甘草中有效成分的分离提取
甘草多糖的分离提取及含量测定研究
甘草多糖的分离提取及含量测定研究引言甘草（Glycyrrhiza）是一种广泛分布于亚洲和欧洲的植物，其根部含有丰富的生物活性成分。
其中甘草多糖是一种具有重要药理活性的化合物，已被广泛应用于中药领域。
为了深入研究甘草多糖的含量以及提取方法，本文进行了一系列实验并对结果进行了统计分析。
材料与方法材料•甘草根部•甘草提取液•离心管•蒸馏水•甘草多糖标准品•硫酸•硝酸•灰色硫酸铁•磷钼酸铵•高速离心机•紫外分光光度计方法1.甘草分离提取：–甘草根部切成小片，并用蒸馏水洗净。
–将甘草根部片放入离心管中，用甘草提取液浸泡。
–在室温下提取24小时后，将提取液离心分离。
–将提取液转移到干燥的离心管中，用高速离心机离心15分钟，取上清液备用。
2.含量测定：–取一定量的甘草多糖标准品和未知甘草多糖提取液，分别制备浓度为0.1 mg/mL的溶液。
–分别将甘草多糖标准品和未知提取液的溶液转移到离心管中。
–加入硫酸，硝酸和灰色硫酸铁，混匀，并在室温下反应20分钟。
–分别加入磷钼酸铵溶液并混匀。
–用紫外分光光度计测定吸光度，并根据标准曲线计算甘草多糖的浓度。
结果与分析在进行甘草多糖的分离提取实验后，我们成功得到了甘草提取液。
在含量测定实验中，我们利用甘草多糖标准品和未知提取液制备了浓度为0.1 mg/mL的溶液，并进行了一系列反应和测定。
通过紫外分光光度计测定吸光度并根据标准曲线计算甘草多糖的浓度，我们得到了未知提取液中甘草多糖的含量。
根据统计分析，我们可以得出以下结论：1.甘草多糖的分离提取方法相对简单且有效，能够得到高纯度的甘草多糖提取液。
2.通过含量测定实验，我们确定了未知提取液中甘草多糖的含量为X mg/mL。
结论本研究成功地进行了甘草多糖的分离提取实验，并通过含量测定方法测定了其含量。
我们得出的结论是未知提取液中甘草多糖的含量为X mg/mL。
这些结果对于进一步研究甘草多糖的药理活性及其应用具有重要意义。
参考文献[1] 张三, 李四. 甘草多糖的提取与含量测定方法研究[J]. 中草药, 20XX, 10(1): 123-135.[2] 王五, 赵六. 甘草多糖的生物活性及应用研究进展[J]. 中药学杂志, 20XX, 25(3): 456-468.。
甘草有效成分的提取分离实验方案
甘草有效成分的提取分离实验方案实验目的：通过对甘草中甘草黄酮、甘草酸和甘草多糖的提取分离，进一步理解他们的理化性质，并且初步掌握提取分离的方法。
实验原理：黄酮类化合物则泛指两个苯环（A环与B环）通过中央三碳相互联接而成的一系列化合物。
根据中央三碳的氧化程度、是否成环、B 环的联接位点等特点，可将该类化合物分为多种结构类型。
代表化合物有甘草黄酮、甘草素、异甘草素、甘草甙、异甘草甙、甘草查尔酮等。
甘草中已经发现的黄酮类化合物有一百多种，本实验只对其进行粗提，并且测定其总含量。
甘草酸是一类三萜类皂苷，主要以甘草酸钾、钙盐的形式存在，是甘草次酸的二葡萄糖醛酸甙，含量在4-20%之间；甘草酸水解脱去糖酸链变形成了甘草次酸。
超临界CO2萃取甘草总黄酮的萃取率是1. 35%，含量32. 45%，是索氏提取法提取甘草总黄酮的提取率的2.2倍，索氏提取溶剂用量是超临界CO2萃取的6倍。
本实验采取超临界CO2萃取法提取甘草黄酮。
【1】大孔树脂适于物质水溶液的分离纯化，超临界C02萃取提取的甘草总黄酮中乙醇含量过高，即使对萃取液进行浓缩处理，其中乙醇的含量仍然很高，所以大孔树脂的吸附、解吸附的效果不好。
萃取液浓缩近干加入水后，所要分离的物质析出变混浊，也不适合用大孔树脂进行分离纯化。
与大孔树脂层析比较，硅胶柱层析可以更有效的分离纯化甘草黄酮。
使用硅胶柱层析可以有效地使甘草黄酮类物质的含量达到55%以上，收率1. 12%，符合国家中药二类新药的原料要求。
【1】综合考虑，本实验选择硅胶柱层析对甘草黄酮进行分离纯化。
甘草酸和甘草次酸的极性比黄酮类物质的极性大，更易溶于极性大的低浓度乙醇中，采用85%乙醇作为夹带剂，使得在二氧化碳超临界萃取甘草黄酮类物质过程中，大部分甘草酸和甘草多糖仍然留在残渣中。
甘草中甘草酸的提取实验报告
甘草中甘草酸的提取实验报告甘草中甘草酸的提取实验报告概述：本实验旨在通过提取甘草中的甘草酸，了解其提取方法和纯化过程，以及甘草酸的性质和应用。
实验采用了溶剂提取法和结晶法，最终成功提取出纯度较高的甘草酸。
实验步骤：1. 材料准备：甘草、无水乙醇、石油醚、醋酸乙酯、无水乙醚、浓盐酸、浓氨水。
2. 提取甘草酸：将甘草研磨成粉末状，加入无水乙醇中，搅拌均匀，静置一段时间，过滤得到甘草提取液。
3. 萃取甘草酸：将甘草提取液与石油醚混合，振荡均匀，分液漏斗分离有机相和水相。
4. 纯化甘草酸：将有机相转移至蒸馏烧瓶中，加入醋酸乙酯，加热回流，蒸发醋酸乙酯，得到甘草酸溶液。
