海洋微生物的产酶分析
海洋酶的发现与应用
海洋酶的发现与应用一、海洋酶的定义及特点酶是一种可以促进化学反应的蛋白质，对于生物体的新陈代谢、增长和修复都有着至关重要的作用。
海洋酶则是分离自海洋微生物中的酶，其具有在高盐、低温、高压等极端环境下生存和发挥作用的特点。
与此同时，海洋酶的结构和功能也十分多样化，被广泛应用于生物科技和医药等领域。
二、海洋酶的发现过程早期的研究表明，海洋中存在着大量的微生物资源，而这些微生物中可能存在着很多未被人类发现的酶和其他有用的分子。
因此，海洋酶的研究逐渐成为了科学家们的关注点。
最早发现海洋酶的人是日本的科学家山口贤治。
他在20世纪70年代末发现了一种从深海沉积物中分离出的酶，这被认为是第一个被发现的海洋酶。
之后，越来越多的研究人员开始对海洋酶的分离和鉴定进行研究，应用各种不同的技术手段探索其在实践应用中的价值。
三、海洋酶的应用领域1. 医药领域目前，海洋酶在医药领域的应用已经取得了一些重大进展。
例如，一些研究者发现，海洋酶中的某些分子具有很好的抗肿瘤性能，可以被应用于抗癌药物的研发中。
同时，海洋酶中的其他分子也被应用于心血管病治疗等方面。
2. 食品加工领域另外，海洋酶在食品加工领域也得到了广泛应用。
例如，海洋酶可以促进鱼类肉质的软化，从而提升食品的口感和风味。
“鱼籽酱”就是利用海洋酶与其他食材调制而成的美食。
3. 生物科技领域最后，海洋酶在生物科技领域的应用也越来越广泛。
例如，海洋酶可以被用于解决酶的稳定性问题，从而提高其在某些工业过程中的应用效果。
另外，海洋酶可以被用于生物燃料的生产等方面。
四、结语总的来说，海洋酶是一种十分有用的资源，在医药、食品加工和生物科技等领域都发挥了重要的作用。
希望未来能有更多的科研人员加入到海洋酶的研究中，探索更多有用的分子和应用途径。
同时，这也为海洋生物资源的保护和可持续利用提供了一个新的角度和思路。
一株海洋微生物产蛋白酶抗肿瘤活性的初步探讨
ｓｕ ｉｄ ｔ ｄｅ ．ＥＭ Ｔ６ｃ ｌ ｒ ｕｔ ｒｄ ｉ ｒ ｓｎ ｅｏ ｒ ｔａ ｅａ ｉｆｒｎ ｏ ｃ ｎ ｒｔ ｎ （ ． ～ ２ ０ ０ ｍｇ Ｉ）ｇ ａ ｉｎ ｓ ｅｌ ｗｅｅｃ ｌ ｅ ｎ ｐ ｅｅ ｃ ｆｐ ｏｅ ｓ ｔｄｆｅｅ ｔｃ ｎ ｅ ｔａ ｉ ｓ ｕ ｏ Ｏ ２ ０ ／． ｒ ｄｅ ｔ
ｔ ｅ ｔ ｏ ｅ ｒ ｉｎ ａ ｄ ｔｍ ｅ Ｔ ｈ ｅ ｔｓ ｅｗｅ ｈ ｔ ｐ ｏ ｅ ｓ ７２ ｈａ ｎｔ ｔ ｍ ｏ ｃ ｉｉｙ ｉ ｏ ｅ ｄ ｇｒ ｅ ｗｅ ｎ ｈｅ ｃ ｎｃ ｎｔａｔｏ ｎ ｉ ． ｅ ｔ ｓ ｈ ｄ ｔａ ｒ ｔａ ｅ１ ｄａ ｉ ｕ ） ｒ ａ ， ０２ ０ ｇＬ的 Ｄ ＭＴ 作 经 ．～２ ０ｍ ／ ０ ２ 蛋国酶作用笨 时间， 同 ＭＴ 对体外培养靶细胞进 行 采用 Ｔ
细胞增殖抑制率检测， 并与阳性对照组（ 紫杉醇组） 和正常细胞对照组（ 人胚肺细胞组≥ ｝较 ＭＴ ： Ｔ＠测结果显蒂
Ａｂ ｔａ ｔ ｓ ｒ ｃ ：Ｔ ｈ＿ａ ’ ｕｍ ｏｒ ｃ ｉｉｙ ｏｆ ｔａ ｎ ｅ ｎｔ ｉ ｔ ａ ｔｖｔ ｓ ｒ ｉ ｐｒ ｅ ｓ Ｄ２ ｒ ｏｔａ ｅ ｆｏｍ ｄｇｅ ｔｖｅ ｔ ａ ｔｏｆ ｉ ｓ ｉ ｒ ｃ Ｐｅ ｎｅ ｅ ｓａｉ ｕ ｔｎｓｓ ｒｉ ｒ ｉ ｂ ｈｉｅ ｉ Ｇｒ ｅ ｕｂ ｗａ ｓ
海洋微生物活性代谢产物研究进展
海洋微生物活性代谢产物研究进展摘要：由于海洋环境的特殊性，从海洋微生物中筛选生物活性物质具有广阔的开发应用前景。
本文综述了近年来产生活性物质海洋微生物代谢产物的研究进展情况。
关键词：海洋微生物；活性物质；代谢产物；筛选方法Research progress on secondary metabolites of marine microorganism(1. Shaoyang Environmental Protection Research Institute, Shaoyang422000,China 2. Faculty of Materials and Metallurgical Engineering, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650093,China;) ABSTRACT：It