地贫筛查中的血红蛋白电泳 共25页
地中海贫血筛查检测ppt课件
轻型（标准型）a-地贫 出生时脐血血红蛋白Hb Bart's （a a /--）或（a-／a-） 占5％-10% 血红蛋白H病 （-a /--），或（a -/-），或（a aT /--），或 （a aT／a aT）
患者多无明显临床症状,实验室检 查可小细胞低色素性贫血，MCH 和MCV均较低．
出生时脐血Hb Bart's约占20％- 终生轻度至中度贫血和肝脾肿大 30％，此时HbH含量较低；但 等，但差异较大 .实验室检查可 出生后Hb Bart's含量迅速降低， 见小细胞低色素性贫血，红细胞 HbH含量逐渐增高。通常成年 内可见包涵体． 期患者HbH含量会持续在4%20%范围内。
地中海贫血的临床特征
小细胞低色素性溶血型贫血(中、重度)
黄疸
肝脾肿大 (脾大明显)
骨髓扩增
发育迟缓
合并感染 Bart’s 水肿胎(α地贫,宫内或出生后数小时内死亡)
地贫血液学分析
• 最常用的方法:
红细胞平均容积(MCV)、红细胞脆性试验、 Hb电泳联合检测进行筛查,发现异常者再 进行基因诊断。
地中海贫血的血液学表型特征
1 2 3 4
500V, 25min
5
全自动血红蛋白琼脂糖凝胶电泳图谱
1、正常成人HbA2,无HbF区带; 2、成人HbA2升高,但HbF碱变性含量正常,图谱中不能扫描出HbF区带; 3、成人HbA2升高,HbF碱变性含量稍高于正常,图谱中可见浅染HbF区带; 4、成人HbA2升高,HbF碱变性含量高于正常,图谱中可见一浅染HbF区带; 5、成人HbA2升高,HbF碱变性含量明显高于正常,图谱中可见一清晰HbF 区带。
小红细胞正色素性贫血
<80
< 80 ＞94
全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的应用价值
全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的应用价值发表时间：2013-04-25T15:58:14.153Z 来源：《医药前沿》2013年第8期供稿作者：韦振空[导读] 目的：探讨在地中海贫血中运用血红蛋白电泳进行筛选的应用价值，为地贫检测提供理论依据。
韦振空（广西贵港市人民医院检验科广西贵港 537100）【摘要】目的：探讨在地中海贫血中运用血红蛋白电泳进行筛选的应用价值，为地贫检测提供理论依据。
方法：对我院自2008年2月至2012年8月之间接收体检的378例育龄人群进行全自动血红蛋白电泳仪扫描结果进行回顾性分析，对所有育龄人群的Hb含量进行检测。
结果：378例育龄体检人群中经检测发现35例（9.3%）育龄体检者是红细胞脆性下降，对其进行血红蛋白电泳的分析发现α地贫阳性21例（5.6%），β地贫阳性9例（2.4%），总阳性率为8.0%。
结论：在地中海贫血筛查过程中使用全自动血红蛋白电泳仪可以准确检测受检者Hb含量，扫描定量准确，提高了异常血红蛋白检测的发现率，有很强的应用价值。
【关键词】地中海贫血全自动血红蛋白电泳应用价值【中图分类号】R446【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2013）08-0280-02地中海贫血是一种溶血性贫血，它由于珠蛋白肽链在合成过程中因合成障碍导致合成失衡，是一种遗传性贫血疾病，在我国的两广地区以及其他南方地区发病率都较高[1]。
现今临床上对于地中海贫血还没有很好的治疗方法，为了降低地中海贫血人群的扩大发展，多采取对育龄人群进行筛选预防的方式。
我院为提高全自动血红蛋白电泳检测地中海贫血的准确性，现抽取2008年2月至2012年8月之间在我院体检的378例育龄人群进行回顾性分析，具体内容现报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料参与本研究的人群是我院在2008年2月至2012年8月间接受的育龄人群的体检者，共378例，其中男性体检者153例（40.5%），年龄介于21岁至46岁之间，平均年龄（30±3.4）岁；女性体检者225例（59.5%），年龄介于19岁至41岁之间，平均年龄（29±2.7）岁。
脐血血红蛋白电泳在新生儿地中海贫血筛查中的研究
脐血血红蛋白电泳在新生儿地中海贫血筛查中的研究摘要：目的对新生儿脐血进行血红蛋白电泳分析，探讨血红蛋白电泳在地中海贫血（地贫）筛查中的临床应用价值。
方法采用全自动毛细管电泳分析系统对2017年1月至2018年6月广东各地妇幼保健院送检来我院进行地贫筛查的14032例新生儿脐血标本，进行血红蛋白电泳检测，对筛查阳性标本检测其基因型。
结果检出轻型α－地中海贫血967 例（6. 89%），中间型α－地中海贫血9例（0.06%），轻型β－地中海贫血425 例（3. 03%），中间型及重型β－地中海贫血3例（0.02%），异常血红蛋白127 例（0.91%）。
结论血红蛋白电泳技术在新生儿地贫筛查中起到了非常重要的作用，其结果与基因检测结果符合率高。
达到早发现，早预防，指导合理婚配，杜绝重型地贫儿出生的目的，对优生优育，提高人口素质具有重要意义。
关键词：地中海贫血；血红蛋白电泳；新生儿筛查；脐血血红蛋白病可分为异常血红蛋白病和地中海贫血（地贫），地贫是我国南方最常见和危害最大的遗传病之一[1]，广东、广西等南方地区是地贫的高发区。
被世界卫生组织列为危害人类健康的6种常见病之一[2]。
根据地中海贫血病变发生的珠蛋白链不同，主要分为α-地贫和β-地贫。
全自动毛细管血红蛋白电泳能够定量检测血红蛋白A（Hb A）、血红蛋白F（Hb F）、血红蛋白A2（Hb A2）含量以及其他异常血红蛋白，可用于诊断地中海贫血及其他血红蛋白病[3]。
是临床诊断及鉴别诊断地中海贫血的主要实验室依据，是新生儿进行早期筛查的有效手段。
1 材料与方法1.1 研究对象2017年1月至2018年6月广东各地妇幼保健院送检新生儿脐带血标本14032例，其中男婴为7813例，女婴为6219例，均为足月儿。
1.2 仪器与试剂仪器采用法国Sebia公司生产的Capillarys 2全自动毛细管电泳仪及其配套血红蛋白电泳试剂盒、质控品。
1.3 方法标本的采集及处理用一次性真空采血管（含ACD抗凝剂），采集新生儿脐带血2ml，摇匀抗凝，低温保存送检。
全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用
