液相色谱常见问题及处理方法
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6．检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗。
7．检测池中有气泡。解决办法为排气。
8．记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。
9．流动相流量不合适。调整流速即可。
10．检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。
为什么HPLC柱柱压过高
柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。
J色谱峰强度参数
K’所给谱峰的容量因子，k’=(tR-t0)/t0=tR’/t0，tR=t0(1+k’)
k梯度洗脱过程中，某溶质的k’的平均值或有效值
kw以水做流动相k’的外推值
k1,k2相邻谱峰1和谱峰2的容量因子
L色谱柱长度（cm）
Lc检测器流动池光路的长度（cm）
M溶质的分子量
MC二氯甲烷Methylene chloride
高效液相色谱所用基本概念：
保留值等色谱分析有关术语，以及分配系数、分配比、塔板高度、分离度、选择性等方面均与气相色谱相一致；高效液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率理论也与气相色谱一致。因液相色谱以液体代替气相色谱中的气体作流动相，则速率议程H=A+B/?+C?。式中：纵向扩散项（分子扩散项）B/?对板高的影响与气相色谱不同，由于液相色谱中组分分子在流动相中的扩散系数Dm仅为气相色谱中的万分之一，因此纵向扩散项对板高的影响可以忽略不计。于是影响液相色谱的主要因素是传质项Cu。由图14—可知，气相色谱（GC）的流动相流速u增大时，板高H显着增大（即柱效显着降低），而液相色谱（LC）的流速增大时，板高增大不显着（即柱效降低不显着）。这说明高效液相色谱也有很高的分离效能，此外，气相色谱的载气权数种，其性质差别也不大，对分离效果影响也不大。而液相色谱的载液种类多，性质差别也大，对分离效果影响显着。因此流动相的选择很重要，并且在选择流动相对应注意以下几点：流动相对样品有适当的溶解度，但不与样品发生化学反应，也不与固定液互溶；流动相的纯度要高（至少分析纯）、粘度要小，以免带进杂质和组分在流动相中扩散系数下降；流动相应与所用检测器相匹配，不应对组分检测产生干扰作用。高效液相色谱不但具有高效、高速、高灵敏度的特点，还由于它的流动相（载液）种类比气相色谱的流动相（载气）多，因此可选用两种或多种不同比例的液体作流动相，从机时可提高选择性。此外，液相色谱的馏分比气相色谱易于收集。便于为红外、核磁等方法确定化合物结构提供纯样品。由于高效液相色谱法具有以上特点，它适于分离、分析沸点高、热稳定性差、分子量大（大于400）的气相色谱法不能或不易分析的许多有机物和一些无机物，而这些物质占化合物总数的75~80%。因此它已广泛用于核酸、蛋白质、氨基酸、维生素、糖类、脂类、甾类化合物、激素、生物碱、稠环芳烃、高聚物、金属螯合物、金属有机化合物以及多种无机盐类的分离和分析。但是，高效液相色谱的固定相的分离效率、检测器的检测范围以及灵敏度等方面，目前还不如气相色谱法。此外对于气体和易挥发物质的分析方面也远不如气相色谱法，因此高效液相色谱法和气相色谱法配合使用可互相取长补短，相辅相成。
TLC薄层色谱法Thin-layer chromatography
TMA四甲基铵Tetramethylammonium（盐）
TMS三甲基硅烷Trimethylsilyl
t0色谱柱的死时间（min）
tR溶质的保留时间（min）
tG梯度时间（min），即梯度开始至结束的时间
t1,t2相邻谱峰1和谱峰2的保留时间（min）
液相色谱常见问题及处理方法
液相色谱常见问题及处理方法
HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法
1．样品量不足，解决办法为增加样品量
2．样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子
3．样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器
4．检测器衰减太多。调整衰减即可。
5．检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数
液相色谱法简介
