无精症或严重少精症患者Y染色体微缺失的检测
无精子和少精子症患者Y染色体精子发生相关基因检测分析
无精子和少精子症患者Y染色体精子发生相关基因检测分析李启运;石之磷;王沙燕;王长花;胡玉华【期刊名称】《中国优生与遗传杂志》【年(卷),期】2005(13)8【摘要】目的探讨原因不明无精子症和少精子症患者与Y染色体精子发生相关基因的关系。
方法对82例原因不明的无精子症和少精子症患者进行G带染色体核型分析,筛选核型正常无精子症和少精子症患者,采用多重PCR技术对Y染色体上AZF区15个序列标记位点进行检测。
结果染色体核型异常16例,异常发生率为19.5%;66例核型正常无精子症和少精子症患者,有7例在Y染色体上出现不同位点基因片段微缺失,缺失率为10.6%。
结论Y染色体上基因片段微缺失是造成无精子或少精子的重要原因之一,采用多重PCR技术对原因不明的无精子症和少精子症患者Y染色体精子发生相关基因进行检测分析是一种有效的好方法。
【总页数】3页(P22-23)【关键词】无精子症;少精子症;Y染色体【作者】李启运;石之磷;王沙燕;王长花;胡玉华【作者单位】暨南大学医学院附二院深圳市人民医院遗传实验室【正文语种】中文【中图分类】R711.6【相关文献】1.精子发生相关基因VASA在正常和少精子症患者精子中的表达及意义 [J], 郭新;桂耀庭;唐爱发;李泽廷;张立兵;蔡志明;高新2.桂西地区原发性无精子症和严重少精子症患者Y染色体无精子因子检测分析 [J], 潘云;卢冬;潘国刚;李北林3.少弱精子症、死精子症、无精子症患者染色体及性激素检测分析 [J], 陈伊;罗明;胡硕楠;卢雪芳;饶研文4.特发性无/少精症患者精子发生相关基因DAZ,DAZLA的微缺失 [J], 赵静;姚元庆;李东红;杨艳红;高萍5.严重少精子症和无精子症中Y染色体基因微缺失检测分析 [J], 王洪华;周小金;胡玲卿;龚健;熊芳;俞红英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Y染色体微缺失检测
Y染色体微缺失检测试剂盒背景介绍根据国际卫生组织调查数据，约15%育龄夫妇存在生育障碍，其中男性因素引起的生育障碍约占一半。
在已知的导致男性不育的遗传学因素中，发病率最高的两种是Y染色体的微缺失和克氏综合症。
Y染色体具有大量重复基因序列及回文结构，这些结构在维持Y染色体进化稳定性的同时也使回文结构内部基因易于丢失，进而导致不育。
缺失率最高的三个影响精子发生的区域被命名为AZFa，AZFb和AZFc，它们之中任何一个出现缺失都有可能导致育性下降或不育。
Y染色体微缺失在无精症或少精症患者中发病率在10-15%，已成为男性不育患者的常规检查项目。
图1，Y染色体AZF区结构示意图（AZFa区两端有两段原病毒序列、AZFb/c区内部有5个序列高度一致的大的回文结构，这些序列和结构导致相应染色体片段易发生同源重组，造成缺失或复制。
）欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控协作网（EAA/EMQN）2004年发表“Y染色体微缺失分子诊断指导意见”建议通过对各AZF区的共6个STS位点和两个对照位点检测Y染色体微缺失。
产品简介本剂盒通过“多重定量荧光PCR技术”（Multiplex Quantitative Fluorescent PCR），以一个高度复合的扩增体系中扩增至少15个Y染色体微缺失检测相关的位点，并根据各位点有无扩增产物及扩增产物剂量判断缺失类型。
对于Y染色体微缺失，由于各AZF区片段相对较小，常规核型分析等方法难以发现其缺失。
本项目采用的检测方法是：在各AZF区上分别选择具有序列特异性的多个位点，通过多重定量荧光PCR方法检测各位点。
根据有无扩增产物判定样本染色体是否包含所检测的序列特异性位点，进而推断样本染色体是否在位点所在AZF区域发生缺失；通过部分位点扩增产物相对剂量确定相关位点拷贝数比例，根据拷贝数比例推断相关位点对应区域是否发生缺失或复制，并对于AZFb和/或AZFc区部分缺失或复制，实现了首次检测。
原发性少精、无精症患者Y染色体微缺失分子检测的应用研究进展
少精 、 无精 子症 与 Ｙ染色 体 微缺 失密 切 相关 ， 总缺失
率 约为 ８２ Ｖ 通 过 辅助 生殖 技 术如 卵胞 浆 内单 精 ．％Ｅ
子 注射 （ Ｓ） 使 这 种 遗传 缺 陷传 递 给 后 代 ＿ 因此 Ｉ Ｉ Ｃ 将 ３ ｌ ， 在 进行 Ｉ Ｓ 治 疗之 前 ， Ｙ染 色 体 微缺 失 进行 分 子 ＣＩ 对 检 测具 有重 要 的临 床及伦 理意 义 。
２Ｙ染色体 微 缺失 与精 子发 生 障碍 的研 究概况 ２１Ａ Ｆ ． Ｚ ａ区缺 失 患 者精 子 发 生 阻滞 于 青春 前 期 ． 表 现 为唯 支持 细胞 综 合征 （Ｃ ＳＬ 该 区的主 要候 选 基 Ｓ Ｏ ）． ￣
因是 Ｕ Ｐ Ｙ、 Ｂ Ｓ ９ Ｓ ９ Ｄ Ｙ Ｕ Ｐ Ｙ是 Ａ Ｆ Ｚ ａ区最 早发 现 的基 因 ， 称 为 Ｄ Ｆ Ｙ。 在 Ｙ染 色体 上 为单 拷 贝 ． 在 又 ＦＲ 它 并 Ｘ染色 体 上有 同 源基 因：其产 物 可 能具 有 Ｃ端 泛 素
域 ，相 当 于 连 锁 图 谱 的 ５ Ｃ区 的 近 侧 ； Ｚ ｂ位 于 ＡＦ
Ｙ１ ｑ １中 间 的 Ｄ１ 一 ６区域 ．相 当 于 连 锁 图 谱 的 ３ Ｄ１ ５ 一 Ｃ区 域 ： Ｚ ｃ 于远 端 的 Ｄ ０ Ｄ ２区域 ． 当 Ｏ６ ＡＦ位 ２一 ２ 相
录本 １在很 多 组 织表 达 ． 括 睾丸 和 精液 ． 录本 ２ 包 转
２２Ａ Ｆ ． Ｚ ｂ区缺 失 患 者 精 子 发 生 阻滞 在青 春期 减 数
分 裂前 或 减数 分裂 期．睾丸 活 检可 见初 级 精母 细胞
＿ ５ ＿
．
１Ａ Ｆ的发 现 与定位 Ｚ
１７ ９ ６年 Ｔｅ ｏ ｉｐｌ ｏ等报道 ６例 原发 性 无 精 子症 患 者 Ｙ染 色体 长 臂存 在 大片段 的缺失 ．推 测 Ｙ ｌ ｑ １内 可 能包 含与 精子 发生 相关 的基 因 ．他们 把这 些基 因 或基 因簇 称为 无 精子 症 因子 （Ｚ ） 基 于多 重 聚合 Ａ Ｆｓ 酶 链 反 应 （ ｌｐｅ Ｃ １ 术 及 基 因组 物 理 图谱 研 ｍｕｔ ｌｘＰ 技 ｉ Ｒ 究 的成 果 ． ｏ ｔ Ｈ 等 将 Ｙ ｌ Ｖｇ Ｐ ｑ １区 划 分 成 ２ ５个 区 （ １Ｄ ５ ， 取 ７ Ｄ 一 ２ ）选 ６个 位 点 ， Ｙ染 色 体 Ａ Ｆ区进 对 Ｚ 行 定位 ． 将 Ａ Ｆ划 分 为 Ａ Ｆ ． Ｚ ｂ及 Ａ Ｆ 并 Ｚ Ｚ ａＡ Ｆ Ｚ ｃ三个
对无精子症和严重少精子症患者Y染色体畸变和微缺失的研究及评估
对无精子症和严重少精子症患者Y 染色体畸变和微缺失的研究及评估金辛良 徐丹枫△ 朱晓明 谭剑敏 周伟民 张涛亮 许嘉骏 高 斌贝 闵志廉△(上海第二军医大学附属长征医院闸北分院泌尿外科 上海 200070;△上海第二军医大学附属长征医院泌尿外科 上海 200433)【摘要】 目的 研究无精子症和少精子症患者染色体畸变及Y 染色体(Yq 11区)无精子症因子(azoospermic fac 2tor ,AZF )微缺失情况,建立Y 染色体微缺失的临床筛查方法。
对原发性无精子及少弱精症患者与AZF 微缺失的关系。
方法 对145例患者(无精子症102例,严重少精子症43例)经染色体核型分析及AZF 的3个位点8对引物PCR 扩增,检测染色体畸变和Y 染色体微缺失率。
选取6个Y 染色体特异性序列标签位点(STS ),用PCR 技术检测145例精子发生障碍患者AZF 区微缺失情况。
结果 145例中染色体核型异常12例,占8.3%。
AZF 区微缺失21例,缺失率为14.5%。
无精子症和严重少精子症AZF 缺失率分别为14.70%和11.62%。