全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用梁廷中【摘要】目的探讨全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用.方法使用法国Sebia公司生产的Hydrasys电泳系统对1718例标本进行血红蛋白电泳,通过自动扫描系统,检测血红蛋白(Hb)各组分含量,从而筛查出地中海贫血表型.结果1718例标本中,检出α地中海贫血表型阳性243例,阳性率14.14％,β地中海贫血表型阳性274例,阳性率15.95％,其他异常血红蛋白病16例,阳性率0.93％.结论全自动血红蛋白电泳仪电泳结果区带清晰,扫描定量准确,可以为地中海贫血诊断提供重要依据.【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2011(029)004【总页数】2页(P417-418)【关键词】血红蛋白电泳;地中海贫血;筛查【作者】梁廷中【作者单位】广西天等县人民医院检验科,广西天等 532800【正文语种】中文【中图分类】R446.11+1;R556.6+1地中海贫血(简称地贫)是世界上最常见和发病率最高的一种遗传性贫血，严重影响人类健康和出生质量，全球约1.8亿无症状携带者，每年出生的100万缺陷患儿中，各类呈进行性溶血性贫血的重症地贫患儿至少20万[1]，是危害最大的一种遗传病。
广西是地贫高发区，地贫基因的携带率高达20%[2]。
血红蛋白电泳分析是诊断和分离异常血红蛋白的有效方法，是用于地中海贫血筛查的常规实验手段。
本文就Hydrasys LC电泳仪进行地中海贫血筛查情况进行总结分析。
1 材料与方法1.1 对象 2010年1月至2011年5月本院门诊及住院病人，年龄在9个月至61岁之间，检查原因主要有：(1)血常规检查发现MCV减小；(2)红细胞脆性筛查＜60%；(3)家庭中有地中海贫血基因携带者；(4)产前孕妇及其丈夫地中海贫血筛查。
以上人群共计1718例。
1.2 仪器和方法1.2 .1仪器和试剂法国Sebia公司生产的Hydrasys LC全自动血红蛋白电泳仪，扫描仪为EPSONJ221A型，试剂为Sebia公司提供的配套试剂。
血红蛋白电泳实验报告
实验汇报实验名称：血红蛋白电泳项目名称：两种碱性血红蛋白样品处理方法的电泳结果实验时间：2018年9月17日实验室：龙泉驿区妇幼保健院检验科实验人员：杨松报告单位：成都温伦科技有限公司一、实验目的：1、掌握生理盐水处理血红蛋白样品的方法2、掌握四氯化碳处理血红蛋白样品的方法3、掌握电泳仪实验的操作4、分析两种碱性血红蛋白样品处理方法电泳结果的不同二、实验原理：血红蛋白电泳就是利用在电场的作用下, 由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小, 形状等性质的差异, 使带电分子产生不同的迁移速度, 从而对样品进行分离, 鉴定或提纯的技术，在临床检验中, 主要用于分离各类蛋白分子。
三、实验方法：琼脂糖电泳法四、实验器械：样品：10个EDTA抗凝管抽取的病人全血样品试剂：0.9%生理盐水500ml，四氯化碳500ml，界面液250ml，美国Helena Spife3000血红蛋白电泳检测试剂盒器材：移液枪，一次性移液枪头若干，EDTA抗凝管10个，玻璃试管10个设备：美国Helena Spife3000 全自动电泳仪五、实验步骤：1、取得医院检验科EDTA抗凝管抽取的病人全血样品10个，编号为1，2,3......10。
2、将1-10号十个个样品分别用移液枪取200ul到玻璃试管中，编号为1-1,2-1,3-1,.....10-1。
3、将1-10号10个样品进行生理盐水前处理，处理方法如下：-用0.9%生理盐水混匀，3500 rpm离心10分钟.-吸走弃去清液。
-以上步骤连续进行三次。
-完全吸走弃去上清液。
-20ul制作后的样本+80ul溶血素，混匀。
-取溶血后的样本17ul加入样品孔。
4、将1-1到10-1号10个样品进行四氯化碳前处理，处理方法如下：-用0.9%生理盐水溶液5000μL与样品混合。
-3000rpm离心5分钟。
-弃去上清液，只留下红细胞。
-加入200ul 蒸馏水溶解红细胞。
-加入300ul 的四氯化碳，混合均匀，3000rpm离心5分钟。
MCV和Hb电泳联合检测在地中海贫血筛查中的临床价值
第37卷2013年第4期黑龙江医学H E I L O N G JI A N G M E D I C A L J O U R N A LV01．37，N o．4A pr．2013249M C V和H b电泳联合检测在地中海贫血筛查中的临床价值梁瑞莲，周远青，江秀兰，谢健敏，梁玉全(南方医科大学附属顺德第一人民医院检验科，广东佛山528300)摘要：目的探讨平均红细胞体积(M C V)、血红蛋白(H b)电泳单项检测及联合检测在地中海贫血筛查中的临床应用价值。
方法x,t-5870例地中海贫血初筛者分别运用M CV、H b电泳进行表型筛查，对其中疑似地中海贫血的1640例病例进行地贫基因检测，以确诊为地贫的病例作为实验组，以确诊为非地贫的病例作为对照组，比较分析两组的M C V、H b电泳单项和联合检测结果用于地贫诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值等相关诊断试验指标。
结果1640例疑似地中海贫血病例，经基因诊断确诊为地贫的有908例，设为实验组；确诊为非地贫的有732例，设为对照组。
实验组和对照组M C V检测结果分别为(73．88±6．13)n和(77．94±3．76)f l，两组比较差异有统计学意义(P<0．05)。
M C V、H b电泳单项试验的灵敏度和特异度分别是91．96％、71．48％和11．34％、80．74％；两项平行联合试验的灵敏度和特异度分别是100％和O．00％；系列联合试验的灵敏度和特异度分别为68．06％和94．81％。
经u检验，联合检测的灵敏度、特异度与单项检测比较，差异有统计学意义(P<0．05)。
结论M C V、H b电泳可作为地贫的筛查指标，两者联合试验能够提高地贫筛查的灵敏度和特异度。