气相色谱不能由色谱图直接给出未知物的定性结果，而必须由已知标准作对照定性。当无纯物质对照时，定性鉴定就很困难，这时需借助质谱、红外和化学法等配合。另外大多数金属盐类和热稳定性差的物质还不能分析。此缺点可高效液相色谱法来克服。在经典液相色谱的基础上，引入了气相色谱的理论与技术，在70年代初建立了高效液相色谱分析法（以HPLC表示）。在常压下操作的液相色谱，分离一个样品往往长达几小时至几十小时，因此工作效率很低。人们曾对这种经典液相色谱法试用了柱前加压或柱后减压的办法来提高流速，以缩短分离时间，但是结果失败了。根据液相色谱理论，因为随着载液（流动相）流速的提高，板高则增大，所以柱效会显着降低。随着生产技术的提高，人们制成了细小（<10?m）而高效的填充物，从而使柱效大大提高。但是随着填充物粒度的减小，柱压降显着增大，为了得到合理的载液流速，使用了高压；输液泵，使流速达到1~10mL/min。从而使分析一个多组分样品只需几分钟到几十分钟时间。随着高效固定相、高压泵和高灵敏度检测器以及电子技术和计算机技术的应用，70年代以业逐步实现了液相色谱分析的高效、高速、高灵敏和自动化操作。因此人们常称它为高效液相色谱或现代液相色谱，以区别于经典液相色谱。高效液相色谱法的分类与经典液相色谱法一致。按固定相的聚集状态不同分为液固色谱法和液液色谱法。按分离原理不同分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶色谱法四类。
4．更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题，SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。
液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？
HA酸性溶质，能电离出A-
Hex己烷Hexane
hr二相邻谱带之间的谷高
HVA高香草酸Homovanillic acid
h’峰高
h1,h2相邻谱峰1和谱峰2的峰高
IEC离子交换色谱法Ion-exchange chromatography
IP离子对Ion-pair
IPC离子对色谱法Ion-pair chromatography
3．柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡
快速变化现象
1.流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定
2．泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。
3．流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合
HPLC仪器问题
1、我的HPLC泵压明显的偏高，请问可能的原因？
答：流速设定过高；流动相或进样中有机械杂质，造成保护柱、柱前筛板或在线过滤器阻塞；流动相粘度过大；柱温过低；缓冲盐结晶；压力传感器故障。
3、问：K''值增加时，拖尾更严重，这是为什么？
答：反相模式，二级保留效应；
a.加入三乙胺（或碱性样品）
b.加入乙酸（或酸性样品）
c.加入盐或缓冲剂（或离子化样品）
d.更换一支柱子
4、问：保留时间的波动有几种可能的原因？
答：温控不当；调节好柱温。流动相组分变化；防止流动相蒸发、反应等，做梯度时尤其要注
4、进样阀漏液是如何造成的？
答：a.转子密封损坏；更换转子密封
b.定量环阻塞；清洗或更换定量环
c.进样口密封松动；调整松紧度
d.进样针头尺寸不合适，一般是过短；使用恰当的进样针（注意针头形状）
e.废液管中产生虹吸；清空废液管
谱图问题
1、问：造成峰拖尾的原因是什么，如何消除？
答：a.筛板阻塞；反冲色谱柱、更换进口筛板
ti色谱图中第一峰的保留时间（min）
tf色谱图中最末峰的保留时间（min）
△tg tf-ti
tx (tf-ti)/2
UV紫外光
Vm色谱柱的死体积（mL），Vm=t0F
VMA香草扁桃酸Vanillymandelic acid
wm化合物的进样量
w1,w2相邻谱峰1和谱峰2于半峰高处（W1/2）的宽度（min）
b.色谱柱塌陷；填充色谱柱
c.有干扰物质的存在；使用更长的色谱柱、改变流动相或更换色谱柱
e.流动相PH值不合适；调整PH值，对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰
f.样品与填料表面的溶化点发生反应；加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂或更改色谱柱
2、问：造成峰分叉的原因是什么，如何消除？
答：保护柱或分析柱污染；取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。样品溶剂不溶于流动相；改变样品溶剂，如果可能采取流动相作为样品溶剂。
1．筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。
2．存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子