145例中AZF 区微缺失21例,表现为无精子症。
缺失均在AZFc 区,7例为DAZ (sY 254、sY 255)缺失,另2例为DNA 加sY 157缺失。
结论 染色体畸变和Y 染色体微缺失是导致无精子症和严重少精子症的主要原因之一。
无精子症缺失率高于严重少精子症患者。
AZF 3个位点8对引物PCR 扩增可作为Y 染色体微缺失的临床筛查方法。
【关键词】 不孕症; 男性; 染色体畸变; Y 染色体; 微缺失【中国图书馆分类法分类号】 R 698+.2Investigator and Evaluation of Chromosome Abnormity and Y ChromosomeC ases of Azoospermia and Serere OligozoospermiaJ IN Xin 2liang ,XU Dan 2feng △,ZHU Xiao 2ming ,TAN Jian 2min ,ZHOU Wei 2min ,Zhang Tao 2liang ,XU Jia 2jun ,G AO Yun ,M IN G Zhi 2lian △(Department of U rology ,Zhabei B ranch of S hanghai Changz heng Hospital ,S hanghai 200070;Department ofU rology ,Changz heng hospital ,Second Military Medical U niversity ,S hanghai 200433,China )【Abstract 】 Purpose To study chromosome abnormity and the frequency of microdeletion on Y chromosoefor the patients suffering from azoospermia and severe oligozoospermia.To set up the method for screening of microdeletion on Y chromosome.To investigate the relationship between microdeletion of azoospermia factor (AZF )and male infertility. Methods We analysed the chromosome K arotype and frequency of mi 2crodeletion on Y chromosome by using 8primers from three locus of AZF regions for 145patients including 102azoospermic cases and 43severe oligozoospermic cases :PCR amplification was performed by using 8primers from three locus of AZF regions.Six Y chromosome specific sequence 2tagged 2sites (STS )in AZF re 2gions were screened and the microdeletions were determined by PCR in 145patients with spermatogenetic malfunction. R esults There were 11cases (7.6%)with chromosome abnormity ,and 21cases with mi 2crodeletion on Y chromosome among 145patients ,the frequency of AZF microdeletion was up to 14.5%.The frequency of AZF microdeletion was up to 14.5%.The frequency of AZF microdeletion for azoospermia and severe oligozoospermia were 15.44%and 11.91%,respectively.Microdeletions in genomic DNA were observed in 7cases who presented with azoospermia and limited to AZFc subregion.The total deletion rate was 4.8%.The deletion patterns of the 2cases were DAZ (sY 254、sY 255)and DAZ plus sY 157,respectively.Conclusions It is one of the major causes that chromosome abnormity and microdeletion on Y chromosome lead to azoospermia and severe oligozoospermia.The frequency of AZF microdeletion for azoospermia is64 复旦学报(医学版)Fudan Univ J Med Sci 2005J ul ,32(4)higher than oligozoospermia.PCR amplification can be used to screen microdeletion on Y Chromosome by using8primers from three locus of AZF regions.【K ey w ords】 infertility; male; chromosome abnormity; Y chromosome; microdeletion Y染色体长臂远端区存在控制精子发生的基因(无精子症因子,azoospermic factor,AZF),这一区域的染色体微缺失可导致精子发生障碍。
y染色体无精子症因子微缺失的筛查与临床探讨
·论 著·Y染色体无精子症因子微缺失的筛查与临床探讨欧妙玲，陈志华，刘丽雅，朱晓丹（广东省佛山市妇幼保健院检验科 ５２８０００） 【摘要】 目的 筛查男性不育患者Y染色体无精子症因子（AZF）微缺失发生率，并分析缺失类型与临床表型的关系。
方法 选取２０１３年１～１２月于佛山市妇幼保健院男科就诊的男性不育症患者２００例，其中非梗阻性无精子症１４１例，重度少精子症５９例；另选取１００例正常孕育男性作为阳性对照；１００例正常孕育女性作为阴性对照。
采用聚合酶链反应分析男性Y染色体AZF微缺失。
结果 特发性不育组AZF微缺失率显著高于非特发性不育组，差异有统计学意义（P＜０．０５）。
在所有AZF微缺失类型中以AZFc最常见，占５５．６％；非梗阻性无精子症组与重度少精子症组微缺失率及微缺失类型分布情况比较，差异无统计学意义（P＞０．０５）。
结论 Y染色体AZFa、AZFb、AZFc区微缺失与男性不育具有密切的相关性。