关键词：地中海贫血；平均红细胞体积；血红蛋白电泳；特异度；灵敏度doi：10．3969／j．i ss n．1004—5775．2013．04．004学科分类代码：320．11中图分类号：R446．11文献标识码：BC l i ni cal V al ue of t he C om bi ne d T es t s of M C Vand l i b E l ect r ophor e s i s i n Thal ass em i a Scr eeni ngL I A N G R ui—l i an，Z H O U Y uan—qi ng，J I A N G X i u—l an，e t a1．(D epar t m ent of L a bor a t or y，The Fi r s t Peopl e’S H os pi t al of Shunde A ff i li at edt o S out her n M e di ca l U ni ver si t y，Shunde528300，CH I N A)A bs t r act：O M ect i ve T o st udy t he cl i ni cal va l ue of s i ngl e det ect i o n and com bi ned t es t s of m e an cor pusc ul ar vol—um e(M C V)and hem ogl obi n(H b)el ect rophor esi s f or t ha l ass em i a s creeni ng．M et hods M C V and H b el ect r opho—r e si s w er e used f or phenot ypi e t ha l ass em i a scr eeni ng of5870cas es of pat i ent s．I n al l pat i ent s，1640cas es of pa—t i e nt s w ho suspect ed t ha l ass em i a w er e det e ct ed by t ha l ass em i a gene．T he di agnosi s of t ha l ass em i a w er e t aken as t he exper i m ent al gr oup，and t he di agnosi s of non—t ha l assem i a w er e t a ken as t he cont r ol gr oup．The di agnos t i c t es t i nde．xes of s i ngl e and com bi ned det ect i o n r es ul t s of M C Vand H b el ect r ophor es i s f or t ha l ass em i a w er e ana l yz ed bet w ee n t he t w o gr oups，s uc h a s di agnosi s s ens i t i vi t y，s peci f i ci t y，pos i t i ve pr edict i ve val ue，nega t i ve pr edi ct i ve va l ue，andSO on．R es ul t s I n1640cas es of pat i ent s w ho w er e suspect ed t hal a ssem i a，908cas es w er e genet i cal l y conf i r m ed as t hal a ss em i a，and t a ken as exper i m ent al gr oup；732pat i ent s di agnos ed w i t h non—t hal ass em i a。
血红蛋白电泳报告单解读
血红蛋白电泳报告单解读
血红蛋白电泳是一种常见的检查方法，可以用来检测血红蛋白的类型和数量，进而判断是否存在贫血、地中海贫血等疾病。
本报告单解读将从以下几个方面进行分析。
1. 检测项目
首先，我们需要了解这份报告单所涉及的检测项目。
从报告单中可以看出，该患者进行了血红蛋白电泳检测。
具体来说，该患者的血液样本被用于分离不同类型的血红蛋白，并通过电泳技术进行分析。
2. 表格解读
接下来，我们需要对报告单中的表格进行解读。
根据表格内容可知，该患者共检测到5种不同类型的血红蛋白：HbA、HbA2、HbF、HbS 和HbC。
其中，HbA是正常成人血液中最常见的血红蛋白类型；HbA2通常占据少量比例；HbF主要存在于胎儿和新生儿体内；而HbS和HbC则是两种比较罕见的变异型血红蛋白。
3. 结果分析
接下来，我们需要对报告单中的结果进行分析。
从表格中可以看出，
该患者的HbA、HbA2和HbF含量均在正常范围内。
但是，该患者的HbS含量为38.3%，高于正常范围（0-2%），而HbC含量为3.5%，也略高于正常范围（0-3%）。
4. 临床意义
最后，我们需要对这些结果进行综合分析，并探讨其临床意义。
根据
以上结果，可以初步判断该患者可能存在地中海贫血或镰状细胞贫血
等血液疾病。
因此，建议该患者进一步进行相关检查、诊断和治疗。
总之，通过以上对血红蛋白电泳报告单的解读分析，我们可以初步了
解该患者的血红蛋白类型和数量情况，并初步判断其可能存在的血液
疾病类型。
但是，在具体诊断和治疗方面仍需进一步检查和评估。
血红蛋白电泳实验报告
血红蛋白电泳实验报告实验报告：血红蛋白电泳实验一、引言血红蛋白（hemoglobin）是一种具有输送氧气功能的蛋白质，存在于人类和许多动物的红细胞中。
它由四个亚基构成，包括两个α亚基和两个β亚基。
血红蛋白的功能和结构与其所含的亚基类型密切相关，而异常的血红蛋白亚基组合可能导致一些血液疾病的发生。
血红蛋白电泳实验是一种常用的实验方法，用于检测血液中血红蛋白的类型和数量，以帮助诊断和监测相关疾病。
二、实验目的通过血红蛋白电泳实验，了解不同类型血红蛋白的迁移速度，并根据实验结果对血液样本进行分类和鉴定。
三、实验材料与方法实验材料：1. 血液样本2. 血红蛋白电泳试剂盒3. 相关实验设备：电泳仪、垂直电泳槽、电源等实验方法：1. 血液样本处理：将血液样本离心，取上清液得到红细胞。
2. 血红蛋白裂解：将红细胞加入裂解液，用振荡器进行充分混合。