如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化
漂移现象
1．温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定
2．流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等
BSA牛血清白蛋白（一种蛋白质）Bovine serum albumin
CAF咖啡因（中性溶质）Caffeine
CRF色谱响应因子Chromatographic response function；色谱图总分离度的定量指标
dc色谱柱内径（cm）
DMOA二甲基辛胺Dimethyloctylamine
DNB 2,4-二硝基甲酰（基）2，4-Dinitrobenzoyl
MDST混合设计统计技术Mixture-design statistical technique；一种优化流动相的软件
MeOH甲醇Methanol
MTBE甲基叔丁醚Methyl-t-butyl ether
MW溶质的分子量
N色谱柱塔板数
NAPA N-乙酰普鲁卡因胺N-Acetylprocainamide（碱性溶质）
S/N信噪比Signal to noise ratio
t分离时间（min）（样品进样时t=0）
tp梯度系统的滞后时间（min）
TBA四丁基铵离子Tetrabutylammonium ion
TEA三乙胺Triethylamine
THF四氢呋喃Tetrahydrofuran
tk在用于校正等度洗脱溶剂强度的流动相离开梯度混合器时，梯度洗脱的时间
dp色谱柱填料的粒度（cm）
DRYLAB液相资源公司（LC Resources INC.)的计算机模拟软件。DRYLAB I用于等度预测，DRYLAB G用于梯度预测
F流动相的流速（ml/min）
FC-113 1，1，2-三氟-1，2，2-三氯乙烷
GPC凝胶渗透色谱法Gel-permeation chromatography
g.检测器没有设定在最大吸收波长处；将波长调整至最大吸收波长处
h.柱平衡慢，特别是流动相发生变化时；用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
3、接头处为何经常漏液，如何处理？
答：接头没有拧紧；拧松后再紧，手紧接头以手劲为限，不要使用工具，不锈钢接头先用手拧紧，再用专用扳手紧1/4-1/2圈，注意接头中的管路一定要通到底，否则会留下死体积。接头被污染或磨损；建议更换接头。接头不匹配，建议使用同一品牌的配件。
pKa溶质酸性常数的负对数；当pH=pKa时，溶质中有一半是电离的
Rk保留值范围，Rk=（最末谱峰k’）/（最初谱峰k’）
RRM相对分离度图（通常N=10000）
Rs相邻二谱峰的分离度
S当流动相中的%B改变时，测量溶质保留值的变化速率的参数
SAL水杨酸Salicylic Acid
SEC尺寸排阻色谱法Size-exclusion chromatography
1．拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；
2．把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；
3．将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。这时，如果柱压仍不下降，再检查；
N0检测器的基线噪音
ODS十八烷基硅烷Octadecylsilyl
P色谱柱的压力降[通常以巴（bar）表示，也用psi；另外，也用作柱极性参数
PA普鲁卡因胺Procainamide（碱性物质）
PAH聚芳香烃Polyaromatic Hydrocarbon
PESOS优化流动相的计算机软件（美国Perkin-Elmer产品）
W1,W2相邻谱峰1和谱峰2的基线宽度（min）
W1/2半峰高处的谱带宽度
xd,xe,xn溶剂选择参数，分别用于测定溶剂的酸度、碱度和偶极性的程度
?分离因子，?=k2/k1
△?梯度洗脱期间流动相成分的变化
?o溶剂强度参数
?化合物的克分子吸收系数
?流动相的粘度（Pa•s)
?流动相中强溶剂的体积份数
%B二元流动相中强溶剂的体积百分比（%v）
2、基线不稳，上下波动或漂移的原因是什么，如何解决？
答：a.流动相有溶解气体；用超声波脱气15-30分钟或用充氦气脱气
b.单向阀堵塞；取下单向阀，用超声波在纯水中超20分钟左右，去处堵塞物
c.泵密封损坏，造成压力波动；更换泵密封
d.系统存在漏液点；确定漏液位置并维修
f.柱后产生气泡；流通池出液口加负压调整器
意流动相混合的均匀。色谱柱没有平衡；在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。
液相色谱常用符号与术语表
ACN乙腈Acetonitrile
AUFS满量程的吸光度单位Absorbance units, full scale
