临床医学检验红细胞的检查以及临床意义

贫血病因
生成减少 破坏过多 失血过多
1）骨髓造血功能减退
药物、物理因素、慢性肾衰、再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移
2）造血原料不足
缺铁（缺铁性贫血）、缺乏VitB12或叶酸（巨幼细胞性贫血）
3）红细胞破坏增加
溶血性贫血（输血不合、蚕豆病、遗传性球形细胞增多症）
4）红细胞丢失过多
各种原因的失血（如消化性溃疡、痔疮、钩虫病）
剧烈体力劳动或运动
相对缺氧
Epo
气压降低
RBC
缺氧 代偿性RBC
妊娠中后期
血液稀释 RBC
老年人
造血功能减退 RBC
病理变化
红细胞和血红蛋白增多 相对增多：血浆中水分丢失，血液浓缩所致，如呕吐、
腹泻
绝对增多：
原发性 — 真性红细胞增多 继发性 — 低氧血症 Epo （如心血管病、肺
疾病、异常血红蛋白病）
血红蛋白的测定
定义
指单位体积血液中所含血红蛋白的量
参考值
成年男性： 120-160g/L 成年女性： 110-150g/L 初生儿： 170-200g/L
Hb测定方法
分光光度计比色
氰化高铁血红蛋白测定法（HiCN）（国际标准参考方法） 十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SDS-Hb）（次选方法） 叠氮高铁血红蛋白测定法（HiN3） 碱羟血红蛋白测定法（AHD575）
方法：
转化液 5ml + 血 20ul(5min)，比色读吸光度（A）(540nm)
计算：有三种方法求得Hb浓度 1. A×367.7 2. 得A值后，在标准曲线上直接查找 3. A×K K＝ΣHb / ΣA
标准曲线的绘制
用一组已知浓度的HiCN参考液，在分光光度计上分 别测定A值，以A为纵座标，血红蛋白参考值为横座 标，绘制标准曲线。
红细胞检查
红细胞（red blood cell, RBC; erythrocyte）
血液中数量最多的有形成分 主要成分：血红蛋白 主要功能：呼吸载体 直径：6.7 ~ 9.5 um，平均7.2 um 形状：双凹圆盘状
RBC
红细胞的生成
Stem cell Epo
原始红细胞
早幼红细胞 中幼红细胞
珠蛋白具有种属特异性，含有两条α链和两条 非α链 正常成人的Hb包括： HbA α2β2 （90%以上） HbA2 α2δ2 （2 ~ 3%） HbF α2γ2 （2%以下；新生儿占70%）
血红蛋白的合成
受激素调节
红细胞生成素：直接
雄激素：直接和间接
自身调节
负反馈
血红素过多 氧化为高铁血红素
例如：HiCN参考品
Hb g/L： 50 100 150 200 A ： 0.14 0.27 0.41 0.54
K＝ΣHb / ΣA = 370.37
如果标本A为0.32，则标本Hb = 0.32×370.37 = 118.52（g/L）
方法学评价
优点
➢ 操作简单 ➢ 呈色快且稳定 ➢ 除SHb外均可检测 ➢ 根据吸光度直接定值
注意问题
Hb测定对贫血程度的判断优于RBC计数
在某些病理情况下，Hb和RBC的浓度不一定能正确 反映全身红细胞的总容量，如：急性失血、水潴留、 失水等
发生大细胞贫血或小细胞低色素贫血时，RBC计数 与Hb浓度不成比例
红细胞形态检查
红细胞形态观察
大小及均匀程度 红细胞形状 血红蛋白含量 细胞内结构
72h
晚幼红细胞
网织红细胞 成熟红细胞
48h
释放入血 平均寿命120 d
红细胞计数
（red blood cell count，RBC）
定义：单位体积（每升）血液内的红细胞数量
原理：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数 池，于显微镜下计数一定体积范围的红细胞数，并换 算得每升血液中红细胞数(/L)
缺点
➢ KCN有剧毒 ➢ HbCO转化较慢 ➢ 高WBC和高球蛋白血
症可致溶液浑浊
红细胞计数与血红蛋白测定 的临床意义
生理变化
年龄与性别
新生儿：RBC高，两周后 下降，6-7岁最低 男性：25-30岁高峰 女性：13岁-15岁达高值， 21岁-35岁低水平，以后 渐渐增高
精神因素
肾上腺素 RBC
外周血红细胞参考值
成年男性（4.0 - 5.5）×1012/L 成年女性（3.5 - 5.0）×1012/L 初生儿 （6.0 - 7.0）×1012/L
思考
手工法VS仪器法？
血红蛋白测定
（ hemoFra Baidu biblioteklobin，Hb）
血红蛋白的组成
血红蛋白
珠蛋白（globin）（4条肽链） 亚铁血红素（heme）（1个）
—肾上腺皮质功能亢进
红细胞生成素代偿性增加
生理性：
新生儿
高原居民
病理性：严重慢性心、肺疾患、异常血红蛋白病
红细胞生成素非代偿性增加：某些肿瘤或肾脏疾患
红细胞和血红蛋白量减少
主要见于贫血：由于各种原因引起的全身血循环中红细 胞总数、血红蛋白和红细胞比积减少，低于该地区、该 年龄及性别组的参考范围低限时称贫血。
红细胞稀释液
稀释液：保护计数细胞，破坏非计数细胞，同时抗 凝，要求不含杂质
红细胞稀释液：Hayem液，由氯化钠、结晶硫酸钠、 氯化高汞组成
作用： 氯化钠调节渗透压，结晶硫酸钠防止细胞 粘连，氯化高汞防腐
计数方法
手工法 ：取样 → 稀释 → 计数 → 计算 仪器法 ：电阻抗分析或激光分析
手工法
10 uL末梢血+2 ml稀释液 混匀稀释 充池 计数 计算
目视比色
沙利法、测铁法、测氧法、比重法、折射仪法、光谱分析法
仪器法
氰化高铁血红蛋白测定法（HiCN）
为国际标准参考方法 步骤： 取样 加转化液（溶血、转化） 比色
原理：
血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各血 红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再 与CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白， 通过比色根据吸光度测得血红蛋白的浓度。
血红蛋白的代谢
珠蛋白 血红蛋白
血红素
氨基酸 胆色素（胆绿素、胆红素、
胆素原及胆素）
血红蛋白的种类
➢ 还原血红蛋白（reduced hemoglobin，Hbred） ➢ 氧合血红蛋白（oxyhemoglobin，HbO2） ➢ 高铁血红蛋白（hemiglobin，Hi） ➢ 碳氧血红蛋白（HbCO） ➢ 硫化血红蛋白（SHb）
红细胞大小改变
小红细胞 大红细胞 巨红细胞 大小不均
直径 < 6um > 10um > 15um