酸性α-醋酸萘酚酯酶染色液

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α-醋酸萘酚酯酶染色

α-醋酸萘酚酯酶染色
α-醋酸萘酚酯酶染色（α-NAE）属于酯酶染色的一种。

（1）原理：血细胞内的α-醋酸萘酚酯酶（α-NAE）将基质液中的α-醋酸萘酚水解，产生α-萘酚，萘酚再与坚牢蓝B偶联，形成不溶性灰黑色或棕黑色沉淀，定位于胞质内。

属于非特异性醋酸染色。

（2）结果判断：染色阳性结果为胞质中出现棕黑色颗粒沉淀。

（3）正常血细胞的染色反应
1）单核细胞系统原始单核细胞为阴性反应或弱阳性反应；幼单核细胞和单核细胞为阳性反应，这种反应可被氟化钠抑制。

2）粒细胞系统各期粒细胞为阴性反应，有时少数粒细胞可呈弱阳性反应，此反应不被氟化钠抑制。

3）巨核细胞和血小板为阳性反应。

4）其他血细胞幼红细胞和淋巴细胞一般为阴性反应，有时少数细胞也可是弱阳性反应，此反应不被氟化钠抑制；浆细胞为阴性反应。

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（4）临床意义
1）帮助鉴别急性白血病的类型：单核细胞白血病时，白血病原始单核细胞可呈阳性反应，幼单核细胞和单核细胞大多呈阳性反应，此反应能被氟化钠抑制，抑制率在50%以上；急性粒细胞白血病时，白血病原始粒细胞为阴性反应，有时个别白血病原始粒细胞可呈阳性反应，但此反应不被氟化钠抑制；急性淋巴细胞白血病时，白血病原始淋巴细胞为阴性反应，有时原始淋巴细胞可出现阳性反应，主要见于T细胞型急淋；急性粒-单核细胞白血病时，部分原始白血病细胞呈阳性反应，并能被氟化钠抑制，这些白血病细胞可能是单核细胞系细胞，部分白血病细胞呈阴性反应，可能是粒细胞系细胞。

2）红血病和红白血病：异常幼红细胞可呈阳性反应。

3）巨幼细胞贫血：巨幼细胞也可呈阳性反应。

血液酸性α-醋酸萘酯酶染色方法改进

血液酸性α-醋酸萘酯酶染色方法改进
朱辛为;李质馨;窦肇华;蒙一纯;鲁质傅;文天秀
【期刊名称】《吉林医药学院学报》
【年(卷),期】1995(000)003
【摘要】1 方法用酸性α-醋酸萘酯酶法(简称ANAE法)检测血液中的T淋巴细胞及其亚群,以观察机体的细胞免疫功能,已广泛用于组织学中的细胞化学及相关的动物实验中.由于α-醋酸萘酯酶易受时间、温度及pH值等多种因素的影响,故作者在常规染色的基础上,对几个主要步骤进行了改进,效果较好.其方法是:(1)取末梢血制成涂片,室温干燥;(2)于4℃甲醛-丙酮固定液(pH6.0)固定45s;
【总页数】1页(P203-203)
【作者】朱辛为;李质馨;窦肇华;蒙一纯;鲁质傅;文天秀
【作者单位】空军医学高等专科学校!吉林市132011
【正文语种】中文
【中图分类】R446.113
【相关文献】
1.血清酸性α-醋酸萘酯酶的比色测定及初步临床应用 [J], 冯春来;黄兴富;范华
2.肝硬化患者血清和腹水中酸性α-醋酸萘酯酶的含量 [J], 王燕;周力;张永宏;张维;陈玉梅
3.酸性α-醋酸萘酯酶染色法的改良 [J], 卢曦;刘艳芬;刘铀
4.酸性α-醋酸萘酯酶染色法在鳜细胞免疫水平检测中的应用研究 [J], 张国军;王高
学;潘厚军;石存斌;吴淑勤
5.用酸性α—醋酸萘酯酶染色法测定儿童外周血T淋巴细胞 [J], 陈毓玲;葛桂秀因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

