液相色谱仪的检定和校准
液相色谱检定规程2017
液相色谱检定规程2017液相色谱检定规程是用于确保液相色谱仪器检定的准确性和可靠性的一系列规定和步骤。
下面将详细介绍液相色谱检定规程。
一、检定前的准备工作1.检定前准备样品和标准溶液。
2.检定前确认仪器是否处于良好工作状态。
3.校准柱塞位置。
4.清洁和检查所有互联元件。
5.校准检测器。
6.校准运行程序。
二、流动相检定1.准备流动相检定溶液。
2.将流动相检定溶液装入试管或移液枪中。
3.在色谱柱中注入流动相溶液。
4.开始检定流动相。
三、柱检定1.安装柱并初始化液相色谱仪。
2.准备柱用检定样品。
3.注射样品和运行柱检定程序。
4.记录检定数据。
5.分析柱检定结果。
四、检测器检定1.校准检测器灵敏度和线性范围。
2.准备检定样品。
3.运行检定程序并记录数据。
4.分析检测器检定结果。
5.校准检测器再生性，稳定性和选择性。
五、系统适用性测试1.准备样品混合物。
2.运行适用性测试程序。
3.记录测试结果。
4.分析测试结果。
六、数据分析和文件记录1.分析检定数据以确认液相色谱仪的性能。
2.生成报告并记录检定结果。
3.存档检定结果文件。
总结：液相色谱检定规程是一套用于确保液相色谱仪器准确性和可靠性的规定和步骤。
检定前需要准备样品和标准溶液，并确认仪器和流动相的状态。
然后进行流动相检定、柱检定、检测器检定和系统适用性测试。
最后，对检定数据进行分析并记录在文件中。
液相色谱检定规程有助于保证液相色谱仪器的正常运行和准确检测结果。
液相色谱仪检定方法
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液相色谱仪检定－检定方法
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液相色谱仪检定－检定方法
有吸光值显示的检测器，改变波长可直接读出吸光值，其最大 最小吸光值对应的波长与标准溶液的波长之差为波长示值误差。
•换档误差只适用于使用积分仪和数据处理机时
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液相色谱仪检定－检定标准
4）整机性能检定标准
仪器的整机性能用定性定量测量重复性表示 ①定性测量重复性（6次测量）RSD6：不超过1.5% （保留时间 的偏差） ②定量测定重复性（6次测量）RSD6：不超过3.0% （峰面积 的偏差）
岛津液相色谱方法开发与应用
---液相色谱仪检定
岛津国际贸易（上海）有限公司
分析仪器事业部 分析中心
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液相色谱仪检定
一、液相色谱仪性能检测包括：
1.计量性能要求 1）输液系统 2）柱温箱 3）检测器 4）整机性能
线性范围
换档误差
4 整机：定性定量重复性
＋
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注： ①“＋”表示应检定项目，“－”表示可不检项目 ②无梯度洗脱装置和无柱温箱的仪器，次项目可不检定 ③紫外－可见光、二极管阵列和荧光检测器检定此项目，示差折光检测器不检定此项目
液相色谱仪检定方法及注意事项
液相色谱仪检定方法及注意事项 摘要：本文对液相色谱仪检定方法及检定中出现的问题，结合自己的工作经验进行了探讨。
关键词：液相色谱仪 检定1、概述液相色谱仪因分离效率高；应用范围广；分析速度快；样品用量少；灵敏度高等特点，在送药、食品、环境、材料等领域有了广泛的应用，成为各类研究室、实验室极为重要的仪器设备。
本文依据JJG705-2002《液相色谱仪》检定规程，以紫外—可见光检测器为例，结合实际工作对主要检定项目泵流量、柱箱温度、基线噪声、基线漂移、最小检测浓度、定性定量重复性的检定及检定中的注意事项说几点看法。
2、检定方法按规程要求设定流量、启动仪器，待压力稳定后在规定时间内收集流动相，同时用秒表计时，出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，在天平上称重，重复测量3次，则流量设定值误差SS 和流量稳定性误差SR ，公式如下： %100/)(⨯-=-S S S F F m F S%100/)(min ⨯-=--m S F F x Fma S 式中：F m -F m =（W 2-W 1）/（e t ·t ），流量实测值，ml/min ； W 2-容量瓶+流动相的质量，g ；W 1-容量瓶的质量，g ；e 1-实验温度下流动相的密度,g/cm 3；t-收集流动相的时间，min ；min /，ml F m 值同一组测量的算术平均--； Fs 流量设定值，ml/min ；Fmax-同一组测量中流量最大值，ml/min ；Fmin-同一组测量中流量最小值，ml/min ；2.2注意事项2.2.1收集流相和计时由一个人完成，减少计时误差；因甲醇容易挥发，收集时用封口胶密封容量瓶瓶口，收集完一瓶后立刻称量，收集的流动相在换算成体积后保留小数点后三位，最后结果保留小数点后一位。
2.2.2如果实际流速低于设定值，清洗或更换单向阀，过滤头；如果流速过高，检查流速补偿和压缩补偿调节是否失灵，如果流量不稳，检查泵头内是否聚集气泡，打开放空阀，让泵在高流速下运行，排除报泡；检查泵头是否松动，拧紧泵头固定螺丝，检查输液管路漏液或部分堵塞，需逐段管路进行排除。
液相色谱仪不确定度评定(校准和测量能力CMC)
