血小板浓缩制品PRPPRFCGF综述

血小板浓缩制品

血小板作为一种多功能细胞,不仅在血栓形成和止血中发挥作用,而且在血管

发生、组织修复和炎症过程中也扮演着重要的角色[1]。血小板被激活后，可释放

多种生物活性物质，在促进组织愈合方面起重要作用。目前的血小板浓缩制品经

过几代发展主要有以下几种：富血小板血浆（platelet rich plasma，PRP），富血小板纤维蛋白（platelet rich fibrin，PRF）,浓缩生长因子（CGF，Concentrate Growth Factors）。

一发展历史

1984年，As s o i o n[2]等发现了人血浆中提取的富血小板血浆(platelet—rich plasma，PRP)中含有多种生长因子，当PRP与氯化钙以及牛凝血酶混合后，各种生长因子即从血小板中的α颗粒中释放出来。但是牛凝血酶的使用往往伴随

着凝血因子Ⅴ、Ⅺ抗体的形成，并且存在着威胁生命的凝血紊乱发生的可能性[3]。作为第二代浓缩血小板，富血小板纤维蛋白（PRF）是由Choukroun。PRF是富纤维蛋白凝胶，由患者静脉中抽取的新鲜血液制作而成，属于新一代的血小板浓缩物，它制备简单无需任何生物添加剂的处理。在PRF通过离心分离的制备过程中，血小板被激活同时大量脱颗粒细胞中蕴含的重要的生长因子释放出来[4]。浓缩生长因子(CGF)是Sacco首先研发的[5]，与PRF一样，CGF由静脉血分离制备而成。不过，两项技术的离心速度有所不同。与PRF不同，CGF技术采用的速度从2400到2700rpm不等，这是为了分离静脉血中的细胞，因此CGF中富含纤维蛋白凝块

比PRF中的大得多，而且更粘稠，纤维蛋白的含量也更多。

二详细介绍

1 PRP

1.1 PRP 制取方法及组成结构

PRP 最早由 Assoian 于 1984 年提取制备[2]，是自身静脉血经梯度离心分层

后位于白细胞上方的富含血小板的血浆部分，含有全血中 70%以上的血小板，于其中加入凝结剂(常用 10%氯化钙和凝血酶)可形成胶状物，激活后血小板α颗粒释放出多种生长因子，如转化生长因子-β(TGF-β)、骨形成蛋白(BMPs)、血小板衍生生长因子(PDGF)、类胰岛素生长因子(IGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)和成纤维细胞生长因子(FGF)等[6-8]。这些生长因子在 PRP 中浓度很高，根据不同的制作方法，约为体内正常浓度的几倍甚至几百倍[9-11]。PRP 血浆成分中的纤维素，纤连蛋白及亲玻粘连蛋白，可作为生长因子的载体，同时也是一种非常良好的细胞黏附分子。

1.2 PRP 的现状

在过去的20余年间，PRP已经逐渐被应用于临床，其中包括促进软组织愈合

和促进骨组织再生方面的应用。应用较多的领域主要有整形美容和创伤外科专业

等[12，13]。1998年PRP由Marx首次引入口腔医学领域中，并逐渐成为口腔医学的

研究热点之一。其中PRP在口腔种植学骨增量方面相关的研究进行的较多，并且得到了多数的肯定。但是，PRP的应用一直争议不断，这些争议集中于其疗效的

稳定性[14-19]和使用的安全性上。后者的矛盾最为尖锐。此矛盾的产生源于PRP在制备过程中需要加入异种凝血酶和抗凝血制品，这被认为可能导致免疫排斥反应

的发生和感染性疾病的传播。

2 PRF

2.1 PRF 制取方法及组成结构

为了延续PRP的优势，同时避免争议，法国科学家Choukroun等于2000年提取制备了新一代自体血液制品Choukroun富血小板纤维蛋白（Choukroun platelet-rich fibrin，Choukroun’s PRF）[20]。Choukroun’s PRF 是自身静脉血经离心分层后位于贫血小板血浆层（Platelet poor plasma，PPP）与红细胞碎片层之间的富含血小板的纤维蛋白凝胶。在制备过程中，Choukroun’s PRF 的纤维蛋白原发生缓慢的聚合，形成三分子的立体网状结构，其凝胶组织具有疏松、孔隙大、弹性好，滞留大量血小板及生长因子的特点。传统的 PRP 为四分子结构，而 PRF 经过缓慢自然的聚合，产生的纤维蛋白为三分子立体网状结构，