3. 准备样品槽：将电泳槽填充足够量样品缓冲液，并插入电泳纸。
4. 样品加载：取相应量的裂解液，滴于电泳纸上。
5. 电泳：将电泳槽连接至电源，设定电压和时间。
6. 停止电泳：电泳结束后，断开电源，取出电泳纸。
7. 进行染色：用染色试剂将血红蛋白带染色。
8. 结果分析：观察电泳纸上的血红蛋白带，根据迁移速度和染色程度对其进行鉴定和分类。
四、实验结果与讨论实验结果显示，通过血红蛋白电泳实验，可以清晰地观察到不同类型血红蛋白的迁移带。
血红蛋白A带出现在电泳纸上最远的位置，表明它的迁移速度最快，而其他类型的血红蛋白则随着亚基结构的不同而迁移速度差异明显。
根据实验结果，我们可以将血红蛋白带分为以下几类：1. 血红蛋白A：正常血红蛋白，包括两个α亚基和两个β亚基。
2. 血红蛋白S：镰状细胞贫血患者中常见的异常血红蛋白，由两个α亚基和两个替代的βS亚基组成。
3. 血红蛋白C：血红蛋白C病患者中可见的异常血红蛋白，由两个α亚基和两个替代的βC亚基组成。
4. 血红蛋白F：胎儿血红蛋白，包括两个α亚基和两个γ亚基。
血红蛋白电泳技术在地中海贫血诊断中的价值
珠蛋白生成障碍性贫血又称为地中海贫血，简称地贫。
它是由于珠蛋白多肽链完全不能或合成不足所致的一种遗传性疾病。
目前尚无有效的治疗办法。
患者只能依靠输血改善贫血症状，维持生命，给家庭、社会带来巨大的负担。
苏珊珊等[1]报道称对育龄期人群、孕妇等筛查地中海贫血，早期发现，预防为主，减少患儿的出生率尤为重要。
本文主要探讨有效的筛查方法，血红蛋白电泳技术，在诊断地中海贫血中的价值。
1.资料与方法1.1临床资料选择2015年1月~2016年12月在本院体检筛查人群1768例，经血红蛋白电泳技术进行筛查，对结果异常患者及可疑地中海贫血患者进行地贫基因检测并诊断。
因各种原因最终自愿进行地中海贫血基因检测患者共473例，其中男性148例，女性325，年龄（24.8±4.4）岁。
EDTA-K 2真空采血管采集静脉血2支，2ml/支，分别用于筛查实验（血红蛋白电泳检测）和基因诊断实验（地中海贫血基因检测）。
1.2血红蛋白电泳检测技术主要仪器试剂：法国Sebia 全自动血红蛋白电泳仪、扫描仪和分析系统；配套的血红蛋白测定试剂盒试剂（加样梳、琼脂糖胶片、pH8.5±0.1碱性缓冲液海绵条、溶血素、染液等）；生理盐水。
1.2.1标本准备：将抗凝血标本于1500rpm 离心5min ，去除血浆；用10倍的生理盐水洗涤红细胞3次；去除红细胞上多余的盐水；取10ul 红细胞置于130ul 溶血素的试管内溶血5min 备用。
1.2.2电泳操作：加样梳每孔加入10ul 溶血标本，加湿舱放置5min ；按试剂操作说明分别将琼脂糖胶片、碱性缓冲液海绵条放入相应位置；选择血红蛋白电泳程序；340V 恒压下进行电泳自动程序。
血红蛋白电泳技术在地中海贫血诊断中的价值唐宝佳 叶作东 蒋煌舟 陈康银 汤一榕 福建医科大学附属宁德市医院 （福建 宁德 352100）文章编号：1006-6586(2017)08-0075-03 中图分类号：R556.61 文献标识码：A内容提要： 目的：探讨血红蛋白电泳技术在地中海贫血诊断中的价值。
202X年新生儿地中海贫血筛查
柳州市人群中α-地贫等位基因频率(pínlǜ)及构成比
基因类型 等位基因数
携带率(%) 基因频率(pínlǜ) 构成比(%)
- -SEA
43
-α3.7
36
-α4.2
20
αCSα
14
αQSα
1
Undefined
1
合计
115
4.18
0.0209
3.50
0.0175
1.95
0.0097
6.91%
1.36
第七页，共三十八页。
α地贫的概况(gàikuàng)
α-地贫是我国南方最常见和危害最 大的遗传病之一，我区高发区报道(bàodào)发 生率高达20%，柳州市城镇人口11.19%。
第八页，共三十八页。
重度α-地贫——Bart’s水肿(shuǐzhǒng)胎
发生率:1/400-1/500
是我区出生缺陷 (quēxiàn)最常见的疾病之 一；
因此，在群体α地贫流行病学调查中，这2种常见缺失 型基因应运用分子诊断技术进行筛查。
第三十三页，共三十八页。
111例α 地贫Hb Bart’s 含量与分型
基因型
Hb Bart’s 含量
例数
（%）
静止(jìngzhǐ)型
-α3.7 /αα
0 ～2.1
34 3.31
-α4.2 /αα
0 ～3.1
19 1.85
简便、快捷、准确、价格低廉，是 国际公认检测α地贫的的金指标；
可检出目前临床基因(jīyīn)诊断不能检 出的罕见型α地贫；
第十七页，共三十八页。
α地贫血红蛋白电泳(diàn 的特点 yǒnɡ)
α-地贫携带者在新生儿脐血中有Hb Bart’s存在，一 般于出生3个月后消失。
地贫筛查中血红蛋白电泳教学
血红蛋白电泳设备
醋酸纤维膜电泳
Байду номын сангаас ▊ ▋▋▉
H J K A
正常→
▋ ▋ ▋
G D E
点样线→
▉▍
A F
▋▋
A2 CA
HbA2的常用测定方法
原理:根据不同Hb自带电荷的不同、分子量大小的不 同、结构和等电点的不同,在一定pH值的缓冲液中朝 特定方向泳动，在一定的电压下经一定时间，可分 离出各自的区带。 主要类别: 醋酸纤维素膜电泳法 琼脂凝胶电泳法 HbA2含量测定: 洗脱法 扫描法
Hb的种类
A.正常的Hb分三类 a.HbA(α2β2) b.HbF(α2γ2) c.HA2(α2δ2) B.异常Hb有两类 a.快速异常Hb:稳定Hb b.慢速异常Hb:不稳定Hb
基层常用的电泳分析方法 醋酸纤维膜电泳 琼脂凝胶电泳
醋酸纤维膜电泳→主要过程←琼脂凝胶电泳 ↓ RBC洗涤 ↓ 制备溶血 ↓ 点样 ↓ 电泳 ↓ 染色与脱色 ↙↘扫描法 ↙ 比色法:分区剪下色带，洗脱 分区切割色带,融化琼脂，干燥,透明→比色
1.通过扫描定量给出HbA、 HbA2和HbF值。 2.异常区带通过查表确定。
HbE区带的鉴别
A.联苯胺染色,鉴定是否为Hb B.区带位于HbA2 区带位置上,在阴性(-)泳动 速度最慢的一种异常Hb,难与A2区分开 C.HbA2定量在10%以上,应考虑为HbE D.HbE纯合子只有HbF和HbE,HbE高达95%以上
谢谢！
地贫防治网站： 联系电话： 2870295（地贫检验） 2870135（地贫输血） 2870640（遗传咨询） 2870640（药物邮购）
地贫筛查中的血红蛋白电泳 操作技术
