急性眼刺激试验-规范
急性眼刺激性、腐蚀性实验
五、急性眼刺激性/腐蚀性试验Acute Eye Irritation/Corrosion Test1 范围本规范规定了动物急性眼刺激性或腐蚀性试验的基本原则、要求和方法。
本规范适用于化妆品原料及其产品安全性毒理学检测。
2 规范性引用文件OECD Guidelines for Testing of Chemicals（No 405，April 2002）USEPA OPPTS Harmonized Test Guidelines（Series 870.2400，Aug.1998）3 试验目的确定和评价化妆品原料及其产品对哺乳动物的眼睛是否有刺激作用或腐蚀作用及其程度。
4 定义4.1 眼睛刺激性（Eye irritation）：眼球表面接触受试物后所产生的可逆性炎性变化。
4.2 眼睛腐蚀性（Eye corrosion）：眼球表面接触受试物后引起的不可逆性组织损伤。
5 试验的基本原则受试物以一次剂量滴入每只实验动物的一侧眼睛结膜囊内，以未作处理的另一侧眼睛作为自身对照。
在规定的时间间隔内，观察对动物眼睛的刺激和腐蚀作用程度并评分，以此评价受试物对眼睛的刺激作用。
观察期限应能足以评价刺激效应的可逆性或不可逆性。
动物如果在试验的任何阶段出现严重抑郁、痛苦的表现，则应该给予人道地处死，依据试验情况对受试物进行适当评价。
动物如出现角膜穿孔、角膜溃疡、角膜4分超过48h、缺乏光反射超过72h、结膜溃疡、坏疽、腐烂等情况，通常为不可逆损伤的症状，也应该给予人道地处死。
6试验方法6.1 受试物液体受试物一般不需稀释，可直接使用原液，染毒量为0.1mL。
若受试物为固体或颗粒状，应将其研磨成细粉状，染毒量应为体积0.1mL或重量不大于100mg（染毒量应进行记录）。
受试物为强酸或强碱（pH值≤2或≥11.5），或已证实对皮肤有腐蚀性或强刺激性时，可以不再进行眼刺激性试验。
气溶胶产品需喷至容器中，收集其液体再使用。
6.2 实验动物和饲养环境首选健康成年白色家兔。
GBZ240.5-急性眼刺激试验
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—— 第 30部 分 :皮 肤变态反应试验-局 部淋 巴结法 —— 第 31部 分 :大 肠杆菌 回复突变试验
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—— 第 32部 分 :酵 母菌基 因突变试验 —— 第 33部 :果 蝇伴性 分 隐性致死试验 —— 第 34部 分 :枯 草杆菌基 因重组试验
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—— 第 35部 分 :体 外 哺乳动物细胞程序外 DNA合 (UDs)试 成 验 —— 第 36部 分 :体 内哺乳动物外周血细胞微核试验
I∶
GBz/T240.5-2011
化 学品毒 理 学评价程序 和试 验方法 第 5部 分 :急 性 眼刺激性 /腐 蚀性试 验
1
范围
GBZ/T240的 本 部 分 规 定 了动 物急性 眼刺 激 /腐 蚀 性 试 验 的 目的 、 验 概 述 、 验 方 法 、 据 处 理 试 试 数
与结 果评 价 、 价 报告 和 结 果解 释 。 评 本 部分适 用 于检 测 化 学 品的眼 睛刺激 性 /腐 蚀性 作 用 。
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—— 第 22部 分 :两 代繁殖毒性试验 —— 第 23部 分 :迟 发性神经毒性试验
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—— 第 24部 :慢 性经 口 分 毒性试验 —— 第 25部 分 :慢 性经皮毒性试验 —— 第 26部 分 :慢 性 吸人毒性试验 —— 第 27部 分 :致 癌试验
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—— 第 28部 :慢 性毒性 /致 分 癌性联合试验 —— 第 29部 分 :毒 物代谢动力学试验
激作 用 。观察 时 间应 能 足 以评 价 刺 激 效 应 的可 逆 性 和 不 可 逆 性 。观 察 时 间最 少 物 质 不必进 行 眼刺激试 验 ;在 充分并 公 认 的体 外试 验 结 果 中确 定 可 能 产 生 刺 激 性 或 腐 蚀 性 的物 质 不 必 进行 体 内试 验 。
消毒技术规范2002完整版word版
1.1 引言根据《中华人民共和国传染病防治法》、《中华人民共和国传染病防治法实施办法》和《消毒管理办法》制订本规范。
