(优选)孕产妇及所生儿童艾滋病检测章三英
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未进行婴儿早期诊断检测或婴儿早期诊断检测结果 为阴性的儿童,应于12、18月龄进行艾滋病抗体筛 查及必要的补充试验,以明确艾滋病感染状态。儿 童抗体检测及服务流程见图7。
产时艾滋病检测及服务流程 (适用于孕期未接受艾滋病检测的产妇)
孕 期 未 接 受 HIV抗 体 检 测 的 临 产 产 妇
主动提供相关检测信息,采集血样本
同时用两种不同的快速检测试剂 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
两种均无反应
两种均有反应 或 一有反应一无反应
报 告 “HIV抗 体 阴 性 ”
检测后咨询,知情选择干预措施
检测后咨询、指导 常规助产及服务
产后暂时未得到补充试验结果或 补 充 试 验 结 果 为 “不 确 定 ”
分娩前快速检测结果为一 有反应一无反应者, 用另一种筛查试剂 再次检测
条带/线性免疫试验(RIBA/LIA) 婴儿诊断:HIV DNA
病情判定检测
T细胞亚群检测:流式细胞仪技术 HIV RNA检测:病毒载量
HIV耐药检测
表型耐药:细胞培养技术 基因型耐药:序列测定,杂交技术
初筛实验
➢酶联免疫吸附试验(ELISA) ➢化学发光 ➢快速检测(RT)及其它检测
(1)明胶颗粒凝集试验(PA) (2)免疫渗滤试验:斑点ELISA和斑点免 疫 胶体 金(或胶体硒)快速试验
有反应
无反应
原 有 试 剂 +另 一 种 筛 查 试 剂 进 行 复 检 或 原有试剂双份进行复检
两种均有反应 或 一有反应一无反应
提供疑似阳性咨询 进一步做补充试验
不确定
补充试验 (首选抗体补充试验)
有反应
提供咨询
进行核酸检测等 其他补充试验
报告 “HIV抗 体 阳 性 ”
两种均无反应
报告 “HIV抗 体 阴 性 ”
无反应
流行病学史
无
有
进行核酸检测或 2-4周 后 随 访
检测后咨询、指导
进行传染病信息报告 提供后续干预服务
检测后咨询、指导 常规孕产期保健
《婴儿艾滋病感染早期诊断工作方案》
对HIV阳性产妇所生儿童于出生后6周和3个月时, 分别采集血标本,进行婴儿感染早期诊断。详见图 3婴儿艾滋病感染早期诊断检测及服务流程。
感染状态不明确者
12个 月 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
无反应
用另一种筛查试剂再次检测
无反应
有反应
有反应
18个 月 时 再 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
无反应
有反应
两 种 均 无 反 应 原 有 试 剂 +另 一 种 筛 查 试 剂 进 行 复检 或 原有试剂双份进行复检
两种均有反应 或 一有反应一无反应
无反应 有反应
分娩前快速 检测结果两 种均阳性者
及时应用抗艾滋病病毒药物; 适宜、安全的助产服务
尽早进行补充试验,及时获得检测结果 (首选抗体补充试验)
有反应
无反应
不确定
报告 “HIV抗 体 阳 性 ”
提供咨询,进行 传染病信息报告 继续提供干预服务
报告 “HIV抗 体 阴 性 ”
提供咨询 终止干预
18个月以下婴幼儿的HIV检测诊断
母亲 HIV 抗体经胎盘进入胎儿,出生时 新生儿和婴儿早期抗体有反应,不一定是感 染
出生时母亲的抗体,80~90% 在生后 9~12 个月消失,出生后 18 个月基本上全部 消失
18 个月后儿童 HIV 仍然有反应,视为自 身感染产生的抗体
18个月以下婴幼儿的HIV检测诊断
酶 酶标记 抗原 抗原
抗体
1.将抗原包被在固相载体上。 2.如样品中含有抗体,则结合 为抗原抗体复合物。 3.再加入酶标记抗原,则结合 为抗原-抗体-酶标记抗原复合 物。
4.酶催化底物并显色。
抗原
固相载体
双抗原夹心法示意图
结果判定:以梅里埃第三代ELISA(双抗原夹心法)为例
①阴性对照(NC),HIV-1阳性对照(PC1),HIV-2阳性对照(PC2) • NC 必须<0.25方可用,排除NC≥0.25的值,计算NC平均值。 • NC界限范围:0.6倍NC均值<NC<1.4倍NC均值。 ②符合以下条件的实验成立: • 两个以上的NC可用。 PC1-NC均值 ≥ 0.4,PC2-NC均值 ≥ 0.4 ③Cut off值 = 阴性对照均值 + 0.100 • 小于Cut off为阴性,大于或等于Cut off为阳性
