高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素
一种高效液相荧光色谱法检测水中微囊藻毒素-lr的方法与流程
一种高效液相荧光色谱法检测水中微囊藻毒素-lr的方法与流程如下：
1.准备标准溶液：购买微囊藻毒素-lr标准溶液，浓度为20μg/ml。
根据需要，准确移
取一定量的标准溶液，用甲醇稀释至所需浓度。
2.样品预处理：取适量水样，通过0.45μm的水系滤膜，收集滤液。
3.活化分离柱：用甲醇5～15ml、流速2.0～5.0ml/min，预洗分离柱，再用5～15ml
水、流速2.0～5.0ml/min，活化分离柱。
4.上样：将预处理后的水样通过已活化的分离柱，收集流出液。
5.洗脱：用甲醇3～5倍于柱体积对分离柱进行洗脱，收集洗脱液。
6.浓缩：将洗脱液在旋转蒸发仪上浓缩至近干，用甲醇定容至一定体积。
7.高效液相荧光色谱分析：将定容后的样品进行高效液相荧光色谱分析，检测微囊藻
毒素-lr的含量。
8.结果计算：根据标准曲线和样品的荧光强度，计算出样品中微囊藻毒素-lr的浓度。
以上方法仅供参考，实际操作中可能需要根据具体情况进行调整。
同时请注意，实验操作需要专业人员指导，并遵循相应的实验室安全规范。
高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素
高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素
廖楠
【期刊名称】《资源节约与环保》
【年(卷),期】2016(0)4
【摘要】微囊藻毒素本身含有七肽类干毒素成分，促癌作用极为明显，容易为居民用水带来较大威胁。
对此问题，较多学者致力于构建相应的检测体系，使水中的微囊藻毒素得以确定，而所选用的检测方法主要以高效液相色谱为主，其可依托于自身重现性、灵活性以及准确性等优势，使微囊藻毒素测定更为精确。
本文主要通过一定的试验方式，判断微囊藻毒素测定中高效液相色谱法的有效性。
【总页数】1页(P63-63)
【作者】廖楠
【作者单位】辽宁省环境监测实验中心辽宁沈阳 110161
【正文语种】中文
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定湖水中的微囊藻毒素
2.高效液相色谱法测定饮用水中微囊藻毒素(MC-LR)的研究
3.高效液相色谱-质谱联用法测定饮用水中微囊藻毒素(MC-LR)的不确定度评定
4.提高固相萃取-高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素回收率方法研究
5.固相萃取-高效液相色谱法测定地表水中的微囊藻毒素-LR的方法优化
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固相萃取-高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素质量控制指标研究
摘 要： 采 用 固相 萃 取 一液相 色 谱 法 ， 通 过 统计 全 国多 家 实 验 室 的测 定 数 据 ， 对水 中 微 囊 藻 毒 素 测 试 的 平 行 样 测 定 相 对 偏 差 、
空 白加标 回收 率 、 实 际 样 品加 标 回收 率 、 空 白加 标 回 收率 平 行 样 相对 偏 差 以及 样 品 加 标 回收 率 平 行 样 相 对 偏 差 ５个 质 控 指标
ｒ ｉ ｖ ｅ ｂ ｉ ａ ｓ ｏ ｆ ｂ ｌ ａ ｎ ｋ ｓ ｐ ｉ ｋ ｅ ｄ ｕ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｅ ｓ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｂ ｉ ａ ｓ ｏ ｆ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｓ ｐ ｉ ｋｅ ｄ ｕ ｐｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｅ ｓ，ｗｅ ｒ ｅ ｓ ｔ ｕｄ ｉ ｅ ｄ ｂ ｙ ｅ ｖ ａ ｌ ｕａ ｔ ｉ ｎｇ ｄ ａ ｔ ａ ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ ｍａ ｎ ｙ
第 ６卷
第 ４期
环 境 监 控 与 预 警
Ｅｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍｅ ｎｔ ａ ｌ Ｍｏ ｎｉ ｔ ｏ ｒ ｉ ｎ ｇ ａ ｎｄ Ｆｏ ｒ ｅ ｗａ ｒ ｎ ｉ ｎ ｇ
Ｖｏ １ ． ６． Ｎｏ ． ４
Ａｕ ｇ ｕｓ ｔ ２ ０ｌ ４
２ ０ １ ４年 ８月
・
监 测技 术 ・
