尿素氮(BUN)含量检测试剂盒说明书 微量法
血、尿液尿素氮(BUN)测定作业指导书
血、尿液尿素氮（BUN）测定作业指导书1.实验原理Vitros BUN/UREA试剂是一种干燥，多涂层的，在透明的聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
将一滴患者样品滴于干片上，分布层会使之均匀地分布。
水和非蛋白质成份进入下面的试剂层，与尿素酶反应生成氨。
半透膜只允许氨进入呈色反应层，与指示剂发生反应。
经过一段固定的孵育时间后，通过测定呈色剂的反射强度可间接求出尿素氮的含量。
测定方式：比色法波长：670nm测试时间和温度：37℃约５分钟反应过程：尿素酶非蛋白质成份＋水—————→氨+ 二氧化碳氨＋氨指示剂—————→呈色剂2. 标本：2.1 病人准备：血清无特殊要求。
要留取24小时尿样。
2.2 样品类型：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆。
定时收集的，稀释后的尿样。
2.3 标本采集与处理：2.3.1 血清和血浆样品特别要注意的是：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆；不要用氟化钠作防腐剂，因为氟会抑制尿素酶。
样品采集后4小时内要离心标本，吸出血清。
处理样品时要将其当成生物污染品。
2.3.2 尿液样品定时或随时采集的尿液，特别要注意的是：不能使用以下防腐剂：冰醋酸，浓盐酸，硼酸，硼粉或甲酸钠硼酸，样品在测试前要冷藏。
测试前将1份样品加20 份试剂级别的水进行稀释。
将测试结果乘以21，就得到原始样品中尿素氮的浓度。
冷藏的样品不能立即测试。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3. 标本的存放：血清、血浆室温下最多1天；4～8℃冷藏最多5天；-18℃冷冻保存可长达6个月。
尿液样品在测试前要冷藏。
4. 标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
5. 标本拒收的标准：污染、抗凝剂、防腐剂不符合要求，标本放置时间过长。
6. 试验材料：6.1测试BUN所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit1；Vitros特制质控液；Vitros 7%BSA稀释液。
xx厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书1.实验原理脲酶-谷氨酸脱氢酶（Urease-GLDH）连续监测法。
尿素被脲酶水解产氨。
在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH同时被氧化成NAD＋。
NADH的减少和样品中尿素浓度成正比。
本法是连续监测法。
脲酶尿素+ 2H2O 2 NH4＋+ 2 HCO3－谷氨酸脱氢酶NH4＋+α-酮戊二酸+NADH L-谷氨酸+NAD＋+H2O2 标本：2.1 病人准备：血清无特殊要求。
要留取24小时尿样。
2.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。
无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。
用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。
3. 标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。
尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂：申能尿素测定试剂盒（142 3107170 1 试剂1：6×64ml＋试剂2：6×16ml）6.1.1 试剂组成试剂1：Tris缓冲液pH7.8 120mmol/Lα-酮戊二酸7mmol/LADP 0.6mmol/L谷氨酸脱氢酶≥1000U/L脲酶≥6000U/L试剂2：NADH 0.25mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。
不要入口，吞下有害。
保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。
BALBC小鼠尿素氮(BUN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
BALB/C小鼠尿素氮(BUN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书检测范围：96T60 pmol/L - 1600pmol/L使用目的：本试剂盒用于测定BALB/C小鼠血清、血浆及相关液体样本中尿素氮(BUN)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中BALB/C小鼠尿素氮(BUN)水平。
用纯化的BALB/C小鼠尿素氮(BUN)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入尿素氮(BUN)，再与HRP标记的尿素氮(BUN)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的尿素氮(BUN)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中BALB/C小鼠尿素氮(BUN)浓度。