提供咨询, 进行核酸
检测等其他 补充试验
提供咨询 终止干预
提供咨询 继续提供干预服务 尽早获得检测结果
所生新生儿特别
护理、应用抗病毒 药物;喂养指导、
营养咨询等
感染妇女纳入当地艾滋病 防治系统
所生儿童继续随访、进行 艾滋病相关检测
艾滋病感染孕产妇所生儿童艾滋病抗体检测及服务流程(图3)
艾滋病感染产妇所生儿童 早期诊断检测结果阴性;或未接受早期诊断检测、
(优选)孕产妇及所生儿童艾 滋病检测章三英
样本的采集和处理
1.对从其他实验室送的样品,注意检查并注明其送检单与标 本记录的符号.样品管遗漏.破损情况。如有遗漏要把残留 的样品移出,并对管壁和盛器消毒。要检查并记录样品的 质量有无溶血,脂血,细菌感染等情况。
2.对实验室自己采集的标本,注意是血液先自然存放1-2小时 候,再用3000rpm离心15分钟,吸出上清液备用,如要几 天内检查可放入2-8℃冰箱,要储存则置于-20℃低冰箱内。
3.滤纸片的采集.用移液管从样品管中吸取100uL抗凝全血或 血浆,对准滤纸片印圈中心处蒋样品滴在滤纸上,或者穿 刺后自皮肤伤口流出的末梢血直接滴加在滤纸印圈的中心 处。在室温下自然干燥至少4小时,不要加热或堆叠,自 然干燥后放入密封袋中。
孕期艾滋病检测及服务流程
孕期初次接受产前保健的孕妇
主动提供有关的检测信息 采 集 血 样 本 , 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
检测HIV DNA或RNA
推荐检测HIV DNA, 因为HIV前病毒DNA 以细胞内前病毒感染状态存在,所以它不受 母亲围产期抗病毒治疗的影响和婴幼儿预防 性抗病毒治疗的影响 HIV DNA 的适宜月龄为3-6个月
不得使用脐带血.
HIV/AIDS实验室检测
诊断性检测
初筛实验:ELISA、化学发光(CLIA)、快速检测(RT) 、PA等 确认实验(补充实验):蛋白免疫印迹试验(WB)
无反应 用另一种筛查试剂 有反应 再次检测
补充试验 (首选抗体补充试验)
无反应有反应不来自定报 告 “HIV抗 体 阴 性 ”
报 告 “HIV抗 体 阳 性 ”
排 除 儿 童 HIV感 染 常规儿童保健随访
诊 断 儿 童 HIV感 染
进行传染病信息报告 提供转介服务
随访并监测病情
提供咨询, 进行核酸
检测等其他 补充试验
产时艾滋病检测及服务流程 (适用于孕期未接受艾滋病检测的产妇)
孕 期 未 接 受 HIV抗 体 检 测 的 临 产 产 妇
主动提供相关检测信息,采集血样本
同时用两种不同的快速检测试剂 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
两种均无反应
两种均有反应 或 一有反应一无反应
报 告 “HIV抗 体 阴 性 ”
检测后咨询,知情选择干预措施
检测后咨询、指导 常规助产及服务
产后暂时未得到补充试验结果或 补 充 试 验 结 果 为 “不 确 定 ”
分娩前快速检测结果为一 有反应一无反应者, 用另一种筛查试剂 再次检测
条带/线性免疫试验(RIBA/LIA) 婴儿诊断:HIV DNA
病情判定检测
T细胞亚群检测:流式细胞仪技术 HIV RNA检测:病毒载量
HIV耐药检测
表型耐药:细胞培养技术 基因型耐药:序列测定,杂交技术
初筛实验
➢酶联免疫吸附试验(ELISA) ➢化学发光 ➢快速检测(RT)及其它检测
(1)明胶颗粒凝集试验(PA) (2)免疫渗滤试验:斑点ELISA和斑点免 疫 胶体 金(或胶体硒)快速试验
有反应
无反应
原 有 试 剂 +另 一 种 筛 查 试 剂 进 行 复 检 或 原有试剂双份进行复检
两种均有反应 或 一有反应一无反应
提供疑似阳性咨询 进一步做补充试验
不确定
补充试验 (首选抗体补充试验)
有反应
提供咨询
进行核酸检测等 其他补充试验
报告 “HIV抗 体 阳 性 ”
两种均无反应
报告 “HIV抗 体 阴 性 ”
无反应
流行病学史
无
有
进行核酸检测或 2-4周 后 随 访
检测后咨询、指导
进行传染病信息报告 提供后续干预服务
检测后咨询、指导 常规孕产期保健
《婴儿艾滋病感染早期诊断工作方案》
对HIV阳性产妇所生儿童于出生后6周和3个月时, 分别采集血标本,进行婴儿感染早期诊断。详见图 3婴儿艾滋病感染早期诊断检测及服务流程。
感染状态不明确者
