MSC(间充质干细胞)

正常人与SLE患者BMSCs生长曲线比较

12000 10000 8000 6000 4000 2000 0
population Cell细胞数

SLE Normal
生长曲线呈S形 SLE患者BMSCs总体生长较 正常人缓慢
d 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 天数
张华勇，孙凌云，中华风湿病学杂志，2006
30 25
% CD3+ Tcells
R2
R1 0 200 400 600 FSC-Height 800 1000
100 101 102 FL1-H 103 104
T cells T cells/Bc MSCs T cells/NW MSCs
# # # #
向TH1偏移

20 15 10 5 0
*
*
#
*

对TH1/TH2平衡影响
正常MSCs：使TH1/TH2平衡向TH1偏移 狼疮鼠病情缓解？ 狼疮MSCs：使TH1/TH2平衡向TH2偏移 狼疮鼠病情恶化？ 狼疮鼠BMSCs对T细胞免疫调节功能存在缺陷

ຫໍສະໝຸດ Baidu

MSCs与B细胞
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
生物学特性
adipocyte osteocyte chondrocyte myoblast

自我更新、多向分化潜能 易扩增传代能力

cardiocyte Nerve cell hepatocyte
MSCs
体外能够传40代，并保持稳定的 表型和多向分化的潜能
IL-6, IL-7, IL-10, IL-11, SCF, SDF-1 GM-CSF, M-CSF..

产生多种细胞因子

分泌IL-6、IL-7、IL-8、IL-11、干细胞生长因子（SCF）、 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、转化生长因子 -β（TGF-β）等

无MHC限制

不管MSCs或T细胞来源种类，MSCs均能对T细胞增殖产生免 疫抑制作用

免疫调节作用

狼疮骨髓MSCs（BMSCs）

而IL-11,M-CSF表 达无区别
SLE
张华勇，孙凌云，中华风湿病学杂志，2006
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
SLE患者BMSCs染色体组型
孙凌云等，中华风湿病学杂志，2005
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
SLE与正常对照组BMSCs培养比较
SLE 组 原代培养时间 形态学 扩增效率 26±7.76 d
MSCs与T细胞

不活化异基因T细胞

抑制T细胞增殖 包括初始和记忆性T细胞的增殖 包括同种异基因抗原、丝裂原或抗原特异性刺激 对T细胞凋亡影响 一：不诱导静止期T细胞凋亡（Tse WT et al.
Transplantation，2003，75：389-397.）


二：诱导活化的T细胞凋亡（Plumas J et al.Leukemia
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
间充质干细胞的免疫调控和 临床应用
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
与狼疮鼠BMSCs(NZBWF1/J) 共孵育： ↑IL-6*, IL-4, IL-10 ↓ TNF-α* 向TH2偏移
IL-4
IL-6
IL-10
IFN-γ
TNF-α
IL-12
Intercellular cytokines
*为有统计学意义
Sun LY, et al.Scand J Rheumatol,2006
Jiang XX et al.Blood，2005;105:4120-4126
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School

MSCs与CTL

抑制CTLs的细胞毒作用

表面标记测定
表 达 CD29、CD44 和 CD105
不 表 达 CD14、CD34、 CD45 、HLA-DR

正常组与狼疮组表型表达 并无差异（P<0.05)
张华勇，孙凌云，中华风湿病学杂志，2006
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University 对照 Medical School
正常人与SLE患者BMSCs细胞因子表达比较
Beta-actin
IL-7

SLE中IL-6、 IL-7 表达降低（P<0.05）

MSCs与DC细胞
人BMSCs与DC共培养对DC分化、成熟、功能影响

显著抑制单核细胞向DC分化（无需细胞间接触） 抑制DC分泌TNF-α的能力 引起免疫耐受


成熟DC （CD83、HLA-DR、CD1a、CD80、CD86）表达 ↓ ，IL-12分泌↓ 向非成熟状态的偏离 对同种 T细胞的活化能力下降
C. T＋正常 MSCs

