瘦肉精检测原理及操作步骤

瘦肉精检测原理及操作步骤？时间：2011-03-22来源：作者：一、测定原理
“瘦肉精”克仑特罗竞争酶标免疫检测方法快速测定的基础是抗原抗体反应。酶联板的微孔包被有针对兔抗克仑特罗特异性抗体的羊抗体（第二抗体）。加入兔抗克仑特罗特异性抗体（第一抗体）与第二抗体结合而被固定，洗涤后加入标准液或样品溶液与酶结合物（酶标记抗原），标准液或样品中的游离抗原与酶标抗原竞争兔抗克仑特罗特异性抗体上有限的结合位点。通过洗涤除去没有与特异性抗体结合的酶标抗原，加入酶基质（过氧化脲）和发色剂（四甲基联苯胺）并孵育，结合到板上的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的底物。加酸终止反应后，颜色由蓝色转变为黄色。在单波长450nm处测吸光度，吸收光强度与样品中的克仑特罗浓度成反比。
二、试剂盒的组成
每个盒中（包括标准分析孔）材料如下：
（1）1×96孔板（12排×8孔），包被有第二抗体（兔IgG抗体）；（2）6个标准液（300ul/瓶）为克仑特罗水溶液。浓度分别为0ng/kg、100ng/kg、300ng/kg、900ng/kg、2700ng/kg、8100ng/kg；（3）1个克仑特罗过氧物酶标记物浓缩液12ml（红色帽）；（4）1个克仑特罗抗体浓缩液12ml（黑色帽）；（5）1个酶基质/发色剂11ml（蓝色帽）；（6）1个反应停止液，1mol/L硫酸14ml（黄色帽）；（7）1个缓冲液25ml，酶标记物及抗体浓缩液稀释用。
三、试验材料