秦艽抗大鼠高尿酸血症作用机制研究
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目前 ,降低 血尿酸主要通过抑 制尿酸生成和促进尿 酸排 ( 2) 乙胺丁醇 : 用灭 菌热蒸馏 水配成溶液 , 按照 2 5 0 m S / ( k g ・ d ) 泄这两个途径来 实现 的,肾脏是排 泄尿酸 的主要器 官 ,其中 O A T 1 、O A T 3 、U R A T 1 这三种转运 蛋 白在调控尿酸水平 方面 有着重要 的意义。本研究就其是否 能够促进尿酸排 泄为切人 点 ,使用免疫组 化和 We s t e r n b l o t t i n g方法 ,通过检测 以上三
用灭菌热蒸馏水配成溶液 , 按照 1 0 0 m r , / ( k g ・ d )的剂量灌 胃。 的剂 量灌 胃。( 3 )秦 艽提 取物 :取秦 艽药 材 ,加 5 0 % 乙醇 回流 提取三 次 ,每 次 1 . 5 h ,合并 滤液 ,浓 缩至药 物浓度 为
1 g / ml 。
1 . 4 . 2 对 大 鼠血 尿酸 的影 响
取 Wi s t a r 大鼠4 0只 ,随机 分
种 蛋 白表达水平来探讨秦 艽降血尿酸的作用机制 。
1 材 料 与 方 法
为 四组 :空 白组 、模 型组 、给 药组 , 阳性 组 ,每组 1 O只, 适应性饲养一周后 , 空 白组 i g . 生理盐水 , 模 型组 大 鼠 i g / d . 给 予腺 嘌呤 和 乙胺 丁醇 ,给药组 大 鼠 i g / d . 给予腺 嘌 呤和 乙胺
白表达 ,现提高 O A T 1 、O A T 3的蛋 白表达来实 的。
【 关键词 】 秦艽 ; 高尿酸血症 ; 阴离子转运 蛋 白
d o i :1 0 . 3 9 6 9 6 . i s s n . 1 6 7 4 — 4 9 8 5 . 2 0 1 3 . 2 2 . 0 6 9
自Wh a t ma n 公 司。 1 . 4 方法
尿酸排 泄 的丙磺舒 、苯溴 马隆等 ,由于这些 药物 副作 用大 , 使其应用受 到限制 。因此 , 借 助 中医理论开发一种药效稳定 、
副作用 小 的天然药 物来解决 这一难 题具有一 定 的研 究价值 。 传统 中医将 痛风列入痹症 的范畴 ,秦艽属于龙胆科 多年生草 本植物 ,其用药 部位为根 ,现代药 理证明其具有非 常好 的降
秦 艽在临床上用 于治疗 风湿性关节炎 、风寒 引起的周身
司) 、 D A B试剂盒 ( 北京 中山金桥生物技术有限公 司 ) , 苏木素、
A T 1 多 克隆抗 体、兔源 抗 O A T 3多克 隆抗体 、兔 源 疼痛 等 ,通常具有 良好的效果 ] 。高尿 酸血症是 嘌呤代谢紊 兔 源抗 O
丁醇后 灌 胃秦 艽提取 物 ,阳性 对照组 大 鼠每 日 i g . 给予 腺嘌
呤和 乙胺丁醇后灌 以苯溴马龙 ,于实验第 7天 ,灌 胃 1 h后 , 各组动物摘 眼球取血 ,血液 经 4 0 0 0 r / m i n离心 2 5 m i n ,取上 清液 ,测定血清尿酸值 。 1 . 4 - 3 对大鼠2 4 h总 尿量 和尿 酸排泄 量影 响 大 鼠分组 及 给药 同上 ,于末次给药 1 h 后 ,采用代谢笼收集大 鼠 2 4 h内 尿液 ,采用全 自动 生化分 析仪 检测 尿酸浓 度 ,计算 2 4 h尿
We s t e m b l 0 mn g 方 法来 检测高 尿酸血症 大鼠 肾脏 阴离子转运蛋 白 O A T 1 、O A T 3 、U R A T 1 蛋 白表达及 变化探 明其作 用机制。结 果 :实验结果 表 明秦艽 能够降低大 鼠血尿酸 、增加 大鼠 2 4 h 尿量 和尿 酸排 泄量。结论 :秦艽抗大 鼠高尿酸血症 的作用是通 过降低模 型组 大鼠 U R A T 1 的蛋
尿酸效果 。
1 . 4 . 1 药液配制
苯溴 马龙 :根据大 鼠与成人 药物剂量换算
公式 ,成人 ( 假设 体重为 7 0 k g ) 每日 服用 1 0 0 m g 的剂量相 当于大 鼠每 日服用 9 . 0 ms / k s 量 。将 药片压 碎 ,加 灭菌热 蒸
馏水溶解 、 混匀 , 配成 9 . 0 m g / m l 浓度 的混悬液 。( 1 )腺 嘌呤 :
R A T 1 多克隆抗体和 H R P 一 羊抗兔 I g G都购 自北京博奥森 乱 引起 的尿 酸生 成过 多 和 ( 或 )尿 酸排泄 减少 的一组代 谢 抗 U
性 疾病 。据统 计 ,高尿 酸血症 在 人群 中的发病 率男 性 高达 生物技术有 限公 司,脱脂奶粉购 自博士德生物工程有限公司 。 2 5 . 8 %,女性 为 1 5 %『 2 】 ,其 不仅 可 以引起 痛风 性关 节炎 ,而 且是心 血管疾病和 肾脏疾 病进展 的独立危 险因素 【 3 ,因此 , 维持稳定 的血尿 酸水 平对人类 的健康有着重要 的意义 。目前 , 临床上治疗 痛风 的药物 主要有 抑制尿酸生成 的别 嘌呤醇和促 1 - 3 实验 器材 切 片机 ( 德 国莱 卡 ) 、Y D S 一 4 7 — 1 2 7液氮 生 物容 器 ( 成都 全凤 液氮 容器 有 限公 司 ) ,染色 缸 、孵 育盒 、 硝 酸纤 维 素膜 ( N C膜 )购 自 A me r s h a m公 司 ,转膜 滤纸 购
1 . 1 实验 动物
2 0 0 7 — 0 0 01 o
Wi s t a r 大鼠 [ 7 】 ,雄性 ,体 重 1 8 0 — 2 2 0 g ,由
黑 龙江 中医药大学 实验动 物 中心 提供 ,合 格证号 : s c x k( 京 1 - 2 实验试剂 腺嘌呤 ( 美国S i g ma 公司 ) 、尿酸试剂盒 ( 南
《 中 国 医 学 创 新》 第1 o 卷 第2 2 ( 总 第2 6 8  ̄ J ) 2 0 1 3 年8 月 综合医学 Z o n g h e y i x u e
秦ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ抗 大 鼠高尿 酸血症作用 机制研 究
刘颖① 郑立运② 崔立然③
【 摘要 】 目的:探 索秦艽抗大 鼠高尿酸血症 的作 用机制 。方法 :通过检测高尿酸血 症大 鼠 2 4 h总尿量和尿酸排泄量 ,采 用免疫组化和