免疫血液学红细胞血小板配血试验

HLA的研究历史
最早发现人类白细胞抗原者为Dausset-1954年 • HLA不仅仅是白细胞特异性同种抗原。 • 它是分布广泛的组织抗原。
HLA的分型命名
血清学分型命名
• 具有临床意义的HLA基因有A、B、C、DR、DQ、DP等 位点(Loci)，每个位点又有若干等位基因，这些基 因的产物便是HLA抗原。
聚凝胺
枸橼酸钠
3 加入枸橼酸钠中和聚凝胺
聚凝胺交叉配血技术示意图1
聚凝胺
枸橼酸钠
1 红细胞间有一定间距
2 加入聚凝胺后，可以 缩短红细胞之间的距离， 使其非特异性凝集
3 加入枸橼酸钠，可以 中和聚凝胺
4 红细胞的非特异性 凝集消失
聚凝胺交叉配血技术示意图2
1 红细胞上已有不完全 抗体致敏
2 加入聚凝胺后，缩短红 细胞之间的距离，让不完 全抗体可以同时与两个红 细胞结合使其特异性凝集
抗
原
抗
体
静电作用力
离子
聚凝胺技术
（1）低离子聚凝胺交叉配血技术
原理：聚凝胺（Polybrene），一种高价 阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很 多正电荷，可以中和红细胞表面的负电 荷，使红细胞之间距离减少，能引起正 常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果 使抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则 凝集不可逆。
血小板血型
血小板表面存在红细胞ABO系统的A抗原和 B抗原,可能是从血浆中吸附上的。
是否还存在其他红细胞血型抗原尚在探讨 之中
在我国，通常进行ABO同型血小板输血
配合性血小板输注
• ABO同型
• 血小板抗体的筛选
• 交叉配合试验：确保供受体的血小板 型和HLA型的配合
血小板血型
血小板特异性抗原
红细图胞6-2表：面红电细胞荷表及面电其荷相及其互相之互之间间的的距距离离
自由移动的 正电荷 内层正电荷 随红细胞移动 表面负电荷 红细胞
红细胞间由静电维 持最小距离约 24nm
低离子强度作用原理
• 当溶液中缺少离子时，抗原抗体之间的静电作用力强
抗 原
抗 体
静电作用力
非离子
• 当溶液中离子增多时，抗原抗体之间的静电作用力弱
二、HLA与器官移植 (一)肾移植 (二)骨髓移植
三、HLA与亲子鉴定
二、血小板血型
一类是与其他细胞表面或组织共有的 抗原，称血小板相关抗原
另一类为血小板特异性抗原
血小板血型
相关抗原：主要与红细胞的ABO血型系统以及
人类白细胞抗原(HLA)有关
特异性抗原：由血小板特有的抗原决定簇组成
，表现出血小板独特的遗传多态性，在其他细胞 和组织上不能发现
端带正电（Kell系统抗原带正电荷） • 抗原抗体的结合：
静电引力、氢键、疏水键及范德华力
影响红细胞抗原抗体反应的因素
• 离子强度： 反应液中的电解质会增加溶液的介电常
数，减弱抗原抗体间的静电作用。
降低离子强度可以显著增加抗原抗体结合 速率。如:离子强度由0.17M降到0.03M时，抗 D和D阳性红细胞的开始结合速率增加1000倍 。
不规则抗体的筛选和鉴定
患者血清+试剂筛选红细胞
盐水介质 聚凝胺介质（最为常用） 抗人球蛋白介质（最为常用敏感） 酶介质法
交叉配血试验
受者血清+供者红细胞
Fra Baidu bibliotek
主侧
受者红细胞+供者血清
次侧
盐水介质
方法
聚凝胺介质 抗人球蛋白介质
酶介质法
红细胞抗原抗体反应过程
• 抗原抗体的靠近： 红细胞抗原位点带负电荷，抗体Fab
免疫血液学
----红细胞 血小板 输血前交叉配血试验
一、人类白细胞抗原
人类白细胞抗原代表个体特异性
与移植排斥有关的抗原称为组织相容性抗原或 移植抗原-MHS 编码MHS的基因组称为主要组织相容性复合物 (MHC) 人类的MHC是首先在白细胞上发现的，称为人类 白细胞抗原(human leukocyte antigen，HLA)
内容：
1. 患者的病史、标本的核对及处理 2. 供受双方ABO、Rh血型鉴定 3. 不规则抗体的筛选和鉴定 4. 交叉配血试验 5. 报告和发血
标本
一、标本采集 二、红细胞悬液的配制 三、标本的保存
标本
一、标本采集
1．红细胞标本-ACD或CPD、(Na2-EDTA)抗 凝静脉血 少数患者有一种自身抗体--不宜用抗凝 血液作为红细胞抗原标本
2．血清标本
一般实验避免使用血浆 配血试验用血清——不超过72小时
二、红细胞悬液的配制
1、红细胞悬液常用浓度有2％、5％和10％
2、2％的悬液一般用于滴定抗体效价，5％的悬 液常用于血型鉴定和交叉配血试验，10％的 悬液则用于测定抗体的亲合力。
三、标本的保存
1．血清标本 不稀释的血清标本如加有防腐 剂可在4℃保存数月,在-20℃以下可保存数年
紫癜(简称ITP)
血小板同种抗体与输血
1.ABO血型的选择
一般需要做主侧或次侧的交叉配血，最好输 注ABO血型配合的血小板
2．Rh血型的选择
D阴性的患者，最好要避免用D阳性献血者的浓 缩血小板。对育龄妇女可以注射Rh免疫球蛋白
三、输血前免疫血液学检查
目的:供者与患者的血液
相容 安全 有效
输血前免疫血液学检查
• 临床意义比较大的HLA-A、B、C称为Ⅰ类抗原 HLA-DR、DQ、DP称为Ⅱ类抗原。
HLA的遗传
单体型遗传 存在基因重组 多态性现象 连锁不平衡
HLA抗体及抗体检测
• 临床上HLA抗体多由妊娠、 输血或器官移植等免疫产生
HLA在医学中的应用
一、HLA与输血 HLA与非溶血性输血反应 HLA与血小板输注
• 如用生理盐水稀释的血清只限当天使用
2．红细胞标本 一般试验用的凝血标本要在5 天之内使用，以不溶血为准。如用保存液可 保存3周
• 用盐水配制的红细胞悬液只能在当天使用
供受双方ABO、Rh血型鉴定
｝ • ABO血型正反定型
• Rh血型鉴定
试玻 管片 法法
不规则抗体的筛选和鉴定
• 抗A、抗B以外的所有抗体统称为不规则抗体。 • 常见于多次输血的人群
具有独特的型特异性，并构成血小板膜结构 中的一部分
血小板特异性抗原有6个血型系统24个抗原， 正式命名为HPA-1、HPA-2、HPA-3、HPA-4、 HPA-5、HPA-15
血小板血型的临床意义
一.血小板输注无效性(PTR) 二.输血后紫癜(PTP) 三.新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜(NAITP) 四.血小板的自身免疫作用---特发性血小板减少性