has powerful potential to produce bioactive substances from marine microbe owing to the special ocean condition.This artice summarized the development of study on marine microbe bioactive substances.KEY WORDS：marine microorganism; bioactive substances; secondary metabolites; method of screening一、前言海洋是地球上最大的生态环境，具有丰富的环境资源，占有约80%的地球生物。
相比陆地微生物，海洋微生物是地球上尚未充分开发的自然环境。
经过几十年的开发，现在要从陆地微生物找到新的活性物质的几率正逐渐下降，并且开发的重复率几近95%，转向从海洋微生物环境中寻找新的活性物质不失为一个很好的解决方法，还有众多类似的现象迫切需要大力开发海洋微生物[1,2]。
对海洋微生物代谢产物及其利用的认识
对海洋微生物代谢产物及其利用的认识下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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来自海洋的酶
来自海洋的酶海洋低温酶的种类近年来，海洋低温酶得到了广泛的研究，发现了许多具有重要价值的酶，或是新的酶系，或具有新的特性(表1)，但大多与实际应用有一定的距离。
几种重要的海洋低温酶如下：(1)核酸酶：从海洋中获得的核酸酶主要有DNA 聚合酶、DNA 修饰酶(连接酶、限制性内切酶)、RNA 聚合酶等。
美国科学家Lundberg(1995)等从嗜热古细菌激烈热球菌(Pyrococcus furiosus)中纯化了一种耐高温的DNA 聚合酶，该酶有多聚酶和校对的双重功能，应用该酶可以扩增出高保真的PCR 产物，有良好的应用潜力。
(2)蛋白酶：各国在蛋白酶领域都有较多的研究，其中以低温蛋白酶的研究最多。
特别是日本在这方面作了大量的工作。
1997年日本Fukuda K．等从海洋细菌Vibrio sp．中获得了新型碱性金属内肽酶，该蛋白酶的最适反应pH 9．5～10．0，45 C保温20 min酶失活一半，55 C则全部失活，NaC1存在下具有最大酶活性。
1995年日本理化所的Hamamoto T．等报道了海洋嗜冷细菌Vibrio sp．Strain 5709的蛋白酶。
该菌株最适生长温度为20 C，0 C也能生长，所产生的蛋白酶，最适pH 为8．5～9．0(40 C)，45℃保温20 min，酶完全失活，0‘C，10 C和20 C分别保持16 ，32 和45 9／6的活力。
该酶为丝氨酸型。
1994年的日本专利报道了一种新的耐热蛋白酶，最适pH 为9．5～10．0，50～55 C，加5 9／6 NaC1呈现最大活性，分子量为44 000 Dr，可降解贝类的足丝，应用于海洋污染处理。
我国的海洋蛋白酶研究也有较大的进展。
中国科学院微生物研究所邱秀宝(1991)报道筛选到了一种海洋中性蛋白酶。
另外中国水产科学研究院黄海水产研究所筛选到产低温蛋白酶的海洋细菌，初步鉴定为黄杆菌属新种，此低温蛋白酶的生产已达到产业化。
该酶由256个氨基酸组成，分子量为33 000 Dr，等电点pI 为9．45，米氏常数Km一5×10 mmol／L；酶的最适作用pH一9．5～ 10．5，最适作用温度3O C，具有一定的抗氧化稳定性。
海洋微生物溶菌酶的发酵优化与中试生产
海洋生物的生物发酵海洋中的微生物工厂
海洋生物的生物发酵海洋中的微生物工厂海洋生物的生物发酵——海洋中的微生物工厂海洋，广袤无垠的蓝色世界，拥有丰富而神秘的生物资源。
这个巨大而广袤的环境中，隐藏着无数微小的生物，它们默默地在海洋中工作着，如同一个无声的工厂。
这些微生物在海洋中进行着生物发酵，为我们提供了许多重要的物质，如藻类制品、抗生素、酶等。
本文将探讨海洋生物的生物发酵，以及它在海洋科学和工业中的应用。
