基因家族分析套路
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基因家族分析套路(一)
近年来,测序价格的下降,导致越来越多的基因组完成了测序,在数据库中形成了大量的可用资源。如何利用这些资源呢?今天小编带你认识一下不测序也能发文章的思路--全基因组基因家族成员鉴定与分析(现在这一领域可是很热奥);
一、基本分析内容
⏹数据库检索与成员鉴定
⏹进化树构建
⏹保守domain和motif分析.
⏹基因结构分析.
⏹转录组或荧光定量表达分析.
二、数据库检索与成员鉴定
1、数据库检索
1)首先了解数据库用法,学会下载你要分析物种的基因组相关数据。一般也就是下面这些数据库了
⏹Brachypodiumdb:
⏹TAIR:
⏹Rice Genome Annotation Project :.
⏹Phytozome:
⏹Ensemble:
⏹NCBI基因组数据库:
2)已鉴定的家族成员获取。
如何获得其他物种已发表某个基因家族的所有成员呢,最简单的就是下载该物种蛋白序列文件(可以从上述数据库中下载),然后按照文章中的ID,找到对应成员。对于没有全基因组鉴定的,可以下列数据库中找:
a. NCBI: nucleotide and protein d
b.
b. EBI: .
c. UniProtKB:
2、比对工具。一般使用blast和hmmer,具体使用命令如下:
⏹Local BLAST
formatdb–i db.fas–p F/T;
blastall–p blastp(orelse) –i known.fas–d db.fas–m 8 –b 2(or else) e 1e-5 –
o alignresult.txt.
-b:output two different members in subject sequences (db).
⏹Hmmer (hidden Markov Model) search. Thesame as PSI-BLAST in function. It h
as a higher sensitivity, but the speed islower.
Command:
hmmbuild--informatafaknown.hmmalignknown.fa;
hmmsearchknown.hmmdb.fas>align.out.
3、过滤。
⏹Identity: 至少50%.
⏹Cover region: 也要超过50%或者蛋白结构域的长度.