酸性α-醋酸萘酯酶染色法在鳜细胞免疫水平检测中的应用研究

Ａｓａｔｈａｉｉｔｏｓｇａｉｂｔｃ：ＴｅｆｓｌｙｆｉｃｄＡ—ｎｐｔｃｔｔｅｔａｅＡＡ）ｔｉｉｇｍｔｏｖｌａｅｅｌｌｕｒｅｂｉｕｎａｈｌｅａｓｒｓ（ＮＥｓｎｎｅｄｔｅａｔｔｌａｉ－ｙａｅｅａｈｏｕｅｈｃｕｒｍｍ
ｎｔｅｅｎｉｉｌｖｌｉｍｍｕｉｅｉｉｅｃｈｕｔｗａｅｔｄｉｈｓｐｐｒＦｃｌ —ＵｒｇｆｒｄｅｔｓｌｔｎｗｉｉｅｅｔｄｎｉｙｎｚｄＳｎｐｒａｃａｓｉｓｔｓｅｎｔｉａｅ．ｉｏｌａａｎｇａｉｎｏｕｉｔｄｆｒｎｅｓｔｉｏｈｆｙ
张国，学，军，存吴军王高潘厚石斌，淑勤
（．西北农林科技大学，陕西杨凌７２０；１１１０２．中国水产科学研究院珠江水产研究所，广州５０８）１３０
摘要：研究了酸性一醋酸萘酯酶染色法在鳜细胞免疫水平检测中应用的可行性。用不同比重的淋巴细胞分
ｔｅｂｓｒｓｌｉｓｌｔｎＡＮｓｕｅｏｓｉｈｓｌｔｄｌｍｐｏｙｅｎｔｉｄｃｔｄｔａｅｏｔｌｔｉｉｇｃｎｈｅｔｅｕｔｎｉｏａｉ．ｏＡＥｗａｓｄｔｔｎｔｅｉａｅａｏｙｈｃｔｓａｄｉｎｉａｅｈｔｔｐｉｈｍａｓａｎｎｏ —
维普资讯
第３６卷第３期
Ｖ０＿６ｌ３
Ｎｏ３．
淡
水

酶类染色液

酶类染色液北京华越洋生物------------------------------------------------------碱性磷酸酶染色液(改良Gomori钙钴法) 3×50ml 酶类染色40% 4℃,避光,3个月碱性磷酸酶染色，适用于石蜡切片属于金属沉淀法,碱性磷酸酶活性出呈棕黑色,可能出现假阳性,采用阴性对照。

二甲苯应采用AR以上级别。

碱性磷酸酶染色液(改良Gomori钙钴法) 3×100ml 酶类染色40% 4℃,避光,3个月碱性磷酸酶染色，适用于石蜡切片属于金属沉淀法,碱性磷酸酶活性出呈棕黑色,可能出现假阳性,采用阴性对照。

二甲苯应采用AR以上级别。

碱性磷酸酶-PAS联合染色液6×50ml 酶类染色40% 4℃,避光,3个月碱性磷酸酶染色与过碘酸雪夫试剂合用,同时显色碱性磷酸酶和PAS阳性物质。

适用于冰冻切片、石蜡切片,碱性磷酸酶活性部位呈黑色,PAS阳性物质呈紫红色。

染色过程中注意控制过碘酸处理的时间,否则容易褪色。

中性粒细胞碱性磷酸酶染色液(NAP) 4×2ml 酶类染色40% 4℃,避光,6个月专门用于血液或骨髓细胞涂片的中性粒细胞的碱性磷酸酶染色,又称同时偶联法。

碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨中。

油镜下计数100个中性粒细胞,求出百分比和积分。

非特异性反应少，结果可靠。

中性粒细胞碱性磷酸酶染色液(NAP) 4×10ml 酶类染色40% 4℃,避光,6个月专门用于血液或骨髓细胞涂片的中性粒细胞的碱性磷酸酶染色,又称同时偶联法。

碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨中。

油镜下计数101个中性粒细胞,求出百分比和积分。

非特异性反应少，结果可靠。

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) 4×2ml 酶类染色40% —20℃,避光,6个月用于石蜡切片、冰冻切片、骨髓细胞涂片、血液涂片等的碱性磷酸酶染色,又称同时偶联法碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨中。