解放军第三0三医院血液实验室
血红蛋白毛细管电泳和血液学指标在地贫筛查中的诊断准确性分析
血红蛋白毛细管电泳和血液学指标在地贫筛查中的诊断准确性分析【摘要】目的：分析血红蛋白毛细管电泳、血液学指标，在地贫筛查中的应用价值。
方法：对我院2019年1月2020年12月的150例地贫筛查者进行回顾性分析，其中诊断为地贫者（基因携带者）83例、诊断为非地贫者67例，所有筛查者均接受血红蛋白毛细管电泳、血液学指标筛查，并对照地贫基因检测观察其诊断效果。
结果：（1）确诊为地贫者、非地贫者分别为：83例和67例，其血液学指标筛查结果比较，P＜0.05。
（2）83例确诊为地贫者中α地贫者50例、β地贫者27例、α+β地贫者3例。
（3）应用血红蛋白毛细管电泳联合血液血学指标在地贫筛查中的灵敏度为74.74%，诊断特异性为63.32%，诊断准确率为63.74%，阳性预测值为55.63%，阴性预测值为85.75%。
结论：血红蛋白毛细管电泳联合血液学指标应用于地贫筛查可提高诊断结果的准确性、灵敏度、特异性。
关键词：地贫筛查；血红蛋白毛细管电泳；血液学指标；诊断珠蛋白生成障碍性贫血，也可以叫作地中海贫血，为血红蛋白珠蛋白肽链基因突变/缺失所致珠蛋白肽链合成减少或是完全缺失引发的遗传性溶血性贫血[1]。
按珠蛋白肽链缺乏类型划分，最常见的为α地中海贫血、β地中海贫血，前者的出现和珠蛋白肽基因缺失/突变有关，后者的发生原因为β珠蛋白合成障碍。
血红蛋白电泳分析涵盖琼脂糖凝胶电泳、毛细管电泳和醋酸纤维薄膜电泳等方法；毛细管电泳，作为新型血红蛋白分析技术，在临床上相关地贫筛查的报道较少。
因此，本文以我院2019年1月2020年12月150例地贫筛查者为主，重点分析实行血红蛋白毛细管电泳、血液学指标对地贫筛查的影响，具体报道如下。
1.基本资料、方法1.1基本资料回顾性分析、处理我院我院2019年1月2020年12月150例地贫筛查者，其中男性65例、女性85例；年龄范围1~42岁，中位(21.5±3.4)岁。
1.2方法采取筛查者采3管2ml静脉血置于EDTA抗凝真空采集管，颠倒混匀8次后送至医院检验科检验（1管用于血细液学指标分折，1管用于血红蛋白毛细管电泳，1管用于地贫基因送检）。
血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用分析
血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用分析摘要：目的：探究血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用和价值。
方法：选取我院2013年1月到2015年10月间接收的1000例育龄检查者，对其血红蛋白电泳进行系统性分析。
结果：α地中海贫血表型阳性诊断准确率为83.3％，β地中海贫血表型阳性诊断准确率为90.9％。
结论：采用血红蛋白电泳进行地中海贫血筛查，能够较准确作出判断，后对高危的地中海类型进行优生优育指导，可以从根本上提高新生人口的素质。
关键词：血红蛋白电泳；在地中海贫血；筛查；作用和价值地中海贫血又称为珠蛋白合成障碍性贫血，它是由珠蛋肽链白合成障碍，导致人体内的正常蛋白链平衡受到破坏或者影响，从而出现溶血的现象，使得体内的血液供给不足，形成贫血的症状。
患有该病的育龄期人群，如果没有进行有效的诊断和治疗，极其容易诞生重型地贫婴儿，从而降低人口出生的素质，达不到优生优育的计划生育方针[1]。
本次我们选取我院2013年1月到2015年10月间接收的1000例育龄检查者进行血红蛋白电泳对地中海贫血的筛查，现将详细资料进行整理分析，报道如下。
1、资料和方法1.1基本资料选取我院2013年1月到2015年10月间接收的1000例育龄检查者，1000例中有男性4600人，女性5400人，最小年龄20.5岁，最大年龄44.5岁，平均年龄26.95岁；所有检查者均为自愿接受本次检查，并且同意参加本次研究，均已签署知情通知书。
1.2方法对1000例检查者均进行血常规的初步筛查，对于血常规红细胞脆性初步筛查＜60％者，和家庭成员有携带地中海贫血者进行重点筛查，采用蛋白电泳分析系统进行检查，电泳，染色，脱色，烘干，然后对Hb含量进行分析，对于血红红蛋白异常者或者HbA2≤3.5，则定为α地中海贫血表型阳性，对于HbA2＞3.5，则定为β地中海贫血表型阳性，对所有检查者的资料进行详细记录[2]。
1.3统计学处理采用SPSS17.0软件处理实验数据，计量资料使用x±s表示，采用t检验；计数资料使用χ2检验。
血红蛋白电泳的意义和判断ppt课件
b
HbA b HbF g HbA2 d
100
%
正常结果
90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 12 24 36 Age (months)
Hb F
+
Hb A: b
Hb F: g Hb A2:d
成人
琼脂糖凝胶 Hydrasys® (Sebia) 碱性缓冲液
Alpha 地中海贫血
o
常见区域
常见与远东地区,非洲和地中海区国家 o 临床症状: 根据Alpha基因的表达状态, 有4个不同程度的Alpha地贫症状 * 1 个基因表达沉默: 静止型 (非常难检测到, 在出生会测到Hb Bart’s 1-2% ) * 2 个基因表达沉默: 轻型alpha地贫,在出生会测到Bart’s 2-10% * 3 个基因表达沉默: 血红蛋白Hb H病, 出生时出现2-30% Bart’s, 儿童-成人出现 10-15% Hb H * 4 个基因表达沉默: Hb Bart’s胎儿水肿综合征 (死胎)
目前, 已经证实的有超过1000 种以上的变异体(, b, g and d) 大部分变异体出现频率较低, 并且没有明显临床症状 4种主要变异体 (Hb S, Hb C, Hb E and Hb DPunjab)出 现频率较高 ( 特定人群) ○ 携带者会出现健康问题 ○ 儿童可能在出生时即伴随有严重症状
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目的
血红蛋白结构和功能的回顾 Sebia CAPILLARYS 2 / Minicap血红蛋白检测说明 血红蛋白临床结果说明
4
血红蛋白的结构
血红蛋白分子是由4条多肽链(2对)和4个可以结合铁和氧气的血红素.