标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
资料大鼠尿素氮（BUN）说明书
大鼠尿素氮(BUN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T100pmol/L – 3200pmol/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中尿素氮(BUN)含量。
实验原理上海恒远生物供应试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠尿素氮(BUN)水平。
用纯化的大鼠尿素氮(BUN)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入尿素氮(BUN)，再与HRP标记的尿素氮(BUN)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的尿素氮(BUN)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠尿素氮(BUN)浓度。
试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品（6400pmol/L）0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
3200pmol/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液1600pmol/L 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液800pmol/L 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液400pmol/L 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液200pmol/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
尿素氮测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求北化康泰
尿素氮测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中尿素氮的含量。
1.1产品型号规格试剂1：10ml×10（干粉复溶后的体积）；试剂2：100ml×1。
2.1 外观：试剂1为干燥粉末，试剂2为澄清溶液，外包装完整。
2.2 净含量：不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：A≥1.00。
（波长340nm，光径10mm）2.3.2试剂空白吸光度变化率：△A/min≤0.010。
（波长340nm，光径10mm）2.4 分析灵敏度：浓度为7.14mmol/L时,吸光度变化率△A/min≤-0.03。
2.5 线性区间2.5.1线性相关系数：[0.9，35.7]mmol/L范围内，线性相关系数r≥ 0.9900。
2.5.2线性偏差：[0.9，7.14] mmol/L时，绝对偏差不超过±0.714mmol/L；（7.14, 35.7] mmol/L时，相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1重复性：变异系数（CV）≤5.0%。
2.6.2批内瓶间差：CV≤5.0%。
2.6.3批间差：相对极差≤10%。
2.7 准确度：测定国家标准物质，相对偏差不超过±10%。
2.8 稳定性2.8.1效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃贮存，有效期为24个月,保存至有效期末进行测定，试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.6.2、2.7的要求。
2.8.2复溶稳定性：工作液(将试剂1用10ml试剂2溶解)18℃～25℃可稳定24小时，2℃～8℃可稳定7天。
测定结果满足2.5、2.7的要求。
尿素氮测定试剂盒(尿素酶谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求海丰
尿素氮测定试剂盒（尿素酶谷氨酸脱氢酶法）
适用范围：本产品适用于体外定量测定人血清中尿素氮的含量。
1.1 产品规格
1.2 主要组成成分
2.1 外观
2.1.1试剂盒标签标识清晰，外包装完整无破损；
2.1.2试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；
2.1.3试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2 净含量
净含量不低于标示值。
2.3 试剂空白
2.3.1空白吸光度
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下：空白吸光度≥1.0。
2.3.2空白吸光度变化率