1、概述1.1 测量依据：（依据JJG 705-2014《液相色谱仪检定规程》）1.2 计量标准：采用国家二级标准物质GBW（E）130405；GBW（E）130406 GBW（E）130167；GBW（E）1301681.3 被测对象：由于液相色谱仪采用的是峰面积(或峰高)相对测量法，同一标准样品由不同仪器测量出的峰面积(或峰高)相差很大，因此我们用最小检测浓度相对测量不确定度来表示仪器的测量结果不确定度。
1.4、环境条件：温度（15～30）℃，相对湿度20%～85%；1.5、测量方法：在仪器处于正常工作状态下，用微量进样器注入20μl或10μl溶液标准物质，记录峰高h，连续测量6次，计算平均值；以下表公式计算检测限上表中：C l—最小检测浓度，g/mL；N d—基线噪声；c—标准溶液浓度，g/mL；H —峰高；V—进样体积，µL。
1.6、评定结果的使用：在符合上述条件下的测量结果，可使用本不确定度的评定结果。
2、紫外可见光（二极管阵列）检测器最小检测浓度测量结果的不确定度评定2.1数学模型见1.5中表2检测限的计算公式。
2.2标准不确定度评定2.2.1最小检测浓度的不确定度是由被测量仪器在相同条件下，重复多次测量的重复性决定的，采用A类方法进行评定。
对一台LC-10AT的液相色谱仪，在相同条件下连续6次测量标准溶液，即n=6，测量值如下：0.931，0.978，0.969，0.981，0.997，0.973其算术平均值为0.972，按贝塞尔公式，单次测量标准偏差为()()=--=∑=112n xxx s ni i0.022则其平均值的相对不确定度()==n A s A u /rel 0.93%2.2.2柱温和室温引入的标准不确定度，用B 类标准不确定度评定，其均用铂电阻测量，查标准证书，扩展不确定度为U =0.1℃，k =2，所以=+=)3515.273(21.0)(rel c T u 0.016%2.2.3进样量V 引入的标准不确定度)(rel V u ，用B 类方法评定。
液相色谱检定规程2017
液相色谱检定规程20171. 引言液相色谱是一种广泛应用于不同领域的分析技术，能够高效地分离和定量分析复杂混合物中的化合物。
为了保证液相色谱分析结果的准确性和可靠性，需要制定一套液相色谱检定规程，以确保仪器设备的性能稳定，并使不同实验室的结果具有可比性。
2. 仪器设备准备在进行液相色谱分析之前，需要对仪器设备进行准备和检定。
2.1 色谱柱选择：根据分析目标和样品性质选择合适的色谱柱。
要确保色谱柱具备相应的分离效果和分析能力。
2.2 检测器选择：根据样品的性质和分析目标选择合适的检测器。
常用的液相色谱检测器包括紫外-可见光谱检测器、荧光检测器、电化学检测器等。
2.3 试剂选择：选用纯度高、质量可靠的试剂，以确保分析结果的准确性。
2.4 校准曲线绘制：选择适当的标准物质，根据浓度差异绘制标准曲线，用于后续的样品浓度分析。
2.5 样品处理：根据样品性质进行适当的预处理，如溶解、稀释等，以提高样品的可检出性。
3. 检定方法3.1 进样方法：根据样品性质和分析目标选择合适的进样方式，如手动进样、自动进样等。
在进样过程中要保证准确性和重复性。
3.2 色谱条件设定：根据样品性质、分析目标和色谱柱的特性，设置合适的色谱条件，如流动相组成、流速、温度等。
3.3 柱效验证：进行柱效验证，确认色谱柱的分离效果和分析能力是否满足要求。
常用的柱效参数有理论板数、峰形对称性、重复性等。
3.4 校准曲线绘制：使用标准物质系列，根据标准曲线绘制方法，绘制准确可靠的校准曲线。
3.5 系统适用性测试：根据不同的分析目标和要求，进行系统适用性测试，验证液相色谱系统是否适用于特定的样品分析。
3.6 样品分析：按照预定的色谱条件和进样方法，进行待分析样品的液相色谱分析。
4. 质量控制为确保液相色谱分析结果的可靠性和可比性，需要进行适当的质量控制。
4.1 质量控制样品：准备质量控制样品，用于仪器校准和测定中的质量控制参考。
4.2 参考物质：选用适当的参考物质，用作仪器校准和质量控制的参考。
液相色谱仪校准标准操作程序
液相色谱仪校准标准操作程序目的：明确液相色谱仪校准的标准操作程序。
范围：适用于分析室高效液相色谱仪定期再验证。
职责：分析室：负责本规程的起草、修订、培训、执行及监督。
Qa使用操作程序：1.引用标准《药品检验仪器检定规程》《中国药典》2015年版二部《中华人民共和国国家计量检定规程液相色谱仪（JJG705-2014）》2.仪器环境2.1检验室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，排风良好。
2.2室温在15℃~30℃，室内相对湿度20%~85%。
2.3仪器应平稳放在工作台上，周围无强烈机械震动和电磁干扰源，仪器接地良好。
3.所用的校准仪器情况5.1.主要技术指标及校准周期最大流量的设定值可根据用户使用情况而定，对特殊的、流量小的仪器，流量的设定可根据用户使用情况选大、中、小三个流量，流动相的收集时间则根据情况适当缩短或延长。
5.2.校准方法5.2.1.泵耐压检查5.2.1.1.检查方法将仪器各部分连接好，以100%甲醇为流动相，流量为0.2ml/min，启动仪器，压力平稳保持10 min，用滤纸检查各管路口接口处；卸下色谱柱，堵住泵出口端，使压力达到最大允许值的90%，保持5 min。
5.2.1.2.结果判定：滤纸应无湿迹，无泄漏。
5.2.2.泵流量设定值误差S S、流量稳定性误差S R5.2.2.1.校准用仪器及设备：秒表(分度：不小于0.1S)、分析天平（分度：不大于1mg）、容量瓶5.2.2.2.测定方法：将输液泵和检测器连接（不接色谱柱），以水为流动相，流速分别设定为0.5ml/min，1.0 ml/min，2.0 ml/min，用25 ml的容量瓶接收，同时以秒表计时，每个流速测定3次。
