酵母菌筛选研究,

最优发酵条件为：
温度40℃，诱变时间20min，经筛选 得到的菌株：酒精度为10.66%（V/V）， 菌体干重4.23g／100mL，残糖量为 0.73%（W/V）。
结论：
经本实验可确定，经筛选的酵母菌S-6
菌株的最优发酵条件为温度40℃，发 酵液酒精度为 9.53%（V/V），菌体干 重3.83g／100mL，残糖量为0.72% （W/V）。
耐高温酵母菌的筛选研究
学生姓名： 专 业 指导教师:
立题背景
酒精是一种重要的基础工业原料，
广泛应用于化学工业、食品工业、 日用化工和医药卫生等领域。 酿酒酵母发酵生产酒精主要存在这 样一些问题：一是酿酒酵母产酒率 低；二是酿酒酵母不耐高温，导致 酿酒酵母的生产成本较高，市场难 以接受。
实验材料与方法
2.实验方法
实验流程： 菌种活化→种子培养→三角瓶发酵初筛 →三角瓶发酵复筛→菌种诱变→稀释平 板分离培养→三角瓶发酵筛选→获得耐 高温且发酵率高的酵母菌
2.1分离筛选
将麦芽汁分装试管， 灭菌，摆斜面
菌株的活化：
挑取菌种， 接种至麦芽汁 斜面培养基中
2.2产酒酵母的置备
1）种子培养
2.2.3三角瓶筛选
2.2.3.1三角瓶发酵培养初筛
将培养 24h 的种子液按 10% 的接种量，接入装有 100mL 酵母液体完全培养基的 250mL 三角瓶中,共8瓶， 在30℃下,200r/min 旋 转式振动培养 48h，进 行酒精发酵实验，测各 产物量。
三角瓶发酵复筛
挑选出的两株菌种接种到装有种 子培养基的三角瓶中，分别在不同的 温度32℃﹑36℃﹑40℃﹑44℃﹑48℃ 下培养48h，进行酒精发酵实验。
菌落形成的边缘光滑，细胞颗粒饱满， 死亡率低，无污染，繁殖方式为芽殖，遗 产性状稳定。
菌种细胞为卵圆形，长约8微米，形 态大小均匀、整齐 。
结果与讨论
由图可知此菌株在 诱变时间为 20min时各产物 产量相对较高， 酒精度达到 10.66%（V/V）
酒精度%(V/V) 11
10பைடு நூலகம்
9
8
7
6 10 15 20 处理时间min 25 30
菌的培养皿(直径为5 cm)中 ，照射1 min后打开培养皿，同时打开磁力搅拌 器进行搅拌，即时计算时间，照射时 间分别设置为10、15、20、25、30 min；
同时设置一组空白对照。
筛选
稀释诱变液一定倍数，涂
布平板，40℃培养48h， 挑单菌落划线培养，接种 三角瓶发酵，测产量。
诱变后菌种观察
2.2.4菌种计数的结果
8支三角瓶计数结果
1
2
3
4
5
6
7
8
平均值 3.25 2.85 3.08 2.76 2.95 3.18 3.35 3.20 108个/mL
2.2.5酵母菌形态特征观察
菌落形态特征： 大而厚，圆形，光 滑湿润，粘性，颜 色单调。颜色以乳 白色为主。
2.2.6诱变筛选
取培养48h的酵母菌菌悬液7 mL放在无
温度对5号与6号菌株酒精度的影响
酒精度%(V/V)
酒精度%(V/V)
11
11
10
10
9
9
8
8
7
7
6
6 32 36 40 温度(℃) 44 48
32
36
40 温度(℃)
44
48
由以上两图表可知：6号菌株在40℃ 时酵母的酒精度比5号菌株的酒精度高， 体积分数达到9.58%，还原残糖较低， 仅残留0.75%，综合考虑，最终以6号菌 株为出发菌株进行诱变筛选。
1.实验材料 2.1.1 菌种: 酿酒酵母(Saccharomyces cerevisia ) 2.1.2 培养基: 麦芽汁液体培养基 种子培养基：土豆培养基 发酵培养基 初筛培养基 复筛培养基： YEPD
2.1.3
主要试剂 葡萄糖、蛋白胨、琼脂、NaCl、NaOH、盐 酸、青霉素钠、酒石酸铜、亚铁氰化钾等 2.1.4 实验材料 仪器: 试管、培养皿、接种针、吸管、容量 瓶、天平、量筒、酒精计等. 设备: 生物显微镜、 高压灭菌锅、 恒温培养箱、 恒温培养摇床、 冰箱等