第四章 植物细胞工程的基本原理和技术基础
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SH培养基。
③中等无机盐含量培养基 大量元素约为MS培养基的一半，微量元素种
类减少，但含量较MS的高，维生素种类比MS多，
如增加了生物素、叶酸等。适合于花药培养，主
要有Nitch，NT、H、Miller培养基。
④低无机盐含量培养基 大量元素含量大幅度降低而且种类减少，有机
含量相对也很低。多数用于生根培养基，主要有
4.2.1.2 培养基的种类和配制 MS培养基 它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟 草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为 较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可 满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他 培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和 原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而 来的。 B5培养基 是1968年由Galmborg等为培养大豆根细胞 而设计的。其主要特点是含有较低的铵，这可能对不 少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在 B5培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植 物。
White培养基
是1943年由White为培养番茄根尖而设
计的。1963年又作了改良，称作White改良培养基，提 高了MsSO4的浓度和增加了硼素。其特点是无机机盐数
量较低，适于生根培养。
N6培养基 是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药
培养而设计的。其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）
（2）培养基的配制 配制培养基前，为了使用方便和用量准确， 常将大量元素、微量元素、铁盐、有机物类和激
素类分别配制成比培养基浓度大若干倍的母液。
当配制培养基时，只需按预先计算好的量吸取母
液稀释即可。
母液应保存在冰箱中备用，保存时间不可过 长，当母液出现沉淀或霉菌团时，则不能使用。 贮备液（母液）的配制： a、方便 b、准确（有些成分量太小）
而盐酸吡哆醇（VB6）促进根的生长，烟酸（VB3，
又称维生素PP）促进胚的发育。有的配方中还使用
了泛酸钙（VB5）、生物素（VH）、钴胺素 （VB12）、叶酸（VBc），Vc等。
（4）植物生长物质
植物激素是在植物体内合成的，对植物生长
发育有显著调节作用的微量有机物，而植物生长
调节剂是外源的调节植物生长发育的物质。
的培养基）主要有MS、White、 N6、B5 、改良
MS、Heller、Nitsh、SH、 Miller等。完全培养
基就是பைடு நூலகம்本培养基的基础上，根据试验的不同需
要，附加一些物质，如生长调节物质和其他复杂 有机物质等。
培养基的筛选： 1.无机营养成分：一般在现有培养基配方中选择。可 以参考前人的经验，例如：MS是广谱性培养基，N6用
3、称取琼脂蔗糖备用
4、融化
用搪瓷量杯量取600～700ml的蒸馏水放在电炉
上，加入琼脂，边加热边用玻璃棒搅拌，直到液体
呈半透明状将其取下，加入蔗糖。 大烧杯底的外表面不能沾水，否则加热时烧杯 容易炸裂，使溶液外溢，造成烫伤。
5、混合 将融化的琼脂和母液充分混合，用蒸馏水定容到 1000ml，来回混合几次。
胞(木质化细胞) > 特化细胞(筛管、导管细胞)；
根据细胞所处的组织不同从强到弱为：
顶端分生组织 > 居间分生组织 > 侧生分生组
织 > 薄壁组织(基本组织) > 厚角组织 > 输导组 织 > 厚壁组织。
脱分化：具有特异结构和功能的细胞转化成没 有特异结构和功能的细胞的过程称为脱分化。（如
根、茎、叶）
3、诱导休眠、促进衰老和脱落。
以上四种生长调节物质，前两类用的多，后两类只
是补充，对某些植物有利、对某些植物不仅没有利，
还有害，实际工作中要具体分析。