按规定时间（0.5ml/min收集10分钟，1.0 ml/min收集5分钟，2.0 ml/min收集5分钟）收集流出的流动相，在分析天平上称重。
5.2.2.3.泵流量设定值误差(S S)的计算如下：S S=（Fm-Fs）/Fs×100%式中：F m=（W2-W1）/（ρt.t），流量实测值，mL/minW2—容量瓶+流动相的质量，gW1—容量瓶的质量，gρt—实验温度下流动相的密度，g/cm3t—收集流动相的时间，minFm —同一设定流量3次测量值F m 的算术平均值，mL/minF s —流量设定值，mL/min5.2.2.4. 泵流量稳定性误差(S R )的计算如下：S R =（F max —F min ）/ Fm ×100% 式中：F max —同一组测量中流量最大值，mL/min F min —同一组测量中流量最小值，mL/minFm —同一组流量实测值F m 的算术平均值，mL/min5.2.2.5. 结果判定：应符合下表要求5.2.3.1. 由梯度控制装置设置阶梯式的梯度洗脱程序，设定两组，第一组为二元梯度，A 溶剂为纯水（流动相A ），B 溶剂为含0.1％丙酮（V/V ）（流动相B ）的水溶液，B 经5个梯度从0％变到100％，A 经5个梯度从100％变到0％；第二组为四元梯度，A 溶剂为纯水，B 、C 、D 溶剂为含0.1％丙酮的水溶液，A 经5个梯度从100％变到0％，B 经5个梯度从0％变到15％，C 经5个梯度从0％变到30％，D 经5个梯度从0％变到55％；如下图所示。
液相色谱仪检定规程
液相色谱仪检定规程1 前言本规程参照国际法法制计量组织(OIML)技术工作导则第二部分:OIML国际建议和国际文件起草与表述规则、JJG1002-84国家计量检定规程编写规则和GB3100-93国际单位制及其应用编写的。
2 范围适用于新安装、使用中和修理后的具有紫外-可见光、荧光和示差折光率检测器的高效液相色谱仪(以下简称仪器)的检定。
2.1 原理本仪器用于分离和测定有机混合物中的化学成分。
样品以溶液状态进入色谱柱后，在流动相的推动下，逐步被分离成单个的组分。
然后依次通过色谱检测器进行检测。
根据各组分的保留时间和响应峰值而进行组分的定性和定量分析。
2(2 构成图1 元素分析仪构成方框图3 计量单位参见GB3100-93国际单位制及其应用中的有关条文。
4 计量要求其计量特性和指标应符合表1中的规定。
5 技术要求5(1外观要求5(1(1仪器应有下列标志:仪器名称、型号、制造厂名、出厂仪器系列编号、产品合格证书及操作使用说明书，仪器外表完好，面板字迹清晰。
5(1(2 仪器整机部件:调节旋纽、按键、开关及指示灯应能正常工作，电缆线插件应接触良好。
5(2 安装条件5(2(1 仪器应平稳地安装在牢固的操作台上，电缆接插件紧密配合，接地良好。
5(2(2 高压气瓶与仪器连接应使用专用管道和接头。
编特性项目紫外可见光检测器荧光检测器折光率检测器号1 泵流量设定值误差 Ss??(2,5)%2 ,泵流量稳定性误差 S??(1,2)% R3 柱恒温箱温度 ?T<?2? ;T?1? C-4-4-74 ,基线噪声??5×10AU ??5×10AU ??5×10AIU-3-3-65 ,基线漂移??5×10AU/h ??5×10AU/h ??5×10AU/h-8-6 灵敏度 ?10g/ml ?104g/ml-8-10-67 ,最小检测量?5×10g/ml ?5×10g/ml ?5×10g/ml38 线性范围 ?109 ,定性重复性 RSD?1.5%10 ,定量重复性 RSD?3%,带星号的项目为必须鉴定的项目5(3 检定环境5(3(1室内环境:应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，室内排风良好，且不应放置与测定无关的其他杂物。
液相色谱-质谱联用仪检定注意事项
液相色谱-质谱联用仪检定注意事项
1. 在进行液相色谱-质谱联用仪检定前，应确保设备的稳定性
和正确性，包括保证色谱流动系统的稳定性和质谱的解析能力。
2. 使用标准溶液进行校准和校验，确保色谱和质谱的准确性和灵敏度。
3. 在进行样品检测前，必须进行仪器的装载，包括正确选择色谱柱、质谱离子源、离子检测器等，并进行参数设置。
4. 清洗样品容器和仪器中的管道，以防止样品之间的污染和交叉污染。
5. 使用合适的流动相和离子源流动相，以保证色谱谱图和质谱谱图的准确性和分辨率。
6. 在检定过程中，要定期监测仪器的噪声背景和系统稳定性，以确保结果的可靠性。
7. 在检定前，应进行仪器的校准和线性范围测试，以确保仪器的准确性和灵敏度。
8. 注意保持样品处理的无菌条件，以避免样品受到细菌污染。
9. 定期维护和保养仪器，包括清洗色谱柱、质谱离子源、离子检测器等，以保证仪器的正常运行和长期稳定性。
10. 在检定过程中，要注意记录每个步骤的操作和结果，以备
后续分析和质量控制的参考。
液相色谱仪(UV)检定操作规程
制备60ug/ml基准重铬酸钾的0.005mol/l硫酸溶液，按紫外分光光度法，用1cm石英比色皿分别在235nm±5nm、257nm±5nm、313nm±5nm、350nm±5nm四个波段处，以0.005mol/L硫酸为空白，测定各波长处60ug/ml基准重铬酸钾的0.005mol/l硫酸溶液的吸收度，各波长重复测量三次。
3.5.2.色谱条件：
色谱柱：C18
流动相：甲醇
流速：1ml/min
波长：254nm
进样量：20ul（定量环）
3.5.3.操作步骤：将仪器各部份联接好，以甲醇为流动相，开机，待基线稳定后，将上述配制好的对照品溶液进样，记录色谱图。
3.5.4.按下式计算最小检测浓度：
Cl=2·Nd·C/H