本规范含总则、消毒检验技术规范、医疗卫生机构消毒技术规范和疫源地消毒技术规范四个部分。
1.2 适用范围本规范适用于在中华人民共和国境内生产、经营、使用和检验消毒产品的组织，医疗卫生机构以及传染病疫源地和其他一切需要消毒的场所。
1.3 术语1.3.1 消毒disinfection杀灭或清除传播媒介上病原微生物，使其达到无害化的处理。
1.3.2 灭菌sterilization杀灭或清除传播媒介上一切微生物的处理。
1.3.3 化学指示物chemical indicator利用某些化学物质对某一杀菌因子的敏感性，使其发生颜色或形态改变，以指示杀菌因子的强度(或浓度)和/或作用时间是否符合消毒或灭菌处理要求的制品。
1.3.4 生物指示物biological indicator将适当载体染以一定量的特定微生物，用于指示消毒或灭菌效果的制品。
1.3.5 消毒剂disinfectant用于杀灭传播媒介上的微生物使其达消毒或灭菌要求的制剂。
1.3.6 灭菌剂sterilant可杀灭一切微生物(包括细菌芽孢)使其达到灭菌要求的制剂。
1.3.7 高效消毒剂high-efficacy disinfectant指可杀灭一切细菌繁殖体（包括分枝杆菌）、病毒、真菌及其孢子等，对细菌芽孢（致病性芽孢菌）也有一定杀灭作用，达到高水平消毒要求的制剂。
1.3.8 中效消毒剂intermediate-efficacy disinfectant指仅可杀灭分枝杆菌、真菌、病毒及细菌繁殖体等微生物，达到消毒要求的制剂。
1.3.9 低效消毒剂low-efficacy disinfectant指仅可杀灭细菌繁殖体和亲脂病毒，达到消毒要求的制剂。
1.3.10 有效氯available chlorine有效氯是衡量含氯消毒剂氧化能力的标志，是指与含氯消毒剂氧化能力相当的氯量(非指消毒剂所含氯量)，其含量用mg/L 或%浓度表示。
GBZ240.6-急性皮肤刺激试验
无红 斑 轻微 红 斑 红斑 和焦痂形成 明显 红 斑
1
72h各 观察时点最高积分均值 ,按 表 2判 定皮肤刺激强度 。
1
皮肤刺激反应评分
评 分
2
中等程度到重度程度 红斑 严重红斑至焦痂形成
GBz/T240.6-2011
表 1(续 )
皮 肤 反 应 无水肿 很轻微水肿 水肿形成
1
评
分
6.4.2 染毒
取受试样 品 0.5mL(g)直 接涂布在皮肤 上 ,用 4层 纱 布 (2.5cm× 2.5cm)和 一层玻璃 纸或类似物 覆盖 ,再 用无刺激性胶布和绷带加 以固定 。对侧皮肤作 为对 照 。采用封 闭试 验 ,敷 用 时间为 4h。 试 验 结束后 ,用 温水或无刺激性溶剂清除残 留受试样 品 。 如怀疑受试样 品可能引起严重刺激或腐蚀作用 ,可 采用分段试验 ,将 三个涂布受试样 品的纱布块 同 时或先后敷贴于一 只家兔背部脱 毛区皮肤上 ,分 别 于涂敷后 3min、 60min和 4h取 下一块纱 布 ,皮 肤涂 敷部位在任 一时间点积分等于 8分 ,即 可停 止试验 。
限 内观察 和评 价 刺激 反 应 的程
作详细的记录 。
1犭
以进行 可 逆 或不 可逆效 应 的观 察 ,以
便进行完整 的评价 ,但 一般不超过
强碱物质 (pH≥ 11),由 于可预见其腐蚀特
性 ,不 必做本试验 ;若 已知受试样 品有很强 的经皮 吸收毒性 (LD5。 ≤ zOO mg/kg体 重 )的 物质不必进行本 试验 ;在 充分并公认 的体外试验结果 中确定可能产生腐蚀或刺 激 毒性 的物质不必进 行体 内试 验 。如果 从受试样 品的结构活性构效关系可 以预见 潜在 的腐蚀毒性 ,则 不必做本试验 。
消毒产品检验技术规范
消毒产品检验技术规范Technical Standard for Testing Disinfection Products 1 消毒产品消毒效果检验技术规范1.1 消毒剂杀微生物试验1.1.1 适用范围主要适用于消毒剂鉴定和日常检测，用来评价各种用途的消毒剂对微生物的杀灭效果。
按此方法进行的试验，只是对消毒剂的杀菌能力的重要方面进行验证，侧重反映消毒剂的实用剂量与杀菌能力。
不能反映消毒剂的全面特性。
1.1.2 菌悬液与菌片的制备1.1.3 活菌培养计数技术1.1.4 残留消毒剂的去除方法1.1.5 中和剂鉴定试验1.1.6 物理法去除残留消毒剂试验1.1.7 细菌定量杀灭试验1.1.8 杀灭分枝杆菌试验1.1.9 真菌杀灭试验1.1.10 病毒灭活试验1.1.11 能量试验1.1.12 各种因素对消毒剂杀菌作用影响的测定1.2 消毒剂模拟现场和现场消毒鉴定试验1.2.1 消毒剂对食（饮）具消毒效果的模拟现场鉴定试验1.2.2 消毒剂对医疗器械的消毒模拟现场试验1.2.3消毒剂对医疗器械的模拟现场灭菌试验1.2.4 连续使用稳定性试验1.2.5消毒剂对手消毒的模拟现场试验1.2.6消毒剂对手消毒现场试验1.2.7 消毒剂对皮肤消毒的模拟现场试验1.2.8消毒剂对皮肤消毒现场试验1.2.9消毒剂对其他表面消毒模拟现场鉴定试验1.2.10消毒剂对其他表面消毒现场鉴定试验1.3 空气消毒效果鉴定试验1.3.1 目的检测消毒器械或消毒剂对空气中细菌的杀灭和清除作用，以验证其对空气的消毒效果。