其凝胶组织较为疏松，孔隙大，弹性高。组织细胞及循环血中的干细胞能更快的

长入其中，细胞因子也被大量的滞纳，并与纤维蛋白发生化学键结合。PRF 的纤维蛋白作为一种基质为细胞的附着，迁移以及分化提供了有利的场所[22]。生长因子主要包括转化生长因子-β（Transforming growth factor-β，TGF-β）、血小板衍生生长因子-AB(platelet-derived growth factor-AB，PDGF-AB)、类胰岛素生长因子-Ⅰ(insulin-likegrowth factor-Ⅰ，IGF-Ⅰ)等。由于Choukroun’s PRF 纤维蛋白原发生缓慢聚，使血小板和生长因子以化学键结合

于 PRF 的纤维蛋白原上，利于其充分发挥协同作用[21]。纤维蛋白基质内还含有

大量的免疫细胞，可能参与炎症反应的调节。

2.2 Choukroun’s PRF 促进骨组织再生的机制、机理

Choukroun’s PRF 作用的发挥有赖于其富含血小板内的α- 颗粒脱颗粒后释放的多种生长因子。生长因子可以诱导成骨细胞迁移、增殖、分化，促进骨愈合。Choukroun’s PRF 内还富含散在的免疫细胞，这些免疫细胞可以释放多种炎症

因子，可能参与炎症调节，从而减轻周围软组织的炎症反应，同时具有抗感染能力。Dohan 等提出Choukroun’s PRF 不仅含有大量血小板，而且可以加强机体

的防御反应[23]。在制备 Choukroun’s PRF 过程中，采集的血液中未添加抗凝剂，也未使用凝血酶和氯化钙诱导血小板活化及纤维蛋白聚合，模拟生理性的凝血过程，发生了类似天然纤维蛋白网形成的缓慢聚合，形成三分子立体网状结构[24]。这种网状结构便于营养物质和氧气弥散至细胞周围，为成骨细胞的迁移、增殖及分化提供场所；网状结构还可以为骨愈合提供支架。与 PRP 相比，Choukroun’s PRF 具有更强的成骨能力。Ling He 等研究认为Choukroun’s PRF 具有逐步释放生长因子的生物特性，并使其保持较高水平[25]，从而表现更优越的成骨作用。孙洁等研究显示 Choukroun’s PRF 内大部分血小板外膜完整，大量α- 颗粒完整未破裂，从而证明 PRF 内大量血小板仍处于未完全激活状态[26]。同时，Dohan DM 等研究认为 PRF 的网状结构将血小板、生长因子以化学键结合[24]。因此，随着纤维蛋白逐渐溶解，结合的生长因子缓慢释放，同时结合的血小板被激活后脱

颗粒释放出生长因子，使生长因子持续发挥作用，延长了生长因子的作用时间，

加强了成骨效果。还有研究提出，Choukroun’s PRF 内的大量免疫细胞也可以

使 Choukroun’sPRF 内释放的 TGF-β和 VEGF 在实验过程中始终保持较高水

平[27]。上述研究证实Choukroun’s PRF 具有良好的成骨能力。

2.3 PRF 促进软组织愈合影响的作用原理

首先，PRF 富含的多种生长因子可协同作用，促进Ⅰ型胶原及纤连蛋白的合成，促进基质干细胞的趋化及增殖，刺激成纤维细胞及血管内皮的分化增殖[29]，在组织愈合过程中起重要调控作用。

其次，PRF 的三维立体网状结构作为基质，为细胞的附着，迁移以及分化提供了有利的场所[28]，使组织细胞及循环血中的干细胞能更快的长入其中，并且，这