与正常鼠BMSCs共培养：T-bet↑，GATA-3↓ 与狼疮鼠BMSCs共培养：T-bet↓，GATA-3↑
TH1↑ TH2↑
Sun LY, et al.Scand J Rheumatol,2006
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
人
形态观察
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School


正常人与SLE患者 BMSCs形态大小上无差 异，均以长梭形为主
SLE骨髓（P0）MSCs第25d 倒置显微镜观察 ×100


呈时间和剂量依赖 不能抑制已活化CTLs的细胞毒作用
通过可溶性因子介导

MSCs不是CTLs作用的靶细胞
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School

表达多种细胞表面分子

CD105、CD73、CD44、CD71、CD90、CD166、基质细胞抗原 （STRO-1 ）等
正常对照组 17 ±5.46 d P=0.029
无区别 P5代后降低 P10代后降低
张华勇，孙凌云，中华风湿病学杂志，2006
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
内容

MSCs的生物学特性 MSCs的免疫调控作用

MSCs与免疫细胞（T、B、DC、NK、CTL） MSCs的免疫调控机制


MSCs的临床应用
间充质干细胞
Nanjing University
（Mesenchymal Stem Cells ，MSCs)
The Affiliated Drum Tower 来源广泛 Hospital of Nanjing 可来源于骨髓、胰腺、皮肤、肺 University Medical 脏等多处器官组织 School
单独T细胞
T ＋狼疮BMSCs
T ＋正常BMSCs
Sun LY, et al.Scand J Rheumatol,2006

对T细胞亚群的影响

Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
2005; 19:1597-604. ）
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School

三：使活化的T细胞凋亡降低
与正常（BALB/c）及 狼疮鼠（NZBWF1/J） BMSCs共培养均导致活 化的T细胞凋亡下降 （P<0.05)
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
静止期NK不能裂解人 MSCs。IL-2活化的自 体及异体NK细胞均可 裂解BMSCs BMSCs抑制IL-2诱导的 静止期NK细胞的增殖， 部分抑制已活化NK细 胞的增殖
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School

转录因子T-bet 和 GATA-3
T-bet
GATA-3
β-actin
β-actin
A
B
C
B. 单独 T
A
B
C
A. T ＋狼疮 MSCs


经IFN－γ预处理可抑 制该裂解作用—上调 MSCs的HLA-Ⅰ类分子 水平 阻止NK细胞的 活化
NK对MSCs的裂解作用.（E/T即NK/MSC）
Spaggiari GM, et al.Blood. 2006;107:1484-1490
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
2.BMSCs与正常T细胞共孵育前后细胞内细胞因子的变化

与正常鼠BMSCs(BALB/c)共 孵育： ↑IFN-γ*, IL-12* IL-4*, IL-10 , IL-6，TNF-α*
T细胞内细胞因子测定
1.正常鼠BMSCs对狼疮T细胞IFN-γ、 IL-4生成的影响

IFN-γ生成T细胞被刺激增多 IL-4生成T细胞被抑制减少 正常BMSCs可促进TH1而抑制TH2细胞生成—影响SLE病情
Deng W, et al. DNA and Cell Biology. 2005;24:458-463
——为正常的染色体组型
张华勇，孙凌云，中华风湿病学杂志，2006

鼠
形态学
Nanjing University
The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School
BALB/c （P0）×100

NZBWF1/J
形态上无显著差异 但狼疮MSCs增殖速度更快、传代时间更短
不同于人？
Sun LY, et al.Scand J Rheumatol,2006
MSCs与免疫细胞
Nanjing University

The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School

人BMSCs可抑制B细胞增殖 增殖抑制与B细胞的凋亡无关， 而与细胞周期滞留于G0/G1有 关 由可溶性细胞因子介导 （不需细胞间直接接触） 抑制抗体生成(IgA、IgM、 IgG)



Corcione A,et al. Blood. 2006;107:367-372

MSCs与NK细胞

Nanjing University