血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的应用价值研究
１ ． ２ ． １ 标本处理
使用 Ｅ Ｄ Ｔ Ａ 一 ２ Ｋ抗 凝 血标 本 ， 混
匀后吸 ２ ０ ０ ｔ ｘ Ｌ全 血用 生理 盐 水洗 涤 ， 然 后 对该 标 本 进 行 离 心操 作 ， 转 速 设 置 为每 分 钟 ４ ０ ０ ０转 ， 时 间控
制在 ５分 钟 。离完后 去 除上 清液 ，如此 反 复洗涤 三
１ 资料 与方 法
１ ． １ 一般 资料
器 自动进行 冲洗 、 染色 、 烘 干等流程 ， 最后对电泳胶
片进 行定 量扫 描 ， 分析 Ｈ ｂ组 分 。 １ ． ３ 观察项 目和指标
我院于 ２ ０ １ ５年 ３月 １ Ｅ ｌ 至 ７月 ３ １日开展 地 中 海 贫血 筛查 活动 ， 共计 筛查 人 数 １ １ ９ ２例 。选取 其 中 疑似患 者 ２ ０ ０例 作 为试验 组 ， 依据《 血液 检验 学》 ， 患 者 血 常规 检 查 显 示 红 细 胞 容 积 减 少 ，脆 性 筛 查 在
【 摘要 】 目的 分析地 中海贫血患者给 予血红蛋 白电泳测试的临床应用价值。 方法 在 ２ ０ １ ５ 年３ 月 １日 至７
月３ １日期 间我 院 地 中海 贫 血 筛 查人 员 中 ， 抽选２ ０ ０例 疑 似 患者 作 为试 验 组 ， 体检 健 康 人 员 ２ ０ ０ 例 作 为 对 照 组 。 分
２ 结
果
２ ． １ 筛查 情况 分析
１ １ ９ ２例 患 者 中 ， 筛 查 出异 常 ４ ８例 ， 占比 ４ ． ０ ％。
其 中实施 基 因诊 断 １ ０例 ， 结 果 显 示 异常 ５例 、 正 常 ５例 ， 各占５ ０ ％。
遍， 最后去除上清液 ； 然后在 １ ０ ０ ￣ Ｌ溶 血 素 中加 入
地贫检查Hb A和Hb A2等一些参考值
地贫检查Hb A和Hb A2等一些参考值地贫电泳报告血红蛋白A(Hb A) (参考值：96.5——97.5)血红蛋白A2(Hb A2) (参考值：2.5——3.5)其它几项正常血常规平均RBC体积(MCV) (参考值：82——100)平均血红蛋白量(MCH) (参考值：27——34)老公的地贫电泳报告血红蛋白A(Hb A) (参考值：96.5——97.5)血红蛋白A2(Hb A2)(参考值：2.5——3.5)其它几项正常血常规平均RBC体积(MCV) (参考值：82——100)平均血红蛋白量(MCH)(参考值：27——34)血常规中的MCV和MCH正常，而Hb A和Hb A2偏差不大，虽然存在地贫的可能，但是可能性不大。
如果遇到这种情况的妈妈们，希望可以静下心来，不必太过担心。
关于地贫的几个常见问题：这些问题，我自己也大部分遇到过，在等结果的那段时间里，查遍了网上能查的所有资料，心里才有了些底，仅供有需要的宝妈参考。
1、什么地贫，对怀宝宝有什么影响?地贫全称是地中海贫血，是一种遗传性的贫血症，由于基因缺陷导致的，分为α和β两种类型。
如果夫妻只有一人有地贫，那么生出的孩子有50%的几率也有轻度地贫，轻度地贫不影响健康和日常生活，所以不用担心，只要的孩子以后找对象时确定对方没有地贫就行了;如果夫妻两人都有地贫，如果两人是属于α和β两种不同的地贫，那么也不用担心，生出的孩子最多是个α和β地贫的杂合子，也是轻度地贫;如果夫妻两人都有地贫，且是同类型的地贫，那么就有问题了。
夫妻同型地贫，那么孩子就是25%的几率是没有地贫，50%的几率有轻度地贫，25%的几率有重度地贫，大多数人担心的就是重度地贫这个结果。
因为α重度地贫，孩子一般会在孕中晚期胎死腹中，即使可以足月生产也会在出生后几个小时内死亡。
β重度地贫的孩子虽然能顺利出生，但是需要长期靠输血来维持生命，一般活不到成年。
2、地贫检查一定要做吗?要做什么检查?看来上面第一条介绍，相信宝妈也知道地贫可能带来的严重后果了，所以地贫检查一定要，求个安心也好。
MCV、Hb_电泳在筛查中孕期孕妇地中海贫血中的应用价值
①宁德师范学院附属宁德市医院 福建 宁德 352100通信作者：林桂花MCV、Hb电泳在筛查中孕期孕妇地中海贫血中的应用价值杨晓冬① 钟文① 欧双余① 林桂花①【摘要】 目的：探讨平均红细胞体积（MCV）及血红蛋白（Hb）电泳在筛查中孕期孕妇地中海贫血中的临床应用价值。
方法：回顾性分析2019年5月-2021年6月于宁德师范学院附属宁德市医院进行孕期检查的320例中孕期孕妇的临床资料，根据基因检测结果将124例地中海贫血患者划分为地贫组，将196例非地中海贫血患者划分为非地贫组，两组孕妇均接受MCV 及Hb 电泳检查，对比两组孕妇的检查结果。
结果：地贫组的MCV 阳性率及Hb 电泳阳性率均高于非地贫组，差异均有统计学意义（P <0.05）。
MCV 及Hb 电泳对地中海贫血诊断的敏感度分别为87.10%、83.06%，特异度分别为70.92%、72.45%，准确度分别为77.19%、76.56%，两者联合检测的敏感度、特异度及准确度分别为97.58%、94.39%、95.63%。
联合检测的敏感度及特异度均高于单项检测，差异均有统计学意义（P <0.05）。
结论：MCV 及Hb 电泳在中孕期孕妇地中海贫血筛查诊断中具有较高的敏感度及特异度，两者联合检测可提高诊断率。
【关键词】 平均红细胞体积 血红蛋白电泳 中孕期 孕妇 地中海贫血 Application Value of MCV and Hb Electrophoresis in Screening for Thalassemia in Pregnant Women during Second Trimester/YANG Xiaodong, ZHONG Wen, OU Shuangyu, LIN Guihua. //Medical Innovation of China, 2023, 20(16): 146-150 [Abstract] Objective: To investigate the clinical application value of mean erythrocyte volume (MCV) and hemoglobin (Hb) electrophoresis in screening for thalassemia in pregnant women during second trimester. Method: The clinical data of 320 second trimester