【关键词】 男性不育症； Y染色体； 无精子症因子DOI：10．3969／j．issn．1672‐9455．2015．03．031文献标志码：A文章编号：１６７２‐９４５５（２０１５）０３‐０３６５‐０３Screening and clinical phenotype explore of Y chromosome microdeletions of azoospermia factor in male infertility pa‐tients OU M iao‐lin g，C H EN Zhi‐hua，L IU L i‐y a，ZH U X iao‐dan（De p artment o f Clinical L aborator y，M aternaland Children H ealth Hos p ital o f Foshan Cit y，Foshan，Guan g dong５２８０００，China）【Abstract】 Objective To investigate incidence of Y chromosome microdeletions of azoospermia factor（AZF）in male infertility patients，and to analyze the relationship between types of gene deletion and clinical phenotype．Methods A total of２００cases of patients with male infertility were recruited in this study from January to December２０１３，including１４１cases with non‐obstructive azoospermia and５９cases with severe oligozoospermia．Another１００healthy males were enrolled as positive control group，and１００healthy females were enrolled as negative controlg roup．M ale Y chromosome AZF microdeletions were analyzed by using polymerase chain reaction method．Results The incidence of AZF microdeletions of idiopathic infertility group was significantly higher than that of non‐idiopathic infertility group（P＜０．０５）．In all types of AZF microdeletions，AZFc was the most common type，accounting for５５．６％．No significant differences of AZF microdeletions incidence and distribution of types of AZF microdeletions were found between non‐obstructive azoospermia group and severe oligozoospermia group（P＞０．０５）．Conclusion Y chromosome AZFa，AZFb and AZFc microdeletion could be closely correlated to male infertility．【Key words】 male infertility； Y chromosome； azoospermia factor 大约有１０％～１５％育龄夫妇存在不育情况，其中男性因素大约占了５０％，在男性不育中３０％是因为遗传因素所导致。
无精子症和严重少精子症患者Y染色体微缺失研究
无精子症和严重少精子症患者Y染色体微缺失研究杨艳红;苏明权;王晓红;罗亚宁;张顺;姚元庆【期刊名称】《生物技术通讯》【年(卷),期】2008(19)4【摘要】目的:研究Y染色体微缺失与男性不育的关系.方法:采用多重PCR技术,研究正常男性、无精子症和严重少精子症男性不育患者Y染色体无精子因子(AZF)区域3个序列标志位点(STS)的缺失情况.结果:在93例无精子症或严重少精子症患者中,15例有Y染色体微缺失,缺失率为16%.其中,42例无精子症患者中,6例为AZFc 区SY255位点缺失,2例为AZFb区SY134位点缺失;51例严重少精子症患者中,7例为AZFc区SY255位点缺失.40例正常男性无Y染色体微缺失.结论:多重PCR技术是简便而有效的对男性不育患者进行Y染色体微缺失筛查的方法;Y染色体微缺失是造成男性不育的一个重要原因,对男性不育患者进行辅助生育技术治疗前应常规进行Y染色体微缺失的检测.【总页数】3页(P535-537)【作者】杨艳红;苏明权;王晓红;罗亚宁;张顺;姚元庆【作者单位】第四军医大学,第二附属医院妇产科生殖医学中心,陕西,西安,710038;第四军医大学,西京医院临床分子生物学研究中心,陕西,西安,710032;第四军医大学,第二附属医院妇产科生殖医学中心,陕西,西安,710038;第四军医大学,第二附属医院妇产科生殖医学中心,陕西,西安,710038;第四军医大学,第二附属医院妇产科生殖医学中心,陕西,西安,710038;第四军医大学,第二附属医院妇产科生殖医学中心,陕西,西安,710038【正文语种】中文【中图分类】Q492.4【相关文献】1.无精子症及严重少精子症患者Y染色体微缺失类型与睾丸活检成熟精子检出率的相关性 [J], 刘兴章;唐运革;王奇玲;郑立新;邓顺美;周冰燚;刘晃;李铭臻2.严重少精子症及非梗阻性无精子症患者Y染色体微缺失分析 [J], 王新阳;唐开发3.PCR-荧光探针法检测严重少精子症或无精子症患者Y染色体微缺失的研究 [J], 杨洋;王树玉;周丽颖;白万凯4.无精子症和严重少精子症患者Y染色体微缺失和基因缺失研究 [J], 李座祥;汪朝晖;王媛媛;唐文豪;马潞林;马旭5.佛山地区无精子症及严重少精子症患者Y染色体微缺失基因分析 [J], 吴智刚; 李炜煊; 李启欣; 李小蓝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Y染色体微缺失检测指导
丫染色体微缺失是严重少精子或无精子症的重要原因，是导致男性不育的第二大遗传因素，其发生率仅次于Klinefelter综合征（克氏综合征）。
从1999年开始，欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控网（EAA/EMQN为提高诊断质量，出版了丫染色体微缺失分子诊断指南，并提供了客观的实验质量评价方法。
最新版的实验室指南是2013年9月EAA/EMQN根据12年的临床积累和专家共识，在1999版和2004版的基础上修订而成。
新指南重点阐明：在少精子症或无精子症男性中发现的丫染色体微缺失区域，主要是无精子因子（azoospermia factor，AZF）区域仅包含AZFa AZFb AZFbc AZFc和AZFabc区，独立的AZFd区并不存在；AZFc 区中gr/gr 缺失是影响精子生成的一个危险因素，但临床意义尚存争议，不作为常规检查指标；检测位点增加并不能提高检测灵敏度，反而可能使结果复杂化；基于两管多重PCR的检测方法仍适用于整个AZF缺失检测。
EAA/EMQN 12年国际质量评估计划（EQA计划）的实施表明，参与实验室通过规范实验操作，改善报告质量，可有效降低诊断错误率。
丫染色体微缺失在中国不育男性中的发生频率为11.5%，处于较高水平，我们建议将AZF检测作为男性严重少精子或无精子症的常规检测项目，呼吁国内AZF检测实验室加入EQA计划，完善中国丫染色体微缺失检测实验操作规范。
丫染色体微缺失分子检测在中国已开展多年，国内专家对AZF缺失模式、检测序列标签位点（sequenee- tagged site, STS的数量、检测方法和内部质量控制等临床问题未达成共识。
各实验室的诊断操作方法有很大不同，导致不准确或错误诊断时有发生，迫切需要建立丫染色体微缺失诊断标准和质量控制标准。