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下，空白吸光度变化率≤
0.040/min。
2.4 线性范围
（0.9，40）mmol/L范围内，相关系数r≥0.990；
（0.9，5.0]mmol/L范围内，绝对偏差不超过±0.75mmol/L；
（5.0，40.0）mmol/L范围内，相对偏差不超过±15%。
2.5 分析灵敏度
在产品说明书规定参数设定条件下，测定浓度为20mmol/L的样本，△
A/min不小于0.030。
2.6 精密度
2.6.1批内重复性
CV≤5.0%。
2.6.2 批间差
相对极差R≤10.0%。
2.7 准确度
测定参考物质GBW(E)090548，测定结果应不超过标示值的±15%。
2.8 稳定性
未开封试剂2℃～8℃储存，可稳定12个月。
取到效期后2个月内产品进行检测，检测结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1和2.7的要求。
尿素(Urea)测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求sainuopu
尿素（Urea）测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中尿素的含量。
1.1试剂盒包装规格试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：1×10L，试剂2：1×2L；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml；试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×54ml，试剂2：2×18ml；试剂1：3×45ml，试剂2：3×15ml；试剂1：4×54ml，试剂2：4×18ml；试剂1：2×300ml，试剂2：1×200ml；试剂1：1×9L，试剂2：1×3L；试剂1：2×30ml，试剂2：2×10ml。
校准品（选配）：1×1ml；1×3ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观液体双试剂：试剂1无色至浅黄色澄清液体；试剂2无色至浅黄色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不小于1.0。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于0.04。
2.4 分析灵敏度测定浓度为7.0mmol/L样本时，吸光度变化率（ΔA/min）应在（0.01，0.11）范围内。
2.5 线性范围在（0.9，35.70）mmol/L线性范围内，理论浓度与实测浓度的线性相关系数r 不小于0.990。
尿素氮(BUN)试剂盒使用说明
尿素氮（BUN）试剂盒使用说明微量法货号：BC1535规格：100T/96S产品内容：标准品：液体1mL×1支，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃避光保存，临用前加4mL蒸馏水充分溶解。
试剂二：液体8mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体8mL×1瓶，4℃避光保存。
产品说明：尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物，在尿酶催化下分解转化成氨。
血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。
在碱性条件下，尿酶水解尿素产生氨，氨与次氯酸反应生成氯胺，再与酚衍生物作用生成绿色吲哚酚，在630nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
操作步骤：一、样品处理1.组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5-10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水），匀浆后于25℃，12000rpm离心10min，取上清待测。
2.细胞：按照细胞数量（104个）：蒸馏水体积（mL）为500-1000：1的比例（建议500万个细胞加入1mL蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）；然后4℃，12000rpm离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血清或其它液体：直接检测。
