过氧化物酶染色

【目的】
指导过氧化物酶染色检查。

【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。

【用途】
急性白血病的鉴别诊断，急非淋（粒细胞，单核细胞）阳性，急淋呈阴性反应。

【染色原理】
当存在过氧化物酶之活性时，可以将基质（过氧化氢）分解，而产生新生态的氧，此新生态氧进而使无色联苯胺氧化为蓝色的联苯胺。

联苯胺是一种不稳定的中间产物，它可以进一步氧化变成棕色的化合物。

【分布】
1．粒细胞系：原粒细胞为阴性，白血病时副原粒细胞可呈阳性反应。

中性粒细胞：自早幼粒细胞起，随细胞成熟而阳性强度也递增。

其阳性颗粒为圆形，规则，直径与嗜苏丹黑颗粒相仿，而比瑞氏染色的特殊颗粒为
大。

嗜酸粒细胞：为阳性反应，其颗粒比中性粒细胞的大，着色也深。

嗜碱粒细胞：为阴性反应，但在慢粒白血病时可出现阳性反应。

在粒细胞系统中，过氧化物酶颗粒的出现和逐渐增多，与特殊颗粒的出现和增多有平行关系。

2.单核细胞系：呈弱阳性反应，颗粒数少，细小，着色较浅。

在白血病时可见强
阳性。

3．组织细胞（网状细胞）：一般呈阴性反应，部分细胞有不同强度的阳性反应。

4. 其他细胞：均为阴性反应。

【试剂配制】
一、3%联苯胺酒精溶液配制: 联苯胺0.3g+碱性品红0.1g+95%乙醇99ml全溶
后加入亚硝基铁氰化钠饱和水溶液（36%）1。

此液可保存1-2年。

一、过氧化氢溶液配制: 3%过氧化氢1滴+蒸馏水5ml。

每次用需新鲜配制。

【染色步骤】
1. 将新鲜之血或骨髓涂片，滴加0.3%联苯胺酒精溶液4—8滴，盖满涂膜约1分钟。

2.1分钟后，立即加入过氧化氢等量与上液混匀。

3.4—5分钟后，一出现蓝色，立即冲洗，否则颗粒变黑。

4.立即再用瑞氏染色法复染，时间应稍长
【结果判断】
阳性反应为蓝色或蓝棕色颗粒，定位于胞浆中。

【临床意义】
1.急性粒细胞白血病呈阳性反应。

2.单核细胞白血病呈弱阳性反应，但有些病例可呈强阳性反应，故不能与急
性粒细胞白血病鉴别，尚需作其他检验。

3.急性淋巴细胞白血病呈阴性反应。

【注意事项】
1. 复染除用瑞氏染液外，也可用姬姆萨染液等。

2. 已固定的血膜不能再作过氧化物酶染色,因酶已破坏。

3. 所用过氧化氢必须新鲜，即加于血迹上发生泡沫。

过量时红细胞可出现假阳
性。

4. 过氧化氢的浓度要适当加减，过量则颗粒色深，不足则颗粒色淡。

5. 最适合PH值为5.8—
6.5（<5.7时可出现假阳性）。

6. 滴加过氧化氢液之后，最好将染片置于载物台上，用低倍镜观察发现胞浆出
现阳性颗粒，立即水洗，晾干，复染，镜检。

操作人员部门主管质量负责人
姓名王烈
日期 04年07月15日。