EAA/EMQN 更新的2013版指南对以上问题都给出了明确的专家共识，对我国建立自己的检测指南有重要的指导意义。
一、丫染色体微缺失发生频率丫染色体微缺失在健康人群中发生率约为1/4 000，但在不育男性中显着升高，微缺失发生频率为2%〜10%（甚至更高）。
生殖激素水平和Y染色体微缺失检测在无精子症患者睾丸穿刺中的应用
生殖激素水平和Y染色体微缺失检测在无精子症患者睾丸穿刺中的应用发布时间：2021-11-12T09:05:31.449Z 来源：《医师在线》2021年28期作者：周昕[导读] 对无精子症患者睾丸穿刺中Y染色体微缺失检测和生殖激素水平研究的意义进行评价分析，周昕扬州市江都妇幼保健院男科江苏扬州 225200【摘要】目的对无精子症患者睾丸穿刺中Y染色体微缺失检测和生殖激素水平研究的意义进行评价分析，为今后的临床工作提供指导。
方法抽取在2016年6月-2019年6月间我院收治的符合临床诊断标准的非梗阻性无精子症患者46例，另抽取同期梗阻型无精子症患者60例作为对照组，对两组患者睾丸穿刺中Y染色体微缺失检测和生殖激素水平检测结果进行回顾性统计分析。
结果经统计发现，非梗阻型无精子症患者的FSH水平较对照组发生显著升高（P＜0.05）；穿刺有精子患者的FSH水平较穿刺无精子患者发生明显降低（P＜0.05）；与Y染色体微缺失的非梗阻型无精子症患者比较FSH水平无明显差异（P＞0.05）。
结论 FSH水平在非梗阻型无精子症诊断中可作为主要观察指标，临床价值显著，但是针对Y染色体微缺失者则预测价值不大，临床应对其给予足够的重视。
【关键词】无精子症；睾丸穿刺；Y染色体微缺失；生殖激素曾有调查结果显示[1]，约有50%的无精子症患者在其睾丸内可发现精子，因此可以让这部分患者经显微取精与单精子卵胞浆内注射技术进而获得拥有自己遗传学特征的后代。
现阶段临床上睾丸穿刺术为取精时对无精子症患者实施生殖病理研究的一个十分重要的手段，也是临床上男性不育患者诊断、分类、病因分析以及预后判断的重要参考指标，临床意义重大[2]。
本次研究中出于对无精子症患者睾丸穿刺中Y染色体微缺失检测和生殖激素水平研究的意义进行评价分析的目的，对收集到的非梗阻型无精子症患者以及梗阻型无精子患者展开了睾丸穿刺中Y染色体微缺失检测和生殖激素水平检测，并对受试者的检测结果进行了对比分析，现汇报结果如下。
无精症、少精症患者中AZF缺失的检测
无精症、少精症患者中AZF缺失的检测*导读：本文介绍无精症、少精症患者中AZF缺失的检测。
……1976年，Tiepolo等首先报道了位于Y染色体长臂(Yqll)常染色质部分的与精子生成有关的基因组AZFCS。
Kent-First等认为AZF包含4个非重叠的功能亚区:AZFa . AZFb , AZFc和AZFd，其估计长度分别为1-3 Mbp,l-3 Mbp和1. 5 Mbp ,其中AZFc又可分为近端AZFc(即AZFd )、中部AZFc(即DAZ)和远端AZFc(即DAZ的远端区域)3个亚区。
迄今国内外已检测了约6 000多个男性不育患者的AZF，发现AZF微小缺失的比例为3%-30%。
一般地，AZF区域的大片段缺失仅限于AZFa的缺失，常见于唯支持细胞综合征(Sertolicell only syndrome)或重度少精症患者，约占7%。
AZF6或AZFc微小缺失既可见于唯支持细胞综合征，也可见于重度少精症患者;而AZFd缺失多见于轻度少精症或畸精症患者。
多重PCR是检测Y染色体微小缺失的有效方法。
本文没有检测到AZFa和AZFb区缺失，只检测到AZFb区缺失，这与Simoni等的实验结果相一致。
Simoni等对168例非阻塞性、特发性无精症和重度少精症患者的DAZ基因进行了分析，发现3例无精症和2例重度少精症存在DAZ缺失，从而证实了DAZ是AZF的重要候选基因的假说。
DAZ基因的缺失发生率在不同的研究报道中差异较大，从1. 9%到18%不等。
本文检测到的2个AZFc亚区缺失位点sY254和sY255均位于DAZ基因内，缺失率为3.6%，相对偏低。
缺失率差异较大的原因可能与筛选患者的标准有关。
Reijo 等, Najmabacii等采用辜丸活检来选择患者，把那些活检标本中检测到精子而在精液中找不到或很难找到精子的无精症或少精症患者排除在被检范围内。
因为这些患者属于阻塞性无精症。
因此其检测得到的缺失率较高，分别达13%和18%。
Y染色体微缺失
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• 但进一步的统计分析表明只有高的 EGFR基
因拷贝数对应较高的存活率。
• 因此说明 , EGFR基因扩增可作为筛选 TKIs
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五 染色体微缺失相关基因研究的 意义
1 用于原发性无精或少弱精症的遗传咨询。 通过遗传病因诊断， 找到男性不育的遗传 病因， 则可避免不必要的药物及手术治疗。
2 进行辅助生育之前对其进行遗传病因诊断， 可尽量避免将不良基因传递给下一代
3 辅助生育精子质量筛选 4 为未来的基因治疗提供理论依据。
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四 Ｙ 染色体微缺失的检测方法
• 选择位于 Y染色体短臂 ( Y p ) 的睾丸决定基因( S RY ) 和
锌指蛋白基因( Z F X ／ Z F Y ) 为对照。Z F X ／ Z F Y 既存在于 x染色体短臂， 也存在于 Y p ， 其与 S R Y一 起构成2个 目前推荐使用 的参照基因。每个 A Z F区域至 少设置2个 S T S位点 才能正确有效.
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EGFR基因突变与 TKIs治疗敏感性
• 文献报道：肺癌细胞中 EGFR酪氨酸激酶编
码区基因突变是靶向药物奏效的一个必要 前提条件,研究结果显示,对 EGFR突变型 NSCLC, Gefitinib的有效率高达80%以上 ,而 对野生型肿瘤则基本无效。这一研究随后 被相继其它研究所证实。
• 近年来随着分子生物学技术的提高 ,产生了一些针对分子
靶点的抗肿瘤药物。这些药物针对性强 ,能特异性地杀伤 肿瘤细胞。
• 其中以表皮生长因子受体 ( epidermal growth factor
Y染色体微缺失检测指导
Y染色体微缺失是严重少精子或无精子症的重要原因，是导致男性不育的第二大遗传因素，其发生率仅次于Klinefelter综合征(克氏综合征)。
从1999年开始，欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控网(EAA/EMQN)为提高诊断质量，出版了Y 染色体微缺失分子诊断指南，并提供了客观的实验质量评价方法。
最新版的实验室指南是2013年9月EAA/EMQN根据12年的临床积累和专家共识，在1999版和2004版的基础上修订而成。
新指南重点阐明：在少精子症或无精子症男性中。
测指南有重要的指导意义。
一、Y染色体微缺失发生频率Y染色体微缺失在健康人群中发生率约为1/4 000，但在不育男性中显着升高，微缺失发生频率为2%～10%(甚至更高)。
2013版指南指出Y染色体微缺失在中国不育男性中发生频率为11.5%，处于较高水平。
2006年朱晓斌等[1]针对中国不育男性染色体的研究表明AZF微缺失在非梗阻性无精子症患者中的发生率为9.94%，严重少精子症患者中发生率为5.82%，与国内外其他学者的研究基本一致。
