无菌室的使用和管理

三、物品进出标准操作规程
• 1、进出无菌室物品必须经传递窗进出无菌室。 • 2、 进入无菌室物品需经紫外照射，物品放入传递 窗后，关上传递窗门，按菌灯按钮，经紫外照射 25秒后，菌灯自动关闭，物品方可传入无菌室。 • 3 、未经消毒的物品须经合适方法消毒方可经传递 窗进入无菌室，如消毒液擦拭、紫外照射、酒精 消毒等。 • 4 、传递窗使用结束后传递窗门及时关闭，禁止传 递窗门对开。 • 5、 物品传递结束后对传递窗进行清洁，用消毒液 对传递窗各部位进行擦拭后，关上传递窗门，按 菌灯按钮，经紫外照射25秒后，菌灯自动关闭， 清洁完成。
四、注意及安全事项
• 6、可疑污染的物品带出无菌室前，应进行 彻底消毒或灭菌处理。菌株和相关样本应 对样本的载体和包装容器表面进行严格消 毒处理后，方可带出，且在取出样本时应 对载体进行再次消毒处理，对包装容器进 行灭菌或消毒处理。 • 7、实验结束后，应立即对试验环境进行消 毒处理，如擦洗、消毒工作台面、地面， 开启紫外灯照射1小时以上。
登记使用） 。
工作内容 使用人 备注
无菌室预约登记表
请如实、清晰填写使用时间，如果不能按时使用请及时更改登记信息。有特 殊情况在备注中表明。 （此表供
使用时间 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 分—— 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 时 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分 分
四、注意及安全事项
• 13、实验过程中，严格按有关规程操作， 降低溅出和气溶胶的产生。 • 14、向液氮罐放取物品时，要防止冻伤和 爆炸，操作时，应戴上起隔热作用的厚手 套。 • 15、-80冰箱存放的和毒有关的，应严格按 照台账的领用记录。
无菌室更衣程序
• 目的： • 建立进出无菌室更衣程序操作规程，以保证培养的安全性和稳 定性。 • 6 步骤 • 6.1.1 工作人员进入无菌室前，应对手部使用七步洗手法进行清 洁。 • 6.1.2 在无菌室一更处更换红色条纹白球鞋，穿戴蓝色缓冲服。 • 6.1.3 在无菌室二更处依次穿戴帽子、口罩、手套、无菌衣、鞋 套。 • 6.1.4 无菌衣穿戴方式从上到下，脱无菌衣从下往上。 • 6.1.5 无菌衣更衣要求：头发不准外漏，缓冲衣必须压在裤子里， 无菌帽压在无菌衣里。 • 6.1.6 穿戴结束后需用酒精对手部进行消毒后方可开始工作。
一、进出无菌室人员管理标准
• 4、无菌室内动作幅度要小，走路慢而稳， 不得坐在地上，不得倚靠在墙壁或门上， 手不能乱摸东西（包括身体、面部、墙体 地面等），当不可避免时要及时消毒。无 菌操作时，避免物品经过瓶口正上方。 • 5、操作人员在操作过程中应减小动作幅度， 尽量避免不必要走动和移动，以保持洁净 室的气流稳定，保持洁净室的净化级别。 • 6、无菌室的门、传递窗门、不得同时对开， 防止空气对流，开关门动作要轻。
四、注意及安全事项
• 1、酒精量不能超过酒精灯2/3,用75酒精消 毒手时，不要消毒完后靠近酒精灯，以免 发生危险。 • 2、用生物安全柜时一定要记得把紫外灯关 闭。 • 3、调节二氧化碳量时，安全阀调节要适当， 不能开的太大，把培养箱的进气管冲开。
四、注意及安全事项
• 4、污物处理，将黄色垃圾袋套入污物桶内， 当有有毒的污物时，在拿出无菌室之前， 应先用配好的消毒液将污物表面消毒，然 后机上袋子，方进传递窗用紫外灯照射5分 钟。 • 5、当实验微生物污染实验环境时，应立即 停止试验，用有效消毒液进行消毒处理。
二、无菌室清洁、消毒标准操作规程