中 图分 类号 ： Ｘ ８ ３ ２ 文献 标 识 码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ６ ７ ４—６ ７ ３ ２（ ２ ０ １ ４） ０ ｆ Ｑｕ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ Ｃｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ Ｉ ｎ ｄ ｅ ｘ ｆ ｏ ｒ Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｃ ｙ ｓ ｔ ｉ ｎ ｉ ｎ Ｗａ ｔ ｅ ｒ Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ Ｓ ＰＥ－ ＨＰ ＬＣ
高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素的含量
高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素的含量
郑力行;吴和岩;施玮
【期刊名称】《中国卫生检验杂志》
【年(卷),期】2004(14)5
【摘要】微囊藻毒素(MC)是水样释放的有毒代谢物,对环境及人类健康具有较大的危害性。
因而建立高效液相色谱法(HPLC)测定水中藻毒素的方法,用该法检测常见微囊藻毒素MC-LR的检出限为0.03μg/L,线性定量范围为0.05- 10μg/L,建立了标准曲线和工作曲线,并应用该方法分析水样,表明其具有实用性,并初步利用导数光谱法进行定量。
【总页数】2页(P526-527)
【关键词】高效液相色谱法;微囊藻毒素;含量;常见;导数光谱法;MC;HPLC;水样;检出限;释放
【作者】郑力行;吴和岩;施玮
【作者单位】复旦大学公共卫生学院劳动卫生教研室;复旦大学公共卫生学院环境卫生教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2;R286.0
【相关文献】
1.固相微萃取/高效液相色谱法测定水中的微囊藻毒素 [J], 吴伟文;杨左军;顾浩飞;郑文丽;徐嵘
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4.提高固相萃取-高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素回收率方法研究 [J], 王良; 陈罡; 张青
5.固相萃取-高效液相色谱法测定地表水中的微囊藻毒素-LR的方法优化 [J], 刘畅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
水中痕量微囊藻毒素的检测方法
水中痕量微囊藻毒素的检测方法介绍微囊藻毒素是一类由蓝藻属（Microcystis）等微藻产生的一种强烈毒性的生物碱类化合物。
微囊藻毒素污染已经成为全球范围内的严重环境问题。
因此，痕量微囊藻毒素的检测方法对于水体质量监测和环境保护非常重要。
痕量微囊藻毒素的危害微囊藻毒素主要通过污染的水体进入食物链，对人和动物产生严重的健康危害。
它们被用作食物链中的神经毒素或肝毒素，引起食物中毒、肝硬化等疾病。
因此，及早检测和监测痕量微囊藻毒素的浓度对于人类和生态系统的健康至关重要。
常用的微囊藻毒素检测方法以下是几种常见的微囊藻毒素检测方法：1. 高效液相色谱法高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用的微囊藻毒素检测方法。
这种方法根据样品中微囊藻毒素的化学性质，通过色谱柱将其分离出来，再通过紫外光检测器进行定量分析。
2. 固相萃取结合气相色谱法固相萃取结合气相色谱法（Solid Phase Extraction combined with Gas Chromatography，SPE-GC）是另一种常见的微囊藻毒素检测方法。
该方法通过固相萃取将微囊藻毒素从样品中富集，然后使用气相色谱仪进行定量测定。
3. 免疫学检测法免疫学检测法是一种基于抗原-抗体反应的方法，可以高效地检测微囊藻毒素。
常见的免疫学检测方法包括酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked ImmunosorbentAssay，ELISA）和免疫层析法。
这些方法的优点是操作简便、快速，但有时可能存在交叉反应和灵敏度较低的问题。
4. 生物传感器生物传感器检测方法利用生物元件（如细胞、酶等）对微囊藻毒素进行特异性识别和转化。
这种方法具有快速、高灵敏度和实时监测等优点，但对于复杂样品可能存在干扰。
微囊藻毒素检测方法的发展趋势随着科学技术的发展，微囊藻毒素检测方法也在不断改进和创新。
以下是一些可能的发展趋势：1. 快速便携式检测设备为了满足实际应用中的需求，科学家们致力于开发更小型化、便携式的微囊藻毒素检测设备。
高效液相色谱法检测水体中微囊藻毒素