5. 结晶甘草酸：将甘草酸溶液冷却至室温，加入无水乙醚，搅拌均匀，静置结晶，过滤得到甘草酸晶体。
6. 纯化甘草酸晶体：将甘草酸晶体溶解于浓盐酸中，加热搅拌，过滤得到甘草酸纯品。
7. 验证甘草酸：将甘草酸溶解于浓氨水中，观察其颜色变化，测定其溶解度。
结果与讨论：通过以上实验步骤，成功提取出了纯度较高的甘草酸。
在提取过程中，溶剂的选择和比例对提取效果有重要影响。
无水乙醇是较好的提取溶剂，能够将甘草中的甘草酸有效溶解出来。
而石油醚和醋酸乙酯则用于萃取和纯化过程，能够去除杂质，提高甘草酸的纯度。
在结晶过程中，温度和溶剂的选择也是关键。
将甘草酸溶液冷却至室温后，加入无水乙醚，可以通过溶剂效应促进结晶的发生，得到较大且纯度较高的甘草酸晶体。
而浓盐酸则用于纯化甘草酸晶体，通过酸解结晶，去除杂质，得到纯净的甘草酸。
甘草酸具有多种药理活性，广泛应用于中药和食品工业中。
它具有抗炎、抗氧化、抗溃疡、降血压等作用，可用于治疗消化系统疾病、心血管疾病等。
此外，甘草酸还可用于食品添加剂，具有增香、保鲜等功能。
结论：本实验成功提取出了纯度较高的甘草酸，并验证了其性质和应用。
通过溶剂提取法和结晶法，可以有效提取和纯化甘草酸。
甘草酸具有多种药理活性和广泛应用前景，对于中药研究和食品工业具有重要意义。
实验七 甘草中甘草酸的提取分离
实验七甘草中甘草酸的提取分离
【实验目的】
1、学会运用煎煮法、渗漉法、回流法等方法从甘草中提取、分离干甘草酸
【实验原理】
甘草酸以钾盐的形式存在于植物体内，易溶于热水，因此可用水提取甘草酸钾盐，水提液加硫酸酸化后生成游离甘草酸，因其在冷水中的溶解度较小而沉淀析出。
也可以用乙醇渗漉后再酸化得到甘草总皂苷沉淀，将沉淀溶解于盐酸的甲醇溶液中，用三氯甲烷除去黄酮类化合物，即可得甘草皂苷。
【实验材料】
设备: 电炉、托盘天平、量筒、玻璃棒、纱布、滴管、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、水浴锅、烧杯、锥形瓶、渗漉筒
药品: 甘草粗粉、蒸馏水、硫酸、氢氧化钾、乙醇、甲醇、盐酸、三氯甲烷
【实验步骤】
1、甘草酸（粗品）的提取
（1）水提法：取甘草粗粉100g，加水煎煮提取2-3次，滤过得水提液，静置，取上清液，浓缩得甘草浸膏（含甘草酸>20%）。
浸膏加3倍量水溶解，加硫酸酸化，放置，滤过得甘草酸粗品。
（2）醇提法：取甘草粗粉100g，加10%乙醇渗漉，收集渗漉液酸化，放置过夜，滤过得沉淀（甘草总皂苷）。
总皂苷用7%盐酸的甲醇，回流4~6小时，滤取甲醇液，冷却，放置后滤取沉淀，溶于三滤甲烷，用5%KOH萃取除去黄酮类，再用蒸馏水洗去碱性，所得沉淀用80%乙醇重结晶，滤过得甘草酸白色针状结晶。
【注意事项】
1、提取甘草酸粗品时，水提液酸化后析出的沉淀，杂质较多难以过滤，故可倾出上清液再抽滤。
【实验装置图】【实验结论】【实验注意】。
甘草中甘草酸提取与分离的研究
内 蒙古 石 油化 工
１
甘 草 中甘 草 酸 提 取 与分 离 的 研 究
李赞 忠 ， 子 荣 ， 乔 乌 云
（ 内蒙古化工职业学院 ， 内蒙 古 呼和 浩特 ００１） １ ０ ０
摘
要 ： 草 是我 国传 统 的 中药 ， 甘 来源于 豆科植 物甘 草 （ ｙ ｙｒ ｉ ｒｌｎ ｉ Ｆｓｈ 、 果甘 草 （ Ｇｌｃ ｒｈｚ ｕａｅ ｓ ｉ ） 胀 ａ ｓ ｃ Ｇ．
（） １ 粉碎 ： 将挑 选 除杂后 干净 干燥 的甘 草放入 粉
碎 机 中粉碎 ， １ 过 Ｏ目筛 选 ， 得甘 草粉 试样 。 制
（） ２ 提取 ： 称取 ２ ０ ０ ｇ甘 草粉 试样 ， 滤纸 包好 放 用 入 索 氏 提 取 管 中 ， １ ０ ｍＬ 圆 底 烧 瓶 中 ， 入 在 ５０ 加
草酸 （ｌｃｒｈｚ ｃ ＧＡ） ｇｙｙｒｉｃａｉ ｉ ｄ， 又名甘 草 甜 素 ， 是甘 草 中分 离 出的一种 三 萜 类化 合 物［ ， ３ 也是 最 重 要 的有效 Ｊ
成分 之一 。本 文对 甘 草 中甘 草酸 及 其他 成分 的提取 分 离方 法进行 了摸 索和改进 ， 得 了较 好 的效 果 。 取 关键 词 ： 草 ； 甘 甘草 酸 ； 提取 ； 离 分 中图分 类号 ： ８ ． Ｒ２ ４ ２ 文献 标识 码 ： Ａ 文章 编号 ：Ｏ ６ ７ ８ （ ０ ０ ２ ～ Ｏ ０ — ０ １Ｏ — ９１ ２ １）４ ｏ１ ３
ｉｆ ｔ ａ． 或光 果甘 草 （ ｇａ ｒ ． 的干燥 根 和根 茎［ 。具 有 多种 药 用功 效 ， ｎｌ ａＢ ｔ ） ａ Ｇ． ｌｂ ａＬ ） １ ］ 主要 生长 在 我 国西 北、 华北 、 东北 等三北 地 区［ 近 年 来在 内 蒙古 自治 区西部人 工 栽培甘 草 已获成 功 ， 草 资源极 为丰 富［ 。 。 甘 引 甘
天然药物有效成分提取分离技术(研)
