岛津LC-20AT-型高效液相色谱仪(仪器编号：)检定规程

岛津LC-20AT-型高效液相色谱仪(仪器编号：)检定规程

岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪（仪器编号：2010106）检定规程

一．概述

本组所有的LC-20AT型高效液相色谱仪（仪器编号：2010106）为日本岛津公司生产的产品，由DGU-20A3脱气机、2 个LC-20AT溶剂输送泵（分为A，B泵）、7725i手动进样器、色谱柱（3个C18柱，3个手性柱）、SPD-20A紫外-可见检测器、SEDEX 80 LT-ELSD蒸发光散射检测器、LCSolution（Version.1.2）中文工作站等。工作原理为高压输液泵将规定的液流动相泵入色谱柱，手动进样器注入供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在色谱柱内被分离，并依次进入紫外检测器和蒸发光散射检测器进行检测。

二．检定目的

为了确保LC-20AT型液相色谱仪（仪器编号：2010106）检测数据安全可靠，也为了确认该仪器的各项指标能达到仪器所设计的性能指标，对该仪器进行检定。

三．检定依据及判断标准

本检定规程参照国家技术监督局JJG705-2014“液相色谱仪检定规程”制订。

四．检定要求

4.1环境条件

4.1.1检定室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，排风良好。

4.1.2仪器应平稳地放在工作台上，周围无强烈机械震动和电磁干扰源，仪器接地良好。

4.1.3电源电压为(220±22)V，频率为（50±0.5）HZ。

4.2检定设备

4.2.1秒表：分度值不大于0.1s。

4.2.3分析天平: 最大称量不小于100g，最小分度值不大于1mg。

4.2.4 注射器:10µL一支。

以上计量器具需经计量检定合格。

4.2.5 10ml注射器一支。

4.2.6 游标卡尺：15cm/0.02mm。

4.2.7容量瓶：5ml，20个。

4.3标准物质：咖啡因标准溶液0.005mg/ml、0.010mg/ml、0.015mg/ml、0.020mg/ml、0.025mg/ml。

4.4.其他要求

4.4.1检定用试剂：HPLC级的甲醇、纯水、乙腈，分析纯的丙酮和异丙醇等。

4.4.2其他玻璃器皿等

五．检定项目及技术指标

检定项目指标

流量设定值

(ml/min)

0.5 1.5 2.5

流量设定值

误差，|S S |

＜

5% 2% 2%

流量稳定性

误差，S R ＜

3% 2% 2%

先将准备好的5ml容量瓶在电子天平上精密称定（W1），以水为流动相，设定泵A流量为0.5ml/min，泵B流量为0ml/min，待流速稳定后，用秒表计时10min，将流出的流动相用容量瓶接收，计时结束后将容量瓶进行第二次称重（W2），（W2-W1）即为接收到的水重量，折算出体积即为（W2-W1）/ρ，流量即为流出体积/时间。同法测定泵B，设置流量5.0ml/min，计时为1min，每个流量测定6次，计算6次流量及流量的SD%与RSD%值，并计算流量输出误差及稳定性。

S S流量输出误差= 流量平均值-设定值×100

% 流量设定值

S R流量稳定性

= 流量最大值-最小值×100

% 流量平均值

流速

(ml/min)

重量（g）

0.5 W1 W2

1.5 W1 W2

2.5 W1

W2

设定流速(ml/min)

测定流量（ml/min）

S S

(±3

%)

S R

(±1.

5%

) 1 2 3 4 5 6

0.5

1.5

2.5

5.2 UV紫外检测器波长的检定

紫外波长标准检测溶液：咖啡因标准溶液。

打开检测器和工作站，开机预热稳定后，以水流过流通池时作一空白扫描，然后，以手动方式将咖啡因标样注入流通池，扫描190nm～400nm范围内的紫外吸收图谱。记录咖啡因最大吸收和最小吸收处的波长，其205nm处的最大吸收波长与205nm比较，其273nm处的最大吸收波长与273nm比较，最

特征吸收波长测定波长波长示值误差（±2nm）

205nm

245nm

273nm

5.3基线噪音和基线漂移的检定

选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，波长254nm，开机预热，待稳定后记录基线65min，测得3min至23min内基线波动幅度作为基线噪音，用检测器自身的物理量（mAU）作单位表示，基线漂移用1小时内基线偏离原点的值（mAU /h）作单位表示。

UV紫外检测器：

项目测定结果结论可接受标准

基线噪音≤0.1mAU

基线漂移≤0.5mAU/h

项目测定结果结论可接受标准

基线噪音≤0.1mAU

基线漂移≤0.5mAU/h

5.4性能检定

5.4.1 重现性检定

使用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流速为 1.0ml/min，检测波长273nm，进样量10µl，待柱子充分平衡且检测器基线稳定，噪音和基线符合规定要求后，取咖啡因标准溶液，连续进样6次，计算6针峰高与峰面积的重现性，即RSD%值。

项目 1 2 3 4 5 6 RSD%(≤1. 5%)

峰面积峰高

项目 1 2 3 4 5 6 RSD%(≤1. 5%)

峰面积

峰高

5.4.2 线性检定

使用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流速为 1.0ml/min，检测波长273nm，进样量10µl，待柱子充分平衡且检测器基线稳定，噪音和基线符合规定要求后，进咖啡因溶液0.005mg/ml、0.010mg/ml、0.015mg/ml、0.020mg/ml、0.025mg/ml，每个样品进样1次，求各浓度样品的响应因子，计算响应因子的RSD%值及所做回归曲线的相关系数。

浓度mg/ml 0.005 0.010 0.015 0.020 0.025

计算结

果

可接受标

准

峰面积——