其他方法对空气的消毒效果，亦可参照本试验的有关原则进行。
1.3.2 试验设备和器材1.3.3 试验阶段1.3.4 实验室试验与模拟现场试验操作程序1.3.5 现场试验1.4 水的消毒效果鉴定试验1.4.1生活饮用水消毒效果鉴定1.4.1.1 目的检测生活饮用水消毒剂与消毒器械的杀菌效果，以验证其对生活饮用水消毒能否达到卫生合格标准。
急性眼刺激试验
急性眼刺激试验急性毒性试验动物急性毒性试验研究动物在24小时内服用一次或多次后在一定时间内产生的毒性反应人类使用的药物通常需要动物急性毒性试验。
需要啮齿动物或非啮齿动物通常小鼠或大鼠通过口腔、吸入或皮肤暴露于药物。
急性毒性试验主要测量LD50(浓度)，观察急性中毒性能、经皮吸收能力以及对皮肤、粘膜和眼睛是否有局部刺激等。
急性毒性试验处于药物毒理学研究的早期阶段，对阐明药物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意义。
急性毒性试验获得的信息对某些药物的长期毒性试验剂量的设计和一期临床试验初始剂量的选择具有重要的参考价值，并能提供一些与人类用药过量所致急性中毒有关的信息。
急性眼刺激/眼腐蚀试验(巴豆油或甲醛)定义:眼刺激:指眼球表面接触试样后可逆的炎症变化眼睛腐蚀性:指眼球表面与被测样品接触造成的不可逆组织损伤。
试验的基本原理:将1个试验样品一次滴入每只实验动物一只眼的结膜囊，另一只未处理的眼作为自身对照。
2在规定的时间间隔内，观察对动物眼睛的刺激和腐蚀程度及评分，从而评价试样对眼睛的刺激观察时间应足以评估刺激效应的可逆性和不可逆性。
观察时间至少为72小时，但一般不超过21d几天。
3当动物表现出严重而持久的疼痛迹象时，应以适当的方式处死动物；4强酸或强碱物质，如酸碱度≤2或酸碱度≥11.5，由于其可预测的腐蚀特性，不需要测试。
5.在皮肤试验中被证明具有腐蚀性或严重刺激毒性的物质不需要进行眼睛刺激试验，可以假定这些物质会对眼睛造成类似的严重后果；6在充分和公认的体外试验结果确定可能产生刺激性或腐蚀性物质时无需进行体内试验目的:检测外来化合物对实验动物眼睛和粘膜的主要刺激和腐蚀作用的急性试验，以提供与受试物质接触的人眼和粘膜的潜在危险信息实验动物:优选成年白兔(如果使用其他哺乳动物进行实验，实验者应提供选择依据)，选择对人皮肤和粘膜反应相对相似的[动物，常用动物包括兔和豚鼠动物种类的选择应基于待观察的指标和模型的合理性。
《急性眼刺激试验报告》消毒产品检验报告(模板 样式)
急性眼刺激试验检验机构全称检验报告样品受理编号：第页/共页样品名称接样日期检验项目急性眼刺激试验检验完成日期一、材料和动物1．受试样品：名称及批号、剂型、颜色、嗅味、液体比重和产品黏膜消毒最高应用液浓度。
2. 动物：品种、来源、等级合格证号、体重范围，饲料及饲养环境条件。
3. 其它可能影响试验结果的材料及其有关情况。
二、方法：1. 检测依据 (写明所依据的资料及所在的条目)。
2．简述受试物制备和浓度，滴入家兔眼结膜囊的受试物用量，被动闭合时间，开始冲洗时间，观察方法和时间及阴性对照处理。
3．检测依据中未包括或需要特殊说明可能影响检测结果的问题。
三、实验结果文字叙述染毒后动物的眼刺激反应及程度，并描述中毒表现。
将实验结果列表6-53、表6-54。
家兔眼刺激（3天内）反应评分动物编号损害表现眼睛刺激反应积分1 h 24 h 48 h 72 h 平均评分*样品对照样品对照样品对照样品对照样品对照1 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿2 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿3 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿*平均评分系指24h、48h、72h评分之和除以观察时间段数3样品受理编号：第页/共页( ) 量认（）字（）号家兔眼刺激（3天后）反应评分动物编号损害表现眼睛刺激反应积分 7d 14d 21d样品对照样品对照样品对照1 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿2 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿3 角膜损害虹膜损害结膜充血结膜水肿四、结论：受试物对家兔急性眼刺激反应分级及其依据。