生长调节物质在生物体内存在甚微，浓度很低，一
般用ppm表示 1ppm=1mg/L
（5）有机附加物 ①肌醇（环己六醇） 肌醇可以形成果胶物质，是细胞壁的构建物质另外 还可以形成植酸，与阳离子结合或形成磷脂，参与细胞 膜的组成。利于胚和芽的形成 ②天然有机物 一些天然的有机物如椰乳、番茄提取物、酵母提取 物、马铃薯煮汁也常用于植物组织培养，并表现出了良 好的促进作用。 ③AA类物质 绝大多数AA适量时对培养效果都有正象效应。常用 的有Gly、Asn、Gln。在植物组织培养中，有时也用水 解乳蛋白和水解酪蛋白。
4.2
植物细胞和组织培养所需的营养和环境条件
4.2.1
4.2.2
培养基的组成和配制
影响植物组织培养的环境条件
4.2.1
培养基的组成和配制
培养基的基本成分
4.2.1.1
（1）无机成分
培养的植物组织、器官、细胞或者原生质体
需要连续的供给某些无机化学物质，除了C、H、O
之外，需要量比较多的元素叫大量元素，需要量 比较少的元素叫微量营养元素。
一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能
力称之为细胞的全能性。
细胞全能性的绝对性与相对性:
不是所有基因型的所有细胞在任何条件下都具
有良好的培养反应;即使对于植物细胞而言，细胞
全能性也并不意味着任何细胞均可以直接产生植物 个体；动、植物细胞全能性的表现程度存在明显的 差异。
植物细胞全能性表现根据细胞类型不同从强到弱: 营养生长中心 > 形成层 > 薄壁细胞 > 厚壁细
齐全，比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲
性，养分数量及比例比较合适，广泛用于植物的器
官、花药、细胞及原生质体的培养。主要有MS、LS、 BL、BM、ER培养基。
②高硝态氮培养基
硝酸钾含量高，氨态氮的含量低，含有较高
的VB1。主要适合与木本植物、十字花科植物和
单子叶植物的组织和花药培养。主要有B5、N6、
培养基的配制步骤： 1、计量 根据配制培养基的量和母液的浓度计算需要吸取 母液的量，计算公式：吸取量 ml=培养基中物质的含 量（mg/L）×1000ml/母液浓度（mg/L）。 2、移液 取医用瓷缸一只，加入少量的蒸馏水，按照计算 吸取母液的量依次吸取各母液置于医用瓷量杯中备用。 注意 （1）用量筒或移液管量取培养基母液之前， 必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次。 （2）量取母液时，不要漏掉或多加。（3）移液管不 能混用。
再分化：是指离体培养物可以由脱分化状态再
度分化。包括细胞分化、组织分化和器官分化递进
地进行，最后再生完整植株。
4.1.2
植物激素的调控作用
激素在细胞分化中的作用，可能是通过在转录
或翻译水平上的调节作用而影响相关基因的表达从
而调控细胞分化。但应该注意到，在植物中细胞种
类的不同或同一种细胞不同的发育状态，均会影响 该种细胞对激素的反应，即靶细胞反应差异，所以 试图寻找不同激素在分化中作用的共同模式可能是 很困难的。
培养中温度、光照、湿度等各种环境条件，培养
基组成、pH值、渗透压等各种化学环境条件都会影
响组织。
4.2.2.1 25±2℃。
温度
培养都是在23～27℃之间进行，一般采用 喜温性植物：茄科、禾本科、兰科等。培养温
2、对形成层的细胞分化有影响，往往同生长素有协
同作用。IAA/GA比值高有利于木质部的分化，比值 低有利于韧皮部的分化。 3、破除种子、鳞茎、块茎休眠，使之提前萌发。 4、对生长素和细胞分裂素的活性有增效作用。
注：不耐热，应采用过滤灭菌加入。
脱落酸（ABA） 生理作用：
1、抑制蛋白质的合成。
2、抵消和抑制生长素、细胞分裂素、GA的作用。
（2）碳源 糖在培养基的作用：
①为细胞提供合成新物质的碳骨架
②为细胞的呼吸代谢提供底物和能量
③维持渗透压
蔗糖是广泛应用的一种碳源。葡萄糖和麦芽糖 也是常用的碳源。
（3）维生素类 维生素类物质在酶系统中有催化功能。 硫胺素（VB1）与愈伤组织的产生和生活力有
关，可能是所有植物组织培养初期需要的维生素，
White、Heller、WS、HE、HB。
根据培养物的培养过程，培养基分为初代培养基 和继代培养基。初代培养基是指用来第一次接种外植
体的培养基。继代培养基是指用来接种继初代培养物
的培养基。
根据其作用不同，培养基分为诱导培养基、增殖
培养基和生根培养基。