pregnant women who underwent pregnancy screening in Ningde Municipal Hospital of Ningde Normal University from May 2019 and June 2021 were retrospectively analyzed, and 124 thalassemia patients were classified as the thalassemia group and 196 non-thalassemia patients were classified as the non-thalassemia group according to the genetic test results, and both groups received MCV and Hb electrophoresis, and the test results of the two groups were compared. Result: The positive rates of MCV and Hb electrophoresis in the thalassemia group were higher than those in the non-thalassemia group, and the differences were statistically significant (P <0.05). The sensitivity of MCV and Hb electrophoresis for the diagnosis of thalassemia were 87.10% and 83.06%, the specificity was 70.92% and 72.45%, and the accuracy was 77.19% and 76.56%, respectively. The sensitivity, specificity and accuracy of the combined assay were 97.58%, 94.39% and 95.63%, respectively. The sensitivity and specificity of the combined test were higher than those of the single test, and the differences were statistically significant (P <0.05). Conclusion: MCV and Hb electrophoresis have high sensitivity and specificity in screening and diagnosis of thalassemia in pregnant women in the second trimester, and the combined test can improve the diagnosis rate. [Key words] Mean corpuscular volume Hemoglobin electrophoresis Second trimester Pregnant women Thalassemia First-author's address: Ningde Municipal Hospital of Ningde Normal University, Ningde 352100, China doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2023.16.035 地中海贫血是一种溶血性贫血，具有遗传性特征，多发生于在地中海及东南亚地区，我国长江以南各省市的发病率较高。
血红蛋白电泳检查（电泳法）
血红蛋白电泳检查（电泳法）1. 原理血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。
每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。
所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。
所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。
正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。
血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。
氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。
本实验在碱性（PH=8.60）条件下，以琼脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。
多余的染色液用酸性液体洗去。
待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别有无电泳条带异常。
运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。
血红蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。
血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。
2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2 标本种类：抗凝血2.3 标本要求：抗凝剂选用ED TA，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。
常规静脉采血1.8ml，加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。
清洁试管中，充分混匀。
3. 标本储存：储存于2-8℃冰箱中，5天。
4. 标本运输：储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。
