宫颈液基细胞学介绍及制片体会

宫颈液基细胞学介绍及制片体会作者：益莉娜刘尽国王秀玲丁佩芬张金宇

近年来宫颈癌的发病年龄趋于年轻化，使宫颈癌的预防和筛查形势更加严峻。因此，早发现早治疗，将其阻断在癌前病变阶段显得尤为重要。随着细胞病理学的发展，液基细胞学(LCT)又称自动薄层制片技术改革了标本的采集和处理方法，以其良好的性能和理想的染色效果已开始逐步取代人工染色。因为传统宫颈涂片在标本取材与制作上存在许多缺陷，使筛查的假阴性率一直较高。其主要原因：(1)标本需要诊断的上皮细胞没被取到玻片上。(2)传统宫颈涂片质量较差，背景中存在在量黏液，血液及炎细胞遮盖了上皮细胞，使阅读者易产生疲劳感而影响正常判断。

我院自2009年8月引进超柏氏液基自动薄层细胞学制片技术以来，已制片4000余张。现将该技术的要点和使用体会介绍如下：1材料与方法

1.1仪器与试剂采用新顺国际有限公司AutoCytePrep液基薄层细胞自动制片机。随机配备的一次性材料包括：细胞采集器、细胞收集瓶、标本转移注射器、试管、吸嘴、胶环、载波片及0.75苏木精和EA/OG等。

1.2染色过程

1.2.1标本采集临床医师将采集器上的宫颈刷置入宫颈口旋转数圈，将采集到子宫颈脱落细胞的宫颈刷直接置入存有细胞保存液的收

集瓶内，保存液使红细胞和粘液降解，以利制片。

1.2.2细胞标本的转移和离心在人工控制下，经涡旋振荡使采集器上的细胞进入瓶内液体中，样本吸取机自动完成标本的混悬，并将其移入盛有比重液的试管中。经过两次离心，液体吸取组件吸走上层悬浮液，除去样本中的非诊断性成分，如细胞碎屑、粘液等，使有诊断价值的细胞富集于试管底部，试管放在振荡器上，试管底部的凝集细胞重新恢复悬浮状态混匀。

1.2.3薄层细胞处理系统进行染色，将盛有细胞的试管置于薄层细胞处理机上，启动染色系统，在平台上进行巴氏染色，1次可自动染色48份标本，整个过程约2.5h。

1.2.4封固取出玻片经过二甲苯处理，保持玻片湿润，常规中性树胶封固。

2结果

玻片背景干净，染色鲜艳均匀，胞核胞质清晰，被检细胞集中，有助于对异常细胞的筛查。

3可能出现问题分析

3.1细胞结构显示不清，原因可能：①吸管吸力过低；②吸废液的导管管道阻塞。

3.2细胞量过少，可能因为：①样本中的细胞量过少；②吸管吸力过高；③覆盖组织的溶液过少或过期。 3.3细胞核染色过深，分析可能：①苏木精染色时间过长；②配置的缓冲液酸碱度不正确。

3.4玻片上有棕色斑片，或许因为：①玻片干燥固定，造成细胞

发生皱缩，影响细胞形态；②样本中比重高的成分未被离心吸走，混杂在细胞当中。

4制片中应注意的一些事项

4.1小瓶标本经助手转移至离心管后,注意检查是否因为保存液较少或标本粘液成分过多,导致只有部分或没有标本转移至离心管。

4.2离心时注意标本的配平。

4.3第一次离心后，吸走上层废液，观察是否有因为吸液头阻塞或标本粘液过多，导致废液没有完全吸走。

4.4第二次离心完成以后，标本震荡要充分，否则会出现成片成团的细胞，震荡标本时，手指不要握住离心管。震荡完成后上机制片。

4.5开始制片和染色前，要检查管道是否插入对应的试剂瓶，试剂的量是否足够，管道是否完全插入试剂瓶底。

4.6机器经过清洗以后制第一批片子时，在primealltubingbeforerun？的选项中，要选择Yes。

4.7开始制片前要注意观察管道是否通畅，废液槽是否有液体残留。

4.8小清洗完成后检查酒精瓶盖是否盖好。

4.9废液瓶的废液倒掉后，必须拧紧瓶盖。

4.10在制片过程中，如果出现管道阻塞或其他异常情况，立即按F10键，让制片程序暂停，分析原因，解决问题后按回车键可以接着制片。

4.11定期清洗，防止机器管道内滋生细菌。

5总结

LCT检测将标本中的黏液、血液和炎细胞分离，收集余下的上皮细胞制成直径13mm涂片，LCT不仅提供了足够量的标本，而且还改善了涂片的质量，使不正常的上皮细胞易被辨认，降低了不满意涂片数量。有研究表明，LCT能明显提高宫颈异常细胞检出率[1]，阳性检出率明显升高,是预防宫颈癌的有效方法[2]。LCT的报告系统即TBS报告反映了当代对子宫颈癌及癌前期病变的最新认识，提出了统一的诊断术语，对各种病变均有明确的定义和诊断标准而且面向临床，对各种病变提出了相应的处理原则；在提高我国妇科细胞学诊断水平的同时与国际诊断模式接轨。此项检查技术具有科学性、新颖先进性、适用实用性。操作无创，受检者无痛苦，易于接受。总之，液基细胞学(LCT)检查是诊断和发现宫颈癌及其癌前病变的有效手段。

参考文献

[1]顾美皎．TBS系统中异常上皮细胞的诊断和处理[J]．中国实用妇科与产科杂志,2003,9(8):466—467．

[2]林志新.液基超薄宫颈细胞涂片2011例临床分析[J]．中国实用妇科与产科杂志,2003,19(30):599—602．