残留溶剂GC检查

七、温度
实际工作中往往是在满足灵敏度的条件下，选择较 低的平衡温度。过高的温度可能导致某些组分的分 解和氧化。一般采用高沸点溶剂时，样品比较稳定 的情况下，推荐80º C左右的平衡温度。 注意：平衡温度过高顶空瓶会爆瓶
八、进样方式
作为残留溶剂检查，顶空进样有许多优越性，不需
要对样品进行特殊处理，不用担心样品中不挥发组
分离度不好 溶媒不合适
供试品配制方法不当
较大未知峰应进行归属
复核结果不合格
当柱温梯度可分离大部分有机溶剂。通常待查溶剂
数目仅两、三种时，可用极性较强的色谱柱，出峰
快，分析时间短；当溶剂数目较多时，还是优选非
极性至中等极性柱，分离较好。
六、色谱柱
非极性柱 弱极性柱 中低极性柱 中等极性柱
商品名
DM-1, DB-1, HP-1, SPB-1, BP-1, SE-30, Rtx-1, ZB-1, AT-1, CP-Sil5CB等
程序升温
增大分流比 使用不同的色谱柱
十一、未知峰归属
对于供试品色谱图中出现的未知峰，应进行确认。
首先分析是否为样品裂解峰，其次核实是否为应控
制溶剂，可采用双柱定性方式。
十二、方法验证
方法的线性范围
检测限 由检测器、方法决定 回收率 加样回收率
重复性、中间精密度和重现性
常见问题
灵敏度低，限度溶液不出峰
极性柱
DB-FFAP, HP-FFAP, CP- FFAP， OV-3501等
化学成分 50％氰丙基甲 基聚硅氧烷
聚乙二醇 （PEG）
硝基对苯二酸 改性的聚乙二醇
七、温度
色谱柱：初温应接近样品中最轻组分的沸点，而终 温则取决于最重组分的沸点，升温速率则要依样品 的复杂程度。 进样口：一般接近沸点最高的组分，但要低于易分 解组分的分解温度。常用的条件是200 ～ 250º C。 检测器：原则是避免流出色谱柱的组分冷凝。 FID 检测器通常设臵为250 ～ 300º C。
九、提高灵敏度
在有机溶液中加入水，可以减少有机物在有机相中 的溶解度，增大其在顶空气体中的含量（常用）。 例如：采用FID检测器测定三氯甲烷，DMF为溶媒，
顶空进样1ml气体，分流比5：1，限度浓度的对照
品溶液检不出峰。 改变条件可检出很明显的色谱峰，灵敏度可达到限 度的五十分之一。
十、改善分离度
不可超声或加热助溶，以免残留溶剂挥发；
如果顶空进样，样品臵顶空瓶封盖之后可以 超声或加热溶解。 大颗粒样品不可以研磨取样，只能取原态样 品（或冷冻粉碎）。
四、供试品溶液的配制
顶空进样方式要求对照品配制与供试品配制
方法应绝对一致，否则顶空瓶中气液平衡状
态有差异（基质效应）。
对照品配制最好采用标准加入法。
化学成分 100％二甲基 聚硅氧烷
5%苯基-甲基聚 硅氧烷
35%苯基65%甲基 14%氰苯基 聚硅氧烷 86%甲基聚硅 氧烷
五、色谱柱
中等/强极性
商品名 DB-225, HP-225, SP-225, BP-225, DB-23， Rtx-225, AT-225, OV－225等
极性柱
DB-WAX, HPINNOWAX, DB-WAXetr, CP-WAX,ZBWAX
五、顶空瓶中样品体积
Cg＝Co/（K＋β）
其中β＝Vg/Vs，K＝Cs/Cg，当K>>β时，样品体积
改变对灵敏度影响很小。当K<<β时，影响很大。
顶空样品瓶中的样品体积（Vs）对分析结果影响很
大，因为它直接决定了相比β。
五、顶空瓶中样品体积
例如：分析水中的二氧六环和环己烷，60º C平衡，
两者的K分别为642、0.04。当样品体积由1ml增加
分对GC分析的影响。
直接进样对仪器要求低，由于部分实验室不具备顶
空进样器，该方法的应用也具普遍性。
八、进样方式
对于待测溶剂在溶解样品的溶剂中溶解度小（分配
系数小）的情况下，例如三氯甲烷在水溶液中，采
用顶空进样方式测得的灵敏度将大于直接进样；反
之，例如甲醇与水互溶性好，直接进样的灵敏度将 大于顶空进样。 测定二氯甲烷、三氯甲烷等卤代烃时，如果溶剂为
待查溶剂再用水稀释。
顶空进样溶剂：
当待测溶剂在有机相中的分配系数明显大于水相
（例如三氯甲烷），对顶空进样来说采用有机相如
DMF为溶剂不是很好的选择；如果样品也只能在有
机相中溶解，建议采用混合液。
直接进样溶媒：
水、合适的有机溶媒或混合液。对于非极性
色谱柱，水对柱有影响，会缩短柱的使用寿 命。
四、供试品溶液的配制
一、残留溶剂简介