二、测定操作空白管标准管测定管样品（μL）20标准品（μL）20H2O（μL）20试剂一（μL）404040充分混匀，于37℃反应10min试剂二（mL）707070试剂三（mL）707070充分混匀，于37℃显色10min，于微石英比色皿/96孔板，双蒸水调零，测定630nm处吸光值，记为A空白管、A标准管和A测定管三、计算公式：1.按样本质量计算：尿素氮含量（mg/g）=（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）×C标准品÷W=0.005×（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）÷W2.按细胞数计算：尿素氮含量（mg/104cell）=（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）×C标准品÷细胞数量=0.005×（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）÷细胞数量3.按液体体积计算：尿素氮含量（mg/L）=（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）×C标准品=5×（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）C标准品：标准品浓度，5mg/L；W：样品质量，g注意事项：配制好的试剂一在2-8℃条件下可保存一周。
尿素氮 (紫外-谷氨酸脱氢酶法)试剂盒标准操作程序
尿素试剂盒测定标准操作程序1. 摘要本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清、EDTA 抗凝血浆标本或尿液中尿素氮的含量。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、EDTA 抗凝血浆标本或尿BUN 的浓度。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定尿素浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的尿素试剂盒采用的是（紫外-谷氨酸脱氢酶法）。
5. 原理++++++−−−−→−+++−−→−++NAD O H NADH NH CO NH H O H 24242--22谷氨酸酮戊二酸尿素谷氨酸脱氢酶脲酶βα血清中的尿素在酸性条件下，在脲酶的催化下水解生成NH 4+和CO 2,其中的NH 4+与α-酮戊二酸 和β-NADH 在下谷氨酸脱氢酶的催化下生成了谷氨酸，并同时引起了β-NADH 的氧化,使波长340nm 处的吸光度产生下降。
在一定底物浓度范围内,β-NADH 的氧化所引起的340nm 处吸光度的下降速率与血清中尿素氮的含量成正比。
6. 仪器日立7600自动生化分析仪 7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：Tris 缓冲液、α-酮戊二酸、NADH 、尿酶、谷氨酸脱氢酶、防腐剂7.3 试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
艾博信尿素(UREA)测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）说明书
尿素(UREA )测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）说明书【产品名称】尿素(UREA)测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）【包装规格】a)试剂1：2×45mL 试剂2：1×18mL b)试剂1：4×50mL 试剂2：2×20mL c)试剂1：2×100mL试剂2：2×20mL【预期用途】用于体外定量测定人体血清中尿素的含量。
尿素是人体含氮蛋白质代谢的终产物.血清中的尿素的含量是肾功能的一个重要指标，肾脏受损或组织蛋白分解增加，尿素的值会升高；而在肝脏受损或怀孕时，血清中的尿素会降低[1]。
【检验原理】尿素+H 2O−−→−尿素酶2NH 3+CO 2NH 3+α-氧代戊二酸+NADH +H +−−→−GLDH L-谷氨酸+NAD ++H 2O此反应速度与尿素含量成正比，在340nm 处，测定固定时间间隔内NADH 吸光度值的下降速率，下降速率与样本中的尿素含量成正相关。
【主要组成成分】试剂1主要组分Tris 缓冲液100mmol/L 尿素酶20KU/L α-氧代戊二酸5.0mmol/L 谷氨酸脱氢酶（GLDH ）15KU/LProClin300适量试剂2主要组分Tris 缓冲液100mmol/L 还原型辅酶Ⅰ（NADH ）0.25mmol/LProClin300适量注：不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。
【储存条件及有效期】贮存于2～8℃，有效期为18个月，生产日期、有效期见标签。
【适用仪器】艾威德AS-420/AS-660/AS-1200；日立HITACHI 7020型/7060型/7180型/7600型/LABOSPECT 008AS 型；贝克曼AU400/AU480/AU640/AU680/AU2700/AU5400/AU5800/AU5811/AU5821；佳能TBA-FX8/TBA-120FR /TBA-2000FR ；罗氏cobas 8000c 702/cobas 8000c 701/cobas 8000c 502；西门子SIEMENS ADVIA 1800/ADVIA 2400；雅培ABBOTT ARCHITECT c8000/ARCHITECT c16000/ARCHITECT ci8200；西森美康SYSMEX BM6010/C ；科华KHB 卓越310/卓越330/卓越400/卓越450/ZY-1200/ZY-1280；迪瑞CS-240/CS-T300/CS-300B/CS-380/CS-400A/CS-400B/CS-600A/CS-600B/CS-800A/CS-800B/CS-1200/CS-1200ISE/CS-1300B/CS-1400；迈瑞MINDRAY BS-220/BS-330/BS-350E/BS-380/BS-390/BS-400/BS-430/BS-600/BS-800/BS-2000M ；颐兰贝ES-200/ES-380/ES-480；赛诺迈德SUNMATIK-9050型；雷杜Chemray 420；英诺华D280；特康TC6010L ；锦瑞GS400；普康6066。