酸性α醋酸萘酯酶染色法

酸性α 醋酸萘酯酶染色法一、原理淋巴细胞内含有许多种酶，如α 醋酸萘酯酶(ANAE)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、β 葡萄糖苷酸酶等。

不同的淋巴细胞细胞亚群所含酶类及其含量各异，如淋巴母细胞富含ACP，而成熟的T淋巴细胞则显示ANAE活性，因此可利用化学反应作检测。

T淋巴细胞浆内含有的酸性α 醋酸萘酯酶(acid α naphthyl acetate esterase，ANAE) ，在弱酸性条件下，能使底物酸性α 醋酸萘酯水解成醋酸和α 萘酚，后者与六偶氮副品红偶联，生成不溶性的红色沉淀物，沉积在T淋巴细胞胞浆内酯酶所在的部位，经甲基绿复染，反应呈现单一或散在的颗粒或斑块，显棕红色。

B淋巴细胞则无此种反应。

因此ANAE染色法可作为鉴别T淋巴细胞的一种非特异性方法。

此外，单核细胞、中性粒细胞、酸性粒细胞及血小板等也可呈现酯酶染色阳性反应，应当注意区分。

二、材料和方法(一) 材料1 2 5%戊二醛溶液(固定液)在0 1mol/L pH值7 4磷酸盐缓冲液9ml中加入25%戊二醛溶液1ml，混和，置4℃冰箱保存备用。

2 副品红液将副品红4g加入2mol/L盐酸100ml中，37℃溶解过滤，4℃冰箱保存备用。

3 4%亚硝酸钠溶液取亚硝酸钠400mg，溶于蒸馏水10ml中，临用前配制。

4 六偶氮副品红溶液取新配制的亚硝酸钠溶液3ml，慢慢滴入副品红溶液3ml中，边滴边搅拌，此时有刺激性气体产生。

充分混合，1min后备用。

5 α 醋酸萘酯溶液：α 醋酸萘酯2g乙二醇单甲醚100ml也可用丙酮100ml代替乙二醇单甲醚。

6 0 067(1/15)mol/L pH值7 6磷酸盐缓冲液：甲液KH 2PO 4 9 08g加蒸馏水至1，000ml乙液Na 2HPO 4 9 74g加蒸馏水至1，000ml。

(如为Na 2HPO 4·12H 2O则称取2322g)取甲液13ml，加入乙液87ml，即为0 067mol/L pH值7 6磷酸盐缓冲液。

一种α-醋酸萘酚酯酶染色试剂盒[发明专利]

专利名称：一种α-醋酸萘酚酯酶染色试剂盒专利类型：发明专利
发明人：谢永华,朱美萍,许付
申请号：CN201510894398.2
申请日：20151207
公开号：CN105648035A
公开日：
20160608
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种α-醋酸萘酚酯酶染色试剂盒。

本发明所述试剂盒包括固定液、α-醋酸萘酚酯溶液、偶氮染料溶液、缓冲液及漂洗液，所述偶氮染料溶液为碱性蓝54水溶液。

本发明试剂盒以碱性蓝54替代现有α-NAE染色方法中的坚固蓝B盐、固紫盐等重氮染料，将染色时间缩短到20分钟左右，染色后即可通过镜检区分单核细胞和未成熟及成熟粒细胞、淋巴细胞、红细胞，省去细胞核复染步骤，且无需NaF抑制试验辅助即可快速诊断出单核细胞白血病和粒细胞白血病，相比现有方法更加简便、快捷。