一、微生物在海洋中的广泛分布海洋是地球上生物多样性最丰富的生态系统之一，也是微生物分布最广泛的环境之一。
在海洋中，几乎所有的生物体表面、海水中和海底沉积物中都可以找到各种各样的微生物。
这些微生物包括细菌、真菌、藻类等，它们在海洋中形成了一个庞大的微生物工厂。
二、海洋生物的生物发酵过程微生物在海洋中的生物发酵是一种复杂而精密的过程。
它们通过吸收海水中的有机物质进行新陈代谢，分解有机物质并产生能量。
这个过程中，微生物会释放有机酸、气体、色素等物质，并改变海水的化学组成。
三、海洋生物的生物发酵应用领域1. 藻类制品藻类是海洋中最重要的微生物之一，它们可以进行光合作用，并通过生物发酵产生各种有益的化学物质。
藻类制品在食品、药品、化妆品等领域中有着广泛的应用。
例如，藻类中富含的蛋白质可以用于生产藻蛋白粉、藻蛋白饼干等食品；藻类中的多糖可以用于生产抗癌药物等。
2. 抗生素海洋中的微生物是抗生素的重要来源之一。
许多微生物通过生物发酵产生抗生素，用于对抗疾病引起的细菌感染。
这些抗生素不仅广泛应用于医疗领域，还在农业和畜牧业中起到重要作用。
3. 酶海洋中的微生物还可以产生各种酶，如蛋白酶、淀粉酶等。
这些酶在食品加工、洗涤剂、制药等工业中有着广泛的应用。
通过提取海洋微生物中的酶，可以用于改善工业生产过程的效率和质量。
四、海洋生物的生物发酵研究进展随着海洋科学研究的不断深入，人们对海洋生物的生物发酵过程有了更深入的认识。
研究者们通过分析海水中的微生物群落，发现了许多新颖的微生物，探索其在生物发酵中的应用潜力。
海洋深层微生物的功能和研究方法
海洋深层微生物的功能和研究方法海洋深层微生物是一种被人们研究不多的微生物，它们生活在海洋深处，具有很多独特的功能，比如可以生产生物活性物质、降解污染物、促进营养循环等。
本文将就海洋深层微生物的功能和研究方法进行探讨。
一、海洋深层微生物的功能1. 生产生物活性物质海洋深层微生物能够生产很多有用的生物活性物质，比如抗生素、酶类、类固醇等。
这些物质具有丰富的生物活性，可以用于药物研发、食品添加等方面。
海洋深层微生物是一种很好的生物资源。
2. 降解污染物海洋深层微生物对于污染物的降解能力很强。
它们可以降解各种化学物质，比如石油、热塑性塑料、聚氨酯等，这对于保护海洋环境具有重要意义。
3. 促进营养循环海洋深层微生物可以参与到海洋生物的营养循环中。
它们可以分解有机物，释放出营养物质，如氮、磷、铁等，为其他海洋生物的生长提供营养。
二、海洋深层微生物的研究方法1. 基于高通量测序的研究方法高通量测序技术是一种能够快速、准确地获取海洋深层微生物信息的方法。
通过对海洋深层微生物的基因组数据进行解析，可以了解海洋深层微生物的多样性、功能等方面的信息。
2. 挑战性海洋样品的提取海洋样品的提取是进行海洋深层微生物研究的重要环节。
由于海洋深层微生物的分布范围广、密度低，样品的提取十分困难。
因此，需要开发出一些先进的样品提取技术，如压力采样、吸附提取等。
3. 海洋深层微生物的培养培养是了解海洋深层微生物的另一种研究方法。
通过海洋深层微生物的培养，可以了解它们的形态、生理生化特性等方面的信息。
不过由于海洋深层微生物的生长条件十分苛刻，培养难度较大。
4. 基于同位素示踪技术的研究方法同位素示踪技术是一种能够揭示生物代谢过程的研究方法。
通过对海洋深层微生物的同位素分布情况进行分析，可以了解它们的代谢途径、能源来源等方面的信息。
结语海洋深层微生物的功能和研究方法是一个十分重要的课题。
通过对海洋深层微生物的深入研究，可以为药物研发、环境保护等方面提供有益的信息，促进人类社会的可持续发展。
海洋生物中重要酶类的纯化与鉴定
海洋生物中重要酶类的纯化与鉴定随着人们对海洋资源的深入开发和研究，发现海洋中存在着许多珍贵的生物资源，其中包括很多重要酶类。
酶是一种生物催化剂，对于化学反应速度的加速、生物物质的合成和降解、代谢调控等方面都起着至关重要的作用。
因此，海洋中的酶类资源具有广阔的研究和应用前景，是现代生物技术和药物研究领域中不可缺少的重要资源。
然而，海洋中的生物资源非常复杂，要从中提取和纯化出目标酶类，需要经过一系列复杂的操作和检测步骤。
下面将介绍海洋生物中重要酶类的纯化与鉴定。
一、酶类的来源与分类酶类来源于自然界中的各种生物，包括动物、植物和微生物等。