根据其营养水平不同，培养基可分为基本培 养基和完全培养基。基本培养基（就是通常称呼
基嘌呤。
功能：
1、促进细胞的分裂和分化 2、诱导芽的分化 3、促进侧芽的萌发和生长 4、抑制衰老
控制植物细胞分化： 分裂素/生长素的比例是控制芽和根形成的一个重要
条件。
比例高时——产生芽,比例低时——产生根。
赤霉素（GA3）
生理作用：
1、诱导茎的细胞伸长，对矮生型植物恢复成高生型
特别有效，对根无效。
7、分装 溶化的培养基应该趁热分装。注意不要让培养基 沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶
容量的1/5～1/4。每1L培养基，可分装20～30瓶。
8、包扎
用封口膜封口，外边可加一层牛皮纸，扎好绳子，
用铅笔或碳素墨水笔在牛皮纸上写上培养基的代号。 9、培养基的灭菌
4.2.2
影响植物组织培养的环境条件
2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植
物的花药培养和其他组织培养。 KM—8P培养基 它是1974年为原生质体培养而设计的。 其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维 生素，广泛用于原生质融合的培养。
（1）培养基的种类（根据无机盐的浓度）：
①高无机盐含量培养基
钾盐、铵盐及硝酸盐含量较高，微量元素种类
大量元素
培养基的大量元素使用量一般在每
升几十至几千毫克。大量元素包括N, P, K, Ca, Mg, S。培养基中加入量最多的是N，N一般以硝酸盐或氨
盐，或者两者结合的盐提供。
微量元素 微量元素的用量一般每升不高于几
十毫克。植物所需的微量元素有Fe、Cu、Zn、B、
Mo、Mn、Co，Cl 其他一些化学药品常带有微量元素杂质，因此 要注意微量元素的用量不能过多，多会引起生长抑 制等毒害现象。
于单子叶植物的培养。豆科多用B5培养基。
2、植物生长调节剂：必须进行筛选试验。总体原则-
当诱导愈伤组织形成时，细胞分裂素和生长素相对平
衡；诱导芽分化时，细胞分裂素水平应高于生长素， 诱导根则要低。 3、有机成分要根据培养类型考虑，如进行器官和组 织培养，一般不加复杂有机成分，而进行细胞和原生 质体培养则要加。
生长素的生理作用
1、促进细胞生长和细胞分裂。
2、诱导受伤组织表面细胞恢复分裂能力。
3、形成愈伤组织，促进生根。
4、与一定量的细胞分裂素配合共同诱导不定芽的
分化、侧芽的萌发与生长、胚状体的诱导。
细胞分裂素 是一类腺嘌呤衍生物。主要有激动素（ 6糠基氨基嘌呤KT）、6-苄基氨基嘌呤（6-BA）
和玉米素（ZT）等。其中最常用的是6—苄基氨
无机元素和有机营养构成的培养基仅保证培 养物的生存与最低生理活动，只有加入植物生长 调节物质，才能诱导细胞分裂、脱分化和再分化。
生长素类：
1）吲哚类：IAA（吲哚乙酸）、 IBA（吲哚丁
酸） 、IPA（吲哚丙酸）
2）萘酸类： NAA（萘乙酸）
3）苯氧羧酸类：2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）、 2,4,5-T（ 2,4,5-三氯苯氧乙酸）、 2,4,5-TP （ 2,4,5-三氯苯氧丙酸）等。 其中吲哚乙酸在植物体内普遍存在，是生理活性最 强的生长素。
4.1
植物细胞工程的基本原理 植物细胞的全能性 1934年，White首次定义为: 每个植物活细胞在合
4.1.1
适的条件下，都有发育为胚的能力。
70年代，扩大了以上定义范围，为：植物活细胞
不但能形成胚状体，而且能发育为完整植株。
80年代初，认为：任何植物的离体细胞在人工培 养下都具有它们母体植株的那种合成药用成分的能力， 即培养细胞的药物生物合成的能力。
6、调pH
用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH或HCl
溶液，逐滴滴入溶化的培养基中，边滴边搅拌，并随
时用精密的pH试纸(5.4～7.0)测培养基的pH，一直到 培养基的pH达到要求为止(在调制时要比目标pH值偏 高0.2～0.5个单位，因为培养基在灭菌过程中由于糖 等物质的降解，pH值会下降0.2～0.5个单位左右)。
第四章
植物细胞工程的基本原 理和技术基础
4.1
植物细胞工程的基本原理
4.2 植物细胞和组织培养所需条件 4.3 外植体的选择及消毒 4.4 外植体的切取和培养
植物细胞工程的含义：通过细胞、组织、器官
培养以及细胞融合等，达到改良品种、快速繁殖或