申请人：上海太阳生物技术有限公司
地址：201108 上海市闵行区金都路3419号
国籍：CN
代理机构：北京集佳知识产权代理有限公司
代理人：赵青朵
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医院检验中心酯酶染色中性非特异性脂酶染色操作规程

医院检验中心酯酶染色---中性非特异性脂酶(α—NAE)染色操作规程[方法学]酯酶染色的方法很多，根据与pH底物等不同作用，将常用的酯酶染色法分为两大类，即特异性酯酶染色和非特异性酯酶染色。

后者又可分为3类：①中性非特异性酯酶染色法：α—乙酸菜酚酯酶、乙酸菜酚酯酶和乙酸菜酚AS-D酯酶。

②酸性非特异性酯酶染色法：α—乙酸菜酯酶和α—丁酸菜酯酶。

②碱性非特异性酯酶染色法：α—丁酸菜酯酶。

中性非特异性酯酶染色是单核细胞与粒细胞白血病区别的重要方法，一般实验室可选用此法。

[原理]α—乙酸萘酚经酯酶水解产生萘酚，萘酚与重氮盐偶联，生成灰黑或棕黑色沉淀物，定位于胞浆中。

[试剂]1．α—醋酸萘酯丙酮液：α—醋酸萘酯1g，加丙酮和蒸馏水混合液100m1，溶解后贮于磨口带塞三角瓶内，4℃保存，可使用半年。

2.pH7．4磷酸盐缓冲液：0．07MNa2HPO4(即Na2HPO4)3．基质液：磷酸盐缓冲液82ml，缓慢滴加α-醋酸萘酯丙酮液1．6ml(滴速约每分钟40滴)，边加边用力振摇。

根据5分钟后，加坚牢蓝B80mg，剧烈振摇10分钟，立即过滤，滤液两杯，各40ml。

4．氟化钠基质液：称取氟化钠(NaF)61mg加入上述其中基质液1杯内，混匀后，标上标记。

[操作](1)新鲜涂片两张，分别标上NSE和NaF记号，滴加10％甲醛生理盐水，固定5分钟，用自来水轻轻冲洗，当心血膜脱落，晾干。

(2)两张涂片同时放入各自染色杯内，37℃水浴1小时。

(3)取出后水洗，晾干后镜检。

不用复染。

[结果观察]在胞浆内若有棕黑色或灰黑色弥漫性颗粒沉淀者为阳性，细胞脑浆为黄色者为阴性。

[临床意义]1．阳性：单核细胞和组织细胞呈强阳性，但可被氟化钠抑制；巨核细胞及血小板呈阳性；早幼粒细胞白血病时早幼粒细胞可阳性，且不受氟化钠抑制。

2．弱阳性及阴性：粒细胞、淋巴细胞一般为阴性，若有弱阳性也可被氟化钠抑制。

3．临床鉴别：主要用于鉴别急性单核细胞性白血病与急性粒细胞性白血病，前者NSE阳性，且受氟化钠(NaF)抑制；而后者NSE阴性，若有阳性也不受氟化钠抑制。

α-茶酚醋酸酯酶染色

α-茶酚醋酸酯酶染色文章目录*一、α-茶酚醋酸酯酶染色的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、α-茶酚醋酸酯酶染色的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、α-茶酚醋酸酯酶染色的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、α-茶酚醋酸酯酶染色的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、α-茶酚醋酸酯酶染色的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应α-茶酚醋酸酯酶染色的基本信息1、定义α醋酸萘酚酯酶为白细胞中的非特异性酯酶,能将基质液中的α醋酸萘酚水解,产生α萘酚,再与重氮盐偶联,生成灰黑色不溶性沉淀,定位于酶活性所在的胞质内。

2、专科分类肿瘤科3、检查分类生化检查4、适用性别男女均适用5、是否空腹空腹α-茶酚醋酸酯酶染色的正常值和临床意义1、正常值原单核细胞、幼单核细胞、单核细胞、巨核细胞、血小板为阳性反应;各期粒细胞、幼红细胞、淋巴细胞、浆细胞为阴性反应。