天然药物有效成分提取分离技术中草药以植物药为主，而植物都是由复杂的化学成分所组成。
其中主要有纤维素、叶绿素、单糖、低聚糖和淀粉、蛋白质和酶、油脂和蜡、树脂、树胶、鞣质及无机盐等。
其中，许多物质对植物机体生命活动来说不可缺少，称为一次代谢产物。
一般认为它们在药用上是无效成分或杂质。
而另外一些化学成分如：生物碱、黄酮、蒽醌、香豆素、木脂素、有机酸、氨基酸、萜类、苷类等对维持植物生命活动来说不起重要作用，称为二次代谢产物，这些物质在植物体内虽含量很少，多则百之几，少则百万分之几，甚至更少。
但它们往往具有较强的生理活性，其中有些已应用于临床，我们称之为有效成分。
当然有效成分与无效成分的划分是相对的，如天花粉的引产有效成分是蛋白质，香茹中的多糖对实验动物肿瘤有显著的抑制作用。
在进行中草药成分提取前，应注意对所用材料的原植物品种的鉴定并留样备查。
同时要系统查阅文献，以充分了解，利用前人的经验。
中草药有效成分的提取分离一般有下面两种情况：第一、从植物中提取已知的有效成分或已知的化学结构类型者。
如从甘草中提取甘草酸、麻黄中提取麻黄素；三棵针中提取黄连素等(提取有效成分)。
或从植物中提取某类成分如总生物碱、总酸性成分。
如从银杏叶中提取总黄酮；从大黄中提取总蒽醌(提取有效部位)。
工作程序比较简单。
一般先查阅有关资料，特别是工业生产的方法，搜集比较该种或该类成分的各种提取方法，再根据具体条件加以选用。
(注意先重复该方法，得到产品后，再结合生产实际，不断改进工艺，达到大生产要求)。
第二、从中草药中寻找未知有效成分或有效部位时，情况比较复杂。
只能根据预先确定的目标，在临床或药理试验配合下，经不同溶剂提取，以确定有效部位。
然后再逐步划分，追踪有效成分最集中的部位，最后分得有效成分。
一、中草药有效成分的提取对中草药化学成分的提取，通常是利用适当的溶剂或适当的方法将植物中的化学成分从植物中抽提出来。
常用的方法有溶剂法、水蒸汽蒸馏法和升华法等。
甘草提取物的工艺流程
⽢草提取物的⼯艺流程⼀、引⾔⽢草，作为⼀种传统中药材，具有悠久的历史和⼴泛的应⽤。
⽢草提取物是从⽢草根部提取的活性成分，因其具有抗炎、抗氧化、抗溃疡等多种药理作⽤，⽽被⼴泛应⽤于医药、⻝品、化妆品等多个领域。
本⽂将对⽢草提取物的⼯艺流程进⾏详细介绍，以期为读者提供全⾯⽽深⼊的了解。
⼆、⽢草提取物的⼯艺流程⽢草提取物的⼯艺流程主要包括原料准备、提取、分离纯化、浓缩⼲燥和包装等步骤。
1.原料准备：⾸先，需要选择优质的⽢草根作为原料。
优质的⽢草根应呈圆柱形，外⽪紧密，⽆裂痕，颜⾊鲜艳。
在收获后，应尽快进⾏⼲燥处理，以防⽌发霉和变质。
2.提取：提取是⽢草提取物⽣产的核⼼步骤。
常⽤的提取⽅法有⽔提法、醇提法和超临界CO2萃取法等。
其中，⽔提法因操作简便、成本低⽽⼴泛应⽤。
在⽔提过程中，需要将⽢草根破碎成⼩块，⽤适量的⽔浸泡后进⾏煎煮，使活性成分充分溶解在⽔中。
3.分离纯化：提取液中含有多种成分，需要通过分离纯化步骤获得纯度较⾼的⽢草提取物。
常⽤的分离纯化⽅法包括沉淀法、萃取法、⾊谱法等。
这些⽅法可以有效地去除杂质，提⾼⽢草提取物的纯度。
4.浓缩⼲燥：经过分离纯化后，得到的⽢草提取物需要进⾏浓缩和⼲燥处理。
浓缩可以采⽤减压蒸馏或薄膜蒸发等⽅法，以去除多余的⽔分。
⼲燥则可以采⽤喷雾⼲燥、真空⼲燥或冷冻⼲燥等⽅法，以获得粉末状的⽢草提取物。
5.包装：最后，对⽢草提取物进⾏包装，以保护产品免受潮湿、氧化等外界因素的影响。
常⽤的包装材料有铝箔袋、玻璃瓶等。
在包装过程中，还应注意防⽌交叉污染和微⽣物污染。
三、⽢草提取物⼯艺流程的优化为了提⾼⽢草提取物的质量和⽣产效率，可以对⼯艺流程进⾏优化。
例如，在提取过程中，可以通过调整浸泡时间、煎煮温度和时间等参数，以提⾼活性成分的提取率。
在分离纯化过程中，可以选择更⾼效的分离纯化⽅法，如⾼效液相⾊谱法等，以进⼀步提⾼⽢草提取物的纯度。
此外，还可以采⽤⾃动化和智能化的⽣产设备，以减少⼈为操作误差和提⾼⽣产效率。
甘草中黄酮类化合物的分离提取及抗氧化活性评价研究
长春师范学院硕士学位论文甘草中黄酮类化合物的分离提取及抗氧化活性评价研究姓名:王铎申请学位级别:硕士专业:分析化学指导教师:刘春明2011-06-01摘要甘草为豆科植物甘草属(Glycyrrhiza uralensis Fisch)胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat或光果甘草Glycyrrhiza glabra L的干燥根及根茎,有调和诸药、解毒、补虚、止咳润肺等多种功能。
本文采用多种提取方法对甘草中黄酮类化合物进行了对比提取,并优化提取方法,应用高速逆流色谱技术分离纯化甘草中黄酮单体,并采用体外活性实验评价了甘草总黄酮的抗氧化活性,对甘草黄酮的研究和开发提供了一定的实验依据和理论基础。
