细胞膜的通透性
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
姓名:XXX 系年级:2013级XXXX 学号:201300XXXXXX
科目:细胞生物学实验题目:细胞膜的通透性日期:2014/9/23
细胞膜的通透性
一.实验目的
1.了解溶血现象及其发生机制。
2.了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度
二.实验原理
细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障,是一种半透膜,可选择性地控制物质进出细胞。将红细胞放在低渗溶液中,水分子大量渗透到细胞内,可使细胞涨破,血红蛋白释放到介质中,溶液由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液,这种现象称为溶血。由于溶质渗透入细胞的速度不同,溶血时间也不同。因此,发生溶血现象所需的时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。本实验选用红细胞作为细胞膜渗透性的实验材料,将其放入不同的介质溶液中,观察红细胞的变化。
三. 实验用品
1.材料
鸡血
2.试剂
0.85%的Nacl溶液,0.085%的Nacl溶液,0.8mol/L的甲醇溶液,0.8mol/L的丙三醇溶液,6%的葡萄糖溶液,2%的Triton X-100溶液
3.器材
6支试管,离心机,滴管,试管架
四.实验步骤
1.取鸡血6ml,加0.85%Nacl溶液4ml,在1000r/min条件下离心五分钟。(RBC体积量不
少于0.6ML)
2.将上述离心后的红细胞按沉淀量配成50%的浓度。(总体积应不少于1.2mL)
3.每组取6支试管,分别加入如下溶液各3Ml
(1) 0.85%Nacl溶液(2) 0.085%Nacl溶液
(3)0.8mol/L甲醇溶液(4) 0.8mol/L丙三醇溶液
(5) 6%葡萄糖溶液(6) 2%Triton X-100
4.向上述6支试管中分别加入50%红细胞悬液1滴,轻摇混匀,观察试管中是否有溶血现象发生(观察时间1小时),记录溶血时间,并于显微镜下观察各溶液中的细胞。
五.实验结果
姓名:XXX 系年级:2013级XXXX 学号:201300XXXXXX
科目:细胞生物学实验题目:细胞膜的通透性日期:2014/9/23
不同溶液处理导致红细胞溶血的现象
由表格中溶血时间可看出,蒸馏水和2% Triton X-100处理的红细胞悬液,细胞溶血很快,其次是0.8mol/L甲醇溶液,而0.8mol/L丙三醇溶液和6%的葡萄糖溶液处理的红细胞悬液,细胞溶血时间很慢。
不同溶液处理后离心管中鸡血红细胞悬液的透明情况比较。
姓名:XXX 系年级:2013级XXXX 学号:201300XXXXXX
科目:细胞生物学实验
题目:细胞膜的通透性
日期:
2014/9/23
蒸馏水处理后的红细胞,细胞悬液迅速变澄清,
证明细胞已发生明显溶血;0.8mol/L甲醇溶液处理的红细胞悬液也很快变澄清,但透明度不如蒸馏水处理的红细胞悬液:
0.8mol/丙三醇溶液处理的红细胞悬液变澄清很慢;6%的葡萄糖溶液处理的红细胞悬液变澄清最慢;2%Triton X-100处理的红细胞悬液变澄清比较快,但透明度不高,远低于对照试管透明度,说明Triton试剂将蛋白脱离下来,蛋白游离在溶液中。
不同溶液处理后的鸡血红细胞的形态变化
0.85%Nacl溶液
姓名:XXX 系年级:2013级XXXX 学号:201300XXXXXX 科目:细胞生物学实验 题目:细胞膜的通透性 日期:2014/9/23
不同作用时间下的细胞形态
0.8mol/
丙三醇溶液
(1
) (2)
(3)
(4)
姓名:XXX 系年级:2013级XXXX 学号:201300XXXXXX
科目:细胞生物学实验题目:细胞膜的通透性日期:2014/9/23 6%的葡萄糖溶液
(1)(2)
(3)(4)
1.0.85%Nacl溶液中的细胞,细胞保持正常形态
2.0.085%Nacl溶液中的红细胞大都吸水涨破
3.0.8mol/L甲醇处理的红细胞,部分破裂,部分保持原状
4.0.8mol/丙三醇溶液处理15min后的红细胞,大致保持正常形态;0.8mol/丙三醇溶液处理30min后的红细胞,细胞突显;0.8mol/丙三醇溶液处理45min后的细胞,部分细胞边缘开始产生缺口;0.8mol/丙三醇溶液处理60min后的红细胞,多数细胞开始破裂。5.6%的葡萄糖溶液处理15分钟后的红细胞悬液,细胞无明显变化;处理45分钟后的细胞,细胞数目明显减少,说明已经失水;处理60分钟后的细胞,一些细胞已经发生明显变形,表明细胞已经开始破损。
6.2%Triton X-100溶液处理的红细胞,细胞明显变小。
六.讨论与结论
1.从1和2号试管,即0.85% Nacl溶液和蒸馏水处理的细胞悬液中,可得出结论:细胞在
姓名:XXX 系年级:2013级XXXX 学号:201300XXXXXX
科目:细胞生物学实验题目:细胞膜的通透性日期:2014/9/23 低渗溶液中容易发生溶血,并且细胞膜内外浓度差越大,细胞越容易溶血。
2.从3和4号试管中,即0.8mol/L甲醇溶液和0.8mol/L丙三醇溶液处理的悬液中,可得出结论:脂溶性物质容易穿过细胞膜,并且物质分子量越小,个头越小,越容易穿过细胞膜,引起细胞溶血。
3.从5号试管中,可得出结论:分子量较大的极性分子,不容易穿过细胞膜引起细胞溶血。4.从6号试管中,可得出结论:Triton X-100试剂可抽取细胞膜中的蛋白质,使细胞通透性增强,从而使细胞发生溶血。
5.1号试管,即0.85%Nacl溶液处理的红细胞悬液,放置很长时间之后,也会出现溶血现象。