式中：Cl：最小检测浓度（g/ml）；
10min
1ml/min
50%
50%
13min
1ml/min
50%
50%
15min
1ml/min
25%
75%
18min
1ml/min
25%
75%
20min
1ml/min
0
100%
23min
1ml/min
0
100%
25min
1ml/min
100%
0
3.6.4.结果计算：
式中：
--第i段梯度误差（%）；
12个月
定性、定量测量重复性误差
12个月
Nd：基线噪声峰-峰高，mm；
C：对照品溶液浓度（g/ml）；
H：标准溶液的色谱峰高，mm。
3.5.5.结果判断：对照品溶液的峰高应大于或等于两倍基线噪声峰高，即最低检测浓度应低于4×10-8g/ml（萘的甲醇溶液）。
液相色谱检定规程2017
液相色谱检定规程2017一、引言液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用的分析技术，广泛应用于化学、生物和医药等领域。
为了确保液相色谱分析结果的准确性和可靠性，制定了液相色谱检定规程。
二、设备准备1. 液相色谱仪：确保液相色谱仪的性能符合要求，例如流量稳定、噪声小等。
2. 色谱柱：检查色谱柱的有效期和性能指标，如效能因子、分离度等。
3. 样品制备：准备待检样品，并按照指定方法进行制备和处理。
三、系统测试1. 测试流量准确性：使用标准常数流速器，设置不同的流速值进行测试，记录实际流速并计算误差。
2. 测试压力准确性：使用标准压力计，将其装在系统的进样口或检测器前，记录并比较实际压力值和设定值。
3. 测试噪声水平：将检测器置于理想条件下，没有样品注入时，记录背景噪声水平，并判断是否超出规定的限制。
4. 测试温度准确性：使用温度计测量色谱柱和进样器的温度，并与设定温度进行比较。
四、系统均匀性测试1. 使用标准物质进行均匀性测试：选择具有良好稳定性的标准物质，在不同位置进行连续检测，记录结果并评估系统的均匀性。
2. 测试系统的响应时间：通过注射标准物质，记录峰的出现时间，并计算系统的响应时间。
五、方法验证1. 选择适当的标准物质：选择与待检样品性质类似的标准物质，并按照指定方法进行制备和处理。
2. 测试线性范围：使用一系列标准溶液，将其注入系统进行检测，绘制响应曲线，并计算线性范围。
3. 测试重复性和精密度：使用一定浓度的标准物质进行多次测试，计算相对标准偏差（RSD）。
4. 测试准确性：通过添加已知浓度的标准物质到待检样品中进行测试，计算回收率并评估方法的准确性。
六、现场环境要求1. 温度和湿度控制：确保液相色谱仪工作环境的温度和湿度稳定，并符合规定的范围。
2. 避光要求：尽量将液相色谱仪安放在避光箱中，以避免光照对结果的干扰。
3. 电源供应：保证电源供应稳定，接地良好。
lcms检定规程
lcms检定规程LC-MS（液相色谱-质谱联用）的检定规程主要包括以下步骤：1. 环境条件：仪器室内不得有明显的机械振动、电磁干扰，不得存放与实验无关的易燃、易爆和强腐蚀性气体或试剂。
温度应在15°C〜30°C之间，相对湿度应不大于80%。
电源电压应为(220 + 22)V，频率应为(50±)Hz。
2. 标准物质和校准设备：标准物质应使用国家有证标准物质，校准设备需经计量检定合格。
常用的标准物质包括利血平溶液，其相对扩展不确定度优于5%（k=2）。
此外，还需要移液器或移液管（量程范围100μL或200μL，B级及以上）和容量瓶（10mL或25mL，B级及以上）。
3. 校准项目和校准方法：外观检查：仪器铭牌上应标示仪器的名称、型号、制造厂名、产品序列号、出厂日期等内容。
分辨力：将扫描范围设为m/z=606〜612，直接注入或经色谱柱注入离子源的方式，观察质谱图并记录m/z609质谱峰，计算其50%峰高处的峰宽，得到W1/2，作为分辨力的结果。
信噪比：设定液相色谱条件并优化质谱条件，将检测离子的m/z设为特征离子的m/z，经色谱柱注入相应量的利血平。
观察色谱图并记录其色谱峰峰高作为HS。
同时记录信号峰后1min-3min时间内的基线输出信号的最大值与最小值之差，作为Hn。
根据公式（1）计算信噪比S/N，连续测量6次，以6次测量S/N的平均值作为信噪比的结果。
质量准确性：根据LC-MS质量数应用范围，选用相应的标准物质或试剂，将扫描范围设为特征离子理论值±5的范围。
直接注入相应量的标准物质或试剂。
观察质谱图并记录特征离子的实测质量数（有效数字取小数点后两位）。
根据公式（2）计算ΔM，以ΔM的最大值作为质量准确性的结果。
峰面积重复性与保留时间重复性：将检测离子的m/z设为特征离子的m/z，经色谱柱注入相应量的利血平。
观察色谱图并记录其色谱峰的峰面积和保留时间。
连续测量6次。
液相色谱检定规程2017
液相色谱检定规程2017液相色谱检定是一种常用的分析方法，广泛应用于药品、食品、环境等领域的质量控制和研究中。
为了确保结果准确可靠，液相色谱检定需要遵循一定的规程。
下面是2017年的液相色谱检定规程。
一、仪器和设备的校验和检定1. 检查液相色谱设备的完整性和性能。
包括检查柱装置、进样器、流动相装置、检测器、数据系统等是否正常运行。
2. 清洗液相色谱系统，确保没有残留样品或污染物。
3. 校准检测器。
使用标准物质，进行波长、测量范围和线性方程等方面的校准。
4. 校准流速。
使用标准物质，校准流量计或泵的流速。
二、试剂和溶剂的选择和准备1. 使用高纯度试剂，并遵循药典标准或内部标准的使用指南。
2. 试剂的溶液应准确配制。
确保各组分浓度的准确性和稳定性。
三、样品制备1. 样品的选择：确保样品符合分析要求，并选择合适的提取方法。
