抗心磷脂抗体的检测与临床意义

4. 底物液对光敏感，需避光显色
半定量：按照以下公式将对照血清或患 者样本的吸光度值比上标准品2的吸光 度值，通过比值半定量估计结果。 比值＝ 对照或患者样本的吸光度值 标准品2的吸光度值
欧蒙建议按照以下原则解释结果：
比值＜1.0 阴性 比值 ≥ 1.0 阳性
定量检测：分别以3份标准血清浓度和 其吸光度为横、纵坐标，以点对点的方 式绘制标准曲线，根据标准曲线求出患 者血清中的抗体浓度。
时景伟
2014-04-02
1 什么是抗心磷脂抗体 2 抗心磷脂抗体的检测方法 3 抗心磷脂抗体的临床意义 （抗磷脂综合征）
第一分部
1.自身抗体是指针对自身组织，器官、细胞 及细胞成分的抗体； 2.人体有完整的自身免疫耐受机制的维持； 3. 自身免疫反应，产生自身抗体； 4.正常人体血液中可以有低滴度的自身抗体。
欧蒙建议对结果 做如下解释： ＜12 阴性 ≥ 12 阳性
关于单位： 心磷脂抗体IgA/G/M RU/ml 心磷脂抗体IgM 心磷脂抗体IgG 心磷脂抗体IgA PL-IgM-U/ml PL-IgG-U/ml PL-IgA-U/ml
相对单位 百分位
经亲和层析从标准血清纯化得 到1微克/ml抗心磷脂IgA抗体 结合心磷脂的活性
*抗心磷脂抗体(aCL)
属于IgG/IgM型的自身抗体，通
常使用ELISA方法测定，其中IgG被
认为与血栓形成和习惯性流产有很
强的相关性。
抗心磷脂是 pangborn 1941年从牛 的心肌中分离出来的一种具有抗原性的 磷脂，并加以命名
抗心磷脂抗体的免疫学分型有IgG和 IgA和IgM三类，其发生率男女无明显差 异。
2.产科表现
胎盘血管的血栓形成导致胎盘功能不全， 可引起宫内发育迟滞、反复流产。其发生率 可达10%-25%，一般发生在妊娠10周以后。 在第34周或之前还可发生先兆子痫或妊高症 以及严重的胎盘功能不足所致的早产。
3.血液系统表现：
血小板减少有25%~50%的病例出现， 但程度较轻，常在90x109/L以上，机制尚 不清楚 溶血性贫血
抗磷脂综合征（anti-phospholipid syndrome, APS） 是指由抗磷脂抗体（APL抗体）引起的一组临床征 象的总称，主要表现为血栓形成，习惯性流产，血 小板减少等。在同一患者可仅有上述一种表现，也 可同时有多种表现。 APS是一种自身免疫性疾病，目前公认的诊断标准 是病人具有下列临床特点之一：全身各脏器动、静 脉血栓：复发性流产；胎儿死亡以及由于胎儿宫内 窘迫提前分娩致新生儿死亡；自身免疫性血小板减 少，上述临床表现同时伴有病人血清中出现抗心磷 脂抗体（aCL）和/或狼疮凝血因子（LA）。 在临床上由于抗心磷脂抗体的特异性更强，与上述 临床表现关系更密切，因而也称为抗心磷脂综合征 （anti-cardiolipin syndrome, ACS)。
研究证实，许多因素与aCL产生密切相关，常
见的原因有： （1）自身免疫性疾病：如系统性红斑狼疮 （SLE)、类风湿性关节炎（RA）、硬皮病等； （2）病毒感染：如腺病毒、风疹病毒、水痘病 毒、腮腺炎病毒等感染； （3）其它疾病：如支原体系统疾病等； （4）口服某些药物：如氯丙嗪、吩噻嗪等； （5）少数无明显器质性疾病的正常人，特别是 老年人。
4.APS相关肾病
肾动脉血栓/狭窄、肾脏缺血坏死、 肾性高血压、深静脉血栓、微血管闭塞 性肾病和相关的终末期肾病统称为APS相 关肾病
4.其他类型的APS
网状青斑（80%） 心脏瓣膜病变（晚期） 神经精神症状 ——偏头痛、舞蹈病、癫痫、 格林巴利综合症等 缺血性骨坏死（少见）
• 在抗磷脂抗体检测结果的判读上，应该与临 床资料相结合，同时要考量其他致栓风险因 子的存在。 • 在诊断、风险预测以及疾病预后的判断方面 ，多种血清学标记物的联合检测是一种合理 有效的方法。 • 发现与疾病致病机制密切相关而且具有更高 特异性的血清学标记物是未来抗磷脂抗体检 测的发展方向。 • 抗磷脂抗体的检测对预防血栓性疾病，降低 心血管疾病风险具有重要的临床意义。
加入终止液100 微升
温浴30min
温浴30min
酶标仪450nm 波长读取吸光 度值
洗板3次
加入稀释后的酶结 合物100微升
绘制标准曲线， 报结果
1. 样本：血清或EDTA、肝素、柠檬酸盐抗凝的血浆 2. 酶结合物使用前需混匀，稀释后需在4小时内使用 3. 所有试剂使用前需在室温（18-25℃）平衡30min
抗心磷脂抗体（anticardiolipin，aCL） 是一种以血小板和内皮细胞膜上带负 电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体。 常见于系统性红斑狼疮（SLE）及其 他自身免疫性疾病。该抗体与血栓形 成、血小板减少、习惯性流产或宫内 死胎关系密切。
抗 磷 脂 抗 体
*狼疮抗凝物 （Lupus anticoagulants，LA） *抗心磷脂抗体 （Anticardiolipin antibodies，aCL) *抗 2-糖蛋白I 抗体 （Anti-2-glycoprotein-I antibodies， a-2-GPI)
第三部分
• 所有发生自发性静脉血栓病变者
• 对于小于50岁的人群或没有其他明显危险因 素的老年人，发生中风或者外周动脉栓塞事 件者 • SLE或其他自身免疫疾病并发血栓病变者
• 反复流产或伴有早产的妊娠并发症的患者
• 不明原因的血小板减少患者
1.血栓形成
动静脉均可形成血栓，尤以静脉血栓 居多。静脉血栓发生率70%，动脉血栓 30%，动静脉血栓5%。静脉血栓以下肢 深静脉血栓为最多见。其他还有多种脏器、 组织内血栓形成。
静脉血栓多累积下肢深静脉（水肿）、肾 脏、肝脏、视网膜 动脉血栓多累积脑部（脑卒中）、上下肢 （缺血性坏疽）、肾脏、肠系膜、冠状动 脉（心肌梗死）
*aPL抗体与血栓之间有显著的统计学相关性
其它 46% LA阴性 12%
LA阳性 42%
其它 42% aCL阴性 18%
aCL阳性 40%
*Love和Santoro对SLE发生血栓栓塞性意外的综合报道

①自身抗体
抗心磷脂抗体 （aCL） ②抗磷脂抗体
③与一些疾病相关抗心磷脂源自合征≈抗磷脂综合征
第二部分
标准化检测采用 ELISA法，分为IgG、 IgM和IgA型
血清1:201倍稀释 酶结合物1:10倍稀释
加入TMB底物液 100微升
避光温浴15min
取100微升稀释后血 清加入反应孔
洗板3次