12个 月 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
无反应
用另一种筛查试剂再次检测
无反应
有反应
有反应
18个 月 时 再 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
无反应
有反应
两 种 均 无 反 应 原 有 试 剂 +另 一 种 筛 查 试 剂 进 行 复检 或 原有试剂双份进行复检
两种均有反应 或 一有反应一无反应
无反应 有反应
分娩前快速 检测结果两 种均阳性者
及时应用抗艾滋病病毒药物; 适宜、安全的助产服务
尽早进行补充试验,及时获得检测结果 (首选抗体补充试验)
有反应
无反应
不确定
报告 “HIV抗 体 阳 性 ”
提供咨询,进行 传染病信息报告 继续提供干预服务
报告 “HIV抗 体 阴 性 ”
提供咨询 终止干预
18个月以下婴幼儿的HIV检测诊断
母亲 HIV 抗体经胎盘进入胎儿,出生时 新生儿和婴儿早期抗体有反应,不一定是感 染
出生时母亲的抗体,80~90% 在生后 9~12 个月消失,出生后 18 个月基本上全部 消失
18 个月后儿童 HIV 仍然有反应,视为自 身感染产生的抗体
18个月以下婴幼儿的HIV检测诊断
酶 酶标记 抗原 抗原
抗体
1.将抗原包被在固相载体上。 2.如样品中含有抗体,则结合 为抗原抗体复合物。 3.再加入酶标记抗原,则结合 为抗原-抗体-酶标记抗原复合 物。
4.酶催化底物并显色。
抗原
固相载体
双抗原夹心法示意图
结果判定:以梅里埃第三代ELISA(双抗原夹心法)为例
①阴性对照(NC),HIV-1阳性对照(PC1),HIV-2阳性对照(PC2) • NC 必须<0.25方可用,排除NC≥0.25的值,计算NC平均值。 • NC界限范围:0.6倍NC均值<NC<1.4倍NC均值。 ②符合以下条件的实验成立: • 两个以上的NC可用。 PC1-NC均值 ≥ 0.4,PC2-NC均值 ≥ 0.4 ③Cut off值 = 阴性对照均值 + 0.100 • 小于Cut off为阴性,大于或等于Cut off为阳性
提供咨询, 进行核酸
检测等其他 补充试验
提供咨询 终止干预
提供咨询 继续提供干预服务 尽早获得检测结果
所生新生儿特别
护理、应用抗病毒 药物;喂养指导、
营养咨询等
感染妇女纳入当地艾滋病 防治系统
所生儿童继续随访、进行 艾滋病相关检测
艾滋病感染孕产妇所生儿童艾滋病抗体检测及服务流程(图3)
艾滋病感染产妇所生儿童 早期诊断检测结果阴性;或未接受早期诊断检测、
(优选)孕产妇及所生儿童艾 滋病检测章三英
样本的采集和处理
1.对从其他实验室送的样品,注意检查并注明其送检单与标 本记录的符号.样品管遗漏.破损情况。如有遗漏要把残留 的样品移出,并对管壁和盛器消毒。要检查并记录样品的 质量有无溶血,脂血,细菌感染等情况。
2.对实验室自己采集的标本,注意是血液先自然存放1-2小时 候,再用3000rpm离心15分钟,吸出上清液备用,如要几 天内检查可放入2-8℃冰箱,要储存则置于-20℃低冰箱内。
3.滤纸片的采集.用移液管从样品管中吸取100uL抗凝全血或 血浆,对准滤纸片印圈中心处蒋样品滴在滤纸上,或者穿 刺后自皮肤伤口流出的末梢血直接滴加在滤纸印圈的中心 处。在室温下自然干燥至少4小时,不要加热或堆叠,自 然干燥后放入密封袋中。
孕期艾滋病检测及服务流程
孕期初次接受产前保健的孕妇
主动提供有关的检测信息 采 集 血 样 本 , 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
检测HIV DNA或RNA
推荐检测HIV DNA, 因为HIV前病毒DNA 以细胞内前病毒感染状态存在,所以它不受 母亲围产期抗病毒治疗的影响和婴幼儿预防 性抗病毒治疗的影响 HIV DNA 的适宜月龄为3-6个月
不得使用脐带血.
HIV/AIDS实验室检测
诊断性检测
初筛实验:ELISA、化学发光(CLIA)、快速检测(RT) 、PA等 确认实验(补充实验):蛋白免疫印迹试验(WB)
无反应 用另一种筛查试剂 有反应 再次检测
补充试验 (首选抗体补充试验)
无反应有反应不来自定报 告 “HIV抗 体 阴 性 ”
报 告 “HIV抗 体 阳 性 ”
排 除 儿 童 HIV感 染 常规儿童保健随访
诊 断 儿 童 HIV感 染
进行传染病信息报告 提供转介服务
随访并监测病情
提供咨询, 进行核酸
检测等其他 补充试验