, 流动相 : V ( 0 . 1 % TFA ) V ( 甲醇 ) =
1 引 言
随着工农业的迅速发展以及污水排放量的增加, 水体富养化日益严重, 频繁暴发蓝藻水华, 微囊藻毒 素是在蓝藻水华污染中出现频率最高、 产量最大、 造成危害最严重的藻毒素。最常见的有微囊藻毒素-RR (M icrocystin s -RR, MC -RR)和微囊藻毒素 -LR( M icrocystins-LR, MC-LR )。 MCs 具有明显的肝毒性, 会导致 肝癌的发生。 目前 , 检测水体中 MCs的常用方法有 H PLC-UV 法
[ 2~ 5, 8] [ 1, 3, 5] , 4 , 6~ 8]
。其中质谱法检出限低,
测定结果准确, 但是价格昂贵。由于天然水体中 MCs的含量低 , 因此在进样检测之前需要对其进行富集, 文献中主要采用固相萃取柱 ( SPE) 和免疫亲和层析柱 ( I A C) 进行富集, 但是这些柱子成本过高, 且 不能重复使用。本研究采用 XAD-2大孔吸附树脂富集 MC s , 成本低 , 且树脂经活化后可以重复使用。 本研究以 MC-LR 和 M C -RR 为对象 , 对色谱检测条件以及水样前处理过程中使用的富集柱、 淋洗 液和洗脱液进行了选择, 建立并且优化了 XAD-2树脂富集-H PLC-UV 检测水体中的微囊藻毒素的方法。
第 5期
梁丽丽等 : 高效液相色谱法检测水体中微囊藻毒素
741
2 . 4 . 2 微囊藻毒素的富集与净化
水中低含量微囊藻毒素（RR）高效液相色谱法检测
水中低含量微囊藻毒素（RR）高效液相色谱法检测摘要：本文用高效液相色谱法检测水中微囊藻毒素（RR），针对水中微囊藻毒素含量低，难检出问题，对常规高效液相色谱做了两种优化改进，在线富集进样、大定量进样，大大降低检出限，获得满意的结果。
关键词液相色谱在线富集大定量进样微囊藻毒素检出限前言微囊藻毒素（RR）具有较强的毒性及危害性。
随着中国水体富营养化程度加剧，蓝藻水华和赤潮的发生逐渐增加。
80%的蓝藻水华都可以检测出次生代谢产物----微囊藻毒素（microcystins，MCs），它对水体环境和人群健康的危害已成为全球关注的重大环境问题之一。
环境改善，检测、防控和治理是必不可少的工作内容。
本文主要介绍水中低含量微囊藻毒素（RR）的检测方法。
本方法检出限低或超低，主要针对水中低含量微囊藻毒素（RR）高效液相色谱法检测，适用于饮用水、湖泊水、河水、地表水等水样检测。
本方法参考《GB/T 5750.8-2006 生活饮用水标准检验方法有机物指标》中第13部分微囊藻毒素，优化出两种检测方案。
实验部分1 方案一：在线富集高效液相色谱法检测。
图1 在线富集高效液相色谱法检测流程图1.1 仪器配置：高压输液泵2台，在线脱气机（两路以上脱气）1台，六通自动进样阀2个（1个带2ml定量环1套，一个带富集柱1根），预柱1根，色谱柱1根，柱温箱1台，紫外检测器1台，三通电磁阀1个，进样泵（或高效液相色谱自动进样器）1台，工作站1套，配件1套（包括废液桶、管路、接头等）。
1.2 色谱条件：色谱柱：ODS C18色谱柱，Venusil XBP (L) 4.6mm×150mm×5μm流动相：流动相A（色谱洗脱液）：乙腈：水：三氟乙酸=40%：60%：0.05%流动相B（富集液）：甲醇（或乙腈）：水=15%：85%进样体积：2ml流速：1ml/min检测器：紫外检测器检测波长：238nm柱温：35℃1.3 试验对比（进样量相同，进样体积不同）：直接进样20μl，标准样品浓度20ng/ml，色谱图情况图2 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度20ng/ml色谱图该检测方法噪声约3.6μAu，样品峰高32μAu，标准样品浓度20ng/ml，按3倍噪声计算检出限，检出限约6.75 ng/ml。
高效液相色谱法测定饮用水中微囊藻毒素(MC-LR)的研究
腥藻、束丝藻等爆发所产生的一种肝毒素 。随着中国 检测器 ，使用 Ｃ１８反相色谱柱 ，柱长 １５０ ｍｍ，内径 ４．６
近年水体的富营养化程度逐渐加剧 ，蓝藻水华的发生 ｍｍ，填 料 粒 径 ５ ｍ；２５０ ｍＬ玻 璃 杯 式 滤 器 ；抽 滤 瓶 ；真
概率逐渐增加 。而 ８０％的蓝藻水华都可检测出次生代 空泵 ；旋转蒸发器和氮吹仪等。
山西ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ技
ＳＨＡＮＸＩ ＳＣＩＥＮＣＥ ＡＮＤ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ
２０１８年 第 ３３卷 第 ２期
文 章 编 号 ：１００４—６４２９（２０１８）０２—００４５—０４
收稿 日期 ：２０１８～０３—０８
高效液相 色谱法测定饮用水 中微 囊藻毒素
（ＭＣ—ＬＲ）的研 究
张 国华
（太原 市环 境监 测 中心 站 ，山西 太 原 ，０３０００２）