根据其作用特性和结构特征，可以将酶类分为多种类型，如水解酶、氧化酶、还原酶、转移酶、异构酶等。
在海洋生物中，也存在着各种类型的酶类，如蛋白酶、脂肪酶、葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶等。
二、酶类的纯化方法酶类的纯化是指将海洋生物中的目标酶类从其他杂质分离出来，得到较为纯净的酶制剂的过程。
酶类的纯化方法一般分为物理方法和化学方法两种。
1.物理方法物理纯化方法主要包括离心、摇床、超滤等。
其中，离心法是通过不同的离心速度将混合物中的细胞碎片、代谢产物等不同大小和密度的物质分离开来，从而得到目标酶类。
摇床法是利用水平振荡将混合物分成不同重量的层次，从而将目标酶类分离出来。
超滤法则是利用不同的孔径大小过滤膜将不同分子量的物质分离出来。
2.化学方法化学纯化方法主要包括沉淀分离、离子交换、凝胶过滤、亲和层析等。
其中，沉淀分离法是利用加入一些沉淀剂，将想要分离的酶类沉淀下来。
离子交换法则是利用具有活性的离子交换树脂将混合物中的酶分离。
凝胶过滤法是利用具有孔隙的聚合物凝胶将不同分子大小的物质分离开来。
亲和层析则是利用与目标酶类有特异性结合的亲和剂纯化出目标酶制剂。
三、酶类的鉴定方法酶类的鉴定是指对酶制剂的纯度、活性、稳定性等指标进行测试分析，以确定是否满足制药或其他生物技术应用的要求。
常用的酶类鉴定方法主要包括以下几种：1.测定酶的活性：通过测定酶对某种底物的反应速度来确定酶的活性水平。
海洋微生物的代谢途径与功能研究
海洋微生物的代谢途径与功能研究海洋是一个广袤的领域，充满着神秘的、未知的力量。
海洋微生物作为海洋中最重要的生物群体之一，不仅是海洋物质循环中的关键环节，也是免疫系统、医学、食品等领域的重要研究对象。
在海洋微生物中，代谢途径是研究的热点之一。
本文将从代谢途径、功能两方面探讨海洋微生物的代谢途径与功能研究。
一、代谢途径海洋微生物的代谢途径主要包括三个方面：有机物降解、光合作用和化学合成。
1. 有机物降解有机物降解是海洋生态系统中非常重要的一环，通过有机物降解可以将有机物转化成为能量和营养物，维持整个海洋生态系统的生命活动。
海洋中有机物的来源非常丰富，包括海藻、浮游生物、腐殖质等，海洋微生物能够利用这些有机物，进行有机物降解。
在有机物降解中，海洋微生物是非常重要的催化剂，通过细胞外酶系统将有机物转化成为简单的化合物，包括一氧化碳、二氧化碳等。
有机物降解的代谢途径是海洋微生物研究中的重要方面之一。
2. 光合作用光合作用是海洋微生物中第二个重要的代谢途径，其能够利用光合色素捕捉阳光中的光能，转化成为有机物和氧气。
海洋微生物中光合作用的种类非常广泛，包括原核细胞和真核细胞两类。
在光合作用中，海洋微生物能够利用光能，将水和二氧化碳转化成为氧气和有机物，为整个生态系统提供营养和能源。
光合作用是海洋微生物代谢途径中的重要组成部分。
3. 化学合成化学合成是海洋微生物中第三个重要的代谢途径，其能够利用无机物合成有机物，从而获得必要的营养和能源。
海洋微生物中可以利用化学合成进行能源代谢、生物合成和细胞生长等过程。
在化学合成中，海洋微生物能够利用微量元素、营养物和化学能，进行复杂的代谢活动，为整个海洋生态系统提供营养和能源。
二、功能海洋微生物的主要功能包括清除污染、免疫防御、食品加工、生物制药等。
1. 清除污染海洋微生物能够利用自身的代谢途径，进行污染物的分解和降解，从而净化环境、改善人类健康。
例如，利用海洋微生物对海洋污染物进行降解，可以减少海洋生态系统中的污染物浓度，维护海洋生物的健康和生态平衡。
海洋微生物几丁质酶的研究进展