法定代表人(或授权的技术负责人) (签字) 检验机构盖章最终审核日期年月日。
急性眼刺激性试验SOP
急性眼刺激试验标准操作规程目的：确定评价化学品对哺乳类动物眼睛是否有刺激作用及其程度。
概述：受试样品以一次剂量加入每只实验动物的一侧眼睛结膜囊内，以未作处理的另一侧眼睛作为自身对照；在规定的时限内，观察对动物眼睛的刺激和腐蚀作用程度并评分，以此评价受试样品对眼睛的刺激作用。
观察时间赢能足以评价刺激效应的可逆性和不可逆性。
观察时间最少72小时，但是一般不超过21天；当动物出现严重和持久的痛苦迹象是，以适当的方式将动物处死；强酸物质或强碱物质，由于其可预见的腐蚀特性，不必做本实验；已在皮肤试验中证实具有腐蚀或严重刺激毒性的物质不必进行眼刺激试验；在充分并公认的体外试验结果中确定可能产生刺激性或腐蚀性的物质不必进行体内试验。
1；样品处理液态受试样品，一般不需要稀释，可直接使用。
不溶性或难溶固体或颗粒状物质，应其研磨成细粉状，过74微米孔径筛。
气溶胶产品需喷至容器中，收集其液体再使用。
对挥发性物质，剂量可以通过使用前后称量容器质量进行估值。
2；实验动物：成年白兔，2000克到3000克（1）可预见有严重反应的受试样品，先考虑用一只动物试验，结果有反应，则不必进行，不反应则，至少需要3只动物。
3；剂量设计；液态受试样品染毒量为0.1ML。
若受试样品为固态难溶颗粒状，染毒量应为100MG。
4；试验步骤（1）试验前眼睛的检查试验前动物药在动物实验室环境中至少适应3天。
试验前24小时，要对实验动物的两只眼睛进行常规检查。
有眼睛刺激症状，角膜缺陷或结膜损伤的动物不能用于试验。
（2）染毒；轻轻拉开实验动物一侧眼睛的下眼睑，将受试样品0.1ml（或100mg）滴入结膜囊中，使上，下眼被动闭合一秒，以防止受试样品丢失。
未处理的另一侧眼睛作为自身对照。
（3）滴入受试样品24小时内不冲洗眼睛，如果认为必要，在24小时可进行冲洗。
（4）根据表2的评价标准，如果受试样品出现中度以上刺激性时，必需时另选3只动物进行冲洗试验，滴入受试样品闭合一秒，30秒后用生理盐水冲洗5分钟，水的流量和流速都不应导致眼损伤。
急性皮肤眼刺激实验报告
一、实验背景化妆品、药物、化工产品等在使用过程中，可能会对皮肤和眼睛产生刺激作用。
为了评估这些物质的安全性，本实验对某化妆品进行了急性皮肤眼刺激试验，以观察其对皮肤和眼睛的刺激反应。
二、实验目的1. 评估某化妆品对皮肤和眼睛的急性刺激作用；2. 为该化妆品的安全性评价提供依据。
三、实验材料1. 实验动物：成年白色家兔，体重2.0-2.5kg，共8只；2. 受试化妆品：某品牌化妆品，生产批号：20231201；3. 赋形剂：无刺激性乳液；4. 实验仪器：皮肤刺激试验箱、电子天平、滴管、纱布、胶布、绷带等。
四、实验方法1. 急性皮肤刺激试验（1）实验动物分组：将8只家兔随机分为两组，每组4只，分别为实验组和对照组。
（2）皮肤准备：实验前24小时，将实验动物背部脊柱两侧毛剪掉，去毛范围各约3cm×6cm，不可损伤表皮。
（3）涂抹受试物：实验组将0.1ml受试化妆品滴在2.5cm×2.5cm大小的四层纱布上，敷贴在一侧皮肤上；对照组将相同体积的赋形剂敷贴在另一侧皮肤上。
然后用一层油纸覆盖，再用无刺激性胶布和绷带加以固定。
（4）观察与记录：试验结束后1、24和48小时，观察涂抹部位皮肤反应，按照表1和表2进行皮肤反应积分和刺激强度评价。
2. 急性眼刺激试验（1）实验动物分组：将8只家兔随机分为两组，每组4只，分别为实验组和对照组。
（2）眼刺激准备：实验前24小时，将实验动物眼部用生理盐水清洗，去除分泌物。
（3）滴加受试物：实验组将0.1ml受试化妆品滴入每只实验动物的一侧眼结膜囊内；对照组将相同体积的赋形剂滴入另一侧眼结膜囊内。
（4）观察与记录：试验结束后1、24和48小时，观察眼睛刺激反应，按照表1和表2进行刺激强度评价。
五、实验结果1. 急性皮肤刺激试验实验组：1只家兔在试验结束后1小时出现轻微红斑，24小时后红斑消退；2只家兔在试验结束后24小时出现轻微红斑和水肿，48小时后症状消失；1只家兔在试验结束后48小时出现轻微红斑和水肿，72小时后症状消失。
ybb眼刺激标准
ybb眼刺激标准
YBB眼刺激标准是关于化学品对眼睛产生刺激的一个标准。
它规定了化学品对眼睛的刺激程度和分类，以便更好地评估和控制化学品对眼睛的潜在危害。
根据YBB眼刺激标准，化学品可以分为五个类别，从无刺激到严重刺激。
这些类别是根据化学品对眼睛的刺激程度和持续时间来划分的。
在评估化学品对眼睛的刺激时，需要考虑多个因素，包括化学品的浓度、暴露时间、暴露方式等。
此外，YBB眼刺激标准还规定了测试方法和实验要求，以确保评估结果的一致性和可靠性。