摘 要 ：研 究 了利 用 高效 液 相 色谱 仪 测 定 饮 用 水 中微 囊 藻毒 素 （ＭＣ—ＬＲ）
的 方法 ，并 优化 了测量 条件 ：选择 体 积 分数 为 ２０％的 甲 醇溶 液作 为 淋洗
液 、酸化 甲醇作 为 洗脱 液对样 品进 行 前处 理 ，具 有较 低 的检 出限 ，并可 以在
１．１ 主要 仪器 和试 剂
转蒸发仪浓缩至干 。用 １ ｍＬ甲醇溶解后 ，用尖嘴吸管
４５
张 国华 高效液相色谱法测定饮用水 中微囊 藻毒 素（ＭＣ—ＬＲ）的研究
本 刊 Ｅ—ｍ‘ａｉｌ：ｓｘｋｊｚｚｓ＠１６３．ＣＯＩｎ 科 技论坛
吸 出 ，氮 吹干 燥 ，甲醇 定容 至 １００ ＩＬＬ。
ｍＬ体 积分数为 ５％的乙酸萃取 ３０ ｍｉｎ，４ ０００ ｒ／ｍｉｎ离 醇 溶 液 洗脱 样 品 的 回 收率 最 高 （见 表 ２），为 ９５．９％ ，但
高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素
高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素作者：薛罡， 杨林， 龚清杰， 闵浩， XUE Gang， YANG Lin， GONG Qing-jie， MIN Hao作者单位：东华大学,环境科学与工程学院,上海,201620刊名：中国给水排水英文刊名：CHINA WATER & WASTEWATER年，卷(期)：2009，25(22)被引用次数：0次1.张维昊.徐小清固相萃取高效液相色谱法测定水中痕量微囊藻毒素 2001(05)2.姚玉莹.蒋文青地表水和饮用水中微囊藻毒素检测方法的研究进展 2008(10)3.Hideaki Murata.Hiroko Shoji.Motoji Oshikata High-performance liquid chromatography with chemiluminescenee detection of derivatized microcystins 1995(02)4.赵建伟.黄廷林高效液相色谱法测定饮用水中的微囊藻毒素RR和LR 2006(03)5.Ikawa M.Phillips N.Haney J F Interference by plastics additives in the HPLC determination of microcys-tin-LR and-YR 1999(06)6.张立将.伊立红.浦跃朴水中微囊藻毒素高效液相色谱检测和前处理优化 2005(03)7.季林丹.刘慧刚.徐进用高效液相色谱法检测天然水体中的微囊藻毒素 2007(04)8.刘碧波.肖邦定.刘剑彤天然水体中痕量微囊藻毒素的高效液相色谱测定方法优化 2005(11)1.期刊论文张维昊.徐小清.Zhang Weihao.Xu Xiaoqing固相萃取高效液相色谱法测定水中痕量-微囊藻毒素-分析化学2001,29(5)微囊藻毒素是有害的蓝藻水华释放的有毒代谢物，对人类及环境具有很大危害性。
水中微囊藻毒素的测定
编号：作业指导书水中微囊藻毒素的测定高效液相色谱法临江市环境保护监测站1、方法提要微囊藻毒素在238nm下有1、方法的适用范围本标准规定了高效液相色谱法和间接竞争酶联免疫吸附法测定水中微囊藻毒素（环状七肽）的条件和详细分析步骤。
本标准适应于饮用水、湖泊水、河水、地表水中微囊藻毒素的测定。
样品中微囊藻毒素的检出限：高效液相色谱法和酶联免疫吸附法均匀为0.1µg/L。
2、微囊藻毒素的分子式、分子质量及结构式2.1分子式微囊藻毒素-RR(MC-RR):C49H75N13O12,微囊藻毒素-YR(MC-YR):C52H72N10O13,微囊藻毒素-LR(MC-LR):C49H74N10O12.。
2.2分子质量MC-RR:1038.21mg,MC-YR:1045.2100µg,MC-LR:995.250µg。
2.3结构式MC-RR、MC-YR、MC-LR、X和Y表1 MC-RR、MC-YR、MC-LR、X和Y3、水样采集和保存用采水器采集1500ml～2000ml水样（水样采集后，应在4h内完成以下前处理步骤）。
用500目的不锈钢筛（）过滤，除去水样中大部分浮游生物和悬浮物。
取过滤后的水样1200ml于玻璃杯式滤器（）中，依次经滤膜（）减压过滤。
准确量取1000ml 滤液置于棕色试剂瓶中。
注：如减压过滤后的水样不能立即分析，可置于玻璃容器中，在-20℃保存，30d内分析完毕。
4、试剂和材料除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂和不含有机物的蒸馏水。
5.1甲醇，HPLC级（色谱级甲醇）5.2二氯甲烷，农残级5.3阿特拉津标准贮备溶液，ρ=100µg/mL。
准确称取0.0100g阿特拉津标准样品，用少量二氯甲烷溶解后，再用甲醇准确定容至100mL，作为阿特拉津标准贮备溶液。
在4℃冰箱中保存，保存期半年。