一氧化氮(NO)含量检测试剂盒.96S
一氧化氮（NO）含量检测试剂盒说明书(货号：NM-W-0132 微量法100T/96S)一、产品简介：一氧化氮（Nitric Oxide，NO）是一种气态分子自由基，在生物体内作为重要的信使分子和效应分子，参与调节血管形成、神经传递、免疫调控及肿瘤生长等多种生理及病理过程。
此外，NO是植物的主要生物活性分子，在植物的生长发育和对胁迫的反应过程中参与了多种生理活动，如种子萌发、叶扩展、根生长、花器官发生、气孔运动的调节以及植物的抗逆反应等。
NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2-。
在酸性条件下，NO2-与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物，进一步与萘基乙烯基二胺偶合，产物在550nm处有特征吸收峰，测定其吸光值，可以计算NO含量。
酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、超声细胞破碎仪、研钵/匀浆器、天平、可调式移液器、冰和蒸馏水。
四、操作步骤：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、预实验样本制备℃ 组织样本：称取0.2g样本，加入1mL提取液进行冰浴匀浆后，10000g，4℃离心15min，取上清置于冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为2~5：10的比例进行提取。
℃ 细菌/细胞样本：建议1000万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率200W，超声3s，间隔7s，总时间5min），10000g，4℃离心15min，取上清置于冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为1000~2000：1的比例进行提取。
℃ 血清（浆）等液体样本：直接测定。
若液体有浑浊则离心取上清测定。
2、标准溶液的配制：把10μmol/mL标准品母液用蒸馏水稀释成1.25μmol/mL的标准溶3、预实验上机操作：℃ 酶标仪预热30min以上，调节波长至550nm。
4、正式实验：℃ 若预实验∆A 测定小于0.005，可以增加样本量后再进行测定；如果∆A测定大于1.5，建议将样本上清用稀释液适当稀释后再进行测定，并将改变后的W和D代入公式计算；℃ 确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；℃ 正式实验按照预实验操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。
家兔血清尿素氮实验报告
一、实验目的1. 熟悉血清尿素氮测定的原理和方法。
2. 掌握家兔血清采集和处理技术。
3. 学习使用生化分析仪进行血清尿素氮的定量测定。
4. 了解血清尿素氮在动物生理和疾病诊断中的意义。
二、实验原理血清尿素氮（Blood Urea Nitrogen，BUN）是血液中尿素氮的浓度，是反映肾脏功能的重要指标之一。
血液中的尿素氮主要由肝脏合成，通过肾脏排泄。
当肾脏功能受损时，尿素氮的排泄减少，导致血液中尿素氮浓度升高。
本实验采用酶偶联法测定家兔血清尿素氮。
该方法利用尿素酶催化尿素分解产生氨，氨与水合酶反应生成亚硝酸盐，亚硝酸盐在酸性条件下与N-（1-萘基）乙二胺反应生成红色化合物，通过测定该化合物的吸光度，计算出血清中尿素氮的浓度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 家兔血清- 尿素氮试剂盒- 10%三氯乙酸- 水合酶- N-（1-萘基）乙二胺- 酸性溶液- 生化分析仪2. 实验仪器：- 采血器- 移液器- 离心机- 酶标仪四、实验方法1. 采集家兔血清：- 将家兔固定在实验台上，使用采血器采集家兔耳缘静脉血。
- 将采集到的血液加入含有10%三氯乙酸的试管中，混匀后离心分离血清。
2. 测定血清尿素氮：- 根据试剂盒说明书，将血清加入反应杯中。
- 加入适量的水合酶和N-（1-萘基）乙二胺，混匀。
- 将反应杯放入生化分析仪中，设定相应的参数进行测定。
3. 结果计算：- 根据生化分析仪显示的吸光度，查表得到相应的尿素氮浓度。
五、实验结果实验过程中，采集到家兔血清样本后，按照实验方法进行血清尿素氮测定。
结果显示，家兔血清尿素氮浓度为X mmol/L。
六、实验讨论1. 血清尿素氮是反映肾脏功能的重要指标，本实验通过酶偶联法测定家兔血清尿素氮，结果可靠。
2. 在实验过程中，应严格按照操作规程进行，确保实验结果的准确性。
3. 血清尿素氮浓度升高可能见于多种疾病，如肾脏疾病、肝脏疾病、心脏疾病等。
本实验为临床诊断提供了一定的参考依据。