2. 样品的准备：根据试剂和样品的特性，选择合适的前处理方法，如提取、固相萃取等。
四、操作条件的选择1. 选择合适的色谱柱、进样量和流动相组成等操作条件。
根据目标分析物的特性，确定最佳的分离条件。
2. 确定检测器的条件，如波长、检测灵敏度等。
五、方法的验证和分析1. 确定方法的灵敏度。
通过测定最小检测浓度、最小可测定浓度等参数来评估方法的灵敏度。
2. 验证方法的准确性和精密度。
通过加标回收实验、重复性实验等方法来验证方法的准确性和精密度。
3. 确定方法的选择性。
通过研究方法在存在干扰物质的情况下的选择性和特异性。
六、结果的计算和表达1. 将液相色谱的峰面积与浓度建立标准曲线关系，根据样品的峰面积计算样品中分析物的浓度。
2. 计算结果的相对偏差和回收率，并进行统计分析。
七、质量控制的建立1. 使用质量控制样品进行每批样品的分析，以确保结果的准确性和可靠性。
2. 根据分析结果，评估样品的质量合格与否，并进行记录。
八、实验记录与报告1. 记录所有实验操作、试剂使用情况、仪器操作参数等关键信息。
液相色谱仪(HPLC)校验SOP
液相色谱仪检验作业指导书1.适用范围适用于液相色谱谱仪的期间核查2.校验方法配制100ng/mL 的萘-甲醇的标准溶液，按仪器操作规程进行重复测量6次，用来验证仪器最小检测浓度、定性及定量准确性，配制0.1%~1.0%的丙酮-异丙醇溶液验证仪器线性范围。
3.校验项目及性能要求校验项目要求定量准确性≤3%定性准确性≤1%线性范围优于103最小检测浓度≤5×10-8g/mL4.校验周期校验项目周期定量准确性1年定性准确性1年线性范围两年最小检测浓度1年5.校验项目5.1最小检测浓度使用100%甲醇作为流动相，流速调为1mL/min ，检测波长设定为254nm ，仪器稳定后，使用自动进样器进样20μL 的100ng/mL 的萘-甲醇溶液，连续进样6次。
计算萘出峰保留时间和峰面积算数平均值。
5.1.1最小检测浓度计算公式H20cV N 2C d L（1）式中：C L ——最小检测浓度，g/mL N d ——基线噪声峰高；c——标准溶液浓度，g/mL V——进样体积，μL ；H——标准物质的峰高。
5.1.2定性准确性计算公式定性准确性以萘出峰保留时间测量的相对标准偏差TV 表示，依下式计算：t11-n /t -t TV n1i 2i ⨯=∑=）（）（（2）式中：TV——相对标准偏差n——测量次数t i ——第i 次测量的峰面积t ——n 次进样的峰面积算术平均值i——进样序号5.1.3定量准确性计算公式定量重复性以萘峰面积测量的相对标准偏差CV 表示，依下式计算：x11-n /x -x CV n1i 2i ⨯=∑=）（）（（3）式中CV——相对标准偏差n——测量次数x i ——第i 次测量的峰面积x ——n 次进样的峰面积算术平均值i——进样序号5.2线性范围操作使用100%甲醇作为流动相，流速调为1mL/min ，检测波长设定为254nm ，仪器稳定后，使用自动进样器分别进样20μL 的0.1%，0.2%，0.3%，0.4%，0.5%，0.6%，0.7%，0.8%，0.9%，1.0%丙酮-异丙醇溶液，每个浓度重复测量三次，取算数平均值。
液相色谱仪检定规程
液相色谱仪检定一、简介液相色谱仪是一类利用混合物在固定相和流动相间分配比的差异,对混合物进行分离、分析的仪器。
可用于分离分析占有机物总数近80%的高沸点、热不稳定、高分子化合物,其中高效液相色谱仪更具有高速、高效、高选择性、高灵敏度等优点,现已被广泛应用于实验室、化学化工、生物、医药学、环境、食品等领域。
JJG705-2014液相色谱仪检定规程(以下简称新规程)由国家质量监督检验检疫总局于2014年2月14日颁布,并于同年8月14日正式实施,用以替代JJG705-2002液相色谱仪检定规程。
（一）工作原理液相色谱仪由输液系统(包括输液泵、流动相储器和梯度仪)、进样系统、分离系统(包括色谱柱和柱恒温器等)、检测系统和数据处理系统等组成。
流动相被高压泵打入系统中,混合样品溶液由进样系统注入,跟随流动相流入色谱柱。
由于混合样品中不同组分在固定相和流动相间的吸附与分配系数不同而产生不同的运动速度,经多次吸附-解析过程逐步分离,由流动相带入检测器中,并转换成电信号输送至记录仪,以色谱图形式输出,进行定性或定量分析。
（二）检定方法新规程在后续检定中主要考察仪器以下几项技术指标。
1泵流量稳定性SR将仪器各部分连接好，流动相用100%甲醇,通过工作站或仪器操作面板设置检定流量(如表1所示,选择高、中、低三档流量逐一测定)，启动仪器，待压力稳定后,在流动相出口处用容量瓶(空瓶质量为W1)收集流出液,并同时用秒表计时t。
在经检定合格的分析天平上称重,质量为W2,按式(2)、(3)计算实际所测流量值Fm,重复三次,得三次实测流量平均值,按式(1)计算SR。
SR为三档流量中最大值。
其中ρt为经温度校正后的甲醇密度,T为测定流速时温度。
表1泵流量设定值和收集时间流量设定值（mL/min）收集时间（t/min）0.2～0.5 10～200.6～1.0 5～10＞1.0 52基线噪声和漂移选用100%甲醇为流动相,流速定为1.0mL/min,C18色谱柱,开启仪器,基线稳定后记录30min,读取瞬时最大基线峰-峰高值,再乘以检测器衰减倍数得到基线噪声(Nd),30min内基线偏离起始点的最大值为基线漂移,均用仪器自身物理量表示。
液相色谱仪校准方法说明书
液相色谱仪校准方法说明书一、引言液相色谱仪是一种广泛应用于化学分析和实验室研究中的仪器。
为确保色谱仪的准确性和可靠性，需要定期进行校准。
本说明书旨在介绍液相色谱仪的校准方法，并提供操作步骤和注意事项，以确保校准的准确性。
