病毒滴度测定-针对有绿色荧光蛋白标记的病毒

病毒滴度测定

a. 感染前24小时，把1x 105个/孔293细胞传代至96孔板中，加入完全培养基至终体积200ul；

b. 把上述重悬的病毒粒子进行10倍梯度稀释，共12个梯度，用含4 μg/ml polybrene的完全培养基进行稀释；

c. 然后把90ul梯度稀释的病毒加入提前接种293细胞的96孔板中，培养液终体积为90ul，感染24小时后移除旧完全培养基，加入200ul完全培养基；

d. 48-72小时后进行绿色荧光观察；如果稀释梯度为109的病毒感染细胞，48小时后具有绿色荧光的细胞的个数为4，则细胞浓度为4*109 cfu/ml。如此类推。