1.分别采用超声、回流、温浸、快速溶剂萃取法四种提取方法对甘草中黄酮类化合物进行了对比研究,并对快速溶剂萃取法和回流提取法进行了提取条件的选择和优化,以确定其昀佳提取条件。
结果表明,快速溶剂萃取法对甘草中总黄酮的提取效率要优于其它提取方法,快速溶剂萃取法的昀佳提取条件为:提取时间为7 min,提取温度为120 ℃,提取次数为1次,乙醇浓度为70 %;回流提取法的昀佳提取条件为:乙醇浓度80 %,提取时间1.5小时,提取次数为3次。
2.采用高速逆流色谱技术对甘草中黄酮类化合物进行分离提取研究,分别在276 nm和360 nm两个紫外检测波长下分离甘草中黄酮类化合物。
在276 nm紫外检测波长下,溶剂系统为乙酸乙酯:乙醇:水(1:0.1:1,V/V/V),可以从甘草粗提物中分离得到两种化合物,分别为甘草素-4’-芹糖苷和甘草苷,纯度分别为95 %和97 %;在360 nm紫外检测波长下,溶剂系统为乙酸乙酯:甲醇:水(1:0.1:1,V/V/V),可以从甘草粗提物中分离得到两种化合物,分别为异甘草素葡萄糖芹菜苷和异甘草苷,纯度分别为92 %和91 %。
3.采用三种体外抗氧化活性方法对甘草提取液进行研究,分别考察了甘草四种提-取方法的提取液在不同浓度下对DPPH?、O ?、和H O 的清除能力。
甘草若干问题及提取方法
9、样品测定。取不同产地的甘草样品, 按上述样品制备方法制备供试品溶液, 取供 试品溶液适量, 加入10%KOH溶液0. 5m,l室温放置5min, 用70%乙醇稀释至刻度, 摇 匀,以 70%乙醇溶液为参比, 在337nm处测定其吸光度, 计算各样品中甘草总黄酮的含量。
4、 检测波长的选择。取70%乙醇和 10%KOH溶液分别在200~600nm波长范围内扫 描, 发现两者在200~600nm波长范围内几乎 无吸收。精密移取对照品溶液0.1ml2份分 别置于10ml量瓶中, 1份直接用70%乙醇定 容, 另1份按照/ 1.2.3方法制备显色溶液, 均以70%乙醇为参比,分别于200~600nm波长 范围内扫。发现对照品溶液加显色10%KOH) 后,取样品溶液0.1ml 2份于10ml量瓶中,1 份直接用70%乙醇定容, 另1份加入显色剂 制得显色溶液分别于200~600nm波长范围 内扫描。发现样品溶液加显色剂(10%KOH) 后在337nm处有最大吸收。可见,对照品显 色溶液和样品显色溶液的最大吸收波长较 接近,故选择337nm为测定波长。
第三节紫外分光光度计
一、原理： 光是一种电磁波,具有一定的波长和频率。可见光的波长范围在400-
760nm，紫外光为200-400nm。可见光因波长不同呈现不同颜色，这些波 长在一定范围内呈现不同颜色的光称单色光。利用棱镜可将白光分成按 波长顺序排列的各种单色光，即红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等，这就 是光谱。有色物质溶液可选择性地吸收一部分可见光的能量而呈现不同 颜色，而某些无色物质能特征性地选择紫外光或红外光的能量。物质吸 收由光源发出的某些波长的光可形成吸收光谱，由于物质的分子结构不 同，对光的吸收能力不同，因此每种物质都有特定的吸收光谱，而且在 一定条件下其吸收程度与该物质的浓度成正比，分光光度法就是利用物 质的这种吸收特征对不同物质进行定性或定量分析的方法。
甘草有效成分提取
甘草有效成分（甘草酸，甘草次酸，甘草苷）的提取一、甘草酸的提取：试剂：甘草粗粉，浓H2SO4，95%乙醇，80%乙醇，浓氨水，冰醋酸。
取甘草粗粉40g,加水煮沸2次(15倍,1.25h;12倍，1h),脱脂棉过滤，合并滤液，浓缩，冷却，搅拌下加入浓硫酸至不再析出甘草酸粘性沉淀为止（约PH=1）。
放置，倾出上清液，棕色粘性沉淀用水洗涤数次，60℃以下干燥，粉碎，即得甘草酸粗品，称重。
将甘草酸粗品称重后加3.5—4倍量95%乙醇浸泡0.5—1h，抽滤，滤渣加3倍量80%乙醇回流1—2h，滤液冷却后加浓氨水（边加边搅拌）调至弱碱性（PH=8），减压回收乙醇至糖浆状，趁热加入等体积冰醋酸浸泡洗涤，放冷，析出结晶，过滤，即得甘草酸单铵盐粗品。
称重后，用70—80%乙醇重结晶，即得甘草酸单铵盐纯品，称重，得率。
二、甘草次酸的提取：试剂：5%H2SO4，氯仿，乙醇。
取甘草酸单铵盐，加5%H2SO4，加热10h,抽滤，水洗至中性，干燥，即得白色甘草次酸粗品，加热氯仿溶解，趁热过滤，所得滤液放冷，通过AL2O3柱，用氯仿洗脱，得甘草次酸粗品，加乙醇重结晶，得甘草次酸结晶。
三、甘草苷的提取：试剂：70％乙醇，甲醇。
取干燥药材粗粉约lOg，精密称定，加10倍量70％乙醇，回流提取2次，每次3h回流提取，纱布过滤，将提取液倒入已恒重的蒸发皿中，水浴浓缩至干，再减压干燥至恒重，得浸膏。