随着微缺失分子机制的阐明和Y染色体男性特异区域的结构(MSY)测序完成，结合十多年临床数据分析，EAA专家总结沿用Repping等[2]对Y染色体微缺失区域的定义模式，分为：AZFa区缺失、AZFb区缺失、AZFbc区缺失和AZFc区缺失，认为只有该微缺失模式有明确的临床表现。
国内外学者对AZFd区缺失是否存在一直存有争议。
尽管发现在AZFb与AZFc两区域之间存在新的缺失位点(一些学者认为的AZFd区缺失)，但是该区域缺失没有明确的临床意义，也并非独立存在的缺失模式。
所以第四区域AZFd区缺失仍存在较多争议。
Müslümanolu等[3]在2005年的一项研究中指出AZFd缺失可能与精子形成有关，但仍缺乏有力的临床证据。
2013年，陈科等[4]在精子正常和轻度少精子症患者中都发现了假定的AZFd 区缺失。
Y染色体微缺失检测
Y染色体微缺失检测据WHO调查，全世界有15%的夫妇患有不孕不育症其中约50%由男性因素所致。
约30%的男性不育是由于遗传因素引起的生精障碍，表现为无精或者少精。
在精子发生障碍引起的男性不育患者中，Y染色体微缺失的发生率仅次于Klinefelter’s syndrome(克氏综合征)，是居于第二位的遗传因素。
Y染色体微缺失已成为男性不育患者的常规检查项目。
Y染色体微缺失分子检测的临床意义Y染色体上存在影响精子发生的无精子因子（AZF）区域，进一步可分为AZFa,AZFb和AZFc三个区域。
AZFa缺失较为罕见，大约占1%～5%，主导精母细胞的增生，缺失导致精子在青春期前发生阻滞，表现为唯支持细胞综合征（SCOS）。
临床还表现为小睾丸症，75%为无精子症，25%为严重少精子症。
AZFb缺失率在16%左右，导致在减数分裂前期或减数分裂中精子发生阻滞,停留在精母细胞阶段, AZFb缺失患者睾丸内可见精原细胞和初级精母细胞,生殖细胞停止成熟,没有精子生成。
AZFb全部缺失时，临床表现为无精子症；部分缺失时，可表现为无精子症或严重的少精子症。
AZFc缺失最常见的Y染色体微缺失，发生率为60%，睾丸组织学表现呈多样化，对于同一患者，一些生精小管内仅见支持细胞，另一些生精小管内则可见精原细胞、精母细胞及少量精子，有时精液检查可见少量活动精子。
AZFc缺失者可以有不同的临床表现：病人出现无精子症或少精子症；有的病人表现为精子计数正常，但多伴有精子形态异常。
另外，有研究发现AZFc区域缺失的少精子症患者，其精子数目有进行性下降的趋势，最后发展为无精子症。
因此，对AZFc区域缺失的少精子症患者,应及早进行治疗或将其精液进行冷冻保存。
两个以上的AZF区同时缺失发生率为14%。
可以是AZFa+c、AZFb+c或AZFa+b+c的缺失，其中AZFb+c的缺失最为频繁，临床上表现为更加严重的精子生成障碍。
41。
无精子症和少精子症不育患者Y染色体AZF微缺失检测
【第一作者简介】邝炎波(1962-)男,广东珠海人,副主任技师,主要从事传染病检测和不孕不育相关检测。
・学术论著・无精子症和少精子症不育患者Y 染色体AZF 微缺失检测邝炎波张畅斌周庆葵朱照平郑毅春肖宗辉广东省妇幼保健院,广东广州510010【摘 要】目的:探讨无精子症和少精子症患者Y 染色体AZF 微缺失与男性不育的关系。
方法:采用多重PCR 技术和毛细管电泳,对167例无精子症和少精子症患者进行Y 染色体AZF 微缺失检测,并以50例已生育的正常男性和10例正常女性作对照。
结果:167例无精子症和少精子症患者中共发现AZF 微缺失11例,总缺失率6159%(11/167),其中无精子症患者65例,AZF 微缺失4例,缺失率6115%(4/65);严重少精子症患者50例,AZF 微缺失7例,缺失率14100%(7/50)。
52例少精子症患者和50例已生育正常男性均未发现AZF 微缺失。
AZF 微缺失的缺失类型及比例:AZFc 缺失10例,占总缺失的90191%(10/11);AZFb +c 缺失1例,占总缺失的9109%(1/11),11例缺失患者中未发现AZFa 缺失。
结论:染色体AZF 微缺失是引起生精功能障碍导致男性不育的主要原因之一,AZF 微缺失主要集中在无精子症和严重少精子症患者中,以AZFc 缺失为主。
【关键词】Y 染色体;无精子因子;微缺失;男性不育;聚合酶链反应;毛细管电泳D etecti on of m i crodeleti on i n AZF reg i on of Y chrom oso m e i n azoosperm i aand oli gozoosperm i a i n fertility pa ti en tsK UAN G Yanbo,ZHAN G Changbin,ZHOU Q ingkui,ZHU Zhaoping,ZHEN G Yichun,X I AO ZonghuiGudong W o m en and Children ’s Hospital,Guangzhou,510010Ch ina【Abstract 】O bjecti ves:T o discuss the relati onshi p bet w een azoos per matis m or oligos per matis m and m icr odeleti ons in theAZF regi on of the Y chr omos ome .M ethod:M ulti p lex PCR and cap illary electr ophoresis were used t o detect the m icr odeleti ons in the AZF regi on of the Y chr omos ome of 167infertile men with azoos per matis m or oligos per matis m.The contr ol cases were 50nor 2mal fertile male and 10nor mal fe males .Result:The m icr odeleti ons in AZF had been detected within 11of 167infertile men,the t otal p r oporti on of m icr odeleti ons in AZF was 6.59percent (11/167).Among 65azoos per matis m men,4men had been detected m icr odeleti ons in AZF,the p r oporti on was 6.15percent (4/65);a mong 50seri ous oligos per matis m men,7men had been detected t o have m icr odeleti ons in AZF,the p r oporti on was 14.00percent (7/50).The m icr odeleti ons in AZF hadn’t been detected among all 52oligos per matis m men and 50nor mal fertile men .A s t o the type of m icr odeleti ons in AZF and its p r oporti on,10men had AZFc deleti on with the p r oporti on of 90.91percent (10/11);1men had AZFb +c deleti on,the p r oporti on being 9.09percent (1/11),and no AZFa deleti on was detected a mong all men .Conclusi on:The m icr odeleti ons in the AZF regi on of the Y chr omo 2s ome is one of the maj or reas ons t o cause s per mat ogenic failure resulting in male infertility .the maj or affecting populati on of m i 2cr odeleti ons in AZF were azoos per matis m and seri ous oligos per matis m patients,and the m icr odeleti ons in AZF f ocuses on AZF .【Key words 】Y chro m oso m e;Azoosperm i a gene;M i crodeleti on;M a le i n fertile;Poly m era se cha i n reacti on;Cap il 2l ary eletrophoresis 据报道,育龄夫妇中约15%患有不育,其中由男性因素引起的不育约占这一比例的50%。