As峰不对称因子
B二元流动相中的强溶剂Fra Baidu bibliotek例如：反相HPLC的甲醇/水混合液中的甲醇
7．检测池中有气泡。解决办法为排气。
8．记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。
9．流动相流量不合适。调整流速即可。
10．检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。
为什么HPLC柱柱压过高
柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。
J色谱峰强度参数
K’所给谱峰的容量因子，k’=(tR-t0)/t0=tR’/t0，tR=t0(1+k’)
k梯度洗脱过程中，某溶质的k’的平均值或有效值
kw以水做流动相k’的外推值
k1,k2相邻谱峰1和谱峰2的容量因子
L色谱柱长度（cm）
Lc检测器流动池光路的长度（cm）
M溶质的分子量
MC二氯甲烷Methylene chloride
高效液相色谱所用基本概念：
保留值等色谱分析有关术语，以及分配系数、分配比、塔板高度、分离度、选择性等方面均与气相色谱相一致；高效液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率理论也与气相色谱一致。因液相色谱以液体代替气相色谱中的气体作流动相，则速率议程H=A+B/?+C?。式中：纵向扩散项（分子扩散项）B/?对板高的影响与气相色谱不同，由于液相色谱中组分分子在流动相中的扩散系数Dm仅为气相色谱中的万分之一，因此纵向扩散项对板高的影响可以忽略不计。于是影响液相色谱的主要因素是传质项Cu。由图14—可知，气相色谱（GC）的流动相流速u增大时，板高H显着增大（即柱效显着降低），而液相色谱（LC）的流速增大时，板高增大不显着（即柱效降低不显着）。这说明高效液相色谱也有很高的分离效能，此外，气相色谱的载气权数种，其性质差别也不大，对分离效果影响也不大。而液相色谱的载液种类多，性质差别也大，对分离效果影响显着。因此流动相的选择很重要，并且在选择流动相对应注意以下几点：流动相对样品有适当的溶解度，但不与样品发生化学反应，也不与固定液互溶；流动相的纯度要高（至少分析纯）、粘度要小，以免带进杂质和组分在流动相中扩散系数下降；流动相应与所用检测器相匹配，不应对组分检测产生干扰作用。高效液相色谱不但具有高效、高速、高灵敏度的特点，还由于它的流动相（载液）种类比气相色谱的流动相（载气）多，因此可选用两种或多种不同比例的液体作流动相，从机时可提高选择性。此外，液相色谱的馏分比气相色谱易于收集。便于为红外、核磁等方法确定化合物结构提供纯样品。由于高效液相色谱法具有以上特点，它适于分离、分析沸点高、热稳定性差、分子量大（大于400）的气相色谱法不能或不易分析的许多有机物和一些无机物，而这些物质占化合物总数的75~80%。因此它已广泛用于核酸、蛋白质、氨基酸、维生素、糖类、脂类、甾类化合物、激素、生物碱、稠环芳烃、高聚物、金属螯合物、金属有机化合物以及多种无机盐类的分离和分析。但是，高效液相色谱的固定相的分离效率、检测器的检测范围以及灵敏度等方面，目前还不如气相色谱法。此外对于气体和易挥发物质的分析方面也远不如气相色谱法，因此高效液相色谱法和气相色谱法配合使用可互相取长补短，相辅相成。
TLC薄层色谱法Thin-layer chromatography
TMA四甲基铵Tetramethylammonium（盐）
TMS三甲基硅烷Trimethylsilyl
t0色谱柱的死时间（min）
tR溶质的保留时间（min）
tG梯度时间（min），即梯度开始至结束的时间
t1,t2相邻谱峰1和谱峰2的保留时间（min）
液相色谱常见问题及处理方法
液相色谱常见问题及处理方法
HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法
1．样品量不足，解决办法为增加样品量
2．样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子
3．样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器
4．检测器衰减太多。调整衰减即可。
5．检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数
液相色谱法简介