精密称取甘草浸膏量的l／20置于25mL量瓶中，加甲醇适量，超声处理30min，冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用045um的微孔滤膜过滤，即制得供试品溶液。
四、药典同时提取甘草酸和甘草苷：试剂：70％乙醇，取本品粉末（过三号筛）0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇100ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，取出，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
甘草中甘草酸的提取实验报告
甘草中甘草酸的提取实验报告
实验目的：了解分离纯化技术的应用，掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。
实验原理：甘草又名甘草根，是一种广泛使用的中草药。
其主要成分是甘草酸、甘草素、甘草皂苷等。
甘草酸是甘草的主要有效成分，具有降糖、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用。
该实验是利用无机酸法将甘草酸从甘草中提取出来。
实验步骤：
1.样品制备：取适量甘草，去除杂质后切碎成小片备用。
2.提取：将切碎的甘草用石英研钵研成粉末，加入适量无水乙醇，浸泡6小时后，过滤得到提取液。
3.提取液浓缩：将提取液加热至70℃左右，缓慢加入盐酸，使pH达到1左右，再继续加热浓缩。
4.结晶：将制得的浓缩液室温下静置冷却，过滤得到结晶固体，用少量无水乙醇反复洗涤，干燥后得到纯净的甘草酸。
实验结果：经过提取、浓缩和结晶得到了白色粉末状的甘草酸，对其进行紫外分光光度计检测其吸收峰在235nm处。
经过质谱实验表明，得到的结晶物是纯净的甘草酸。
实验讨论与分析：通过本实验我们可以了解分离纯化技术的应用，掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。
甘草酸是甘草中的主要有效成分，具有重要的药理作用。
本实验采用无机酸法提取甘草酸，操作简单易行，效果良好。
不过，无机酸法提取时要注意浓
度和pH值的控制，以免影响提取效率。
同时，在结晶过程中还需要注意温度和过滤的方式和时间，以得到高纯度的甘草酸。
实验总结：本次实验采用无机酸法提取甘草酸，操作简单易行，效果良好。
通过本次实验，我们了解了分离纯化技术的应用、掌握了无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作，同时也体验了一把科学实验并学到了新的实验技能。
实验九甘草酸的提取、分离与鉴定PPT课件
酸1毫升，观察两层的颜色变化及荧光。 4）、薄层色谱 吸附剂：硅胶G板100℃活化半小时。 展开剂：正丁醇—醋酸—水(6：1：3上层) 样品：甘草酸单钾盐标准品，甘草酸单钾盐70％乙醇液。 显色剂：磷钼酸
2
实验目的
❖ 1、掌握甘草酸的提取原理和方法 ❖ 2、熟悉皂甙的性质和鉴定方法。
3
实验原理：
❖ 甘草酸(G1ycyrrhizic acid)由冰醋酸中结晶出来的为白色柱状 结晶，mpl70℃。易溶于热水、热稀乙醇、丙酮、不溶于乙 醇、乙醚等。在加热、加压及稀酸作用下，可水解为甘草次 酸及二分子葡萄糖醛酸。
❖ 甘草是常用和重要的中药之一，有较强的解毒作用， 中药用于清热解毒调和诸药，此外尚有类皮质激素、 抗炎、抗胃溃疡、镇咳祛痰、解痉等方面的药理作 用，甘草中还含有多种黄酮成分，甘草素 (Liguiritigenin)，异甘草素(Isoliguiritigenin)，甘草 甙(1iguritin)，新甘草甙(Neo1iguritin)新异甘草甙 (Neoisoliguritin)和异甘草素-4-β-葡萄糖-β-洋芜荽糖 甙等。
热溶解，热过滤，再用少量热冰醋酸淋洗滤纸上吸附的
甘草酸，滤液放冷后，有白色的结晶析出，抽滤，用无
水乙醇洗涤，得乳白色甘草酸单钾盐。
6
❖ 3. 性质实验及色谱检查 l）、泡沫实验 取甘草酸单钾盐水溶液2毫升，置试管中用力振摇，放置
10分钟后观察泡沫。 2）、醋酐—浓流酸反应(Liebermann—Barchard反应) 取甘草酸单钾盐少量，置白瓷板上，加醋酐2—3滴使溶解，
❖ 2. 甘草酸的精制
甘草黄酮高效提取
甘草中黄酮的分离纯化方法
大孔吸附树脂柱层析分离纯化甘草黄酮 本实验采用AB-8型号的大孔吸附树脂。
装柱：充分吸胀的树脂在搅拌下倒入层析柱 (80×1500 mm)中，装柱后液体必须高于树脂20～ 40mm。
上样：将甘草乙醇提取物加适量去离子水稀释 后上样至经过预处理的AB-8大孔吸附树脂柱，调节 柱层析流出速度大约15mL·min-1，流出液收集备 用。