2、临床意义阳性可见于单核细胞白血病、组织细胞白血病、网状细胞肉瘤、粒细胞-单核细胞性白血病、红血病、红白血病、早幼粒细胞性白血病等的细胞。

阴性见于多发性骨髓瘤的细胞。

α-茶酚醋酸酯酶染色的检查过程及注意事项1、检查过程骨髓取材:取材部位有胸骨、棘突、髂骨前嵴或后嵴等。

两岁以内小孩最好用胫骨,成人常取髂后上棘,此部位穿刺方便,病人也易接受。

穿刺前要求严格消毒,杜绝细菌感染,除穿刺室紫外线消毒和皮肤消毒外,还应注意穿刺包和手套消毒时间有否过期。

戴手套要熟练,避免手套接触未消毒物品。

穿刺针进入髓腔时常有脱空感,吸取前针筒内应留有1ml左右的空隙,否则髓液很快进入针筒空隙而无法取出。

针筒内若有水份也要用消毒纱布擦干,以免溶解细胞。

吸液量一般控制在0.2ml左右,因吸量过多,易被外周血稀释。

部分病人干抽或吸出量太少时,不要将针头立即拔出,可边抽边调节针头深浅,或边抽边缓慢外移针头,最后将针头内可能残留的髓液尽量推出、制片,以减少病人痛苦。

酯酶染色---中性非特异性脂酶(α—NAE)染色

酯酶染色---中性非特异性脂酶(α—NAE)染色[方法学]酯酶染色的方法很多，根据与pH底物等不同作用，将常用的酯酶染色法分为两大类，即特异性酯酶染色和非特异性酯酶染色。

后者又可分为3类：①中性非特异性酯酶染色法：α—乙酸菜酚酯酶、乙酸菜酚酯酶和乙酸菜酚AS-D酯酶。

②酸性非特异性酯酶染色法：α—乙酸菜酯酶和α—丁酸菜酯酶。

②碱性非特异性酯酶染色法：α—丁酸菜酯酶。

中性非特异性酯酶染色是单核细胞与粒细胞白血病区别的重要方法，一般实验室可选用此法。

[原理]α—乙酸萘酚经酯酶水解产生萘酚，萘酚与重氮盐偶联，生成灰黑或棕黑色沉淀物，定位于胞浆中。

[试剂]1．α—醋酸萘酯丙酮液：α—醋酸萘酯1g，加丙酮和蒸馏水混合液100m1，溶解后贮于磨口带塞三角瓶内，4℃保存，可使用半年。

2.pH7．4磷酸盐缓冲液：0．07MNa2HPO4(即Na2HPO4)3．基质液：磷酸盐缓冲液82ml，缓慢滴加α-醋酸萘酯丙酮液1．6ml(滴速约每分钟40滴)，边加边用力振摇。

