癌蛋白PRC17与人肌球蛋白调节轻链相互作用的初步鉴定

癌蛋白PRC17与人肌球蛋白调节轻链相互作用的初步鉴定何泽;陈洋;张永臣;万青;赵虎子;赵蕾;沈传陆

【期刊名称】《东南大学学报（医学版）》

【年(卷),期】2014(033)001

【摘要】目的:分析前列腺癌基因17(PRC17)与人肌球蛋白调节轻链(MLC2)之间的相互作用,并鉴定PRC17蛋白序列上与MLC2相互作用的功能区域.方法:经大肠杆菌表达并用Glutathione Sepharose 4B纯化GST及融合蛋白GST-MLC2,用SMMC-7721细胞表达带HA标签的PRC17及其截短突变体HA-PRC 17(353)、HA-PRC17 (251)、HA-PRC 17 (164)和HA-PRC17(△164),GST沉淀实验分析GST-MLC2与PRC17及其截短体的相互作用.结果:经诱导表达并纯化的GST和GST-MLC2分子质量符合预期,分别约为28.4 kD和46.6 kD,纯度均95％以上;GST沉淀实验结果显示,PRC17结合MLC2,不结合阴性对照GST;PRC17(353)和PRC17 (251)也能有效结合MLC2,但PRC17(164)和PRC17(△164)都不能与MLC2结合.结论:PRC17能特异性结合MLC2,其蛋白序列上与MLC2结合的部位位于其氨基端251位氨基酸之内,可能在164位氨基酸附近.

【总页数】6页(P12-17)

【作者】何泽;陈洋;张永臣;万青;赵虎子;赵蕾;沈传陆

【作者单位】东南大学医学院病理学与病理生理学系,江苏南京210009;东南大学生命科学研究院,江苏南京210009;东南大学医学院病理学与病理生理学系,江苏南京210009;东南大学医学院病理学与病理生理学系,江苏南京210009;东南大学医学院病理学与病理生理学系,江苏南京210009;东南大学医学院病理学与病理生理

学系,江苏南京210009;东南大学医学院病理学与病理生理学系,江苏南京210009;东南大学医学院病理学与病理生理学系,江苏南京210009

【正文语种】中文

【中图分类】Q78

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