BUN检测标准操作规程
1 目的建立BUN 检测标准操作规程,确保其操作规范化。
2 合用范围合用于迈瑞BS200 生化仪BUN 检测的操作。
3 引用文件卫生部<<全国临床检验操作规程>>第三版第四篇临床化学检验第六章第一节463 页。
浙江省〈<临床检验管理与技术规程>>第四篇第七章第一节515 页4 原理及试剂1)试剂厂家：深圳迈瑞脲酶2)原理:尿素+2H2O + —--————-→ 2NH4+CO2谷氨酸脱氢酶α-酮戊二酸+NH4+NADH ————-——————-→L—谷氨酸+NAD+ + H2O通过上述二步反应，使NADH 氧化成NAD+，从而引起在波长340nm 处吸光度下降，在固定间隔时间内吸光度下降值正比于样本中尿素氮含量.3)试剂组成:尿酸试剂成份成份成份实验浓度R1 Tris 缓冲液120mmol/LADP 750mmol/L脲酶≥40KU谷氨酸脱氢酶≥0.4KUR2 NADH 1.2mmol/Lα—酮戊二酸25mmol/L5 标本采集与处理：血清于2℃—8℃避光保存可稳定5 天,或者冰冻保存,但不能反复冻融。
6 测定程序6.1 测定器材:全自动生化分析仪(迈瑞BS200)。
6.2 实验项目参数表6.3 操作步骤:深圳迈瑞340nm670 nm0—36mmol/L0-0s18-24s1 。
7 —8.3mmol/L质控液来源反应类型样本量A试剂量B定标周期定标液来源方法学样本类型试剂储存罗氏紫外- 谷氨酸脱氢法血清/尿液2℃—8℃试剂来源分析波长分析范围反应时间参考范围罗氏速率法3µl300µl75µl每日主副空白试验测定项目:尿素(BUN)备注仪器测试温度为37℃，血清于2℃-8℃保存可稳定7 天。
6 。
3 。
1 开机前检查6.3.1 。
1 检查电源,确认电源有电并且能够提供正确的电压。
6.3 。
1.2 检查分析部、操作部和输出部的通讯线和电源线，确认已连接且没有松动.6 。
尿素氮
3、登录
4、清洗
1）编号
6、生化项目检测
（2）测定
7、样本结果登记
8、样本查询
9、系统注销 10、工作结束 清洗仪器，退出系 统、关闭仪器，关闭计算机，切 断电源，处理试剂。
二、实验原理
尿素+H2O
尿酶
2NH3+CO2
谷氨酸脱氢酶
NH3+α-酮戊二酸+NADH+H+
谷氨酸+NAD+
酶反应速率与尿素氮的浓度成正比，测定340nm吸光度 下降速率，即可计算出样本中尿素氮含量（两点法）。
三、实验器材与试剂
（一）实验器材
（1）试管 （2）水浴箱 （3）试管架 （4）洗耳球 3支 1台 1个 1个
（5）微量五档可调移液器 2支
（6）刻度吸量管（5ml） 1支
（7）半自动生化分析仪 1台
四、实验内容
1、加样
加入物 标准液 血清 工作液 测定管 （T） — 10 μL 1.0 mL 标准管 （S） 10 μL — 1.0 mL
2、振荡混匀，使用URIT-800半自动
生化分析仪测定血清中尿素氮的含量。
非肾脏方面：最重要原因是失水，引起血液浓缩，使肾血
流量减少，肾小球滤过率降低而使血液中尿 素潴留。常见于大量呕吐、腹泻、高热、严 重大面积烧伤、大量出血。
2、尿素含量降低偶见于：
偶见于严重的肝病，如急性黄色肝萎缩、肝硬化等。
一、实验目的
1．掌握血清尿素氮测定的方法、临 床意义。 2．掌握URIT-800半自动生化分析仪 的使用。
3、记录 （参考值：2.14～7.85mmol/L）
五、结果分析
【参考值】： 2.14～7.85mmol/L
血尿液尿素BUN测定
血、尿液尿素氮（BUN）测定1.实验原理Vitros BUN/UREA试剂是一种干燥，多涂层的，在透明的聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
将一滴患者样品滴于干片上，分布层会使之均匀地分布。
水和非蛋白质成份进入下面的试剂层，与尿素酶反应生成氨。
半透膜只允许氨进入呈色反应层，与指示剂发生反应。
经过一段固定的孵育时间后，通过测定呈色剂的反射强度可间接求出尿素氮的含量。
测定方式：比色法波长：670nm测试时间和温度：37℃约５分钟反应过程：尿素酶非蛋白质成份＋水—————→氨+ 二氧化碳氨＋氨指示剂—————→呈色剂2. 标本：2.1 病人准备：血清无特殊要求。
要留取24小时尿样。
2.2 样品类型：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆。
定时收集的，稀释后的尿样。
2.3 标本采集与处理：2.3.1 血清和血浆样品特别要注意的是：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆；不要用氟化钠作防腐剂，因为氟会抑制尿素酶。
样品采集后4小时内要离心标本，吸出血清。
处理样品时要将其当成生物污染品。
2.3.2 尿液样品定时或随时采集的尿液，特别要注意的是：不能使用以下防腐剂：冰醋酸，浓盐酸，硼酸，硼粉或甲酸钠硼酸，样品在测试前要冷藏。
测试前将1份样品加20 份试剂级别的水进行稀释。
将测试结果乘以21，就得到原始样品中尿素氮的浓度。
冷藏的样品不能立即测试。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3. 标本的存放：血清、血浆室温下最多1天；4～8℃冷藏最多5天；-18℃冷冻保存可长达6个月。
尿液样品在测试前要冷藏。
4. 标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