5.4阿特拉津标准使用液，ρ=10.0µg/mL。
水质微囊藻毒素的测定
水质微囊藻毒素的测定水质微囊藻毒素是一种常见的水体污染物，对人体健康和水生态环境都有着严重的影响。
因此，准确地测定水质微囊藻毒素的浓度是非常重要的。
本文将介绍水质微囊藻毒素的测定方法。
一、什么是水质微囊藻毒素？水质微囊藻毒素是一种由蓝藻属微囊藻产生的毒素，主要存在于淡水中。
当水体中微囊藻数量过多时，就会产生微囊藻毒素。
这种毒素对人体健康和水生态环境都有着严重的影响，可以导致中毒、死亡等问题。
二、水质微囊藻毒素的测定方法1.酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是一种常用的水质微囊藻毒素测定方法。
该方法需要使用特定的抗体，通过特异性结合来检测水样中微囊藻毒素的浓度。
这种方法具有快速、准确、灵敏等优点，但需要专业设备和技术支持。
2.高效液相色谱法高效液相色谱法也是一种常用的水质微囊藻毒素测定方法。
该方法需要使用特定的色谱柱和检测仪器，通过检测色谱图谱来确定水样中微囊藻毒素的浓度。
这种方法具有准确、可靠、灵敏等优点，但需要专业设备和技术支持。
3.免疫荧光法免疫荧光法是一种新型的水质微囊藻毒素测定方法。
该方法需要使用特定的抗体和荧光染料，通过荧光信号来检测水样中微囊藻毒素的浓度。
这种方法具有快速、准确、灵敏等优点，但需要专业设备和技术支持。
三、注意事项在进行水质微囊藻毒素测定时，需要注意以下事项：1.样品采集要在合适的时间和地点进行，避免受到环境因素的影响。
2.样品处理要严格按照标准操作程序进行，避免污染或误差。
3.测定过程中要注意安全，避免接触到有害物质。
4.使用仪器和设备要按照说明书进行操作，避免误操作或损坏设备。
四、结论水质微囊藻毒素是一种常见的水体污染物，对人体健康和水生态环境都有着严重的影响。
准确地测定水质微囊藻毒素的浓度是非常重要的。
目前常用的测定方法有酶联免疫吸附法、高效液相色谱法和免疫荧光法等。
在进行测定时，需要注意样品采集、样品处理、安全和设备操作等问题。
液相色谱串联质谱法测定水中的微囊藻毒素-LR
液相色谱串联质谱法测定水中的微囊藻毒素-LR摘要：近年来，随着水体污染和富营养化程度的加剧，水中的微囊藻毒素类物质越来越受到关注。
本文建立了一种液相色谱串联质谱法检测水中微囊藻毒素-LR的方法，该方法采用水样无需前处理，直接进样至超高效液相色谱-质谱检测系统，经 BEH shield RP18 色谱柱分离，以 0.1%甲酸溶液和甲醇作为流动相梯度洗脱，在电喷雾电离源模式（ESI）下使用正离子多反应（multiple reaction monitoring，MRM）监测模式液相色谱质谱法定性定量分析。
在优化条件下微囊藻毒素-LR在一定质量浓度范围内线性关系良好，相关系数大于0.990，方法最低检测质量浓度为0.21 µg/L，并且该方法检测速度快、适用性强，能为人民群众的饮用水安全提供技术保障。
关键词：液相色谱串联质谱法；微囊藻毒素-LR；直接进样1 引言随着工业的快速发展，社会对环境造成的污染越来越严重，导致水体中含有大量含氮、磷的污染物,加速了湖泊的富营养化[1],为藻类的生存繁殖提供了条件。
其中微囊藻毒素(Microcystin，MC)是涉及范围最广,被研究最多的一类藻毒素,它是一类具有生物活性的环状七肽化合物，分子式为C49H74N10O12，是由蓝藻水华，如固氮的鱼腥藻（Anabaena）、束丝藻（Aphanizomenon）、拟柱胞藻（Clindrospermopsis）、胶刺藻（Gloeotrichia）和节球藻（Nodularia），非固氮的微囊（Microcystis）、颤藻（Oscillatoria）和鞘丝藻（Lyngbya）等暴发所产生的一种肝毒素[2]，对蛋白磷酸酶1和蛋白磷酸酶2A具有抑制作用，当细胞破裂或衰老时毒素释放进入水中，被人体饮用后会带来极大的危害，是强烈的肝脏肿瘤促进剂，而其中的微囊藻毒素-LR(MC-LR)是目前已知毒性最强、急性危害最大的一种淡水蓝藻毒素,因此对水中微囊藻毒素-LR的检测是非常必要的。
固相微萃取高效液相色谱法测定水中的微囊藻毒素
固相微萃取高效液相色谱法测定水中的微囊藻毒素
固相微萃取/高效液相色谱法测定水中的微囊藻毒素
采用CWX/DVB萃取头,应用固相微萃取与高效液相色谱联用技术(SPME/HPLC)分析了水溶液中的痕量微囊藻毒素.对SPME的萃取条件进行了优化,并对实际水样进行了分析.该方法测定MC-LR(LR型微囊藻毒素)的线性范围为1.00～200 μg/L,相关系数为0.999 5,检出限为0.45 μg/L(3σ,n=11),相对标准偏差(RSD)为2.4%,回收率为90%～99%.该方法测定MC-RR(RR型微囊藻毒素)的线性范围为1.00～100μg/L,相关系数为0.998 8,检出限为0.15 μg/L(3σ,n=11),RSD为2.4%,回收率为89%～100%.