二、校准方法1. 系统性能检查液相色谱仪的系统性能检查是校准的一项重要步骤。
通过该检查可以确保仪器的各项参数处于正常范围内。
（1）泵的流量校准：a. 开启色谱仪电源，并确保泵处于正常工作状态。
b. 依次打开进样器、检测器、进样泵和梯度泵。
c. 使用标准液进样，设置合适的流速，并记录流速值。
d. 重复上述操作3次，计算平均值，并与仪器规格进行比较。
（2）进样器精度校准：a. 将适配器插入进样器口，并连接标准样品。
b. 设定进样器的体积，进行多次进样，并记录各次进样的体积值。
c. 计算进样器体积的标准偏差，并与仪器规格进行比较。
（3）检测器灵敏度校准：a. 使用标准液进样，设置合理的流速和检测器参数。
b. 调整检测器增益，逐渐增大信号幅度，直至达到最大可测范围。
c. 记录增益值，并与仪器规格进行比较。
2. 峰宽和峰高校准峰宽和峰高的校准是保证色谱仪分离性能的重要环节。
（1）峰宽校准：a. 使用标准样品，设置合适的流速和柱温，并记录峰宽值。
b. 调整柱温，分别进行低、中、高柱温的峰宽校准，并记录峰宽值。
c. 将峰宽值与仪器规格进行比较。
（2）峰高校准：a. 使用标准液进样，设置合适的流速和柱温，并记录峰高值。
b. 逐渐增大进样量，进行多个浓度的峰高校准，并记录峰高值。
c. 将峰高值与仪器规格进行比较。
3. 数据处理校准数据处理是液相色谱仪分析过程中的关键环节，确保数据的准确性和可靠性。
（1）基线校准：a. 使用毛细管或其他方法，将纯溶剂进样，记录基线的漂移程度。
b. 调整仪器参数，使基线漂移降至最小，并记录调整值。
（2）数据采集和峰识别：a. 确保仪器的数据采集系统正常工作，并设置合理的采集时间和间隔。
液相色谱仪检定规程
液相色谱仪检定规程液相色谱仪检定规程一、定义液相色谱仪检定是指对液相色谱仪具有准确度和可靠性认证要求时实施的检定，为保证液相色谱仪的准确性和可靠性提供了可靠的保障。
二、检定范围1.检定液相色谱仪的基本性能，包括稳定性、精度、线性、探测限、数据处理能力、后处理能力、低检出限性等方面。
2.检定液相色谱仪壳体及检测系列维护项目，包括壳体清洁及调节、数据处理系统检查、后处理系统检查、检测系统调零等。
三、检定步骤1.添加校准品：选择符合性能要求的校准品，将合适的校准品添加到样品中，调节液相色谱仪设置。
2.空流检定：根据试剂的稳定性，查看液相色谱仪的时间、峰面积及峰保持等参数确保空流的准确性。
3.浓度及精度检定：该项检定前需计算出校准曲线上各个校准品浓度的理论值，查看液相色谱仪测定出来的浓度矩阵与理论值的誤差，以确认检出精度。
4.曲线线性检定：查看曲线线性度，比较上下文具分析仪采集系统测定结果。
四、检定记录1.液相色谱仪及试剂性能：记录液相色谱仪及检测试剂的原始性能参数，以便保证检定具有可靠性。
2.测试记录：详细记录校准品浓度和液相色谱仪测得的结果，及曲线线性度检定结果。
3.其它记录：详细的记录液相色谱仪检测状态、使用参数、报警阈值、后处理设置等。
五、维护要求1.配置标准配置：严格按照液相色谱仪厂家及其标准配置，以确保液相色谱仪的正确性和可靠性。
2.液相色谱仪的定期清洁：根据使用状况定期清洁液相色谱仪，以重现液相色谱仪实验室的洁净度。
3.液相色谱仪的定期维护：定期检查液相色谱仪的各项参数，确保液相色谱仪的可靠性及准确性。
六、安全考虑1.一定要使用安全装备：无论在实验室还是工厂，使用液相色谱仪时都必须使用安全装备以防止意外发生。
2.注意试验环境：使用液相色谱仪时应避免高温、湿度及其它物质对液相色谱仪运行的影响。
3.关注安装工艺：在安装液相色谱仪时建议使用专业的工艺，以确保液相色谱仪的正确安装及操作。
液相色谱仪紫外检测器检定操作程序
液相色谱仪检定操作程序
1、使用前按要求检查仪器外观和安全性能。
2、按要求设定流量，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先称重过的洁净容量瓶收集流动相，同时用秒表计时收集规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，每一设定流量重复测量3次，计算流量稳定性。
3、选用C色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，紫外检测器的波长设定为254nm，检测灵敏度调到最灵敏档。
开机预热，待仪器稳定后记录基线30min，选取基线中噪声最大峰-峰高对应的信号值，计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示。
基线漂移用30min内基线偏离起始点最大信号（AU/30min）表示。
液相色谱仪国标
液相色谱仪国标液相色谱仪国标液相色谱仪（HPLC）是一种用于化学分析和分离的仪器。
它利用流体动力学原理和分子间相互作用，将混合物中的化合物分离并分析。
液相色谱仪在化学、生物、制药、环境和食品科学等领域起着重要的作用。
为了确保不同仪器和实验室之间的结果的一致性和可重复性，许多国家都制定了液相色谱仪的国家标准。
国际上常用的液相色谱仪基本性能指标主要包括分离效率、重复性和灵敏度。
分离效率是指仪器在一定的操作条件下，对于复杂样品中的化合物能够达到多好的分离程度。
分离效率可以通过峰的分离度、峰的对称度和分离时间来评价。
重复性是指仪器在重复实验中产生的结果的一致性。
包括进样量的重复性、峰面积的重复性和保留时间的重复性等。
灵敏度是指液相色谱仪对于微量化合物的检测能力。
灵敏度可以通过检测限来评价。
除此之外，国际上的液相色谱仪国家标准还包括了仪器的可靠性、工作范围、精密度、准确度等指标。