气相色谱不能由色谱图直接给出未知物的定性结果，而必须由已知标准作对照定性。当无纯物质对照时，定性鉴定就很困难，这时需借助质谱、红外和化学法等配合。另外大多数金属盐类和热稳定性差的物质还不能分析。此缺点可高效液相色谱法来克服。在经典液相色谱的基础上，引入了气相色谱的理论与技术，在70年代初建立了高效液相色谱分析法（以HPLC表示）。在常压下操作的液相色谱，分离一个样品往往长达几小时至几十小时，因此工作效率很低。人们曾对这种经典液相色谱法试用了柱前加压或柱后减压的办法来提高流速，以缩短分离时间，但是结果失败了。根据液相色谱理论，因为随着载液（流动相）流速的提高，板高则增大，所以柱效会显着降低。随着生产技术的提高，人们制成了细小（<10?m）而高效的填充物，从而使柱效大大提高。但是随着填充物粒度的减小，柱压降显着增大，为了得到合理的载液流速，使用了高压；输液泵，使流速达到1~10mL/min。从而使分析一个多组分样品只需几分钟到几十分钟时间。随着高效固定相、高压泵和高灵敏度检测器以及电子技术和计算机技术的应用，70年代以业逐步实现了液相色谱分析的高效、高速、高灵敏和自动化操作。因此人们常称它为高效液相色谱或现代液相色谱，以区别于经典液相色谱。高效液相色谱法的分类与经典液相色谱法一致。按固定相的聚集状态不同分为液固色谱法和液液色谱法。按分离原理不同分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶色谱法四类。
4．更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题，SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。
液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？
HA酸性溶质，能电离出A-
Hex己烷Hexane
hr二相邻谱带之间的谷高
HVA高香草酸Homovanillic acid
h’峰高
h1,h2相邻谱峰1和谱峰2的峰高
IEC离子交换色谱法Ion-exchange chromatography
IP离子对Ion-pair
IPC离子对色谱法Ion-pair chromatography
3．柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡
快速变化现象
1.流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定
2．泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。
3．流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合
HPLC仪器问题
1、我的HPLC泵压明显的偏高，请问可能的原因？
答：流速设定过高；流动相或进样中有机械杂质，造成保护柱、柱前筛板或在线过滤器阻塞；流动相粘度过大；柱温过低；缓冲盐结晶；压力传感器故障。
3、问：K''值增加时，拖尾更严重，这是为什么？
答：反相模式，二级保留效应；
a.加入三乙胺（或碱性样品）
b.加入乙酸（或酸性样品）
c.加入盐或缓冲剂（或离子化样品）
d.更换一支柱子
4、问：保留时间的波动有几种可能的原因？
答：温控不当；调节好柱温。流动相组分变化；防止流动相蒸发、反应等，做梯度时尤其要注
4、进样阀漏液是如何造成的？
答：a.转子密封损坏；更换转子密封
b.定量环阻塞；清洗或更换定量环
c.进样口密封松动；调整松紧度
d.进样针头尺寸不合适，一般是过短；使用恰当的进样针（注意针头形状）
e.废液管中产生虹吸；清空废液管
谱图问题
1、问：造成峰拖尾的原因是什么，如何消除？
答：a.筛板阻塞；反冲色谱柱、更换进口筛板
ti色谱图中第一峰的保留时间（min）
tf色谱图中最末峰的保留时间（min）
△tg tf-ti
tx (tf-ti)/2
UV紫外光
Vm色谱柱的死体积（mL），Vm=t0F
VMA香草扁桃酸Vanillymandelic acid
wm化合物的进样量
w1,w2相邻谱峰1和谱峰2于半峰高处（W1/2）的宽度（min）
b.色谱柱塌陷；填充色谱柱
c.有干扰物质的存在；使用更长的色谱柱、改变流动相或更换色谱柱
e.流动相PH值不合适；调整PH值，对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰
f.样品与填料表面的溶化点发生反应；加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂或更改色谱柱
2、问：造成峰分叉的原因是什么，如何消除？
答：保护柱或分析柱污染；取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。样品溶剂不溶于流动相；改变样品溶剂，如果可能采取流动相作为样品溶剂。
1．筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。
2．存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子
如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化
漂移现象