总之，YBB眼刺激标准是一个重要的标准，有助于更好地评估和控制化学品对眼睛的潜在危害。
了解这个标准可以帮助化学品生产商、使用者和管理者更好地管理化学品，保护人们的眼睛健康。
急性眼刺激试验
急性眼刺激试验2.3.4.1 目的检测消毒剂对实验动物眼睛的急性刺激和腐蚀作用。
2.3.4.2 实验动物使用3只家兔。
试验前检查家兔双眼，有异常者不能用于试验。
2.3.4.3 操作程序（1）受试物一般为黏膜消毒或空气消毒应用液的5 倍浓度的溶液或原液。
吸取受试物0.1ml，滴入家兔一侧眼结膜囊内。
另一侧眼以生理盐水作为正常对照。
（2）滴受试物后，将眼被动闭合4s，30s后用生理盐水冲洗。
于滴眼后1h、24h、48h、72h、7d、14d和21d，肉眼观察家兔眼结膜、虹膜和角膜的损伤与恢复情况。
如果72h内未出现刺激反应，或第7d或第14d，眼睛刺激反应完全恢复，即可提前终止试验。
必要时，用2% 荧光素钠溶液或裂隙灯、放大镜检查角膜及虹膜变化。
2.3.4.4 评价规定按表2-13对家兔眼角膜、虹膜和结膜的急性刺激反应进行评分，并分别计算每只动物在三个不同观察时间（24h、48h和72h）角膜损害、虹膜损害、结膜充血和结膜水肿四方面的“平均评分”（即每只动物的24h、48h和72h评分之和除以观察数3）。
分别以动物眼角膜、虹膜和结膜充血、水肿的平均评分和恢复时间进行，按表2-14、表2-15眼刺激反应分级标准判定受试物对眼睛的刺激强度。
表2-13 家兔急性眼刺激反应的评分标准眼损害表现评分角膜损害：无溃疡形成或混浊散在或弥漫性混浊，虹膜清晰可见1半透明区易分辨，虹膜模糊不清2出现灰白色半透明区，虹膜细节不清，瞳孔大小勉强可见 3角膜不透明，混浊，虹膜无法辨认4虹膜损害：正常皱褶明显加深，充血，肿胀，角膜周围有中度充血，瞳孔对光仍有反应1出血、肉眼可见破坏，或瞳孔对光无反应 2结膜（睑结膜、球结膜）充血血管正常血管充血呈鲜红色1血管充血呈深红色，血管不易分辨 2弥漫性充血呈紫红色3结膜（睑结膜、球结膜）水肿无水肿轻微水肿(包括瞬膜)1明显水肿，伴有部分眼睑外翻2水肿至眼睑近半闭合3水肿至眼睑大半闭合4表2-14 眼刺激性反应分级标准可逆性损伤无刺激性3只动物的平均评分：角膜损害＜1、虹膜损害＜1、结膜充血＜2和结膜水肿＜2或3只动物中至少有2只动物的平均评分符合上述标准。
眼刺激ybb标准
眼刺激ybb标准
眼刺激性是指动物的眼睛表面（包括角膜，巩膜及结膜部分）接触到化学物质从而产生炎症反应的过程。
这个过程有可逆的，也有不可逆的。
对于化妆品眼刺激性的安全评价，目前多采用家兔试验，即兔的眼刺激性试验（Draize eye test）。
该实验方法于1944年建立，目前仍是测定急性眼毒性的国际标准。
在实验中，受试物以一次剂量滴入每只实验动物的一侧眼睛结膜囊内，以未作处理的另一侧眼睛作为自身对照。
在规定的时间间隔内，观察对动物眼睛的刺激和腐蚀作用程度并评分，以此评价受试物对眼睛的刺激作用。
观察期限应能足以评价刺激效应的可逆性或不可逆性。
如出现角膜穿孔、角膜溃疡、角膜4分超过48h、缺乏光反射超过72h、结膜溃疡、坏疽、腐烂等情况，通常为不可逆损伤的症状，也应当给予人道地处死。
请注意，虽然家兔试验是当前评价化妆品眼刺激性的常用方法，但其存在一定的主观性和实验室之间的变异性，这可能导致实验结果存在误差。
总的来说，眼刺激ybb标准是一个用于评估化妆品或其他物质对眼睛刺激
性的标准，该标准采用家兔试验作为主要手段，并规定了一系列观察和评价
的程序。
但请注意，任何涉及动物实验的标准或方法都应遵循伦理和法律的要求。
动物眼刺激试验及评分标准
一次眼刺激试验
5.4.2.1.1将液态或软膏（0.1ml或100mg）受试物滴入（涂入）实验动物一侧结膜囊内，另一侧眼作为对照。
滴药后使眼被动闭合5~10s，记录滴药后6、24、48和72h眼的局部反应，第4、7天恢复情况。
观察时应用荧光素钠检查角质膜损害，最好用裂隙灯检查角膜透明度、虹膜纹理改变。
5.4.2.1.2如果受试物明显引起眼刺激反应，可再选用6只动物，将受试物滴入一侧结膜囊内，接角4s或3 0s后用生理盐水冲洗干净，再观察眼的刺激反应。
5.4.2.1.3按表4所列眼损害分级标准积分，再按表5进行眼刺激强度的评价。
5.4.2.2多次性眼刺激试验
将受试物原液0.1ml或配制成的50%软膏约100mg滴入或涂入一侧结膜囊内，另一侧眼作为对照，每日一次，连续14天。
实验结束后，继续观察7~14天，按表4分级标准记录眼的刺激反应，并按表5眼刺激性评价标准进行眼刺激强度的评价。
表5
5.4.3结果评价
按上述分级评价标准评定，如一次或多次接触受试物，不引起角膜、虹膜和结膜的炎症变化，或虽引起轻度反应，但这种改变是可逆的，则认为该受试物可以安全使用。