生产生物产品的一种技术。
研究内容： 细胞工程基本技术 细胞、组织、器官培养 原生质体培养 细胞融合及培养
③中等无机盐含量培养基 大量元素约为MS培养基的一半，微量元素种
类减少，但含量较MS的高，维生素种类比MS多，
如增加了生物素、叶酸等。适合于花药培养，主
要有Nitch，NT、H、Miller培养基。
④低无机盐含量培养基 大量元素含量大幅度降低而且种类减少，有机
含量相对也很低。多数用于生根培养基，主要有
4.2.1.2 培养基的种类和配制 MS培养基 它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟 草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为 较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可 满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他 培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和 原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而 来的。 B5培养基 是1968年由Galmborg等为培养大豆根细胞 而设计的。其主要特点是含有较低的铵，这可能对不 少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在 B5培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植 物。
White培养基
是1943年由White为培养番茄根尖而设
计的。1963年又作了改良，称作White改良培养基，提 高了MsSO4的浓度和增加了硼素。其特点是无机机盐数
量较低，适于生根培养。
N6培养基 是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药
培养而设计的。其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）
（2）培养基的配制 配制培养基前，为了使用方便和用量准确， 常将大量元素、微量元素、铁盐、有机物类和激
素类分别配制成比培养基浓度大若干倍的母液。
当配制培养基时，只需按预先计算好的量吸取母
液稀释即可。
母液应保存在冰箱中备用，保存时间不可过 长，当母液出现沉淀或霉菌团时，则不能使用。 贮备液（母液）的配制： a、方便 b、准确（有些成分量太小）
而盐酸吡哆醇（VB6）促进根的生长，烟酸（VB3，
又称维生素PP）促进胚的发育。有的配方中还使用
了泛酸钙（VB5）、生物素（VH）、钴胺素 （VB12）、叶酸（VBc），Vc等。
（4）植物生长物质
植物激素是在植物体内合成的，对植物生长
发育有显著调节作用的微量有机物，而植物生长
调节剂是外源的调节植物生长发育的物质。
的培养基）主要有MS、White、 N6、B5 、改良
MS、Heller、Nitsh、SH、 Miller等。完全培养
基就是பைடு நூலகம்本培养基的基础上，根据试验的不同需
要，附加一些物质，如生长调节物质和其他复杂 有机物质等。
培养基的筛选： 1.无机营养成分：一般在现有培养基配方中选择。可 以参考前人的经验，例如：MS是广谱性培养基，N6用
3、称取琼脂蔗糖备用
4、融化
用搪瓷量杯量取600～700ml的蒸馏水放在电炉
上，加入琼脂，边加热边用玻璃棒搅拌，直到液体
呈半透明状将其取下，加入蔗糖。 大烧杯底的外表面不能沾水，否则加热时烧杯 容易炸裂，使溶液外溢，造成烫伤。
5、混合 将融化的琼脂和母液充分混合，用蒸馏水定容到 1000ml，来回混合几次。
胞(木质化细胞) > 特化细胞(筛管、导管细胞)；
根据细胞所处的组织不同从强到弱为：
顶端分生组织 > 居间分生组织 > 侧生分生组
织 > 薄壁组织(基本组织) > 厚角组织 > 输导组 织 > 厚壁组织。
脱分化：具有特异结构和功能的细胞转化成没 有特异结构和功能的细胞的过程称为脱分化。（如
根、茎、叶）
3、诱导休眠、促进衰老和脱落。
以上四种生长调节物质，前两类用的多，后两类只
是补充，对某些植物有利、对某些植物不仅没有利，
还有害，实际工作中要具体分析。
生长调节物质在生物体内存在甚微，浓度很低，一