相关规定 ICHQ3C—残留溶剂指南 ChP2010、USP36、BP2009、 EP7.0、JP16
二、检测器
FID（火焰电离）——质量型检测器，适用于有机物 NPD（热表面电离）——氮/磷化合物 ECD（化学电离）——半选择性的检测器，适用于电 负性物质（卤代烃）。
多数情况下，三氯甲烷、DMF、DMSO均用FID检测， 但需采取一些措施提高检测灵敏度。 四氯化碳则必须用ECD检测器。
水，直接进样容易造成FID检测器灭火，此时优选
顶空进样。
八、进样方式
无论是采用细口径或粗口径，均可选择不分流进样，
提高灵敏度。当然，采用不分流进样也要考虑溶媒
性质，挥发性太大的溶媒对色谱柱污染较大。
直接进样要考虑样品性质。
顶空进样体积可达到1ml气体，而直接进样只能1至
3ul液体。
八、进样方式
甲酰胺、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、乙
残留溶剂GC检查
内容提纲
一、残留溶剂简介 二、检测器 三、溶媒 四、供试品溶液的配制 七、温度 八、进样方式 九、提高灵敏度 十、提高分离度
五、顶空瓶中样品体积
六、色谱柱
十一、未知峰归属
十二、方法验证
一、残留溶剂简介
ICH关于残留溶剂的定义

药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产工艺 中，以及在制剂制备过程中使用过或产生的有机挥 发物。它们在实际的生产工艺中未能被完全去除。
至5ml，二氧六环的峰面积只提高了1.3％，而环己
烷却提高了452％。 根据实际经验来说，20ml顶空瓶样品装量为5ml比 较适当。
六、色谱柱
残留溶剂检查大多需要较高的分离度和检测灵敏度，
通常采用毛细管色谱柱。
填充柱口径大，造成溶剂峰扩散，检测灵敏度低＊
实践证明，使用非极性至中等极性色谱柱，配合适
二醇、N-甲基吡咯烷等一般不宜用顶空进样 方式测定
九、提高灵敏度
对于限度要求很严格的溶剂，或贵重样品取样量 有限制时，或检测器对该溶剂灵敏度低的情况下＊， 采取一些措施提高灵敏度是方法成败的关键。 溶剂 温度 不分流进样 顶空瓶体积
九、提高灵敏度
利用盐析作用，即在水溶液中加入无机盐来改变挥 发性组分的分配系数。常用高浓度，甚至用饱和浓 度。盐析作用对极性组分的影响远大于对非极性组 分的影响。 例如：在水溶液样品溶剂中加入0.01mol/L氯化钠 溶液可使甲醇、乙醇灵敏度提高5倍（这种方法不 常用）。
三、溶媒
选择原则：溶解样品，并对色谱柱无损坏， 不干扰测定。 例如：直接进样不能含GC不能分析的无机盐
顶空进样溶媒：
首选水，其次DMF、DMSO、不挥发酸碱溶液，不可
使用盐酸溶液和氨水，可选择在80～90 ℃加热能
溶解样品的试剂。
顶空进样溶媒：
如待查成分为苯、甲苯、三氯甲烷等水溶性不好的
溶剂，可采用混合液，即先用少量乙醇或甲醇溶解
七、温度
顶空瓶平衡温度：温度越高，蒸汽压越高，顶空气 体的浓度越高，分析灵敏度越高。待测组分的沸点 越低，对温度越敏感。但温度的改变只影响分配系 数K，并不影响相比β。 Cg＝Co/（K＋β）
七、温度
例如：水溶液中的甲醇、甲乙酮、甲苯、正己烷和 四氯乙烯，80º C平衡温度与40º C平衡温度相比，甲 醇在顶空气体中的浓度增加5.15倍，甲乙酮浓度增 加2.61倍，甲苯只增加25%，而正己烷和四氯乙烯， 分别增加2.6%和10.4%。
DM-5, DB-5, HP-5, SPB-5, BP-5, SE-52, Rtx-5, ZB-5, PE-5,SE-54, CP-Sil8CB等
DM-35, DB-35, HP-35,SPB-35, BP-35, Rtx-35, ZB-35, 等
DM-1701, HP-1701, SPB-7, ZB-1701, Rtx-1701, CP-Sil19CB等

由于残留溶剂没有疗效，故所有的残留溶剂应尽可 能除去，以符合产品规范、GMP或其它基本的质量 要求。
一、残留溶剂简介为人体致癌物或环境 危害物 第二类溶剂 有非遗传致癌毒性或其他不可逆毒性、 或其他严重的可逆毒性 第三类溶剂 对人体低毒 第四类溶剂 尚无足够毒理学资料