在许多情况下，哺乳动物眼的反应较人敏感，从动物试验结果外推到人可提供较有价值的依据。
比较几种消毒剂对实验动物的安全性
比较几种消毒剂对实验动物的安全性摘要目的：观察不同有效成分的化学消毒剂对动物设施进行消毒时对实验动物的刺激性。
方法：依据GB/T 38496-2020《消毒剂安全性毒理学评价程序和方法》对84消毒液、过氧乙酸消毒液、新洁尔灭、2%强化戊二醛消毒液进行急性经口毒性试验、急性吸入毒性试验、皮肤刺激试验、急性眼刺激试验，评价这几种消毒剂的刺激性。
结果：采用相同检测方法对这几种消毒剂进行对比检测，刺激性：过氧乙酸消毒液＞2%戊二醛溶液＞84消毒液＞新洁尔灭。
结论：过氧乙酸消毒液、2%强化戊二醛消毒液适合在无动物情况下对动物设施进行消毒，84消毒液、新洁尔灭适合带动物消毒。
关键词化学消毒剂；实验动物设施；刺激性；随着医学和生物学的发展，动物试验涉及的科研或者检测领域也更加广泛，如新药测试，疾病模型建立、肿瘤研究、遗传学研究及检验检测等[1-2]。
屏障设施如果消毒不彻底，对微生物控制不到位，会加大SPF级实验动物感染的风险。
选用刺激性小或无刺激性的消毒剂，不仅能够严格控制动物房设施环境中的微生物数量，化学消毒剂在实验动物设施中的科学合理使用提供参考。
本文通过研究84消毒液、新洁尔灭、过氧乙酸消毒液、2%强化戊二醛消毒液四种消毒液对实验动物的毒理学试验，旨在研究日常用四种常见消毒液对屏障环境消毒时对实验动物的影响。
1材料和方法1.1仪器电子天平，上海豪晟科学仪器有限公司；静式吸入染毒柜，汉仁唐山设备制造有限公司。
1.2样品过氧乙酸消毒液，有效含量为2g/L；84消毒液，有效含量200mg/L；新洁尔灭，有效含量27g/L-33g/L；2%强化戊二醛消毒液，有效含量2.2±0.2%。
1.3实验动物SPF级KM小鼠，由斯贝福（北京）生物技术有限公司提供，动物生产许可证号SCXK （京）2019-0010。
普通级新西兰兔由璧山区腾鑫养殖场提供，动物生产许可证号SCXK（渝）2017-0010。
1.4方法1.4.1急性经口毒性试验选用SPF级KM小鼠80只，体重18g~22g。
急性眼刺激试验
急性毒性试验动物急性毒性试验研究动物一次或24小时内多次给予受试物后，一定时间内所产生的毒性反应。
拟用于人体的药物通常需要进行动物急性毒性试验。
要求采用啮齿类或非啮齿类两种动物。
通常为小鼠或大鼠采用经口、吸入或经皮染毒途径。
急性毒性试验主要测定半数致死量（浓度），观察急性中毒表现，经皮肤吸收能力以及对皮肤、粘膜和眼有无局部刺激作用等，急性毒性试验处在药物毒理研究的早期阶段，对阐明药物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意义。
急性毒性试验所获得的信息对长期毒性试验剂量的设计和某些药物Ⅰ期临床试验起始剂量的选择具有重要参考价值，并能提供一些与人类药物过量急性中毒相关的信息。
急性眼睛刺激性／眼睛腐蚀性试验（巴豆油或甲醛）定义:眼睛刺激性：指眼球表面接触受试样品后产生的可逆性炎性变化。
眼睛腐蚀性：指眼球表面接触受试样品后引起的不可逆性组织损伤试验基本原则：1 受试样品以一次剂量滴入每只实验动物的一侧眼睛结膜囊内，以未作处理的另一侧眼睛作为自身对照；2 在规定的时间间隔内，观察对动物眼睛的刺激和腐蚀作用程度并评分，以此评价受试样品对眼睛的刺激作用。
观察时间应能足以评价刺激效应的可逆性和不可逆性。
观察时间最少72h，但一般不超过21d；3 当动物出现严重和持久的痛苦迹象时，以适当的方式将动物处死；4 强酸或强碱物质如pH≤2或pH≥11.5，由于其可预见的腐蚀特性，不必做本试验；5 已在皮肤试验中证实具有腐蚀或严重刺激毒性的物质不必进行眼刺激试验，可以推测该物质对眼睛将会引起相似的严重结果；6 在充分并公认的体外试验结果中确定可能产生刺激性或腐蚀性的物质不必进行体内试验。
目的：检测外来化合物对实验动物眼和粘膜得原发性刺激和腐蚀作用的急性试验，为人类眼和粘膜接触该受试物的潜在危害提供资料。
实验动物：首选成年白色家兔（如果使用其它的哺乳动物做试验，试验者应提供选择的依据【应选择与人类皮肤、粘膜反应比较相近的动物，常用的动物有家兔、豚鼠。
微生物肥料生物安全通用技术准则
微生物肥料生物安全通用技术准则（NY 1109-2006）1 范围本标准规定了微生物肥料使用菌种安全性分级目录、不同菌种及产品选择毒理学试验的原则、程序、试验方法和结果评价方法。
本标准适用于中华人民共和国境内生产、销售的微生物肥料。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB 15193。
3-2003 急性毒性试验GB/T 4789。