中国国家标准化组织（SAC）制定的液相色谱仪国家标准GB/T是中国境内应用最广泛的液相色谱仪标准。
GB/T标准详细规定了液相色谱仪的基本技术要求、性能检测方法和质量控制要求。
根据GB/T标准，液相色谱仪可以分为几个不同的类型，如高压液相色谱仪、常压液相色谱仪、气液色谱仪等。
标准对于每种类型的液相色谱仪都详细说明了其结构、工作原理、技术性能和应用范围。
此外，标准还对液相色谱仪的仪器附件、操作要求、维护和保养、使用说明等方面进行了规定。
液相色谱仪国标GB/T标准还明确规定了液相色谱仪的性能检测方法。
根据GB/T标准，液相色谱仪的主要性能指标可以通过标定测试、进样性能测试和分离性能测试来检测。
标定测试是通过一系列已知浓度的标准品进行测试，确定色谱柱的校准曲线和检测限。
进样性能测试包括进样量的精确度和重复性。
分离性能测试通过测量特定的混合物在液相色谱仪中的保留时间和分离度来评估仪器的分离效果。
此外，标准还规定了一系列质量控制要求，包括仪器的稳定性要求和日常维护和保养要求等。
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最小检测浓度 * 波长示值误差 波长重复性 线性范围 换挡误差 整机 定性定量重复性*
19
2. 液相色谱仪检定规程
5）计量器具控制
c) 检定方法 d) 检定结果的处理 一个检测器 一个以上检测器 e) 检定周期 一般不超过2年。 修理、更换重要部件或对仪器性能 有怀疑时，应随时检定。
式中:
ND为检测器基线噪声， K 为衰减倍数， B 为测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度（AU）。
基线漂移用一小时内基线偏离原点的值（AU/h）表示。 30
3. 液相色谱仪检定方法
色谱基线噪声图
31
3. 液相色谱仪检定方法
色谱基线漂移图
32
3. 液相色谱仪检定方法
3.4.3 最小检测浓度的检定
27
3. 液相色谱仪检定方法
3.4 紫外-可见光和二极管阵列检测器的检定
3.4.1 波长示值误差和重复性的检定 将检测器和记录仪连接好，仪器预热后，将紫外波 长标准溶液（标准波长为235nm，257nm, 313nm 和 350nm）注入样品池中冲洗，并将池充满。将检测器波 长调到低于标准波长5nm处（如检定257nm时，检测器波 长先调到252nm），记录纸速调到（2～4）cm/min，记 录笔调到记录纸的中间，启动记录仪，记录笔画出一条 直线。调检测器波长，每（5～10）s改变1nm，记录仪 上将画出如下图所示的折线，折线的最高点（或最低点） 对应的波长与标准溶液波长之差为波长示值误差。每个 波长重复测量3次，其中最大值与最小值之差为波长重 复性误差。 28
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梯度误差Gc:不超过±3％
2. 液相色谱仪检定规程
b) 柱温箱 柱箱温度设定值误差ΔTS: 不大于 ± 2℃。 温度稳定性 TC: 不大于 1℃。
14
2. 液相色谱仪检定规程
c) 检测器
液相色谱仪检测器的主要技术指标如下 检测器 紫外-可见 二极管阵列 基线噪声 基线漂移 不大于5×10-4AU 不大于5×10-3AU/h 不大于5×10-4FU 不大于5×10-3FU /h 不大于1×10-9g /mL 硫酸奎宁/高氯酸水 不大于±2nm 优于2nm 优于103 优于2% 优于103 优于2% 不大于5×10-7RIU 不大于5×10-6RIU/h 不大于1×10-6g/mL 丙三醇/水 荧光检测器 示差折光检测器
液相色谱仪的检定 和校准
中国计量科学研究院
2008年8月
1
液相色谱仪的检定和校准
1. 2. 3. 4. 计量基础知识 液相色谱仪检定规程 液相色谱仪检定方法 液相色谱仪检定结果计算举例
5. 液相色谱仪的期间核查
2
1.计量基础知识
1.1 什麽是计量
计量是实现单位统一、保证量值准确可 靠的活动，它包括科学技术上的、法律法 规上的和实践管理上的一系列活动。 计量的内容通常可以概括为6个方面： a) 计量单位和单位制； b）计量器具（或测量仪器）
本规程委托全国物理化学计量技术委员会负责解释
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2. 液相色谱仪检定规程
检定规程的主要内容
1）范围 2）概述 3）计量性能要求 4）通用技术要求 5）计量器具控制 附录
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2. 液相色谱仪检定规程
1）范围 本规程适用于配有紫外-可见光检测 器、二级管阵列检测器、荧光检测器和 示差折光率检测器的液相色谱仪的首次 检定、后续检定和使用中检验。液相色 谱仪样机试验和型式评价中有关计量-7g/mL 萘/甲醇 波长示值误差 波长重复性 线性范围 换挡误差 不大于±2nm 优于2nm 优于103 优于2%
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2. 液相色谱仪检定规程
d)整机性能
仪器的整机性能用定性、定量测量重复性表示 * 定 性 测 量 重 复 性 （ 6 次 测 量 ） RSD6 ： 不大于1.5% * 定 量 测 量 重 复 性 （ 6 次 测 量 ） RSD6 不大于3.0%
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2. 液相色谱仪检定规程