作者：吴伟文杨左军顾浩飞郑文丽徐嵘 WU Wei-wen YANG Zuo-jun GU Hao-fei ZHENG Wen-li XU Rong 作者单位：吴伟文,WU Wei-wen(深圳市南山区环境监测站,广东,深圳,518052) 杨左军,顾浩飞,郑文丽,徐嵘,YANG Zuo-jun,GU Hao-fei,ZHENG Wen-li,XU Rong(深圳出入境检验检疫局,广东,深圳,518045) 刊名：分析测试学报ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF INSTRUMENTAL ANALYSIS 年，卷(期)：2007 26(4) 分类号：O657.72 S946 关键词：固相微萃取(SPME) 高效液相色谱水样微囊藻毒素。
高效液相色谱-电喷雾电离质谱法测定地表水中微囊藻毒素
ｓｏ ｅ ａ ｍ ｂ ｅｓｌｔ ｎ ［ （ ｅｈｎ １ ： （ ａｅ）＝６ ：０ ｈ ｗ ｄｔ ｔ ｏ ｉ ｏｕｉ ｈ ｌ ｏ Ｖ ｍ ｔａ ｏ） Ｖ ｗ ｔ ｒ ０ ４ ］ｗ ｉ ｏ ｔ ｎ ｄ０ １ ｍ ｔａｏｃａｉ ，ｓｌ ． ｈｃ ｃ ｎ ｉｅ ． ％ ｅｈｎ ｉ ｃ ｈ ａ ｄ ｅｅ ｃ ｔ ｅｑ ａ ｔｙｉ （ ／ ｉ ｕ ｎｉ ｎ ｍ ｚ＝９ ６ ３） Ｇ ｏ ｉｅｒｙ ｏ ｔｅ ｍ ｔｏ ａ ｏ ｔ ｎｄ ｉ ｒ ｇ ｒｍ ０ １ ０ ｍｇ Ｌ ｔ ｖ ｔ ｏ ９ ． ． ｏｄ ｌ ａｉ ｆ ｈ ｅ ｄ ｗ ｓ ｂ ｉｅ ｎ ａ ｅｆ ． ／ ｏ ｎ ｔ ｈ ａ ｎ ｏ ０
Ｍ Ｃ中研究 最多且毒 性较 大 的有 ＭＣ—Ｌ Ｍ Ｒ、 Ｃ—Ｒ Ｒ
和 ＭＣ— Ｒ， Ｙ 世界 卫 生 组 织 （ ＷＨＯ） 许 多发 达 国 和
１ 试 验 １ １ 主 要 仪 器 与 试 剂 ．
Ａ ｉ ｎ １ ０型 高效液 相色谱 一单 四级质 谱 联 ｇｌ ｔ ３ ｅ ６
用仪 ， 国 Ａ ｉ ｎ 公 司 ； 美 ｇｅｔ ｌ 手动 固相萃 取仪 ， 国 ｓ － 美 ｕ
ｐｌ 公 司 ； ｅｏ ｃ 氮吹仪 ， ｒａｏ ａｉ ｓｏｉ ｅ ， ｎ Ｏ ｇｎ ｍ ｔ ｎＡ ｓｃ ｔｓ Ｊｃ公 ｏ ａ 司 ；Ｌ Ｈ Ｂ固相 萃 取 小柱 （ ０ ， Ｅ ； 璃 纤 维 ５ ０ ｍｇ ６ｍ ） 玻 滤膜 （ ．５ Ｉ ； 头过滤 器 （ ． ｍ） 玻璃 注 射 ０ ４ Ｌ 针 ． ｍ） ０ ２Ｉ ； ｘ
Ｋ ｅ ｒ ｓ：Ｍ Ｃ — ＬＲ ； Ｓ ｌｄ ｐ ａ ｅ ｅ ｔａ ｔ ｎ；Ｈ Ｐ ｙ ｗｏ ｄ ｏｉ ｈ ｓ ｘｒ ｃ ｉ ｏ ＬＣ — ＥＳ Ｉ— Ｍ Ｓ；Ｓ ｒａ ｅ ｗａ ｅ ｕ ｆｃ ｔｒ
固相萃取高效液相色谱法测定水中痕量微囊藻毒素
分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究报告
第5期
2001 年 5 月
Chinese Journal of Analytical Chemistry
522～525
固相萃取高效液相色谱法测定水中痕量微囊藻毒素
张维昊 徐小清 3
(中国科学院水生生物研究所 , 武汉 430072)
Macrocystins (MC) 2LR MC2CR
2. 5 ×10 - 7～2. 5 ×10 - 5 2. 5 ×10 - 7～2. 5 ×10 - 5
Y = 1. 17 X - 0. 03 Y = 0. 88 X - 0. 33
相关系数 Correlation coefficient ( r)
0. 03
5. 5
88. 3
MC2RR
1. 680
1. 432 1. 346 1. 288 1. 454 1. 326 1. 355
0. 06
3. 8
81. 3
4 结 语
建立了 SPE2HPLC 分析水中痕量微囊藻毒素的方法 ,该法具有操作简便 ,灵敏度高的特点 ,适合水 质监测部门应用 。同时 ,与酶联免疫法相比 ,在定性和定量上更加可靠 ,可推广进行水中藻毒素含量的 检测 。
毒素 Toxins
加入量 Added (μg/ L)
检出量 Detected (μg/ L)
标准偏差 SD (μg/ L)
相对标准偏差 RSD ( %)