综合考虑确定最佳提取条件为 A3B2C3D3，即提取时间 60min，料液比 1∶15， 提取温度 70℃，提取次数 3 次，在此条件下，甘草总黄酮提取得率为 98.19%，RSD 为 0.92%。
将三种提取工艺进行比较，结果发现，在提 取得率相近的情况下，超声-微波萃取法所需的时 间大大缩短，显示超声微波协同萃取技术具有低 能耗及高效快速的优点，适合于黄酮类化合物的
超声-微波协同萃取技术
提取时间15 min，料液比1∶30，提取 温度50℃，提取1次的条件下，考察乙醇 浓度为50%，60%，70%，80%，90% 时黄酮的提取得率，确定乙醇浓度。
固定乙醇浓度80%,超声功率50 w，微波频率2450Hz。
通过以上分析并结合单因素分析可以确定关于提取得率的最佳的因素水平组合为 ：提取时间 15min，料液比 1∶15，提取温度 50℃，提取次数 3 次，在此条件下进行 重复实验，得到平均提取得率为 98.80%，RSD 为 0.31%。
薄层色谱 气相色谱 高效液相色谱
实验思路1： 提取——提纯——初步鉴定——分
离——结构测定 实验思路2：
提取——分离纯化——检测
甘草中黄酮的提取方法
黄酮的提取得率受到很多因素的影响 ，根据文献报道及初步实验，本文选择 提取的料液比，提取时间，提取温度， 乙醇浓度及提取次数五个因素进行分析
甘草有效成分提取分离方法的研究进展
黑龙江医药ＨｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇＭｅｄｉｃｉｎｅＪｏｕｒｎａｌＶｏＬ２３Ｎｏ．１２０１０・９３・脂质体包裹的药物制备外用制剂，具有皮肤给药的靶向性特点，可增加皮肤透过量，提高药物在局部的浓度，延缓药物的释放而达到延长药物作用时间的目的，同时因全身吸收药量的减少，可降低药物的全身不良反应，延缓抗药性。
冯淑华等¨叫将白鲜皮提取物制备成外用脂质体凝胶，具有良好的生物相容性、生物膜相似性、无毒和促进药物透皮吸收、在皮肤内形成药物储库而维持较恒定的有效浓度等特征。
脂质体外用凝胶剂还可增加与皮肤表面的接触，提高局部组织药物浓度。
李冬梅等【ｌｕ将阿西美辛包封于脂质体中，并进～步制备成卡波姆的凝胶剂。
该制剂在阿西美辛脂质体的基础上结合了凝胶的特点，既使活性物质容易透过皮肤，提高局部组织药物浓度，叉清凉，元污染，易于使用，且在脂质体中加入卡波姆形成凝胶后，对脂质体起到立体稳定作用，减少脂质体的凝聚而增加了稳定性。
３．２．３壳聚糖凝胶制备技术壳聚糖（Ｃｈｉｔｏｓａｎ）是一种天然的高分子材料，甲壳素脱乙酰产物，具有良好的生物相容性和生物降解性，不仅无毒无味，而且有抗菌消炎、促进伤口愈合的作用¨“。
壳聚糖凝胶制备技术使外用凝胶剂具有更好的溶解性、成模性、粘滞性。
祁智等Ｌｌ副研制的双氯芬酸钾壳聚糖凝胶剂就是采用了壳聚糖和卡波姆两种新型药用辅料为基质的凝胶剂。
壳聚糖亲水性强，可在酸性递质中膨胀形成胶体粘稠物质；卡波姆遇水可形成酸性的粘稠状液体，有利于壳聚糖在水中溶胀，二者配合使用所制备的外用凝胶剂成型性较好。
４结语综上所述，外用凝胶剂是一种极具发展潜力的外用新剂型，不仅可以避免药物在胃肠道中的破坏，减少血药浓度峰谷变化，而且已成为克服药物副作用的有效用药途径之一，其优越的医药性能使其成为药学工作者关注的热点。
新材料的不断出现和新技术的引入，使外用凝胶剂在经皮给药领域发展上，有更多的空间。
但对外用凝胶剂在选定基质的过程中，切莫忽视酸碱度对药物的影响，在正常情况下，认为亲水性基质的ｐＨ值接近皮肤的ｐＨ值，这种基质对药物的吸收更好。
甘草中甘草酸的提取实验报告
甘草中甘草酸的提取实验报告实验名称：甘草中甘草酸的提取实验报告实验目的：1.了解甘草酸的特性以及其在中药中的应用；2.学习甘草中甘草酸的提取方法；3.掌握色谱层析分离技术。
实验原理：甘草酸是甘草中的主要有效成分，在中药中有着较广泛的应用。
本实验采用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(5:4:1)为溶剂体系，采用色谱层析技术将甘草酸从甘草中提取出来。
色谱柱为硅胶柱，进行激光检测，检测波长为254nm。
实验步骤：1.将50g甘草粉末加入400mL甲醇中，搅拌2小时，过滤，取得提取液；2.将提取液浓缩至200mL后，加入等量的水，再用2mol/L的醋酸调节pH至4.0；3.将上述液体用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(5:4:1)混合物合并，混合均匀后放置15分钟，将有机相分离；4.收集有机相，过滤后浓缩至20mL；5.将浓缩后的样品以60mL/h的流速通过硅胶柱(20cm×2.6cm)，梯度洗脱，洗脱液分别为乙酸乙酯-丙酮(2:3)，乙酸乙酯-丙酮(1:1)，乙酸乙酯-丙酮(3:2)，乙酸乙酯-丙酮(4:1)，每次洗脱液用量为50mL；6.取得提纯后的甘草酸，测定其产率。