2）概述 液相色谱仪（以下简称仪器）是由输液 系统、进样器、色谱柱及柱温箱、检测器和数 据记录处理装置等部分组成的分析仪器，图1 是其组成的方框图。液相色谱仪利用试样中各 组分在色谱柱内固定相和流动相间分配或吸附 特性的差异，由流动相将试样带入色谱柱中进 行分离，经检测器检测，依据组分的保留时间 和响应值（峰面积或峰高）进行定性和定量分 析。
3. 液相色谱仪检定方法
3.2.2 泵流量设定值误差SS和流量稳定性误差SR
按计量性能表的要求设定流量，启动仪器，压力稳 定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集 流动相，同时用秒表计时，收集表1规定时间流出的流 动相，在分析天平上称重，按式（1）、式（2）计算SS 和SR。
22
3.液相色谱仪检定方法
3. 液相色谱仪检定方法
3.4.1 波长示值误差和重复性的检定
29
3. 液相色谱仪检定方法
3.4.2 基线噪声和基线漂移的检定
选 用 C18 色 谱 柱 ， 100% 甲 醇 为 流 动 相 ， 流 量 为 1.0mL/min，紫外检测器的波长选在254nm，检测灵敏度 调到最灵敏档，记录纸速调至（5～10）mm/min。开机预 热, 仪器稳定后记录基线30min, 由检测器的衰减倍数和 测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，计算基线噪声， 用AU 表示。 ND=K×B (4)
2. 液相色谱仪检定规程
b) 检定项目 泵 耐压检定 流量设定值误差SS 流量稳定性误差SR 梯度误差GC 柱箱 温度设定值误差ΔTS 温度稳定性 TC 检测器 基线噪声 * 基线漂移 *
+
首次检定 + + * + + + + + + + + + + + +
后续检定 – + + + + + + + + + + – – +
33
3. 液相色谱仪检定方法
3.4.4 线性范围的检定
将检测器和记录仪连接好，检测器波长选在 254nm，通电稳定后，用注射器直接向检测池中注射2% 异丙醇/水溶液冲洗检测池至记录仪读数不变，记下此 值。之后，依照上法分别注入丙酮/2%异丙醇系列水溶 液（丙酮含量为0.1%、0.2%、……1.0%）冲洗检测池， 并记下各溶液对应的稳定记录仪读数，每个溶液重复测 量3次，取算术平均值。以5个丙酮含量（0.1%～0.5% 5 个点）和对应的记录仪读数做标准曲线，在曲线上找出 丙酮含量大于0.5%各点的读数，与对应含量的测量值做 比较，测量值低与读数5%时，认为曲线弯曲，此点的浓 度做为检测上限CH。按3.4.3的方法和式（5）测出丙酮 的CL值，由CH/CL算出检测器的线性范围。 34
24
3. 液相色谱仪检定方法
0.10
0.08
0.06
0.04
0.02
0.00
-0.02 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34
25
3. 液相色谱仪检定方法
3.2.3 梯度误差的检定
Gci=(Li平-Lm平)/ Lm平×100%
式中：
(3)
3
1.计量基础知识
c) 量值传递和溯源，包括检定、校准、 测试、检验和测量； d）物理常量、材料和物质特性的测定； e）测量不确定度、数据处理与测量理论 及其方法； f）计量管理，包括计量保证与计量监督 等。
4
1.计量基础知识
1.2 什麽是检定 测量仪器的检定是指查明和确认测量仪器是否 符合法定要求的程序，它包括检查、加标记和 （或）出具检定证书。 检定具有法制性，其对象是法制管理范围内的 测量仪器。我国规定列入用于贸易结算、安全防 护、医疗卫生和环境检测四个方面的工作计量器 具属于国家强制检定的管理范围。对社会公用计 量标准、部门和企事业单位的各项最高计量标准 也实行强制检定。 检定的依据是按法定程序审批公布的计量检定 规程。
11
2. 液相色谱仪检定规程
A B 进 样 器 色 谱 柱 检 测 器 数据处理系统
输液泵
废 液 收 集
图1.液相色谱仪组成方框图
12
2. 液相色谱仪检定规程
3）计量性能要求 a) 输液系统：
流量设定值误差SS和流量稳定性误差SR应 符合以下要求： 流量设定值（mL/min）:0.5 1.0 2.0 测 量 次 数 : 3 3 3 流动相收集时间(min) :10 5 5 允许误差 Ss :5% 3% 2% *SR :3% 2% 2%
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：
2. 液相色谱仪检定规程
4）通用技术要求 仪器外观（名称，型号等） 电路系统（接线，开关，旋钮， 指示灯等）
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2. 液相色谱仪检定规程
5）计量器具控制
a）检定条件 环境条件：检定场地、温度(15-30)℃、湿度(20-80)%RH、 电源。 检定设备：秒表、分析天平、温度计、注射器、游标卡尺、 容量瓶。 标准物质：萘、硫酸奎宁、丙三醇标准溶液。 其 他：HPLC用甲醇、纯水、丙酮、异丙醇、玻璃器皿 等。 18
SS=(Fm平-Fs)/Fs×100% SR=(Fmax-Fmin)/Fm平×100%
(1) (2)
式中： Fm=(W2-W1)/ρT·t，流量实测值(mL/min)， W2 ——容量瓶+流动相的质量(g)， W1 ——容量瓶的质量(g)， ρT ——实验温度下流动相的密度(g/cm3)， Ft ——收集流动相的时间(min)； Fm平 ——同一组测量的算术平均值(mL/min)； Fs ——流量设定值(mL/min)； Fmax——同一组测量中流量最大值(mL/min)； Fmin——同一组测量中流量最小值(mL/min)。