般用ppm表示 1ppm=1mg/L
（5）有机附加物 ①肌醇（环己六醇） 肌醇可以形成果胶物质，是细胞壁的构建物质另外 还可以形成植酸，与阳离子结合或形成磷脂，参与细胞 膜的组成。利于胚和芽的形成 ②天然有机物 一些天然的有机物如椰乳、番茄提取物、酵母提取 物、马铃薯煮汁也常用于植物组织培养，并表现出了良 好的促进作用。 ③AA类物质 绝大多数AA适量时对培养效果都有正象效应。常用 的有Gly、Asn、Gln。在植物组织培养中，有时也用水 解乳蛋白和水解酪蛋白。
4.2
植物细胞和组织培养所需的营养和环境条件
4.2.1
4.2.2
培养基的组成和配制
影响植物组织培养的环境条件
4.2.1
培养基的组成和配制
培养基的基本成分
4.2.1.1
（1）无机成分
培养的植物组织、器官、细胞或者原生质体
需要连续的供给某些无机化学物质，除了C、H、O
之外，需要量比较多的元素叫大量元素，需要量 比较少的元素叫微量营养元素。
一个细胞所具有的产生完整生物个体的固有能
力称之为细胞的全能性。
细胞全能性的绝对性与相对性:
不是所有基因型的所有细胞在任何条件下都具
有良好的培养反应;即使对于植物细胞而言，细胞
全能性也并不意味着任何细胞均可以直接产生植物 个体；动、植物细胞全能性的表现程度存在明显的 差异。
植物细胞全能性表现根据细胞类型不同从强到弱: 营养生长中心 > 形成层 > 薄壁细胞 > 厚壁细
齐全，比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲
性，养分数量及比例比较合适，广泛用于植物的器
官、花药、细胞及原生质体的培养。主要有MS、LS、 BL、BM、ER培养基。
②高硝态氮培养基
硝酸钾含量高，氨态氮的含量低，含有较高
的VB1。主要适合与木本植物、十字花科植物和
单子叶植物的组织和花药培养。主要有B5、N6、
培养基的配制步骤： 1、计量 根据配制培养基的量和母液的浓度计算需要吸取 母液的量，计算公式：吸取量 ml=培养基中物质的含 量（mg/L）×1000ml/母液浓度（mg/L）。 2、移液 取医用瓷缸一只，加入少量的蒸馏水，按照计算 吸取母液的量依次吸取各母液置于医用瓷量杯中备用。 注意 （1）用量筒或移液管量取培养基母液之前， 必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次。 （2）量取母液时，不要漏掉或多加。（3）移液管不 能混用。
再分化：是指离体培养物可以由脱分化状态再
度分化。包括细胞分化、组织分化和器官分化递进
地进行，最后再生完整植株。
4.1.2
植物激素的调控作用
激素在细胞分化中的作用，可能是通过在转录
或翻译水平上的调节作用而影响相关基因的表达从
而调控细胞分化。但应该注意到，在植物中细胞种
类的不同或同一种细胞不同的发育状态，均会影响 该种细胞对激素的反应，即靶细胞反应差异，所以 试图寻找不同激素在分化中作用的共同模式可能是 很困难的。
培养中温度、光照、湿度等各种环境条件，培养
基组成、pH值、渗透压等各种化学环境条件都会影
响组织。
4.2.2.1 25±2℃。
温度
培养都是在23～27℃之间进行，一般采用 喜温性植物：茄科、禾本科、兰科等。培养温
2、对形成层的细胞分化有影响，往往同生长素有协
同作用。IAA/GA比值高有利于木质部的分化，比值 低有利于韧皮部的分化。 3、破除种子、鳞茎、块茎休眠，使之提前萌发。 4、对生长素和细胞分裂素的活性有增效作用。
注：不耐热，应采用过滤灭菌加入。
脱落酸（ABA） 生理作用：
1、抑制蛋白质的合成。
2、抵消和抑制生长素、细胞分裂素、GA的作用。
（2）碳源 糖在培养基的作用：
①为细胞提供合成新物质的碳骨架
②为细胞的呼吸代谢提供底物和能量
③维持渗透压
蔗糖是广泛应用的一种碳源。葡萄糖和麦芽糖 也是常用的碳源。
（3）维生素类 维生素类物质在酶系统中有催化功能。 硫胺素（VB1）与愈伤组织的产生和生活力有
关，可能是所有植物组织培养初期需要的维生素，
White、Heller、WS、HE、HB。
根据培养物的培养过程，培养基分为初代培养基 和继代培养基。初代培养基是指用来第一次接种外植
体的培养基。继代培养基是指用来接种继初代培养物
的培养基。
根据其作用不同，培养基分为诱导培养基、增殖
培养基和生根培养基。
根据其营养水平不同，培养基可分为基本培 养基和完全培养基。基本培养基（就是通常称呼
基嘌呤。
功能：
1、促进细胞的分裂和分化 2、诱导芽的分化 3、促进侧芽的萌发和生长 4、抑制衰老