根据5分钟后，加坚牢蓝B80mg，剧烈振摇10分钟，立即过滤，滤液两杯，各40ml。

4．氟化钠基质液：称取氟化钠(NaF)61mg加入上述其中基质液1杯内，混匀后，标上标记。

[操作](1)新鲜涂片两张，分别标上NSE和NaF记号，滴加10％甲醛生理盐水，固定5分钟，用自来水轻轻冲洗，当心血膜脱落，晾干。

(2)两张涂片同时放入各自染色杯内，37℃水浴1小时。

(3)取出后水洗，晾干后镜检。

不用复染。

[结果观察]在胞浆内若有棕黑色或灰黑色弥漫性颗粒沉淀者为阳性，细胞脑浆为黄色者为阴性。

编写：谢平制定日期：2011.12.12．弱阳性及阴性：粒细胞、淋巴细胞一般为阴性，若有弱阳性也可被氟化钠抑制。

血清酸性α-醋酸萘酯酶的比色测定及初步临床应用

【Abstra ct】Objective To establish a colorimetric assay for detecting acid alpha naphthyl acetate esterase in serum. Methods When pH was 6. 2 and temperature was 37 ℃α- naphthyl acetate was , hydrolyzed by acid alpha naphthyl acetate esterase and it producedα- naphthyl. Then colorimetric assay was performed with fast B salt diazotization reaction. Results The optimum pH was 6. 0 - 6. 4 and substrate concentra2 tion was 2mmol/ L. Absorbent wavelength was at 520 nm. Linear range for enzyme determination was from 0 to 2500U/ L. Time for enzymatic reaction was 20 minutes. Time for production of color reaction was 20 minutes. Time for color stabilization was 20 minutes. Intra - assay CV value was 5. 1 % and inter - assay CV value was 2. 67 % . When Hb concentration rose up to lg/ L and bilirubin to 172μmol/ L ,enzymatic ac2 tivity was not interfered. When sodium citrate ,sodium oxalate ,heparin and EDTA - K2 was common concentration ,enzymatic activity was not interfered ,but NaF interfered for enzymatic activity. The results did not changed in seven days when sera were stored at 2 - 8 ℃in refrigerator. The mean value in 100 healthy subjects was 1645 ±378. 5U/L ( ( x - 1. 96s) . Conclusions The method was simple and usefu1. It fit into every laboratory. It should be a new indicator for evaluation of hepatic function.

淋巴细胞酸性α—萘乙酸脂酶活性(ANAE)测定法的改进

.
2士 8
.
.
3%
.
.
36 70
.
92 一 4 3 9 5一 7 7
.
485 65纬 99坏
男战士女战士
85%
3 士 10 2
.
5%
10 5 12 8
.
% %
,
1 2
66 34
.
7 0一 8 4 %
,
.
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.
.
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.
6 8 4 1一 7 7
.
.
以上结果表明不论在儿童还是在成
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一样品接受处理方法》
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淋巴细胞酸性一蔡乙酸脂酶活性 ( A N A E ) 测定法的改进
邯郸市中心医院邯摘要本文对
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,
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,
进行了改进获得了满意的结果并对 6 0 名 3一 5 岁儿童的和 7 0 名战士的进行了测定试剂
1 154
.
,
,
水溶解冰箱存备用
-
1947士 58
9331

酸性α—醋酸萘酯酶

实验五：酸性α—醋酸萘酯酶一、实验目的和要求：1、掌握酸性α—醋酸萘酯酶实验的原理及在免疫学方面的应用；2、学会应用该实验方法鉴别不同免疫细胞在不同疾病中的作用。

二、实验内容：鉴别人和鼠中T、B淋巴细胞。

三、实验步骤：1、配制试剂。

A液：PH7.6的磷酸盐缓冲液：甲液：将9.08克的磷酸二氢钾溶于1L蒸馏水中；乙液：将23.88克十二水合磷酸氢二钾溶于1L蒸馏水中；取甲液12mL加乙液88mL即成磷酸盐缓冲液。