实验结果与分析：经过色谱层析分离，可以得到100mg左右纯度高达95%的甘草酸。
同时，通过计算得到甘草中甘草酸的提取产率约为1.9%。
结论：本实验成功地从甘草中提取出了甘草酸，得到了较高的提取产率和纯度。
实验结果具有一定的参考价值和应用价值。
实验中存在的问题与不足：虽然本实验得到了较高的提取产率和较高的纯度，但是在实验过程中还是存在着一些问题和不足之处。
1.通过计算得到的提取产率较低，不同操作条件下产率有很大的偏差；2.采用硅胶柱进行分离时，洗脱液的选择和流速等条件对产率有很大的影响，需要更进一步的研究和优化；3.还需要对甘草中其它成分的提取方法进行研究，提高提取效率和纯度。
甘草酸的提取、分离和纯化
甘草酸的提取、分离及纯化实验甘草酸的性质及用途甘草为豆科植物的根，主要产于我国内蒙古、山西、甘肃、宁夏、新疆等地。
甘草味甘，故又名甜草、蜜草。
其主要化学成分有四类：三萜类、黄酮类、生物碱类及多糖类。
其中三萜类成分有甘草酸、羟基甘草次酸等。
甘草酸又称甘草皂苷、甘草甜素。
白色结晶，可用冰醋酸结晶，有很强的甜味。
分子式为C42H62O16，分子量为822.90。
纯品为白色、无臭的结晶性粉末，熔点212～217℃，易溶于热水及热的稀乙醇，几乎不溶于无水乙醇或乙醚。
甘草酸在植物中常以钙、钾、铵盐等形式存在。
从甘草根为原料制得的甘草浸膏中提取的铵盐，其甜度为蔗糖的50～100倍，精制甘草酸钠、钾盐的甜度为蔗糖的200～300倍，是一种天然的甜味剂。
甘草素入口后不能立刻感觉到甜味，而是逐渐才有感觉，并且一直延续很长时间还留有余味，因此甘草素与砂糖、葡萄糖等糖类复配，可以得到口感良好的甜味。
因为它是非糖类、高甜度的甜味剂，因此没有褐变、吸湿及发酵等缺点。
甘草素在医药上还可用作消化道溃疡治疗剂、解毒剂、消炎剂以及降血脂、抗动脉粥样硬化、降胆固醇等。
目前，甘草素已广泛用于食品、医药、化妆品、饮料、卷烟等行业。
我国甘草资源丰富，带皮甘草中含甘草酸7%～10%，去皮甘草中约5.5%～9.0%。
甘草经溶剂浸取，可以制得甘草浸膏，再进一步加工可以制得甘草酸。
1 实验目的1.掌握甘草酸的提取原理和方法。
2.掌握甘草酸的分离纯化方法。
2 实验原理甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂提取。
提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。
3实验材料、仪器和试剂实验材料：甘草实验仪器：电子分析天平（精确至0.001g）、移液管、紫外分光光度计、超声波清洗器、抽滤装置、水浴锅、旋转蒸发仪、容量瓶（10mL、25mL、100mL）试剂：70 ％的乙醇溶液、蒸馏水、硫酸（3.5mol/L）、浓氨水、25 ％氨水、冰醋酸、80%甲醇质量分数为70 ％的乙醇溶液（100 mL）：用量筒量取75 mL 无水乙醇，25 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为10 ％的乙醇溶液（100 mL）：用量筒量取12．5 mL 无水乙醇，87．5 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为0．5 ％的氨水溶液（100 mL）：用量筒量取2 mL 25 ％氨水，98 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为0．5 ％的氨性醇溶液（100 mL 以无水乙醇为溶剂）：用量筒量取98．5 mL 无水乙醇，1．5 mL25 ％氨水于烧杯中，混匀。
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甘草中有效成分的分离提取
关键词：甘草有效成分分离与提取
一、甘草简介
甘草属于豆科多年生草本植物。
作为我国传统药材之一，甘草具有多种药用功效，如补脾益气、清热解毒、祛痰咳喘、调和百药等作用。
甘草中含有多种化学成分，其中，有效成分为三萜皂苷类化合物（甘草酸、甘草次酸）、黄酮类化合物（甘草苷、异甘草苷）、甘草多糖等。
据有关研究显示，目前人们已从甘草中成功分离出多种有效成分，仅黄酮类化合物就超过100多种[1]。
因此，随着甘草有效成分的价值日益被人们所认识，甘草有效成分的提取、纯化技术也成为当前研究的一个热点。
二、甘草中的有效成分
1.甘草甜素
甘草甜素的主要成分是甘草酸，因此它又被称为甘草酸。
它的甜度是蔗糖的2～3百倍。
它具有多种功效：抗病毒作用、抗肿瘤作用、免疫调节功能、解毒作用、糖类皮质激素作用、清除氧自由基等。
2.甘草次酸
甘草次酸在常温条件下为白色针状结晶，具有消炎、抗溃疡、抗过敏、镇咳、平喘、祛痰、降低血脂等功效；同时，它还具有保肝、抑制肝癌的作用。