28—2003 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准.3.1半数致死量 median lethal dose,LD50是经口给予受试物后，预期能够引起动物死亡率为50%的单一受试物剂量,该剂量为经过统计得出的估计值.其单位是每千克体重所摄入受试物质的毫克数、克数或毫升数，即mg/kg体重、g/kg体重或mL/kg 体重。
4 选择毒理学试验的原则4.1 生产用菌种微生物肥料生产用菌种分为四级管理,其安全分级目录见附录A.未列入附录A中的菌种，除根瘤菌和乳杆菌(Lactobacillus)外，其余均需做毒理学试验。
4.1.1第一级（A。
1）为免作毒理学试验的菌种。
4。
1.2 第二级（A。
2）为需做急性毒性试验的菌种。
4。
1。
3 第三级（A.3）为需做致病性试验的菌种。
4。
1.4 第四级(A。
4)为禁用菌种。
4。
2产品4.2.1 除有机物料腐熟剂以外的固体微生物接种剂类产品均免做毒理学试验。
4.2。
2 复合微生物肥料、生物有机肥和液体剂型微生物接种剂等需做急性毒性试验。
5 毒理学试验程序5。
1 菌种毒理学试验程序5。
1。
1 应提供微生物肥料生产用菌种的鉴定资料,包括属及种的拉丁文学名和中文译名、形态、生理生化特性及鉴定依据、功能评价等资料。
化学品毒性鉴定技术规范
化学品毒性鉴定技术规范2005年6月目录一、总则 (3)二、试验方法（一）第一阶段试验 (15)1、急性吸入毒性试验 (16)2、急性经皮毒性试验 (20)3、急性经口毒性试验 (23)4、急性眼刺激性/腐蚀性试验 (26)5、皮肤刺激性/腐蚀性试验 (32)6、皮肤变态反应试验（皮肤致敏试验） (36)（二）第二阶段试验 (54)1、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames试验） (55)2、体外哺乳动物细胞染色体畸变试验 (62)3、体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验 (68)4、体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验 (75)5、哺乳动物精原细胞/初级精母细胞染色体畸变试验，或 (79)精子畸形试验 (87)6、啮齿类动物显性致死试验 (90)7、免疫毒性评价试验方法 (95)8、亚急性吸入（14/28天）毒性试验 (104)9、亚急性经皮（21/28天）毒性试验 (110)10、亚急性经口（28天）毒性试验 (115)（三）第三阶段试验 (121)1、亚慢性吸入毒性试验 (122)2、亚慢性经皮毒性试验 (126)3、亚慢性经口毒性试验 (130)4、致畸试验 (136)5、两代繁殖毒性试验 (142)6、迟发性神经毒性试验 (147)（四）第四阶段试验 (153)1、慢性吸入毒性试验 (154)2、慢性经皮毒性试验 (160)3、慢性经口毒性试验 (166)4、致癌试验，或 (172)慢性毒性/致癌性合并试验 (180)5、毒物代谢动力学试验 (189)6、接触人群调查与观察（参考国内外有关专著或教科书）（五）参考试验 (196)1、皮肤变态反应试验-局部淋巴结法 (197)2、大肠杆菌回复突变试验 (202)3、酵母菌基因突变试验 (210)4、体外哺乳动物细胞正向基因突变试验 (214)5、果蝇伴性隐性致死试验 (220)6、枯草杆菌基因重组试验 (224)7、体外哺乳动物细胞程序外DNA合成（UDS）试验 (232)8、体内哺乳动物外周血细胞微核试验 (238)9、体外哺乳动物姊妹染色单体交换（SCE）试验 (244)10、体内哺乳动物骨髓细胞姊妹染色体交换（SCE）试验 (250)11、繁殖/生长发育毒性筛选试验 (256)12、亚急性毒性合并繁殖/发育毒性筛选试验 (262)13、一代繁殖试验 (269)14、神经毒性筛选组合试验 (274)总则General Principles1 依据根据《中华人民共和国职业病防治法》、《作业场所使用有毒物品劳动保护条例》、《危险化学品安全管理条例》、《职业卫生技术服务机构管理办法》、《化学品毒性鉴定管理规范》制定本规范。
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五、急性眼刺激性/腐蚀性试验
Acute Eye Irritation/Corrosion Test
1 范围
本规范规定了动物急性眼刺激性或腐蚀性试验的基本原则、要求和方法。
本规范适用于化妆品原料及其产品安全性毒理学检测。
2 规范性引用文件
OECD Guidelines for Testing of Chemicals (No 405, Feb. 1987)
