免疫学检验 整理综述

[键入公司名称]

免疫学检验整理[键入文档副标题]

Administrator

[选取日期]

免疫学检验

第一章绪论

免疫学检验（immunoassay）：免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学、生命科学等领域中的一门应用学科：

免疫学技术的发展历史：

1、经验免疫学发展阶段（16~18世纪）

接种人痘（中国）/牛痘（英国）预防天花

2、经典免疫学发展阶段（19世纪后期）

凝集反应、沉淀反应、补体结合反应等免疫学方法被大量运用于临床

肥达反应：1896年Widal用伤寒患者血清与伤寒杆菌发生特异性凝集反应来诊断伤寒

3、近现代免疫学发展阶段（20世纪初）

- Landsteiner的血型研究，开拓了免疫化学领域

Karl Landsteiner(1868-1943)——发现ABO血型

Burner的克隆选择学说（clone selection theory)预见了一个细胞克隆产生一

种特异性抗体

- Kohler和Milstein于1975年创立单克隆抗体技术

20世纪60~70年代，诸多免疫标记技术被广泛应用：放射标记免疫、酶标记免疫、荧光标记免疫、金（银）标记免疫、免疫印迹

- 免疫学检测的水平从mg提高到pg，检测范围从病原微生物扩大到多种物质

免疫学检验的特点：特异性强、灵敏度高、稳定、简便、快速

免疫学检验细胞免疫检验：免疫活性细胞及其功能的检测

体液免疫检验：抗原、抗体、补体等的检测

免疫学检验的应用范围：

➢传染病：血清学检测病原微生物及其代谢产物

➢免疫性疾病：青霉素注射前的皮试

➢肿瘤抗原、抗肿瘤抗体、肿瘤标志物

➢组织器官移植：肝脏移植前的HLA配型

➢血型和血液病：输血前的ABO及Rh配型

➢其他：样品中微量的酶、激素、蛋白质、药物等

免疫学检验的基本原理

A与B相互识别构象，产生应答抗原↔抗体

细胞因子↔受体

补体↔抗原抗体复合物

通过某种方法检测到A与B的识别反应直接观察：沉淀、凝集

通过标记：荧光、放射线、吸光值

免疫学检验的一般思路

1、选择合适的检验方法

➢ 检验的灵敏度 ➢ 检验的特异度 ➢ 方法的可行性 2、对检验结果进行评价 ➢ 阳性结果说明什么？阴性结果说明

什么？

➢ 检验的重复性

➢ 是否设立对照？

➢ 检验过程的质量控制很重要！ 目前常用的免疫学检验技术

● 凝集反应 ● 沉淀反应

● 补体测定和补体结合试验 ● 荧光免疫技术 ● 酶免疫技术

● 放射免疫技术 ● 化学发光免疫技术 ● 金（银）免疫技术 ●

免疫细胞检测

各种免疫学检验技术的比较

免疫系统 是脊椎动物和人类的防御系统。它与神经系统、内分泌系统、呼吸系统等一样，是机体的一个重要系统。 ——机体的“安全部门”

免疫系统的组成:免疫器官 免疫系统的功能：免疫防御——病原体的入侵

免疫细胞 免疫稳定——对衰亡死亡损伤的细胞的清除 免疫分子 免疫监视——对突变细胞的清除

免疫器官：中枢免疫器官 骨髓—“士兵工厂” T\B 细胞的发源地、B 细胞成熟场所 胸腺—“训练场” T 细胞成熟场所 外周免疫器官 脾——血液过滤器 淋巴结——小战场