海洋微生物几丁质酶的研究进展杨雪松;李丽;刘红全【摘要】The advanced research progress of source,quality and catalysis mechanism of chitinase from marine microorganism was reviewed.%对海洋微生物几丁质酶的来源、性质和催化机制等方面的最新研究进展进行综述.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)016【总页数】6页(P9481-9485,9543)【关键词】几丁质酶;海洋微生物;研究进展【作者】杨雪松;李丽;刘红全【作者单位】广西民族大学化学与生态工程学院,化学与生物转化过程新技术广西高校重点实验室,广西,南宁,530006;广西民族大学化学与生态工程学院,化学与生物转化过程新技术广西高校重点实验室,广西,南宁,530006;广西民族大学化学与生态工程学院,化学与生物转化过程新技术广西高校重点实验室,广西,南宁,530006【正文语种】中文【中图分类】X145几丁质，一种以β-(1，4)糖苷键连接而成的N-乙酰氨基葡萄糖多聚物，也叫甲壳质或者甲壳素。
几丁质可由节肢动物、线虫、软体动物、真菌和其他生物合成［1］。
几丁质在结构上类似纤维素，只是纤维素C2上的羟基基团被乙酰氨基取代［2］。
几丁质在自然界的含量仅次于纤维素，据估计，每年大概有1010～1011t几丁质产生［3］。
来自海洋生物圈的几丁质占几丁质总量的绝大部分，然而几丁质在海底沉积却很少，这主要与海洋微生物对几丁质的有效分解有关。
海洋微生物通过分泌几丁质酶分解几丁质作为自身生长繁殖的碳源和氮源，推动了几丁质的再循环。
几丁质是海洋环境中一种丰富而且重要的营养和能量物质［3］，海洋微生物通过几丁质酶对几丁质进行降解和利用是海洋环境中营养物质循环的关键［3-4］，对维持海洋环境生态系统的平衡也很重要［5］。
海洋微生物酶的应用研究
海洋微生物酶的应用研究海洋是地球上最广阔的生态系统之一，拥有丰富的生物资源。
其中，海洋微生物酶作为一种重要的生物催化剂，在许多领域都展示出了巨大的应用潜力。
本文将重点探讨海洋微生物酶的应用研究，以及它们在不同领域的应用前景。
一、海洋微生物酶的来源和特点海洋微生物酶主要由海洋微生物产生，包括细菌、真菌和病毒等。
它们在海洋环境中的广泛分布性使其成为一种极具潜力的酶源。
与陆地微生物酶相比，海洋微生物酶具有以下特点：1. 适应广泛性：海洋微生物酶能够适应高盐、低温、高压等极端环境条件，具有较好的稳定性。
2. 多样性：由于海洋生态系统的多样性，海洋微生物酶的种类繁多，不同类别的微生物酶具有不同的催化特性，适用于不同的反应。
3. 生物可降解性：海洋微生物酶主要以蛋白质形式存在，易于降解，不会对环境造成污染。
二、海洋微生物酶在食品工业中的应用1. 深海鱼类加工：海洋微生物酶可用于鱼糜制备、鱼蛋白酶解和造浆等过程，提高产品的质量和产量。
2. 植物蛋白提取：海洋微生物酶能够在低温下高效地解离植物细胞壁，提高植物蛋白的提取率，为植物蛋白行业带来新的发展机遇。
三、海洋微生物酶在制药领域的应用1. 新药研发：海洋微生物酶可以用于新药的筛选和合成，提高药物的稳定性和活性。
2. 蛋白质工程：利用海洋微生物酶的特殊催化性质，可以对蛋白质进行修饰和改造，扩展其应用领域。
四、海洋微生物酶在环境保护中的应用1. 污水处理：海洋微生物酶可以用于污水处理领域，加速有机物的降解和废水的净化过程。
2. 油污处理：海洋微生物酶能够降解石油类物质，对海洋油污事故的处理具有重要意义。
五、海洋微生物酶在能源产业中的应用1. 生物质转化：利用海洋微生物酶的催化作用，可以实现生物质的高效转化，生产生物燃料和生物化学品。
2. 深海油气开发：海洋微生物酶的高温高压适应性使其成为深海油气开发中的可靠催化剂。
六、海洋微生物酶在其他领域的应用前景海洋微生物酶的应用潜力还未得到充分发挥，在许多领域中仍然存在着广阔的研究空间。
2024版海洋微生物的应用与发展
•海洋微生物概述•海洋微生物的应用领域•海洋微生物的研究进展•海洋微生物的资源开发目•海洋微生物的生态功能与环境保护•海洋微生物的未来发展趋势录定义与分类定义分类多样性适应性代谢活性030201海洋微生物的特点海洋微生物的生存环境海水海洋微生物广泛分布于海水中的各个水层，从表层海水到深海底层。
海底沉积物海底沉积物是海洋微生物的重要栖息地，提供了丰富的营养物质和生存空间。
海洋生物体表与体内海洋微生物与海洋生物之间存在共生关系，许多微生物寄生于海洋生物体表或体内。
生物制药抗生素生产酶制剂生产激素和维生素生产生物燃料生物氢气生产生物柴油生产某些海洋微生物可通过厌氧发酵产生氢气，为清洁能源领域提供新的发展方向。