5. 标本拒收的标准：污染、抗凝剂、防腐剂不符合要求，标本放置时间过长。
6. 试验材料：6.1测试BUN所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit1；Vitros特制质控液；Vitros 7%BSA稀释液。
强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
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尿素氮（BUN）含量检测试剂盒说明书微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1535
规格：100T/48S
产品内容：
试剂一：粉剂×2瓶，4℃避光保存，临用前加2mL蒸馏水充分溶解。
试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保存。
试剂三A液：液体0.4mL×1支，4℃保存；
试剂三B液：液体1.6mL×1瓶，4℃保存；临用前将A液倒入B液中混合，或者根据比例（A:B=1:4）现用现配；
试剂四：液体2mL×1瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂×1瓶，4℃保存。
10mg尿素。
临用前加入4.66mL蒸馏水配制成1mg/mL尿素氮标准液。
产品说明：
尿素（BUN）是人体蛋白质代谢的主要终末产物，BUN构成了血液中绝大部分的非蛋白质氮，血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。
用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N，生成的蓝色靛酚和尿素氮的浓度成正比
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计/酶标仪、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
操作步骤：
一、样品处理
1.组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5-10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水），冰
上匀浆后于4℃，13000g离心15min，取上清待测。
2.细胞：按照细胞数量（104个）：蒸馏水体积（mL）为500-1000：1的比例（建议500万个细胞加入1mL蒸
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馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）；然后4℃，13000g离心15min，取上清置于冰上待测。
3.血清（浆）或其它液体：直接检测。
二、测定操作：
1、分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至630nm，分光光度计蒸馏水调零。
2、将1mg/mL尿素氮标准液用蒸馏水稀释至50μg/mL备用。
3、加样表：
试剂名称（μL）空白管标准管测定管对照管样品1212
标准品12-
蒸馏水1224
试剂一242424-
试剂二44444444
充分混匀，于37℃反应10min，
试剂三16161616
试剂四12121212
混匀，室温静止30min。
蒸馏水92929292
充分混匀后测定630nm处吸光值，记为A空白管、A标准管、A测定管和A对照管。
计算ΔA标准=A标准管-A空白管，ΔA测定=A测定管-A对照管。
三、计算公式：
1.按样本质量计算：
尿素氮含量（μg/g）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷W
=50×ΔA测定÷ΔA标准÷W。
2.按蛋白浓度计算：
尿素氮含量（μg/mg prot）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷（Cpr×V提取）
=50×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr。
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3.按细胞数计算：
尿素氮含量（μg/104cell）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷细胞数量
=50×ΔA测定÷ΔA标准÷细胞数量。
4.按液体体积计算：
尿素氮含量（g/mL）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品
=50×ΔA测定÷ΔA标准。
C标准品：标准品浓度，50μg/mL；
V提取：提取液体积，1mL；
W：样品质量，g；
Cpr：样品蛋白浓度，mg/mL；
细胞数量：以万计。
注意事项：
1.配制好的试剂一在2-8℃条件下可保存一周。
2.ΔA测定大于1或者A测定管大于1时，建议将样品用蒸馏水稀释后在进行测定。
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