97例少精子症和无精子症患者Y染色体微缺失的检测
３ １ 双胎发 育的不一致 性原 因 （ ） 儿 畸形 ： ． １胎 罗艳敏等 报告只有 １ ％为双胎同时畸形 ， ５ 大多数只有一胎畸形 ， 另一胎
对照组 。发育不一致性双胎 围生儿预后较差 的原因为 ：１ 发 （）
育不一致性双胎早 产率 明显 升高 ， 且早 发型和 迟发 型双 胎发
１ ５个非 多态性短 片断的序列标签位 点（ Ｔ ） Ｓ Ｓ 。结果 ９ ７例 患者 中检 出缺失 １ ２例 ， 总缺 失率为 １ ． ７ 。涉及 Ａ Ｆ 位 点 １例 ， ２３％ ｚａ
一
致可导致一胎死亡 ， 若一胎死亡发生 在妊娠 中晚期 ， 为单 且
绒毛膜双胎 ， 可使存活儿多脏 器受 损。本 研究显 示 ， 育不一 发 致双胎组 围产儿 总死亡 率及 双胎之 一胎 死宫 内率、 新生儿 窒
３ 讨
论
息、 新生 儿高胆红素血症 、 新生 儿进入 Ｎ Ｃ 比率 均明显 高于 ＩＵ
学 ，０７，９ ６ ：１ ８ ０ ２０ ２ （ ） ８９— ２ ．
（ 收稿 １期 ： ０ — ７— ０ 修 回 日 ： ０ — ８ １ ） ３ ２ ８ ０ １ ０ 期 ２ ８ ０ — ２ ０
９ 例少精子症和无精子症患者 Ｙ染色体微缺失的检测 ７
唐 宁 蔡 军 许 泽 辉优生科 ， 柳州市
１９ １５ ３ ：２ ２ ９ ９６，５ （ ）２ ４－ ２ ．
部 的动静脉吻合 ， 由于血液只 向一个 方向流 ， 产生 了明显 的血
液动力学失衡 ， 导致 双胎输血综 合征 ， 两胎儿 间 出现明显生长 不一致 。（ ） ３ 胎盘供血不足 ： 主要引起双绒毛膜 双胎生长不一
［ ］ Ｃ ｅｎ Ｙ Ｂ ｃｉ Ｄ， ａ ｌ Ｐ Ｐｅ ｒ ｉ ｏ ａｔ ｗ ｓ ３ ｈｕ ｇ Ｖ ， ｏｋ ｇ Ａ Ｄ ｓｖ Ｏ ． ｒ ｅ ｌｄ ｃ ｄｎ ｔｉ ： ｎ ｉａ ｔｎ ｓ ｒ ｎ ｗ ａ ｂ ｔ ｗ ｉ ｔ ｉ ｒ ｃ ｉ ｓ ｎ ｉ ｎ？［ ］ Ａ Ｏ ｓ ｔ ｙｅ ｈｔ ｉｈ ｅ ｈ ｄ ｅ ｎｅ ｓ ｉ ｉｃ ｔ Ｊ ． ｍ Ｊ ｂｔ Ｇ ｎ — ｒ ｇ ｆ ｅ ｇ ｆａ ｅ
男性无精子症及严重少精子症患者的Y染色体微缺失筛查规范化分析
色体结构与数目异常者。ＡＺＦ检测采用多重ＰＣＲ方法，患者取外周血２ｍｌ，按照天根生化科技有
限公司提供的外周血基因组ＤＮＡ抽提试剂盒提取ＤＮＡ。按照欧洲男科协会（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ａｃａｄｅｍｙ
ｏｆ
Ａｎｄｒｏｌｏｇｙ，ＥＡＡ）和欧洲分子遗传实验质控网（Ｅｕｒｏｐｅａｎ
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ
最低。无精子症及少精子症患者选择辅助生殖技术生育子代之前，进行Ｙ染色体ＡＺＦ微缺失的 分子遗传学筛查应为常规检查项目。
【关键词】无精子症；Ｙ染色体微缺失；多重ＰＣＲ
一１１８．
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３：Ｊｆ＿％¨ｔＢ自ｆ曲（刚１３４‘ＹＢ‘ｓＹ２￥Ｊ ４胁、＾ｚＦ“ｓＹＢ４ｍｎ＾ｔ★￥女＾ｍｆ￡＾６眦
特异性。取扩增产物与上样缓冲液混合均匀后加入琼脂糖凝胶（Ｏ．５ ｇ／ｍｌＥＢ）中，凝胶成像仪观察 结果。
【结果】在２１８例患者中，发现Ｙ染色体微缺失３０例，缺失率为１３．７６％。共４种缺失类型，其中
ＡＺＦｂ区缺失ｌ例，ＡＺＦｃ区缺失２３例，ＡＺＦｂ＋ｃ区缺失５例，ＡＺＦｂ＋ｃ区及ＡＺＦａ区ｓＹ８４单位点缺
２：Ⅱ＃＊＆＾“ｎ＾６ＲＹ
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男性无精子症及严重少精子症患者的Y染色体微缺失筛查规范 化分析
作者： 作者单位： 孙璨， 朱勇， 杨施， 胡洪亮， 李铮 上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科 上海市男科学研究所精子发育与遗传学室 上海 市人类精子库 200001
和严重少精子症患者Ｙ染色体微缺失的筛查方法，研究分析无精子症和严重少精子症患者Ｙ染 色体微缺失的发生与分布情况，为临床诊断及治疗男性不育症提供依据。
70例严重少精症和无精症患者Y染色体微缺失检测
［ 关键词 】严重 少精症 ；无精症 ；Ｙ染 色体微缺失 ［ 中图分类号 ］ Ｒ ９ ． ［ ６ ８２ 文献标 识码 ］ Ａ ［ 文章编号 ］ １０ ２ ４ （００ ０ ０５ ０ ０ ８— ３４ ２ １ ） ３— １４— ２
Ｄｅ ｅ ｔｏ ｏ Ｃｈ ｏ ｓ ｍｅ Ｍ ｉｒ ｄ ｌｔｏ ｎ ７０ Ｉ ｆ ｒ ｉ ｅ ｔ ｖ ｒ ｉ ｏ ｏ ｓ ｅ ｍｉ ｏ ｓ ｅ － ｔｃ ｉ ｎ ｆ Ｙ ｒ ｍｏ ｏ ｅ ｏ ｅ ｅｉ ｎｓｉ ｎ ｅ ｔｌ Ｍ ｎ ｗｉｈ Ｓｅ ｅ ｅ Ｏｌｇ ｚ ｏ ｐ ｒ ａ ｏｒＡｚ ｏ ｐ ｒ ｅ
ｌｔ ｎ ． Ｍ ｅ ｈ ｄ ： Ｓ ｖ ｎｙ ｃ ｒ ｍｏ ｏ ｏｍａ ｎ ｅ ｔ ｅ ｍｅ ｉ ｅ ｅ ｅ ｏｉｏ ｏ ｓ ｅ ｍｉ ｒａ ｏ ｐ ｒ ｉ ｅ ｅ ｓ ｒ ｅ ｅ ｙ ｍｕ ｔ ｐ ｌ— ｅｉ ｓ ｏ ｔｏｓ ｅ ｅ ｔ ｈ ｏ ｓ ｍｅ ｎ ｒ ｌ ｆｒ ｌ ｎ ｗ ｔ ｓ ｖ ｒ ｌ ｚ ｏ ｐ ｒ ａ Ｏ ｚ ｏ ｅ ａ ｗ ｒ ｃ ｅ ｎ ｄ ｂ ｌ —ｏ ｙ ｉ ｉ ｈ ｇ ｍ ｉ ｌｅ ａ ｅｃ ａｎ ｒａ ｔ ｎ ｉ ｅ ｕ ｎ ｅｔｇ ｅ ｉ ｓｉ Ｆ 、 Ａ Ｆ ｎ Ｙ ｓ ｈ ｉ ｅ ｃｉ ｓｗ ｔ ６ ｓ ｑ ｅ ｃ ａ ｇ ｄ ｓ ｅ ＡＺ ａ ｏ ｈ ｔ ｎ Ｚ ｂ、ＡＺ ｃ ｒ ｇｏ Ｆ ｅ ｉｎ，ａ ｄ ２ ｏｍｏ ｐ ｒ ｅｍｅ ｓｃ ｎ ｒｌ ． Ｒｅ ｕ ｔ ： ｎ ０ ｎ ｒ ｓ ｅ ｍｉ ｎ ａ ｏ ｔ ｓ ｏ ｓｌ ｓ
37例无精子症及严重少精子症患者Y染色体微缺失检测分析
37例无精子症及严重少精子症患者Y染色体微缺失检测分析吕静;计垣;李练兵
【期刊名称】《重庆医学》
【年(卷),期】2004(33)11
【摘要】目的探讨Y染色体微缺失检测技术对男性不育患者的病因学诊断和遗传咨询的价值.方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测男性不育患者和正常男性Y染色体微缺失情况.结果 37例患者中Y染色体微缺失8例,缺失率21.6%.10例正常男性Y基因均得到扩增.结论 Y染色体微缺失是不明原因性无精子症或严重少精子症的病因之一,对临床上原因不明的无精子症或严重少精子症患者进行Y染色体微缺失检测是十分重要的.