生物乙醇生产海洋生态修复利用海洋微生物的降解和转化能力，对受污染的海域进行生态修复。
污水处理海洋微生物在污水处理中具有重要作用，能够降解有机污染物，提高水质。
大气净化某些海洋微生物能够吸收大气中的二氧化碳等温室气体，有助于减缓全球变暖。
环境保护农业应用生物肥料01生物农药02饲料添加剂031 2 3基因组测序技术基因功能注释比较基因组学代谢物分析技术代谢组学通过对生物体内代谢物的定性和定量分析，揭示生物体的代谢状态和生理变化。
海洋微生物代谢途径研究海洋微生物的代谢途径，可以了解它们如何利用环境中的营养物质进行生长和繁殖。
代谢产物应用一些海洋微生物能够产生具有生物活性的代谢产物，如抗生素、抗肿瘤物质等，具有潜在的应用价值。
蛋白质鉴定技术海洋微生物蛋白质组蛋白质相互作用宏基因组测序技术海洋环境宏基因组宏基因组与生态环境采集方法培养条件菌种保藏采用专业的海洋生物采集器，针对不同海域、水深、季节等条件进行采集。
海洋微生物的采集与培养海洋微生物的基因资源挖掘基因组测序基因功能注释基因工程改造海洋微生物的代谢产物研究代谢产物提取活性筛选结构鉴定海洋微生物的酶资源开发酶种类挖掘酶性质研究酶工程改造与应用海洋微生物通过光合作用和化能作用固定大气中的CO2，将其转化为有机碳，进而参与到全球的碳循环中。
产低温蛋白酶海洋细菌的筛选及发酵条件
１ 材 料和 方 法
１１ 样 品采集 ．
２０ ０９年 １ ０月上旬于渤海秦皇岛海域东经 １９６ 北纬 ３ 。３附近 ， １。０ ， ９９ 采集海水样品共 ２ 份。 ０
１２ 培养基 ．
１２１ 营养琼脂培养基 牛肉膏 ５ ／ ， ．． Ｌ蛋白胨 １ ／ ， ２ ／ ， ｇ ０ｇＬ琼脂 ０ｇＬ作为菌体初筛和斜面菌种保藏用 。 １２２ 筛选培养基 葡萄糖 ０５ Ｌ Ｋ ２Ｏ ０５ｓＬ Ｋ Ｈ Ｏ ０５ｓＬ 酪蛋 白 １ ／ ， ．． ． ， Ｈ Ｐ ４ ． ／ ， ２ Ｐ ４ ． ／ ， ０ｇＬ 琼脂 ２ ／ ， ＯｇＬ 用于筛选蛋白酶产生菌。 １２ ３ 种子培养基 葡萄糖 ５ Ｌ蛋 白胨 １ Ｌ 。． ， Ｏ 。 １２ ４ 基础发酵培养基 葡萄糖 ０５ｇ Ｌ Ｋ Ｈ ０ ． ／ ， Ｈ Ｐ ４ ． ／ ， ．． ． ／ ， ２ Ｐ ４ ５ｓＬ Ｋ ２０ ５ｇＬ 蛋白胨 １ Ｌ ０ ０ Ｏ 。以上培 养基 ｐ ． ７４均用陈海水代替蒸馏水配制 ， １ Ｈ７２— ．， １ ℃灭菌 ３ ｉ。 ２ ０ｍｎ
１５ １ 培养时间对菌株产酶的影响 挑 １ ．． 环菌株接入种子培养基 ，８ ｍｎ 震荡培养 １ ， １０ ／ ｉ， ｒ ２ 以体积分 ｈ 数为 ００ 的菌液转接发酵培养基 ， ０ｒ ｉ， ．１ １ ｒｎ ２ ８ ／ ａ ５℃震荡培养 ， 分别培养 １ ，４３ ，８ ６ ， ， ２２ ，６ ４ ，０７ ｈ测定发 ２ 酵液中蛋白酶活力 。
株 Ｈ Ｍ．６ 初步鉴定 为黄 色杆菌属 ， Ｙ １， 设计单 因素和正交试 验 ， 确定该菌 的最 佳发 酵条 件。结果表 明， 在装液
量 ５ Ｌ ０ｍ 液体培养基 的 ２０ Ｌ三角瓶 中， ５ ｍ 以体积分数 ００ 的接种量、 ．１ 摇床转速 １０ｒ ｉ 条件下 ， ８ ｒｎ ／ ａ ２ ５℃培养
海洋生物酶的研究和应用
对的双重功能 应用该酶可以扩增
出高保真的 °≤ 产物 ∀
连接酶链式反应 ≤ 是测定
⁄ 突变的新技术 ∀从海洋古细菌
分离纯化的热稳定性 ⁄ 连接酶 可用 ≤ 技术来测定 !放大和区分 特殊的 ⁄ 序列 ∀
蛋白酶
年代初
∏ 在农
业生化杂志上发表一篇关于从海
洋嗜冷杆菌获得一种新型海洋碱
性蛋白酶的文章 引起学术界和酶
制剂公司的高度重视 ∀迄今为止研
究开发的海洋生物蛋白酶产品有
多个 并申请了国际专利 ∀
碱性蛋白酶
收稿日期
22
修回日期
22
我国尚无这方面的统计资料 应立 即对这方面进行必要的调查研 究 ∀况且 绝大多数海兽均以鱼 !浮 游生物为食 和渔业关系极为密 切 它们对水产资源破坏很大 直 接影响到渔业生产 所以同时应开 展这方面的研究工作 搞清它们之 间的利害关系 以期获得海产资源 的充分利用 ∀
代谢途径与现存的生物有严格的
区别 可以在 ε 以上的极端环
境生存 当然这就要求其有在高温
下稳定的酶系统 ∀热稳定性的核酸
酶如 ⁄ 修饰酶 聚合酶 !连接酶 !