黏膜相关淋巴组织——参与局部免疫应答

扁桃 咽喉守卫者

肠相关淋巴组织 肠道守护者

阑尾 免疫助手

免疫细胞发生分化发育成熟的场所 免疫细胞定居、应答

的场所

免疫细胞 适应性免疫细胞 T 细胞 TH TS TC 或CTL 固有免疫细胞 M0 DC NK

免疫分子 免疫球蛋白 特异性结合抗原，激活补体，Fc 段结合Fc 受体的作用 补体 溶解靶细胞，免疫调节 细胞因子 白介素IL

肿瘤坏死因子TNF 干扰素IFN 集落刺激因子CSF 趋化因子生长因子GF

膜分子 免疫细胞间相互识别

第二、三章 抗原-抗体反应及抗原抗体的制备

免疫器官： 中枢免疫器官：骨髓 胸腺

外周免疫器官：淋巴结 脾脏 粘膜免疫系统

免疫细胞：T 淋巴细胞 B 淋巴细胞 NK 细胞 抗原提呈细胞 粒细胞 红细胞 肥大细胞 免疫分子：可溶性分子：抗体 补体 细胞因子

膜分子：CD 分子 黏附分子 主要组织相容性抗原 第一节 抗原和抗体

抗原 antigen ，Ag 刺激机体免疫系统，使之产生特异性免疫应答，并能与应答产物（抗体或致敏淋巴细胞）在体内或体外发生特异性反应的物质，也称免疫原。 抗原的性能

1、免疫原性 immunogenicity

抗原刺激机体免疫细胞产生特异性免疫应答的能力 2、免疫反应性 immunoreactivity

抗原可与相应的抗体或致敏淋巴细胞在体内或体外发生特异性结合的能力，也称抗原性

经抗原刺激后产生

与生具有，先天的 接上 细胞间信息交流 抗细菌 抗肿瘤 调节免疫 刺激造血

抗原的种类

完全抗原：既有免疫原性又有免疫反应性的物质，如各种微生物、大多数蛋白质

不完全抗原：只有免疫反应性而没有免疫原性的物质，如多糖，简单小分子等，也称半抗原hepten

耐受原：可诱导机体产生特异性无应答状态，形成免疫耐受的抗原，称耐受原tolerogen

变应原：可刺激机体发生过强的免疫应答，发生超敏反应的抗原，称为变应原allergen

影响抗原免疫原性的因素

抗原因素：

1、抗原异质性 foreignness

异种物质、同种异体物质、自身物质

2、抗原分子的理化性质

分子量大小、化学组成与结构、分子构象与易接近性 conformation & accessibility

应用抗原与抗体之间的种属关系越远，组织结构差异越大，异质性越强

宿主因素：

1、宿主的遗传背景、年龄、性别、健康状况等

2、抗原的剂量及进入机体的途径

应用 - 选用遗传背景合适、健康年轻的动物个体作为宿主

- 抗原剂量要适中，根据需要选择适当的免疫方法，一般皮内注射免疫原性最佳，口服免疫原性最差

常见的抗原

●微生物及其代谢产物

●类毒素免疫动物后的动物免疫血清（含抗毒素）

●异嗜性抗原

不同种属间的共同抗原

●同种异型抗原

红细胞表面的血型抗原，MHC抗原

●其他抗原

肿瘤抗原、人工合成抗原。。。

非特异性免疫刺激剂

超抗原 superantigen ：某些物质可以非特异性地激活免疫细胞，产生强烈的免疫应答，

称为超抗原。如金葡菌肠毒素、金葡菌A蛋白（SPA）等。

有丝分裂原 mitogen ：可非特异性地激活淋巴细胞进行分裂克隆的物质，称为有丝分裂原，简称丝裂原。如刀豆蛋白A、植物血凝素PHA、细菌脂多糖LPS、SPA等

抗原特异性

是指物质之间的相互吻合性、针对性或专一性。

●抗原的特异性表现在两个方面:

(1) 免疫原性的特异性

(2)抗原性的特异性。

●特异性是免疫应答最重要的特点，也是免疫学诊断与防治的理论依据。

●决定抗原特异性的物质基础是抗原分子中的抗原决定簇(antigenic determinant),

又称表位(epitope)

抗原决定簇（抗原表位）:

●指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。是被免疫细胞TCR/BCR识别

的靶结构，是抗原物质特异性的分子学基础。