B液：4%副品红溶液：将4克副品红溶于100mL2M盐酸内，溶解过滤，4℃保存。

C液：4%亚硝酸钠溶液：取0.4克亚硝酸钠溶于10mL蒸馏水中，现用现配。

D液：2%醋酸ɑ萘酯液：取2克醋酸ɑ萘酯，溶于100mL无水丙酮中，溶解后装棕色瓶，4℃保存。

孵育液：将2.4mLC缓慢滴入到2.4mLB中，震荡混匀，静置5min，之后将此溶液加进80mLA液中，混匀，滴入2mLD，调PH5.8-6.0。

1%孔雀石绿染液：将1克孔雀石绿溶于100mL蒸馏水中，用氯仿处理后4℃保存。

2、血液涂片取一只小鼠，断尾采血，涂抹于洁净玻片，编号为D，血液层越薄越好，另外手指尖取血涂片，编号D1。

3、孵育和染色待血液自然干燥后置于孵育液内，37℃孵育90min，水冲洗5min，孔雀石绿复染1min，流水冲洗，干燥后，制片显微镜观察（用油镜）。

4、结果判定淋巴细胞胞浆内出现大小不等、数量不一的深红色颗粒者为ANAE阳性细胞（T细胞），胞浆内无颗粒者为ANAE阴性细胞（B细胞）。

四、实验结果二、分析和讨论人的TB淋巴细胞相对于小鼠的都比较大，但是形态相似，胞浆内呈现大小不一的红色颗粒为T细胞，B细胞，胞核比较搭，几乎占据整个细胞。

五、作业酸性α—醋酸萘酯酶在兽医临床上有何应用？在免疫学方面的应用，检测TB淋巴细胞的活性，鉴别不同免疫细胞在不同疾病中的作用，ANAE测定可作为评价肝细胞损伤、肝纤维化以及肝脏合成功能异常的一项新的血清学指标。

酸性α-醋酸萘酯酶染色法的改良

ＣｅｌＩｍｕｎａｕａｉｌｍｅＥｖｌｔｏｎ
ＬＵ．ＵｎｅＬＩＹｏｎＸｉＬＩＹａ —ｆｎ．Ｕ
１３３９液的配制：３ｍ的亚硝酸．．育将Ｌ钠溶液缓慢地滴入３ｍＩ的六偶氮副品
红溶液中．匀静１２ｒｉ再缓慢滴混～ｎａ
Ｉ９各重复间差异不显著。．％．８
脉采集抗凝【．加等量的Ｈｎｓ衄２ｍＬａｋ
液混匀稀释．取一根离心管，入２ｍＬ注的淋巴细胞分离液．将稀释血缓慢地
沿管壁倒入．０ｐ２００ｒｍ离心１ｉ，０ｒｎ用ａ
关键词
０醋酸萘酯酶染色改良贵妃鸡Ｔ【一淋巴细胞
胶头滴管吸取Ｌ问层悬浮的淋巴细｝Ｉ胞．】ａｋ液做适当的稀释后均匀涂丹Ｈｎｓ
片数张
ＩｐｒｍｏｖｅｅｎｔｏｆＡｃｉＡ－ｎａｐＨｔｃｅｔｅＥｓｅｒａｓａｉｎｇｍｄｙｌＡａｔｔｅＳｔｎｉＭｅｈｏｄｔａｎｄｈｅＡｐｐｌｃｉｔｉａｔｏｎｎｏｙａｌＣｈｉｋｅｎｉＲｃ
ｃｕｔｒｔｉｎｙｍｅｈｌｇｅｎｓｌｔｏａｅｎｃｎｉｅｅ．ＴｅｒｓｌｓｏｄｔａｏｎｅｓａｎｉｇｂｔｙｒｅｏｕｉｎｈｄｂｅｏｓｄｒｄｈｅｕｔｈｗｅｈｔｕｅｌｔｒｄｈｄｓｉａｉｎｓｌｔｎＳｅｔｒｈｎｈｏｍａｄｈｄｓｄｇｕａａｅｙｅａａｆｔｏｕｉｉｘｏｏｂｔｅｔａｔｅｆｒｌｅｙｅ— ａｅｏｅｃｔｎｍｉｅｏｕｉｎｐｌｏｅｉｃｂｔｏｏｕｉｎｎｕｔｅｃｎｒｌｅｎ５８６２：１ｏｒｆｒｘｄｓｌｔｏ：ｔｆｈｎｕａｉｎｓｌｔｏｌｓｏｔｏｌｄｉ．－－ｔｂ．ｈｕｏ５ｉｃｂｔｇｉｎｕｈＴｉｌｆｔｅｃｕｔｒｔｉｉｇｉｅｆｃｈｎｉ’ ｏｒｌｄｉ～ｎｕａｉｓｅｏｇ；ｔｅｏｈｏｎｅｓａｎｎｓｐｒｅｔｗｅｔＳｃｎｔｌｎ１ｎｉｏｅ