平均回收率 Recovery ( %)
MC2LR
0. 560
0. 522 0. 504 0. 480 0. 453 0. 532 0. 478
2000207203 收稿 ;2001201215 接受 本文系国家科技部与云南省政府资助课题 (课题号 :DCH201)
检测微囊藻毒
基于全自动固相萃取前处理方法的3种微囊藻毒素高通量检测1 方法依据本方法依据2007年7月1日实施的《生活饮用水标准检验方法》GB/T5750-2006制定。
2 适用范围2.1 本方法采用高效液相色谱法测定生活饮用水及其水源水中的微囊藻毒素；2.2 本方法适用于地表水源水及生活饮用水的微囊藻毒素的检测。
2.3 本方法仪器的最低检出限MC-YR为0.2mg/L；MC-LR为0.2mg/L；MC-RR 为0.25mg/l,若取水样1000ml，浓缩至2ml，浓缩倍数为500倍，则方法的最低检出限分别为0.0004mg/L；0.0004mg/L；0.0005mg/L。
3 方法原理本方法采用C18固相萃取柱，对水中的微囊藻毒素进行浓缩富集，用洗脱液洗脱保留在萃取柱上的微囊藻毒素，然后用带有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪进行定性和定量分析。
4 试剂材料4.1 C18固相萃取小柱：液相填料；4.2 高纯水：密理博公司纯水仪，经0.22um的滤膜过滤；4.3 甲醇：色谱纯级，经0.22um的滤膜过滤；4.4 三氟乙酸：色谱纯级4.5 微囊藻毒素标准物质；4.6萃取柱活化剂及洗脱液：二氯甲烷（色谱纯级）、甲醇（色谱纯级）。
5 仪器5.1 高效液相色谱仪（Agilent 1100）：配二极管阵列检测器(DAD)和3D色谱工作站；5.2 固相萃取装置（Agilent）：配缓冲装置；5.3 真空泵：Vacuum Pressure Pump AP—9908S5.4 密理博公司纯水仪；5.5 过滤装置：配滤膜100mm 0.45um；5.6 吸液装置；5.7 尖底浓缩管：2ml具刻度。
6 样品预处理6.1 水样的采集和贮存方法样品存放在棕色的玻璃瓶中，尽快检测。
6.2活化和条件化预先用5ml二氯甲烷和5ml甲醇润洗萃取柱，达到去干扰和活化柱子的目的，再用5ml纯水通过小柱条件化。
6.3样品富集采集1000ml水样，以5~10ml/min流速通过活化的固相萃取柱，完成固相萃取富集。
6-高效液相色谱法分析水中微囊藻毒素
高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素雷军马东哲王鹏辉（国家城市供水水质监测网大庆监测站，大庆，163458）摘要研究了一种用高效液相色谱法分析水中微囊藻毒素的方法。
当取样量为1L时，回收率为99.6%，RSD<10%，检出限为0.05mg/L。
并用该方法对某地区水库引水干渠、水库原水、出厂水中的微囊藻毒素的含量进行了定量测定。
关键词微囊藻毒素液相色谱法1引言微囊藻毒素分子形态成七肽环状[1]，结构稳定，其分子结构通常为环-[-D-丙氨酸-L-X-赤-β-甲基-D-异天冬氨酸-L-Y-Adda-D-异谷氨酸-Mdha]，其中Mdha和Adda是两种特殊氨基酸，Adda与MC的毒性有密切关系[2]，X,Y代表两种可变氨基酸，由它们的不同，以及其它一些基团的细微变化，就产生了多种微囊藻毒素异构体，常见的有MC-LR、MC-RR、MC-YR三种毒素[3-4]，其中L、R、Y分别代表亮氨酸、精氨酸、酪氨酸[5]，目前发现的异构体有60多种。
Harada将微囊藻毒素的检测和分析分为四个层次[6]：筛选、纯化、鉴定和定量分析。
其主要的方法有生物分析法、色谱分析法、免疫分析法和其他仪器分析法。
目前使用较多的是色谱分析法和免疫分析法两种。
高效液相色谱法因其灵敏度高、分析速度快，在测定微囊藻毒素方面具有其它方法无可比拟的优点，它可对不同类型的微囊藻毒素分别进行定性定量测定。
本文在色谱柱选择、色谱条件优化等方面实验优化，进一步提高了检测的灵敏度，增加检测的特异性，使此方法能更成熟、可靠，同时操作更简便，检测速度快捷。