【总页数】2页(P1730-1731)
【作者】吕静;计垣;李练兵
【作者单位】重庆市人口和计划生育科学技术研究院,400020;重庆市人口和计划生育科学技术研究院,400020;重庆市人口和计划生育科学技术研究院,400020
【正文语种】中文
【中图分类】R698.2
【相关文献】
1.无精子症及严重少精子症患者Y染色体微缺失类型与睾丸活检成熟精子检出率的相关性 [J], 刘兴章;唐运革;王奇玲;郑立新;邓顺美;周冰燚;刘晃;李铭臻
2.严重少精子症及非梗阻性无精子症患者Y染色体微缺失分析 [J], 王新阳;唐开发
3.PCR-荧光探针法检测严重少精子症或无精子症患者Y染色体微缺失的研究 [J], 杨洋;王树玉;周丽颖;白万凯
4.无精子症和严重少精子症患者Y染色体微缺失研究 [J], 杨艳红;苏明权;王晓红;罗亚宁;张顺;姚元庆
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特发性无精子症及严重少精子症患者Y染色体微缺失检测
特发性无精子症及严重少精子症患者Y染色体微缺失检测方小武;谭志伟;雷继敏;干志锋;吴日然;霍山【期刊名称】《中国生育健康杂志》【年(卷),期】2003(014)001【摘要】目的在广东中山地区建立Y染色体微缺失检测技术,将其应用于特发性无精子症或严重少精子症患者的病因学诊断及遗传咨询. 方法利用Y染色体特异序列标签位点,以多重PCR法检测特发性无精子症或严重少精子症患者及精液正常者的Y染色体微缺失情况. 结果无精子症或严重少精子症组35例,共检出Y染色体微缺失4例,缺失频率为11 %.其中,无精子因子C区缺失3例,无精子因子B区缺失1例.精液正常者组20例未发现Y染色体微缺失. 结论 Y染色体微缺失是造成男性无精子症或严重少精子症的病因之一,对临床上特发性无精子症或严重少精子症患者应进行Y染色体微缺失检测.【总页数】3页(P25-27)【作者】方小武;谭志伟;雷继敏;干志锋;吴日然;霍山【作者单位】528403,广东,中山市博爱医院生殖遗传医学中心;528403,广东,中山市博爱医院生殖遗传医学中心;528403,广东,中山市博爱医院生殖遗传医学中心;528403,广东,中山市博爱医院生殖遗传医学中心;528403,广东,中山市博爱医院生殖遗传医学中心;528403,广东,中山市博爱医院生殖遗传医学中心【正文语种】中文【中图分类】R69【相关文献】1.37例无精子症及严重少精子症患者Y染色体微缺失检测分析 [J], 吕静;计垣;李练兵2.PCR-荧光探针法检测严重少精子症或无精子症患者Y染色体微缺失的研究 [J], 杨洋;王树玉;周丽颖;白万凯3.佛山地区无精子症及严重少精子症患者Y染色体微缺失基因分析 [J], 吴智刚; 李炜煊; 李启欣; 李小蓝4.特发性无精子症和严重少精子症患者无精子因子的检测及其意义 [J], 宋宁宏;吴宏飞;张炜;钱立新;苏建堂;周作民;沙家豪5.180例无精子症或严重少精子症不育男性的Y染色体微缺失检测 [J], 方小武;谭志伟;雷继敏;韦剑洪;梁少霞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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作 者 单 位 ：３０ ６ 南 昌大 学 第 一 附 属 医 院 泌 外 研 究 所 ３００
自 １９ ９ ４年 Ｋ ｂ ｙｓ ｉ 采用 Ｐ Ｒ 方 法 对 不 育 ｏ ａ ａｈ 等 Ｃ
５ ２例 男 性无 精 子症 或 严 重 少 精 子 症 患 者 均 为 自 ２０ ０ ７年 １月至 ２ ０ ０ ８年 １ 在本 院进 行单 精子 卵 月
细 胞 浆 注 射 （ ｔ ｃｔｐａｍｉ ｓｅｍ ｉｊｃｉ ， Ｓ） ｉ ｒ ｙ ｌｓ ｃ ｐｒ ｅｔｎＩ Ｉ ｎａ ｏ ｎ ｏ Ｃ 治
［］ ｏ ｏｉＳ Ｎ ｋ ｔ Ｙ Ｓ ｋｔ Ｋ ｅ ａ． ｎ ｌ ｉ ｆｒｍｅｏ ｅｅｏｓｏ ２ Ｋ ｍ ｒ ， ａａａ ， ａ ａ ， ｔ １Ａ ａｙ ｓ ｏ ｉｒｄｌｔ ｎ ｆ ａ ｓ ｉ
Ｙ ｃ ｒ ｍｏ ｏ ｉ ｓｎ ｌ ｐ ｒ ｔ ｚ ｏ ｆｏ ｈ ｏ ｓ ｍｅ ｎ ａ ｉ ｇｅ ｓ ｅ ｍａｏ ｏ ｎ ｒ ｍ ａ ｍａ ｔ ｓ ｖ ｒ ｎ ｗｉｈ ｅ ｅ ｅ
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２ 结果
应 用 多重 聚合 酶链 反 应 ｆ Ｃ 对 部分 男 性不 育 患者 Ｐ Ｒ）
进 行 Ｙ染 色体 微 缺失 检 测 ． 了解 Ｓ Ｇ Ｐ Ｙ基 因 片断 的 缺 失情 况 ． 分析其 与 男性 不育 的关 系 ． 现报 告如 下 。 １ 资料 与方 法
１１ 研 究 对象 ．
电 泳后 样 板 置 紫 外 透 射仪 下 观
Ｈａｅ ａ ， ０ ２ １ １２： ８ ｌ ０２ ２２ １ ｒｆ ｈ ２ ０ ， ４ （） ７ 一 ８ ， ，２ ． ｕ １ ２
后 的细 胞缺 乏． 提示 在 青春 期减 数 分裂前 或 减数 分 裂 中精 子发 生 中断 ． 人 的睾 丸活 检 切片 中不 能发 病 现 任何表 型变化 大部 分人 Ａ Ｆ Ｚ ｂ缺失 引起 不育． 而
【 要】 目的 探 讨不育男性无精子症或 严重少精子症与 Ｙ染色体微缺失之 间的关 系 。 方法 利用 摘
多 重 Ｐ Ｒ 法 检 测 无 精 子 症 或 严 重 少精 子 症 患 者 的 Ｙ染 色 体 微 缺 失 情 况 结 果 Ｃ ５ ２例 无 精 子 症 或 严 重
Ｙ 染 色 体 微 缺 少 精 子 症 患 者 中 共检 出 Ｙ 染 色 体 微 缺 失 ４例 ， 失 率 为 ７６ ％。 精 液 正 常 者（ 照 组１２例 未 发 现 Ｙ 染 色 缺 ．９ 对 １ 体 微 缺 失 。４例 Ｙ染 色体 微 缺 失 的 无 精 子 症 患者 睾 丸 细 胞 学 检 查 均 未 发 现 精 子 。 结 论 失 是造 成 男 性 精 子 发 生 障碍 的常 见 病 因之 一
男性 ＳＧ Ｐ Ｙ基 因均得 到 Ｄ Ａ 扩 增产 物 见附 图 Ｎ ３ 讨论 Ｙ染 色体微 缺 失是 引起 男性 不育 的 常见 原 因之
一