USEPA OPPTS Harmonized Test Guidelines (Series 870.2400 , Aug. 1998 )
3 试验目的
确定和评价化妆品原料及其产品对哺乳动物的眼睛是否有刺激作用或腐蚀作用及其程度。
4 定义
4.1 眼睛刺激性(Eye irritation)：眼球表面接触受试物后所产生的可逆性炎性变化。
4.2 眼睛腐蚀性(Eye corrosion)：眼球表面接触受试物后引起的不可逆性组织损伤。
5 试验的基本原则
受试物以一次剂量滴入每只实验动物的一侧眼睛结膜囊内，以未作处理的另一侧眼睛作为自身对照。
在规定的时间间隔内，观察对动物眼睛的刺激和腐蚀作用程度并评分，以此评价受试物对眼睛的刺激作用。
观察期限应能足以评价刺激效应的可逆性或不可逆性。
6试验方法
6.1 受试物
液体受试物一般不需稀释, 可直接使用原液，染毒量为0.1mL。
若受试物为固体或颗粒状，应将其研磨成细粉状，并用水充分湿润, 染毒量应为体积0.1mL或重量不大于100mg（染毒量应进行记录）。
受试物为强酸或强碱（pH值≤2或≥11.5），或已证实对皮肤有腐蚀性或强刺激性时，可以不再进行眼刺激性试验。
气溶胶产品需喷至容器中，收集其液体再使用。
6.2 实验动物和饲养环境
首选健康成年白色家兔。
至少使用3只家兔。
试验前动物要在实验动物房环境中至少适应3d时间。
在试验开始前的24h内要对试验动物的两只眼睛进行检查（包括使用荧光素钠检查）。
有眼睛刺激症状、角膜缺陷和结膜损伤的动物不能用于试验。
实验动物及实验动物房应符合国家相应规定。
选用常规饲料，饮水不限制。
6.3 试验步骤
6.3.1 轻轻拉开家兔一侧眼睛的下眼睑，将受试物0.1 mL（100mg）滴入(或涂入)结膜囊中，使上、下眼睑被动闭合1s，以防止受试物丢失。
另一侧眼睛不处理作自身对照。
滴入受试物后24h内不冲洗眼睛。
若认为必要，在24h时可进行冲洗。
6.3.2若上述试验结果显示受试物有刺激性，需另选用3只家兔进行冲洗效果试验，即给家
兔眼滴入受试物后30s用足量、流速较快但又不会引起动物眼损伤的水流冲洗至少30s。
6.3.3临床检查和评分：在滴入受试物后1、24、48、72h以及第4d和第7d对动物眼睛进行检查。
如果72 h未出现刺激反应，即可终止试验。
如果发现累及角膜或有其它眼刺激作用，7d内不恢复者，为确定该损害的可逆性或不可逆性需延长观察时间，一般不超过21d。
除了对角膜、虹膜、结膜进行观察外，其它损害效应均应当记录并报告。
在每次检查中均应按表1眼损害的评分标准记录眼刺激反应的积分。
可使用放大镜、手持裂隙灯、生物显微镜或其它适用的仪器设备进行眼刺激反应检查。
在24h观察和记录结束之后，对所有动物的眼睛应用荧光素钠作进一步检查
6.3.4 对用后冲洗的产品（如洗面奶、发用品）只做30s冲洗试验，即滴入受试物后，眼闭合1s，至第30s时用足量、流速较快但又不会引起动物眼损伤的水流冲洗30s，然后按6.3.3进行检查和评分。
表1眼损害的评分标准
7 结果评价
化妆品原料—以给受试物后动物角膜、虹膜或结膜各自在24、48和72h观察时点的刺激反应积分的均值和恢复时间评价，按表2眼刺激反应分级判定受试物对眼的刺激强度。
化妆品产品—以给受试物后动物角膜、虹膜或结膜各自在24、48或72h观察时点的刺激反应的最高积分和恢复时间评价，按表3眼刺激反应分级判定受试物对眼的刺激强度。
8 试验报告
试验报告应包括如下内容：
(1)受试物名称、理化性状、配制方法和用量，必要时说明受试物的pH值；
(2)实验动物的种属、品系和来源（注明合格证号和动物级别）；
(3)实验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、相对湿度、实验动物房合格证号；
表4 对家兔眼睛刺激性试验结果
(4) 列表显示每只动物在每一观察时点（如染毒1，24，48和72h ）的刺激反应（建议的
表格形式见表4），将实验条件不冲洗和30秒冲洗的结果分别列表； (5) 具体描述除眼部以外的其它作用；
(6) 描述在各观察时点积分时的检查方法（如手持裂隙灯、用荧光素钠）； (7) 结论。
表 2 眼刺激性反应分级
表 3 眼刺激性反应分级
实验条件：不冲洗
30秒冲洗
动物
编号
部位 眼刺激性反应积分 1h 24h 48h 72h 4d 7d
样品
对照
样品
对照
样品
对照
样品
对照
样品
对照
样品
对照
1 结膜 虹膜 角膜
2 结膜 虹膜 角膜
3
结膜 虹膜 角膜
刺激反应分级
9．试验结果的解释
急性眼刺激性试验结果从动物外推到人的可靠性很有限。
白色家兔在大多数情况下对有刺激性或腐蚀性的物质较人类敏感。
若用其它品系动物进行试验时也得到类似结果，则会增加从动物外推到人的可靠性。