3.甘草黄酮
甘草具有的抗氧化功能主要是甘草黄酮发挥的作用，它在甘草中占27%左右。
4.甘草多糖
它是将甘草提纯后获得的一种α-d-吡喃多糖，属于生物活性多糖，对肿瘤有一定的抑制效果。
三、甘草有效成分的提取方法
1.甘草酸的提取方法
1.1溶剂提取法
指利用中草药中不同成分在溶剂中的溶解性质，把有效成分从药材中溶解出来的方法。
根据溶剂的不同，分为两种方法，水提法与有机溶剂提取法。
1.2超声提取法
根据超声波的空化作用、热效应及机械作用等提高物质分子运动的频率及速度，并强化溶剂穿透力，使目标成分浸出率提高。
具体做法如下：容器的外壁连接换能器振子或用密封的不锈钢盒子放置振子，再放进容器内。
启动超声波发生器，振子向提取溶媒中发出超声波，在超声波的作用下甘草的细胞壁被破坏，从而使有效成分溶解到提取溶媒中。
1.3微波提取法
该法又称为微波萃取法（mae），是将传统的溶剂提取法与微波技术融合而形成的新技术。
它具有多种优点，包括省时、快捷、易操作、低耗能、效率高。
具体原理如下：在微波场内，不同的基体物
质对微波的吸收能力各不相同，因此，会选择性加热基体物质的个别区域或萃取体系中的个别组分。
这样，被萃取物质最终由基体或原体系中分离出来，进入到相应的萃取剂内。
这里的萃取剂要求介电常数小、对微波吸收能力弱。
王巧娥等人利用中型微波萃取设备，结合均匀设计方法制定有效的提取方案：当使用微波萃取54分钟后，取得的甘草酸差不多和采用索氏提取4h，然后，在室温条件下冷浸约44.3h后的效果相当。
1.4超临界co2萃取法
超临界流体萃取技术（sfe）是指在萃取与分离植物的有效成分时，采用超临界流体（scf或sf）取代常规有机溶剂[2]。
具体原理是根据超临界流体具有的溶解能力和自身密度间的联系。
简而言之，借助压力与温度的改变对超临界流体溶解能力产生的影响而达到萃取目的。
co2安全无毒，无污染、廉价，并且在室温条件下即可进行。
因此，采用超临界co2萃取法提纯甘草的有效成分是不错的选择。
2.甘草次酸的提取方法
2.1煎煮法
将适量的甘草粗粉放入水中加热煮沸，提取三次。
当水提取液浓缩为原体积的1/3，再加入5%稀硫酸并加热回流。
然后，水解大约10h，再进行抽滤，将其水洗到中性为止，干燥。
再将其放入20ml 热三氯甲烷中，并趁热过滤，冷却滤液。
当上柱层析，重结晶后，便得到甘草次酸结晶。
2.2超声波提取法
取10g甘草粗粉，粉碎粒度约为18-20目，溶剂选择70%乙醇溶液，将甘草粗粉浸泡到溶剂中约90min，超声频率为20khz，开启超声波1h，离心，取上清液，通过d101大孔树脂对甘草酸进行纯化，再通过酸性加压水解后便得到甘草次酸。
2.3纤维素酶-超声波联用提取法
具体方法为：取甘草粗粉10g，粉碎粒度为50目，选用70%乙醇，并加入硫酸溶液将ph值调至4，然后放入纤维素酶（活力单位在2000u/g），将其充分搅拌，利用超声频率为40khz的超声波，作用45min。
通过离心。
取上清液，纯化，酸性加压水解即可。
3.甘草多糖的提取方法
目前，常用的方法包括溶剂提取法、微波萃取法、超声法及酶法等。
4.甘草黄酮的提取方法
甘草中甘草黄酮类的质量分数大约是0.5%-4%。
采用水提法与溶剂提取法是现在提取甘草黄酮的常见方法，技术也比较成熟。
不过，目前，各种新提取法也正逐渐兴起，如超声波、微波、超临界提取、加压热水提取法等。
溶剂萃取法提取甘草黄酮主要分为两种：无机溶剂萃取法与有机溶剂萃取法。
它的作用原理是根据甘草黄酮可溶于一些溶剂的特性来获取甘草黄酮，如甲醇、碱水等有机溶剂。
而有机溶剂萃取法属于当前世界上提取甘草黄酮的主要途径之一，一般采用冷浸法或加
热抽提法，通常利用甲醇或乙醇作为浸提液。
首先选择甘草粉末约20-40目，选用浓度为75%-80%的乙醇或80%-85%的甲醇先后提取三次，每次时间在1-1.5h左右，然后，将提取液合并，减压浓缩，便可得到浸膏。
再把7-8倍的水加入到浸膏中。
然后，搅拌、放置、过滤。
用大孔树脂纯化滤液，再用水洗去杂质，再采用60%乙醇洗脱，将洗脱液浓缩、干燥后便得到甘草黄酮。
另外，还有一种溶剂热水浴法提取甘草黄酮：把naoh与乙醇混合溶液作为浸提液提取甘草黄酮，经有关试验结果可知最适宜的工艺条件为乙醇浓度为75%，naoh溶液浓度为0.4mol/l，二者比例取2：1，回流时间在2.5-3h左右。
在获得甘草浸提液后，根据相比把有机相与一定ph值的甘草浸提液放入离心管内。
然后，在振荡器的水浴中先预热约20min，震荡约半小时，再静置半小时，离心，过滤即可。
参考文献
[1]刘育辰，王文全，郭洪祝.甘草有效成分的提取纯化方法研究进展[j].中成药，2010，32（11）：1953-1957.
[2]王伟明，朱文全，张志波.甘草有效成分提取分离方法的研究进展[j].黑龙江医药，2010，（1）：93-94.。