１ 方 法 ． ２
１． Ｎ ．１ ２ Ｄ Ａ提 取 取 患 者 外 周 血 １ ． Ｄ Ａ抗凝 。 ｍ１Ｅ Ｔ Ｃ ｅ ｘ １ ０提取 Ｄ Ａ。 ｈｌ 一 ０ ｅ Ｎ
察 分 析带 纹 ， 检测 ｓ Ｇ Ｐ Ｙ基 因有无 缺失 。
５ 标 本 中检 出 Ｓ Ｇ ２例 Ｐ Ｙ基 因缺 失 ４例 ． 失 率 缺
７６ ％。其 中无 精子 症 ３例 ．约 占无 精 子 症 患者 的 ． ９ ６６ ％： 重 少 精子 症 １ 。 占严重 少 精 子症 患 者 ． ７ 严 例 约
男 性 外 周 血 Ｄ Ａ进 行 Ｙ 染 色 体 微 缺 失 域 研 究 以 Ｎ 来 ． 已 经 确 定 Ｙ 染 色 体 上 Ａ Ｆ 、Ｚ ｂＡ Ｆ Ｚ ａ Ａ Ｆ 、 Ｚ ｃ和 ＡＦ Ｚ ｄ是 与精子 生成相 关 的 ４个 区域 Ａ Ｆ Ｚ ａ缺 失者
７ ％表现 为仅 有 Ｓ ｒ ｌ细 胞 ．５ ５ ｅｔ ｉ ｏ ２ ％有 部 分 精 子 生 成
Ｃ Ｔ Ａ ＴＩ Ｇ 一 ’ Ａ Ｆ ＡＧ ＴＡ Ｃ ３ ；反 向 弓 物 ： ’ Ａ Ａ ＴＩＴ— Ｉ ５ 一 Ｃ Ａ ｒ ｒ １
Ｇ Ｔ Ｇ Ｃ Ｇ ＡＣ Ｃ Ａ 一 ’ Ａ Ａ Ｔ Ｔ Ａ Ａ Ａ ＧＣ ３ 扩增 产 物 ４ ０ ｐ ： ６ ｂ 对
照 引物 ： Ｈ ０ｆ ｌｂｎ ’ Ｇ Ａ Ａ Ｃ Ａ Ｇ Ａ Ａ Ｇ ２ ｇ ｉ１ 一 Ａ Ｇ Ｇ Ｃ Ａ Ｇ Ｃ Ｇ ｏ ５
Ｅｘ ｅ ｉ ｎａ ｐｒ ｍｅ ｔｌ＆ Ｌ ｂ Ｍｅ ． ｃ ｍｂ ｒ ０ ８ Ｖｏ ６ Ｎｏ ａ ｄ Ｄｅ ｅ ｅ ２ ０ ． ｌ２ 。 ６
结果 显示该基 因可 能与精 子发 生相关 我们 的研 究
中得 到的精子 发生 相关 基 因 Ｓ Ｇ Ｐ Ｙ的缺失率 与 国 内 同行 报 道 的 Ｙ染 色 体微 缺 失 的缺 失率 基本 一致 【 ｌ ｌ １ 与 已有文献报 道 Ｙ染 色体微 缺失 主要见 于 Ａ Ｆ Ｚ ｃ相 符【 。
疗 的患 者 ， 按照 ＷＨＯ的诊 断 标准 。 诊 为无 精 症 和 确
少精 症 ． 中无 明确 病 因 的无 精症 患者 ４ 其 ５例 ． 精 少
症 患 者 ７例 ，常 规 染 色 体 核 型 分 析 均 为 正 常 ｆ６ ４，
ＸＹ１ 。
的 ｌ ．９ ４２ ％ ４例 Ｙ染 色体 微缺 失 的无精 子症 患者 睾 丸细 胞 学检 查 均未 发 现 精 子 对 照 组 中 １ 健 康 ２例
Ｔ ＡＣ 一 ’扩 增产 物 ２ ０ Ｄ Ｃ Ｃ３， ５ｂ 。
ｌ ． 多 重 Ｐ Ｒ 反 应 试 剂 由大 连 宝 生物 工 程 公 －３ ２ Ｃ
司提供 。 总反应 体 ５ 。 ０ Ｃ ０ ｌ ５ ｌ Ｒ反应 体 系包括 去 Ｐ 离 子 水 、 冲 液 、 Ｎ Ｐ、 缓 ｄ Ｔ 引物 、 ａ Ｎ Ｔ ｑ Ｄ Ａ聚 合 酶 以及 模板。 Ｃ Ｐ Ｒ反应 条件 ９ ｏ ｒ ｎ ９ ℃ ３ ｓ６ ｃ ５ ． ３Ｃ ３ ｉ ，３ ０ ，５Ｉ２ ｓ ａ Ｃ ７ ℃ ４ ｓ３ ２ ５ 。０个 循环 。２Ｃ ｌ ｍ ｎ ７ ｏ Ｏ ｉ 。所 使用 Ｐ Ｒ 扩 增 Ｃ
首 次证 实 部 分 特 发 性 的 睾 丸 生 精 障 碍 与 男 性 Ｙ 染
色 体微 缺 失 相 关 ． 后 对 Ｙ 染色 体 微缺 失 的研 究 此 日益 深 入 和广 泛 近 年 来研 究 表 明 ． 性 原％存 在 Ｙ染 色 体 上 ．％～ ５
实 验 与检 验 医学
２０ ０ ８年 １ ２月 第 ２ ６卷
第 ６期
・
实验研究・
无精 症或严重 少精症 患者 Ｙ染 色体微缺 失 的检测
黄 学明 王共先 胡红林 冯 亮 李冬水 汪 泱 中图分类号 Ｒ ９ ． Ｑ ５ ．３ ．３ ３２ ６ ８ ９ ４４ ＊ Ｑ ４ ． ． ４ ２ ＊ 文献标识码 Ａ 文章编号 １ ７— ９２ ０）６ ０ ３ — ３ ６ ４ １２ （０ ８０ — ６ ７ ０ １
色体 功能 研究 的新 领域 。经 过 近 ３ Ｏ年 的研究 ． 目前 将Ｙｌ ｑ １划分 为 Ａ Ｆ 、 Ｚ ｂ和 Ａ Ｆ Ｚ ａＡ Ｆ Ｚ ｃ３个互 相 并不
重叠 的 区域 ． 发现 了至 少 １ ５个 与精 子发 生相关 的基
因嘲 。
基 因 引 物序 列 ．正 向 引 物 ：’ ｒ Ａ Ａ Ａ Ａ Ｃ ５一 Ｃ Ｃ Ｔ Ｃ Ｇ — 几Ｔ
无 精 子 因子 Ａ Ｆ区域微 缺 失【 我 院 自 ２ ０ Ｚ ３ Ｊ ０ ７年 起 ．
仪 为 Ｐ ９０ Ｅ ６ ０型 ｆＥ公 司 ． 国１ Ｐ 美 。为 避 免 假 阳性 结
果， 所有 的缺失标 本都 至 少检测 ３次 ． 对所 缺失 的 并 片 段进行 多 重 Ｐ Ｒ 扩增 以进 一步验 证 Ｃ １ ． 琼 脂糖 电泳 Ｐ Ｒ扩 增产 物 １ ｐ ．置 ｌ ．４ ２ Ｃ ０￣ １ ％琼 脂糖 凝胶 电泳 ３ ｍ ｎ ０ ｉ １ ． 结 果 分析 ．５ ２
附 图 Ｐ Ｒ产 物 ｌ 脂 糖 凝 胶 电泳 ： Ｍａｋ ｒ１健 康 男 性 ： 水 Ｃ ％琼 Ｍ： ｒｅ； ： ２：
３ ５ 男 性 无 精 子症 或 严 重 少 精 子 症 患者 。 －：
生相 关基 因微缺 失可能 通过辅 助生殖技 术传递 到患 者 的男 性后代 『． ｌ 因此 ． ３ ｊ Ｙ染 色体微 缺 失 的筛 查 和患 者选 择 临床治疗 方式 的遗传咨 询也是值 得关 注的 问
Ｉ 词 】 男 性 不育 ； 染 色 体微 缺 失 ； 精 子 症 ； 重 少 精 子 症 关键 Ｙ 无 严
据 ＷＨＯ调查 ． 在育 龄 夫 妇 当 中约有 １％～ ５ ０ １％ 患 者不 育 ， 中男 性 因 素约 占 ４ ％～ ０ ． 其 ０ ５ ％ 而精 子 生 成 障碍 的则 占其 中的 ３ ％『 自 １７ ０ １ ］ 。 ９ ６年 ． 国外 学 者
常 规将 Ｙ 染 色体 微 缺 失 的筛 查 作 为对 男 性 不
育患 者 的一项 常规 检查项 目， 以利于长 期 、 系统 开展 研究 ： 对原 因不 明无 精子 症 或严 重少 精 子症 患 者进
行 Ｙ染 色体 微缺 失 检测 ． 以明确 患者 生精 障碍 的原 因， 为诊 断与 治疗 提供 指导 。由于 Ｙ染色体 精 子发
．
１７ ９ ６年 ． ｉ ｏｏ研究 发 现 Ｙ染 色体 的 Ｙ １ Ｔｅ ｌ ｐ ｑ １区