如何测定柱效

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如何测定色谱柱柱效?

答:不通的色谱柱有不同的测试方法,来自不同厂家的同类色谱柱也往往采用不同的测试条件,所以最好按照色谱柱说明书中的测试报告测定柱效。一般工作站的数据处理都有自动计算柱效值的功能,若没有工作站,可由公式计算:

柱效(理论塔板数)等于保留时间与峰宽之比值的平方再乘以16,或保留时间与半峰宽之比值的平方再乘以5.54

测定柱效时,不要接保护柱,同时注意连接的管路尽可能短,以减少死体积。

自己测定的柱效是会低于出厂时测试报告给出的值,因为一般情况下,应用实验室没有专门用于测柱效的仪器。当然,使用了一段时间的色谱柱的柱效是会下降的。

作为一个例子,下面给出Waters参考资料上面的测试条件,可用于C18(C8)柱效的测定。流动相:60/40 乙腈/水

流速:1.0 mL/min

检测波长:254 nm

测试样品:2 mL丙酮,0.20 mg苊,溶于100 mL流动相中

进样体积:3.0 L

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