• • • 6.6 清洁步骤 6.6.1 日清洁消毒 用纯化水、消毒液擦拭清洁生产操作台面、门窗、地面、地漏（如有）、设 备表面、管道表面、传递窗。如有地漏要用消毒液灌封。 6.6.2 周清洁消毒 每周全面对洁净区进行清洁，用纯化水、消毒剂擦拭操作台面、门窗、地面、 地漏（如有）、设备表面、管道表面、传递窗、墙壁等进行消毒。如有地漏 要用消毒液灌封。 6.6.3 月清洁消毒 根据生产需要每月用纯化水、消毒剂擦拭操作台面、门窗、地面、地漏（如 有）、设备表面、管道表面、传递窗、墙壁、照明设施和顶棚、风口等进行 消毒。如有地漏要用消毒液灌封。
一、进出无菌室人员管理标准
• • 7、带入无菌室物品，严格按照无菌室物品 进出标准操作规程操作。 • • 8、每天工作前后要做好前清场及后清场工 作，参照无菌室清洁标准规程。 • • 9、每次实验后及时切断电源、关闭门窗， 检查所有仪器设备是否处于正常安全状态。
二、无菌室清洁、消毒标准操Байду номын сангаас规程
• 3 定义 • 日清洁：每天开始工作前和工作后对工作区域 进行清洁消毒。 • 周清洁：每周对生产区进行清洁消毒。一般定 为周六。 • 月清洁：每月全面对生产区进行一次清洁消毒。 一般定为每月最后一周的周六。 • 甲醛熏蒸后清洁：甲醛熏蒸后对无菌室进行一 次全面清洁消毒。一般定为甲醛熏蒸后的次日。
无菌室使用及注意事项
• • • • 一、进出无菌室人员管理标准 二、无菌室清洁、消毒标准操作规程 三、物品进出标准操作规程 四、注意事项
一、进出无菌室人员管理标准
• 1、进入无菌室人员需填写无菌室进出登记表， 工作完成后不得在无菌室逗留。 • 2、严禁化妆、擦粉质护肤用品，不得佩戴饰 物，指甲必须和手指指尖平齐，不得超出手指 长度；不得携带与生产无关的私人物品，如相 机、钱包、钥匙、手表、手帕、用具和手袋等。 • 3、清洗双手并严格执行无菌室更衣程序进行 更衣。
二、无菌室清洁、消毒标准操作规程
• • • • • • • • • 6.1 清洁形式及范围 6.1.1 清洁形式包括日清洁、周清洁、月清洁消毒。若无菌室长期处于停用状 态，可以每星期清洁一次。下一次生产前，需进行彻底清洁消毒。 6.1.2 清洁范围包括：无菌室纯化、培养区域。 6.2 清洁工具：清洁布、水桶等。 6.3 消毒剂：0.2%的新洁尔灭溶液、75%的乙醇溶液、0.055%的84消毒液（每 月轮换使用）。 6.4 清洁效果评价 目测检查各种物体表面应光洁，物品摆放整齐有序，地面无可见异物、污垢、 无积水，区域内无废弃物。 6.5 清洁消毒方法 用经高压灭菌的洁净抹布，蘸取纯化水、消毒剂擦拭工作台面、设备表面等， 最后擦拭地面。
四、注意及安全事项
• 8、试验完成后，对试验废弃物应立即进行 高压灭菌或消毒等无害化处理。 • 9、对细菌芽孢、真菌孢子污染的物品，选 用高水平消毒或灭菌法。对于受高抵抗力 治病因子污染的器材必须用高压蒸汽 （136℃ ，60分钟）进行消毒处理。
四、注意及安全事项
• 10、试验后的废弃物如不及时处理会污染 环境，从而对工作人员造成危害，因此有 关人员必须严格按规定执行。 • 11、试验样本在处理和进行实验室检测时 产生的废物，如离心管、枪头、吸管等应 放入适当的容器内。 • 12、试验过程中产生的污染性液体物质、 废弃的液体标本、培养物等应放在盛有消 毒液的专用容器中。
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二、无菌室清洁、消毒标准操作规程
• 6.6.4 甲醛熏蒸后清洁 • 甲醛熏蒸结束后用纯化水、消毒剂擦拭操作台面、门窗、 地面、地漏（如有）、设备表面、管道表面、传递窗、墙 壁、照明设施和顶棚、风口等进行消毒。如有地漏要用消 毒液灌封。 • 6.7 清洁程序 • 按照先里后外、先上后下、先物后地、先净后脏，不可逆 清洁顺序依次进行擦拭。