限制性内切酶等 在分子生物学中
有重要的应用价值 ∀ ∏
等从
嗜热古细菌激烈热球菌 Πψροχοχχυσ φυριοσυσ) 中纯化 了一 种 耐 高 温 的 ⁄ 聚合酶 该酶具有多聚酶和校
目前普遍认为 个糖残基的甲 壳寡糖具有抗肿瘤的作用 小分子 的甲壳寡糖或单糖可提高机体免 疫力 有活化肠道乳酸杆菌 ! 双歧 杆菌的作用 ∀甲壳寡糖的生产多采 用盐酸水解法 反应条件剧烈 产
≥≤ ∞ ≤ ∞ ≥≤ °∞ 科学视野
物得率较低 ∀而采用甲壳质酶生产 甲壳寡糖反应温和可控 且有较高
产纤维素酶海洋细菌的筛选和酶学性质的初步研究
（ ． 台大学海洋学 院 ， １烟 山东 烟 台 ２ ４０ ；． ６ ０ ５ ２ 中国科学院烟 台海岸带研 究所 ， 山东 烟台 ２ ４ ０ ） ６０ ３
摘要 ： 从病 烂 的海 洋植 物 中分 离到 一株 高产 纤 维素 酶 的菌株 Ｔ １ ， 兰氏 阴性 ， Ｘ－ ２ 革 经鉴 定
为噬纤维茵属（ ｅｕ ｐａ ａｓ． 中的一个种． ＣＵ ｌ ｈｇ ） ｏ ｐ 该菌株在温度 ２ ５℃ 、 培养基起始 ｐ ． Ｈ ８０条 件下培养 ５ ６ｈ产生碱性纤维素酶活力高达 ３ ４８Ｕ ｍ ． ５ ． ／ Ｌ 酶学性质初步研究显 示，Ｘ一 ２ Ｔ １
作者简 介 ： 唐志红 （ ９４ ） 女 ， １７ 一 ， 山东武 城人 ， 士 ， 博 副教授 ， 研究方 向： 海洋生物活性 洋细 菌 的筛选 和酶 学性 质 的初 步研 究 等 产
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恒 温水 浴 锅 ， 海 金 桥 科 技 仪 器 厂 ； Ｒ－ ４电 上 Ａ １０ １ 子 天 平 ， 克 斯 国 际 贸易 上 海 有 限公 司 ；２Ｅ 型 奥 ７２ 可 见 分光 光度计 ， 光谱 仪 器 有 限公 司 ；Ｄ － 上海 ＴＬ５
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ｈ 弃去染液 ， ， 用适量 １ｍ ｌＬ的 Ｎ Ｃ 溶液 ， ｏ ／ ａ１ 洗涤 ｌ ｈ 若细菌产生纤维素酶 ， ， 则在菌落的周 围会出现 清晰的水解圈． 选取产生透 明圈的菌株 为初筛菌
种， 将所 选菌 株进 行发 酵 复筛 ， 分离 纯化 ．
蒸 馏水 １００ｍ ｐ ＝ ７５； 酵 培养 基 ： 分 同 ０ Ｌ，Ｈ ． 发 成
初筛培养基 ， 不含琼脂． Ｙ Ｑ Ｌ 一０ Ｉ 立式 压 力 蒸 汽 灭 菌器 ， 海 Ｘ —Ｓ５Ｓ 型 上 博讯实业有限公 司医疗设备厂 ； Ｚ Ｗ－ Ｄ Ｋ ４型电子
海洋生物酶及其应用-精选文档
2.多糖水解酶 （PolysaccBiblioteka arides hydrolases）
海洋多糖水解酶主要包括淀粉酶、甲壳质酶、 琼胶酶、褐藻酸酶、卡拉胶酶等。酶的来源主要 包括两类生物：一类是海洋动物，主要是无脊椎 动物如紫贻贝、日本鲟、滨螺、石鳖、鲍、海兔 等；另一类是海洋微生物，如产气单胞菌、假单 胞菌、交替单胞菌、弧菌等。
20世纪的20年代初，Nobou Kato 在农业生 化杂志上发表一篇关于从海洋嗜冷杆菌获得一种新 型海洋碱性蛋白酶的文章，引起学术界和酶制剂公 司的高度重视,迄今为止研究开发的海洋生物蛋白 酶产品已有几十个，并有多个申请了国际专利。
1.1碱性蛋白酶
日本开发的一种碱性蛋白酶是从海洋共 生菌发酵提取的，酶的MW 为31kD,作 用的pH5-11，最适pH为10，最适温度 20℃。用于洗衣粉添加剂。美国从海洋 船蛆共生菌（ATCC39867）发酵生产 一种新型碱性蛋白酶,分子量3.6KD、 pI8.6,作用pH4-12、最适温度50℃。 可在复杂试剂中保持稳定性，并有抗氧 化的功能。已应用于洗衣粉和镜头清洁 剂。
多糖水解酶具有很多作用。如在海藻原生质体制备方 面的应用：海藻细胞生理生化的研究，进行目的基因的导 入、创造新品种或作为生物反应器生产所需的物质，细胞 间的融合，改变体细胞的遗传物质，创造优良杂交品种等； 单细胞饵料生产中的应用：酶解大型海藻，分离成单细胞， 作为海洋养殖动物的饵料， 具有营养全面、 材料易得、 生产加工简便等优点； 用于单糖和寡糖的制备：琼胶经琼 胶酶水解可以形成寡糖如三糖和四糖，然后经β- 半乳糖苷 酶降解可形成单糖，琼胶寡糖在食品生产中有广泛的应用， 如可用于饮料、 面包及一些低热量食品的生产，另外， 近 来在日用化工领域又发现了琼胶寡糖的一些新用途， 日本 以琼胶寡糖为添加剂生产的化妆品对皮肤的保湿效果良好， 对头发有很好的调理效果。目前普遍认为6 个糖残基的几 丁质寡糖具有抗肿瘤的作用，小分子的几丁质寡糖或单糖 可提高机体免疫力， 有活化肠道乳酸杆菌、 双歧杆菌的作 用。
产淀粉酶海洋酵母菌多样性的研究
