(完整word版)现代分子生物学复习题

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现代分子生物学

一.填空题

1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。

2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。

3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。

4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导,蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。

5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种:核心启动子元件和上游启动子元件。

6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。

7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两

个实验中主要的论点证据是:生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。

8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点: hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、

mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子,在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。

9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法、可以减少蛋白质合成

过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。

10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是: SC构型、 oc构型、 L构型。在电泳中最前面

的是SC构型。

11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别

是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。

12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用,转录因子与DNA结合的功能域常见有以下

几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。

13.转基因动物常用的方法有:逆转录病毒感染法、DNA显微注射法、胚胎干细胞法。

14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是: D、

A、B、E 。其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。

15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G为_17.2%_和C为_17.2%__。

16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。

17.DNA合成仪合成DNA片段时,用的原料是模板DNA‘TAQ 、引物、缓冲液、dNTP。

18.在琼脂糖电泳中,DNA会向正极移动。

19.染色体包括蛋白质、染色体两大部分。

20.环状DNA双链的复制主要可分为θ形、滚环形、D-环形三种类型。

21.转录的基本过程包括转录的起始、延伸、终止。

22.半乳糖对细菌有双重作用;一方面可以作为碳源供细胞生长;另一方面它又是细胞壁的成

分。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从 S2 开始,无G时转录从 S1 开始。

23.DNA重组技术也称为基因克隆或分子克隆。最终目的是把一个生物体中的遗传信息DNA转入

另一个生物体。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤:

①提取供体生物的目的基因或称外源基因,酶接连接到另一DNA分子上克隆载体,形成一个新

东隅已逝 1 桑榆非晚!

的重组DNA分子。

②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。

③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。

④对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。

24.质粒的复制类型有两种:受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为严紧型质粒,不受宿主

细胞蛋白质合成的严格控制称为松弛型质粒。

25.PCR的基本反应过程包括:变性、退火、延伸三个阶段。PCR的反应体系要具有以下条件: a、

被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物约20个碱基左右。

b、具有热稳定性的酶如:TagDNA聚合酶。

c、dNTP,

d、作为模板的目的DNA序列

26.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是

TFIID 、 SP-1和CTF/NF1。

27.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是:D、A、

B、E。其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。

二.名词解释

质粒:是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子。在基因工程中质粒常被用做基因的载体。

启动子:是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位,也就是使转录开始的部位。在基因表达的调控中,转录的起始是个关键。常常某个基因是否应当表达决定于在特定的启动子起始过程。

信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。

核受体:细胞内受体分布于胞浆或核内,本质上都是配体调控的转录因子,均在核内启动信号转导并影响基因转录,统称核受体。

hnRNA:核不均一RNA,即mRNA的前体,经过5’加帽和 3’酶切加多聚A,再经过RNA的剪接,将外显子连接成开放阅读框,通过核孔进入细胞质就可以作为蛋白质合成的模板了。

分子杂交:互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。

基因组文库:将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞,进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合,即基因组文库,它包含了该生物的所有基因。

密码的简并性:由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为密码的简并性

衰减子:在色氨酸操纵子中,当mRNA合成起始以后,除非培养基中完全没有色氨酸,否则,转录总是在长162bp的前导区终止,产生一个仅有140个核苷酸的RNA分子,终止trp基因转录,因为转录终止发生在这一区域,并且这种终止是被调节的,这个区域被称为衰减子。

DNA拓扑异构酶:DNA在细胞内往往以超螺旋状态存在,DNA拓扑酶催化同一DNA分子不同超螺旋状态之间的转变。DNA拓扑异构酶有两类,大肠杆菌的ε蛋白(MW-110000)就是一种典型的拓扑异构酶Ⅰ.它的作用是暂时切断一条DNA链,形成酶-DNA共价中间物而使超螺旋DNA 松弛化,然后再将切断的单链DNA连接起来,而不需要任何辅助因子。而大肠杆菌中的DNA 旋转酶(DNAgyrase)则的典型的拓扑异构酶Ⅱ,能将负超螺旋引入DNA分子,该酶能暂时性地切断和重新连接双链DNA,同时需要ATP水解为ADP以供能。

基因表达:遗传信息从DNA到RNA再到蛋白质的过程。

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