1．温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定
2．流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等
BSA牛血清白蛋白（一种蛋白质）Bovine serum albumin
CAF咖啡因（中性溶质）Caffeine
CRF色谱响应因子Chromatographic response function；色谱图总分离度的定量指标
dc色谱柱内径（cm）
DMOA二甲基辛胺Dimethyloctylamine
DNB 2,4-二硝基甲酰（基）2，4-Dinitrobenzoyl
MDST混合设计统计技术Mixture-design statistical technique；一种优化流动相的软件
MeOH甲醇Methanol
MTBE甲基叔丁醚Methyl-t-butyl ether
MW溶质的分子量
N色谱柱塔板数
NAPA N-乙酰普鲁卡因胺N-Acetylprocainamide（碱性溶质）
S/N信噪比Signal to noise ratio
t分离时间（min）（样品进样时t=0）
tp梯度系统的滞后时间（min）
TBA四丁基铵离子Tetrabutylammonium ion
TEA三乙胺Triethylamine
THF四氢呋喃Tetrahydrofuran
tk在用于校正等度洗脱溶剂强度的流动相离开梯度混合器时，梯度洗脱的时间
dp色谱柱填料的粒度（cm）
DRYLAB液相资源公司（LC Resources INC.)的计算机模拟软件。DRYLAB I用于等度预测，DRYLAB G用于梯度预测
F流动相的流速（ml/min）
FC-113 1，1，2-三氟-1，2，2-三氯乙烷
GPC凝胶渗透色谱法Gel-permeation chromatography
g.检测器没有设定在最大吸收波长处；将波长调整至最大吸收波长处
h.柱平衡慢，特别是流动相发生变化时；用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
3、接头处为何经常漏液，如何处理？
答：接头没有拧紧；拧松后再紧，手紧接头以手劲为限，不要使用工具，不锈钢接头先用手拧紧，再用专用扳手紧1/4-1/2圈，注意接头中的管路一定要通到底，否则会留下死体积。接头被污染或磨损；建议更换接头。接头不匹配，建议使用同一品牌的配件。
pKa溶质酸性常数的负对数；当pH=pKa时，溶质中有一半是电离的
Rk保留值范围，Rk=（最末谱峰k’）/（最初谱峰k’）
RRM相对分离度图（通常N=10000）
Rs相邻二谱峰的分离度
S当流动相中的%B改变时，测量溶质保留值的变化速率的参数
SAL水杨酸Salicylic Acid
SEC尺寸排阻色谱法Size-exclusion chromatography
1．拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；
2．把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；
3．将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。这时，如果柱压仍不下降，再检查；
N0检测器的基线噪音
ODS十八烷基硅烷Octadecylsilyl
P色谱柱的压力降[通常以巴（bar）表示，也用psi；另外，也用作柱极性参数
PA普鲁卡因胺Procainamide（碱性物质）
PAH聚芳香烃Polyaromatic Hydrocarbon
PESOS优化流动相的计算机软件（美国Perkin-Elmer产品）
W1,W2相邻谱峰1和谱峰2的基线宽度（min）
W1/2半峰高处的谱带宽度
xd,xe,xn溶剂选择参数，分别用于测定溶剂的酸度、碱度和偶极性的程度
?分离因子，?=k2/k1
△?梯度洗脱期间流动相成分的变化
?o溶剂强度参数
?化合物的克分子吸收系数
?流动相的粘度（Pa•s)
?流动相中强溶剂的体积份数
%B二元流动相中强溶剂的体积百分比（%v）
2、基线不稳，上下波动或漂移的原因是什么，如何解决？
答：a.流动相有溶解气体；用超声波脱气15-30分钟或用充氦气脱气
b.单向阀堵塞；取下单向阀，用超声波在纯水中超20分钟左右，去处堵塞物
c.泵密封损坏，造成压力波动；更换泵密封
d.系统存在漏液点；确定漏液位置并维修
f.柱后产生气泡；流通池出液口加负压调整器
意流动相混合的均匀。色谱柱没有平衡；在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。
液相色谱常用符号与术语表
ACN乙腈Acetonitrile
AUFS满量程的吸光度单位Absorbance units, full scale
As峰不对称因子
B二元流动相中的强溶剂Fra Baidu bibliotek例如：反相HPLC的甲醇/水混合液中的甲醇