产淀粉酶海洋酵母菌多样性的研究1王晓红，池振明中国海洋大学生命学院与技术学部，青岛（266003）E-mail：zhenming@摘要：从采集自南海、南极、烟台长岛、青岛近海的泥样和鱼类肠道内容物中分离得到了数百株海洋酵母菌，进一步筛选得到8株能够产淀粉酶的海洋酵母菌。
根据对它们的生理和生化特征、所产粗酶最适pH和温度以及18S rDNA的部分序列的分析，确定菌株Ba、H、M和W1a属于解脂耶罗威亚酵母（Yarrowia lipolytica），菌株DMC 属于平滑假丝酵母（Candida parapsilosis），菌株W13a、G7b和N13d属于普鲁兰短梗霉（Aureobasidium pullulans）。
结果显示在海洋环境中产淀粉酶的海洋酵母菌多样性还是相当丰富的，并发现解脂耶罗威亚酵母（Yarrowia lipolytica）、平滑假丝酵母（Candida parapsilosis）和普鲁兰短梗霉（Aureobasidium pullulans）是可以产生淀粉酶的新酵母菌菌株。
关键词：海洋酵母菌；淀粉酶；18S rDNA；进化树1. 引言淀粉酶 (amylase) 是一种用途极广的生物催化剂，可应用于面包制作业、淀粉的糖化和液化、纺织品脱浆、造纸业、清洁剂工业、化学和临床医学分析、食品工业和制药工业。
淀粉酶可分为α、β淀粉酶和葡萄糖淀粉酶。
α-淀粉酶为内切酶，以无规则的方式切开淀粉分子内部的α-1,4糖苷键而使淀粉生成糊精和低聚糖等, 是一种Ca2+依赖性酶。
β-淀粉酶从非还原性末端顺次切下麦芽糖，为外切酶。
葡萄糖淀粉酶是外切酶，作用于α-1,4糖苷键，从非还原性末端切下葡萄糖分子。
淀粉由于价格低廉，原料来源广泛，成为酵母菌生产单细胞蛋白和乙醇的最好底物。
环境中的酵母菌菌株大部分是安全的，所以可降解淀粉的酵母受到了日益广泛的关注。
陆地酵母菌Arxula adeninivorans, Lipomyces, Saccharomycopsis, Schwanniomyces, Candida japonica， Cryptococcus sp，Corticium rolfsii和Filobasidium capsuligenum及所产的胞外淀粉酶已被广泛研究[1]。
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1、几丁质降解菌：
筛选培养基（MM-Chitin培养基）
NaH2PO40.75g
Na2HPO4 1.0g
胶体几丁质0.5g(干重)
补加人工海水至100ml
pH 7.6
胶体几丁质的制备：称取25g几丁质，加25ml 85%磷酸。
30℃反应1.5h,加蒸馏水使胶体沉淀后，反复水洗直至中性。
用20mm/L NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液（pH为6.0），调整几丁质浓度至2%。
细菌生长培养基（2216E）
蛋白胨0.5g
酵母膏0.1g
FePO40.01g
补加人工海水至100ml
固体平板中补加琼脂糖 1.5g/100mL
2、酪蛋白水解酶产生菌
筛选培养基A液：蛋白胨0.03g，酵母膏0.05g ，琼脂1.5g ，磷酸铁0.01g，人工海水至100mL；B液：10%-20%用双蒸水配制的酪蛋白或脱脂奶溶液。
溶液B在110℃灭菌20min，溶液A121℃灭菌20min，冷却至50℃，A液和B液等体积混合，制成平板。
3、明胶蛋白酶产生菌
筛选培养基：蛋白胨0.03g，酵母膏0.05g ，琼脂1.5g ，磷酸铁0.01g，明胶1g，人工海水至100mL，pH为7.6，121℃，20min。
试剂：1M HCl
4、淀粉酶产生菌：
筛选培养基：蛋白胨0.03g，酵母膏0.05g ，琼脂1.5g ，磷酸铁0.01g，可溶性淀粉1g，人工海水至100mL，pH为7.6，110℃，20min。
试剂：1：5稀释的Lugol氏碘液（1% KI，1%升碘）
5、藻胶酶产生菌
筛选培养基：蛋白胨0.03g，酵母膏0.05g ，琼脂1.5g ，磷酸铁0.01g，藻酸钠1g，人工海水至100mL，pH为7.6，配制时先加入1%的藻酸钠（加热剧烈搅拌使其充分溶解），再加入琼脂等其他成分，121℃，20min。
6、琼脂糖酶产生菌
筛选培养基：蛋白胨0.03g，酵母膏0.05g ，琼脂1.5g ，磷酸铁0.01g，人工海水至100mL，pH为7.6，121℃，20min。
7、脂肪酶产生菌：
筛选培养基：蛋白胨0.03g，酵母膏0.05g ，琼脂1.5g ，磷酸铁0.01g，人工海水至100mL，pH为7.6，121℃灭菌后，冷却至50℃加入2.5%的橄榄油或棉籽油，0.001%的诺丹明B，充分混匀后到平板。
8、纤维素酶产生菌
筛选培养基：蛋白胨0.03g，酵母膏0.05g ，琼脂1.5g ，磷酸铁0.01g，晶体纤维素1g，人工海水至100mL，pH为7.6，121℃，20min。
试剂：1%的刚果红、1M NaCl。
摘自《海洋生物基因工程实验指南》，徐洵主编。