控制植物细胞分化： 分裂素/生长素的比例是控制芽和根形成的一个重要
条件。
比例高时——产生芽,比例低时——产生根。
赤霉素（GA3）
生理作用：
1、诱导茎的细胞伸长，对矮生型植物恢复成高生型
特别有效，对根无效。
7、分装 溶化的培养基应该趁热分装。注意不要让培养基 沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶
容量的1/5～1/4。每1L培养基，可分装20～30瓶。
8、包扎
用封口膜封口，外边可加一层牛皮纸，扎好绳子，
用铅笔或碳素墨水笔在牛皮纸上写上培养基的代号。 9、培养基的灭菌
4.2.2
影响植物组织培养的环境条件
2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植
物的花药培养和其他组织培养。 KM—8P培养基 它是1974年为原生质体培养而设计的。 其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维 生素，广泛用于原生质融合的培养。
（1）培养基的种类（根据无机盐的浓度）：
①高无机盐含量培养基
钾盐、铵盐及硝酸盐含量较高，微量元素种类
大量元素
培养基的大量元素使用量一般在每
升几十至几千毫克。大量元素包括N, P, K, Ca, Mg, S。培养基中加入量最多的是N，N一般以硝酸盐或氨
盐，或者两者结合的盐提供。
微量元素 微量元素的用量一般每升不高于几
十毫克。植物所需的微量元素有Fe、Cu、Zn、B、
Mo、Mn、Co，Cl 其他一些化学药品常带有微量元素杂质，因此 要注意微量元素的用量不能过多，多会引起生长抑 制等毒害现象。
于单子叶植物的培养。豆科多用B5培养基。
2、植物生长调节剂：必须进行筛选试验。总体原则-
当诱导愈伤组织形成时，细胞分裂素和生长素相对平
衡；诱导芽分化时，细胞分裂素水平应高于生长素， 诱导根则要低。 3、有机成分要根据培养类型考虑，如进行器官和组 织培养，一般不加复杂有机成分，而进行细胞和原生 质体培养则要加。
生长素的生理作用
1、促进细胞生长和细胞分裂。
2、诱导受伤组织表面细胞恢复分裂能力。
3、形成愈伤组织，促进生根。
4、与一定量的细胞分裂素配合共同诱导不定芽的
分化、侧芽的萌发与生长、胚状体的诱导。
细胞分裂素 是一类腺嘌呤衍生物。主要有激动素（ 6糠基氨基嘌呤KT）、6-苄基氨基嘌呤（6-BA）
和玉米素（ZT）等。其中最常用的是6—苄基氨
无机元素和有机营养构成的培养基仅保证培 养物的生存与最低生理活动，只有加入植物生长 调节物质，才能诱导细胞分裂、脱分化和再分化。
生长素类：
1）吲哚类：IAA（吲哚乙酸）、 IBA（吲哚丁
酸） 、IPA（吲哚丙酸）
2）萘酸类： NAA（萘乙酸）
3）苯氧羧酸类：2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）、 2,4,5-T（ 2,4,5-三氯苯氧乙酸）、 2,4,5-TP （ 2,4,5-三氯苯氧丙酸）等。 其中吲哚乙酸在植物体内普遍存在，是生理活性最 强的生长素。
4.1
植物细胞工程的基本原理 植物细胞的全能性 1934年，White首次定义为: 每个植物活细胞在合
4.1.1
适的条件下，都有发育为胚的能力。
70年代，扩大了以上定义范围，为：植物活细胞
不但能形成胚状体，而且能发育为完整植株。
80年代初，认为：任何植物的离体细胞在人工培 养下都具有它们母体植株的那种合成药用成分的能力， 即培养细胞的药物生物合成的能力。
6、调pH
用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH或HCl
溶液，逐滴滴入溶化的培养基中，边滴边搅拌，并随
时用精密的pH试纸(5.4～7.0)测培养基的pH，一直到 培养基的pH达到要求为止(在调制时要比目标pH值偏 高0.2～0.5个单位，因为培养基在灭菌过程中由于糖 等物质的降解，pH值会下降0.2～0.5个单位左右)。
第四章
植物细胞工程的基本原 理和技术基础
4.1
植物细胞工程的基本原理
4.2 植物细胞和组织培养所需条件 4.3 外植体的选择及消毒 4.4 外植体的切取和培养
植物细胞工程的含义：通过细胞、组织、器官
培养以及细胞融合等，达到改良品种、快速繁殖或
生产生物产品的一种技术。
研究内容： 细胞工程基本技术 细胞、组织、器官培养 原生质体培养 细胞融合及培养