6. 试剂6.1 试剂名称：血红蛋白电泳检查试剂6.2 试剂生产厂家：法国Sebia公司6.3 包装规格：150test s6.4 试剂盒组成琼脂糖凝胶 10块溶血素 1瓶缓冲液条带 10包×2条薄滤纸1×10张氨基黑（浓缩液）1瓶×100ml点样模具滤纸 10条×1盒6.5 试剂储存条件及有效期：贮存于室温（15～30℃）或冰箱（2～8℃），不能冷冻。
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9.轻型β地中海贫血 10.异常HbD杂合子 11.异常HbG杂合子 12.轻型β地中海贫血复合HbE 13.正常成人 14.正常成人 15.HbH病
地贫防治网站： 303dp 联系电话： 2870295（地贫检验） 2870135（地贫输血） 2870640（遗传咨询） 2870640（药物邮购）
醋酸纤维素膜电泳法 琼脂凝胶电泳法 HbA2含量测定: 洗脱法 扫描法
血红蛋白A2测定
不连续电泳将HbA2分离后，分别剪 出膜条中的HbA和HbA2区带，分别放入试 管中，HbA加蒸馏水20ml， HbA2加4ml ，浸泡30分钟，不定时摇动，使Hb完全 冼脱下来后混匀，用721分光光度计以波 长413nm蒸馏水校正零点，读取光密度OD 值并计算出结果。
1.通过扫描定量给出HbA、 HbA2和HbF值。
2.异常区带通过查表确定。
HbE区带的鉴别
A.联苯胺染色,鉴定是否为Hb B.区带位于HbA2 区带位置上,在阴性(-)泳动
速度最慢的一种异常Hb,难与A2区分开 C.HbA2定量在10%以上,应考虑为HbE D.HbE纯合子只有HbF和HbE,HbE高达95%以上
染色与脱色 ↙↘扫描法
↙ 比色法:分区剪下色带，洗脱 分区切割色带,融化琼脂，干燥,透明→比色
血红蛋白电泳设备
醋酸纤维膜电泳
▊ ▋▋▉ ▋ ▋ ▋
H J KA
G D E 点样线→
正常→ ▉▍
▋▋
AF
A2 CA
HbA2的常用测定方法
原理:根据不同Hb自带电荷的不同、分子量大小的不 同、结构和等电点的不同,在一定pH值的缓冲液中朝 特定方向泳动，在一定的电压下经一定时间，可分 离出各自的区带。 主要类别:
HbH区带的鉴定
A.联苯胺染色,确定是否为Hb B.在阳极(+)泳动速度最大的Hb区带 C.HbH包含体阳性(+) D.pH6.5缓冲液(酸性)唯一向阳性(+)移动的Hb区带 E.Hb↓MCV↓MCH↓ F.HbBart’s 区带在HbH区带后,泳动速度比HbH稍慢
些,有Bart’s 区带,一般都有H区带,H含量高达30% 多,但不会超出40%,低少到1%左右。
HbA2 在血红蛋白病中的意义
HbA2组成: α2 δ2 HbA2参考值:1.2%-3.5% HbA2含量的改变: HbA2水平升高,是β地 贫基因携带者的特征性标志, 故HbA2定 量的准确与否,对于临床一线β地贫基因 携带者的筛查至关重要。
血红蛋白（Hb）病
1.血红蛋白病：基因突变导致合成的珠蛋白 肽链结构异常（如：镰状细胞血红蛋白病 /HbS） 2.地中海贫血：基因突变导致一种或多种珠 蛋白肽链合成减少或缺如（α/β地贫） 3.获得性血红蛋白病：接触或误服化学药物
人体发育过程中Hｂ的组成
发育期 胚胎期 胎儿期
0－2周岁左 右
2周岁后以后
血红蛋白 Gower1 Gower2 Porland
F A F
A A2 A A2 F
肽链组成
ζ2 ε2 α2 ε2 ζ2 γ2 α2 γ2 α2 β2 α2 γ2
α2 β2 α2 δ2 α2 β2 α2 δ2 α2 γ2
Hb的种类
A.正常的Hb分三类 a.HbA(α2β2) b.HbF(α2γ2) c.HA2(α2δ2)
B.异常Hb有两类 a.快速异常Hb:稳定Hb b.慢速异常Hb:不稳定Hb
基层常用的电泳分析方法
醋酸纤维膜电泳 琼脂凝胶电泳
醋酸纤维膜电泳→主要过程←琼脂凝胶电泳 ↓
RBC洗涤 ↓
制备溶血 ↓
点样 红蛋白E/A2 2.血红蛋白D/S 3.血红蛋白G 4.血红蛋白K 5.血红蛋白J 6.血红蛋白H
Hb电泳操作中的经验与教训
1.RBC洗涤：离心的速度和时间要够，生理盐水与血 比例要5：1，血浆与冼涤生理盐水要尽量吸干净。
2.制备溶血：加入的溜水、溶血剂与红细胞体积要 符合要求。离心的速度和时间要够。
地贫筛查中的血红蛋白电泳
操作技术
解放军第三0三医院血液实验室
王荣新
血红蛋白的组成
血红蛋白由血红素与珠蛋白组成 血红素：铁原子与原卟啉Ⅸ复合物。 珠蛋白：包括α、β、γ、δ、ε和ζ 珠蛋白6种。
血红蛋是由两种不同的鳌合了血红素的 珠蛋白肽链所形成的四聚体结构，在人体的 不同发育时期，其主要的血红蛋白（Hb）组 成不同。
HbCS的区带多在HbA2位置的前 后，含量低，2％左右，很不稳定， 有时还可分开成三或四小区带，用 联苯胺染色可确定。HbE为慢速异常 区带，其位置相当于HbA2。HbH和 HbBart’s为快速异常区带。
全自动Hb电泳仪
目前国内使用的主要有 美国的Helena电泳仪、扫描仪和分析系统。 法国的Sebia电泳仪、扫描仪和分析系统。 国产的金桑特电泳仪、扫描仪和分析系统。
3.点样:血红蛋白液适量，不能太宽。 4.电泳:醋纤膜浸泡时间要够长，平衡时间要够。 5.染色与脱色:时间要够。
1.正常新生儿 2.胎儿水肿综合征 3.α地中海贫血1(脐血) 4.HbCS-HbH病型 5.重型β地中海贫血复合HbE 6.轻型β地中海贫血 7.异常HbK杂合子 8.异常HbJ杂合子
Hb病为世界上发病率最高危害最大的单基因遗 传病，被WHO列为严重危害人类健康六大疾病之一。
全球约有4.83%的人口携带Hb病基因,每年各类 重型地贫(包括地贫复合异常Hb病类型)患儿的出生 率不低于2.4‰。据此推算,全球每年至少约35万Hb 病患儿出生;
至今为止，全球在分子水平上已鉴定出近1000 种不同的珠蛋白突变基因，其中包括700多种异常Hb 变异体和200余种β地贫基因以及70多种α地贫突变 ,其中中国人群中异常Hb、β地贫基因和α地贫突变 各占70多种、34种和11种。
抗碱血红蛋白(HbF)测定
设备：721分光光度计，刻度吸管，秒表，玻璃漏斗 ，滤纸。 试剂：1/12mol/LKOH或NaOH溶液，酸性半饱和硫酸 铵溶液。 方法：取两支试管，测定管加入溶血液0.1ml，对照 管加入0.02ml，于测定管中加入KOH1.6ml，摇匀， 1分钟时立即加入酸性半饱和硫酸铵溶液3.4ml，倒 转6次，放10分钟，滤取溶液检测，用波长 540nm 蒸馏水校正零点，分别读取测定管和对照管光密度 OD值，计算出结果。