2实验部分2.1仪器和试剂HP1290高效液相色谱系统（美国Agilent公司），包括G1315A二极管阵列检测器（DAD）；G1311A四元泵；G1313A自动进样器；G1322A真空脱气机；G1316A恒温柱箱；HP ChemStation A.06.01；Turbo Vap® LV样品浓缩仪。
水中微囊藻毒素的测定
编号：作业指导书水中微囊藻毒素的测定高效液相色谱法临江市环境保护监测站1、方法提要微囊藻毒素在238nm下有1、方法的适用范围本标准规定了高效液相色谱法和间接竞争酶联免疫吸附法测定水中微囊藻毒素（环状七肽）的条件和详细分析步骤。
本标准适应于饮用水、湖泊水、河水、地表水中微囊藻毒素的测定。
样品中微囊藻毒素的检出限：高效液相色谱法和酶联免疫吸附法均匀为0.1µg/L。
2、微囊藻毒素的分子式、分子质量及结构式2.1分子式微囊藻毒素-RR(MC-RR):C49H75N13O12,微囊藻毒素-YR(MC-YR):C52H72N10O13,微囊藻毒素-LR(MC-LR):C49H74N10O12.。
2.2分子质量MC-RR:1038.21mg,MC-YR:1045.2100µg,MC-LR:995.250µg。
2.3结构式MC-RR、MC-YR、MC-LR、X和Y表1MC-RR、MC-YR、MC-LR、X和Y微囊藻毒素X YMC-RR Arg(R)Arg(R)MC-YR Tyr(R)Arg(R)MC-LR Leu(L)Arg(R)3、水样采集和保存用采水器采集1500ml～2000ml水样（水样采集后，应在4h内完成以下前处理步骤）。
用500目的不锈钢筛（）过滤，除去水样中大部分浮游生物和悬浮物。
取过滤后的水样1200ml于玻璃杯式滤器（）中，依次经滤膜（）减压过滤。
准确量取1000ml 滤液置于棕色试剂瓶中。
注：如减压过滤后的水样不能立即分析，可置于玻璃容器中，在-20℃保存，30d内分析完毕。
4、试剂和材料除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂和不含有机物的蒸馏水。
5.1甲醇，HPLC级（色谱级甲醇）5.2二氯甲烷，农残级5.3阿特拉津标准贮备溶液，ρ=100µg/mL。
准确称取0.0100g阿特拉津标准样品，用少量二氯甲烷溶解后，再用甲醇准确定容至100mL，作为阿特拉津标准贮备溶液。
固相萃取-高效液相色谱法测定地表水中的微囊藻毒素-LR的方法优化
改良后ꎬ 方法操作简单、 灵敏度较高ꎬ 具有较好的精
密度和准确度ꎬ 能很好地满足生活饮用水及其水源中
微囊藻毒素 － ＬＲ 的日常检测要求ꎮ
参考文献
[１] 谢平. 论蓝藻水华的发生机制—从生物进化、 生物地球化学和
生态学视点 [ Ｍ] . 北京: 科学出版社ꎬ ２００７.
[２] Ｌｉｕ Ｉꎬ Ｌａｗｔｏｎ Ｌ Ａꎬ Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ Ｐ Ｋ Ｊ. Ｍｅｃｈａｎｉｓｔｉｃ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ
※农业科学
农业与技术 ２０２１ꎬＶｏｌ ４１ꎬＮｏ ０５ ２ ３
固相萃取 － 高效液相色谱法测定地表水中的
微囊藻毒素 － ＬＲ 的方法优化
用之前以 １０ｍＬ 甲醇及 １０ｍＬ 去离子水活化ꎮ 将水样
以 ５ ~ １０ｍＬｍｉｎ 的流速流过固相萃取柱进行富集浓
－１
ＬＲ 富集、 净化效果进行了考察ꎬ Ｃ１８ 柱回收率变化
较大ꎬ 检测稳定性一般ꎬ ＨＬＢ 柱对微囊藻毒素 － ＬＲ 有
较好的富集效果ꎬ 回收率稳定ꎬ 检测可重复性良好ꎬ
因此ꎬ 采用 ＨＬＢ 固相萃取柱ꎬ 规格为 ２００ｍｇ、 ６ｍＬꎮ
作者简介: 刘畅 (１９８３－) ꎬ 女ꎬ 硕士ꎬ 高级工程师ꎮ 研究方向: 生态环境监测ꎮ
－１
２ ４ ２０２１ꎬＶｏｌ ４１ꎬＮｏ ０５
农业与技术 ※农业科学
关于洗脱过程甲醇用量的确定ꎬ 分别采用 ６ｍＬ、 ８ｍＬ、
缩ꎮ 上样完成后ꎬ 用 ２０％ 甲醇水溶液 １０ｍＬ 淋洗以净
１０ｍＬ、 １２ｍＬ 甲醇溶液进行洗脱ꎬ 实验表明ꎬ １０ｍＬ 甲
( 含 ０ １％的三氟乙酸) 以 １ｍＬｍｉｎ 的流速将固相
０ １％的三氟乙酸ꎬ 洗脱效果显著提升ꎬ 因此ꎬ 最终