铁皮石斛组培技术

铁皮石斛的组织培养研究

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课程：植物组织培养

目录

摘要 (3)

Abstract (4)

前言 (5)

1. 培养基 (6)

配方 (6)

配制（以1000ml 幼株的生根壮苗培养基为例） (6)

灭菌 (8)

2. ............................................................ 转接9

转接前准备 (9)

转接 (9)

培养 (9)

3. .......................................................... 炼苗10

炼苗目的 (10)

炼苗方法 (10)

4. .......................................................... 移栽11

基质选择 (11)

移栽技术要求 (11)

5. 结论与分析 (12)

参考文献 (13)

摘要

铁皮石斛(De ndrobium offic in ale )是兰科(Orchidaceae)石斛属(De ndrobiumSw)多年生草本植物。铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。铁皮石斛是传统名贵中药材，有生津益胃、清热养阴和清咽利嗓等功效，主要药用成分石斛多糖是一种免疫调节剂。铁皮石斛蒴果成熟时易开裂，且种子粒径小，自然繁殖率低。为了保护和有效利用铁皮石斛，通过组织培养技术大量快速繁殖铁皮石斛组培苗显得尤为重要。

关键词：铁皮石斛组织培养移栽培养基转接快速繁殖

Abstract

Dendrobium orchid Dendrobium is a perennial herb. It is the ultimate in DendrobiumSw,namedfor its ferric green a rare traditional Chinese herbal medicine,it contributes to dry dampness and strengthen the spleen,clear away lung-heat ,nourish yin ，clear away heat ,and so main medicinal components of Dendrobium polysaccharide is a kind of immune mature,its capsule cracks,in which seeds are in small particle size and have a low rate of natural order to protect and utilize the Dendrobium orchid Dendrobium ,it is particularly important to establish a rapid propagation by the tissue culture technique .

key words: Dendrobium orchid Dendrobium tissue culture

culture medium adapter rapid propagation

前言

多年生草本，具有气生根。茎直立丛生、高30-50cm,肉质稍扁，有节、有槽沟，黄绿色。单叶互生，叶片革质，无柄，狭长椭圆形或近披针形，叶鞘抱茎。总状花序腋生，每个花序有花2-3 朵，白色，先端淡紫红色。

铁皮石斛为兰科石斛属多年生草本植物。作为我国传统的名贵中药, 具有重要的药用价值。由于长期过度采挖, 加之本身繁殖率低,导致其野生资源急剧减少日趋濒危, 现已被列为国家重点保护植物, 成为国家重点保护的药材品种。

试验结果表明，MS N6和B5等3种基本培养基对铁皮石斛芽诱导和增殖的效果,B5要优于其他基本培养基；在激素浓度配中,铁皮石斛原球茎在L+L中,增殖系数最大; 天然附加物对铁皮石斛增殖的影响差异很大, 实际应用中宜选用香蕉汁为添加剂；在B5+蔗糖30g/L+香蕉汁100mg/L+琼脂L基本培养基中,加入的NAA寸铁皮石斛芽的生根以L处理的效果最好，但考虑到NAA介格较贵,且在浓度范围为之间对生根的影响差异不明显，在实际应用中以选用L的NAA为好；生成的小苗经过炼苗后, 在铺有一层苔藓的含有75％锯末+20％泥炭土+5％碎磁片的基质上能够良好的生长。

1. 培养基

配方

根据不同阶段，培养基配方有所差异。如表1-1

表1-1各种培养基配方

不同阶段培养基备注

愈伤组织（原球”、“

MS+L6-BA+3蔗糖+%琼脂pH= 茎）的诱导

原球茎的增殖MS+20马铃薯+3%蔗糖+%琼脂pH =

k丄卄”八八MS+20马铃薯+LNAA+3蔗糖+%琼

原球茎的分化- pH=

脂

MS+10香蕉+LNAA+3蔗糖+%琼脂pH= 幼株的生根壮苗

配制（以1000ml幼株的生根壮苗培养基为例）

配方：10%香蕉（w/w）+MS +3%蔗糖（w/w）+%琼脂（w/w）+L NAA 1）量取800ml蒸馏水于洁净的大烧杯中，加热至沸腾；

2）准确称量100g香蕉果肉，切成碎片状，并倒入上述烧杯中，加热煮沸5mi n，其间搅拌使之充分溶解；

3）按照大量、微量、Fe2+盐、有机I、有机U顺序，量取MS各种母液于盛有50ml蒸馏水的烧杯，混合均匀；

4）将2）和3）的溶液混合，然后加入30g蔗糖，并移取2ml NAA （ml），混

合均匀；

5）加热至沸腾，加入8g琼脂并煮沸5min，其间不断搅拌使之充分溶解；

6）冷却至50± 5C时，调pH至一。分装于培养瓶内，瓶。

培养基附加物：