血细胞a-NAE染色测定

血细胞a-NAE染色测定
一、原理：
血细胞内的a-醋酸萘酚脂酶（a-NAE）将基质液中的a-醋酸萘酚酯水解，释放出a-萘酚，后者与重氮盐偶联形成有色沉淀物。

沉淀物的显色深浅与酶活性成正比。

二、试剂组成
1、a-NAE固定液：1瓶×5
2、a-NAEⅠ液：1瓶×5
3、a-NAEⅡ液：1瓶×5
4、a-NAEⅢ液：1瓶×5
5、苏木素复染液：1瓶×5
三、操作步骤
1、新鲜涂片滴加固定液5-8滴，盖满血膜即可，（4℃）30秒，水洗。

2、将Ⅰ液和Ⅱ液放置入Ⅲ液中溶解混合成为基质液。

将涂片放置入后37℃放
置30分钟，然后连缸流水冲洗数分钟。

3、苏木素复染1-2分钟，水洗待干，镜检。

4、结果提示：
阳性结果：细胞内出现褐红色沉淀物，定位于胞质。

阴性结果：细胞内无褐红色沉淀物。

四、注意事项
1、标本宜新鲜，若不能及时测定可先用固定液处理后，可保存数天。

2、基质液配制后及时应用，以免失效或降低阳性强度。

3、若需作NaF抑制试验，请同时配制两缸基质液，另一缸内加入NaF即可。

4、基质液为一次性使用，可同时放置8张涂片（即8份标本），配制后不能反
复应用。

5、基质液配制时可出现混浊，但不影响染色效果。

五、临床意义
此酶为非特异性酯酶，在单核—吞噬系统中含量较高，可呈阳性反应，但可被NaF所抑制。

而粒细胞也可见阳性反应，但基本不被NaF抑制。

另外，幼红细胞、巨核细胞、部分淋巴细胞均能见到弱阳性。

肝病患者血清酸性α-醋酸萘酯酶及其同工酶的变化

肝病患者血清酸性α-醋酸萘酯酶及其同工酶的变化肖芸;王燕;戴志敏;张维;廖若男【期刊名称】《世界华人消化杂志》【年(卷),期】2004(12)8【摘要】目的:探讨肝病患者血清酸性α-醋酸萘酯酶(acid alpha naphthyl aetate esterase,α-ANAE)及其同工酶的临床应用价值. 方法:通过比色法测定血清ANAE 总活性.ANAE同工酶的检测采用琼脂糖凝胶电泳法及聚丙烯酰胺凝胶电泳法. 结果:肝病患者包括肝炎、肝硬化及肝癌血清ANAE含量均低于对照组,肝硬化组及肝癌组明显低于肝炎组.通过琼脂糖凝胶电泳法可以在肝病患者血清中检出两种ANAE 同工酶异常谱形.聚丙烯酰胺凝胶电泳可分离出更多ANAE同工酶谱带. 结论:血清ANAE含量测定可作为评价肝细胞变性坏死、肝脏合成功能异常的一项血清学指标.肝病患者血清中检出的异常ANAE同工酶谱带性质、组成及在临床应用上的价值还有待于进一步探讨.【总页数】2页(P1932-1933)【关键词】肝病患者;血清;检出;肝癌;临床应用;肝炎;琼脂糖凝胶电泳法;醋酸萘酯;同工酶谱带;酯酶【作者】肖芸;王燕;戴志敏;张维;廖若男【作者单位】贵阳医学院附院血液检验科;贵阳医学院附院消化内科;贵阳医学院附院血液内科【正文语种】中文【中图分类】R575;R735【相关文献】1.血清酸性α-醋酸萘酯酶的比色测定及初步临床应用 [J], 冯春来;黄兴富;范华2.血清酸性α-醋酸萘酯酶的比色测定及初步临床应用 [J], 周玉贵;王传芳;陆晓云;金勇;刘昌元3.血清α-醋酸萘酯酶同工酶琼脂糖凝胶电泳法及临床应用 [J], 黄志华4.肝硬化患者血清和腹水中酸性α-醋酸萘酯酶的含量 [J], 王燕;周力;张永宏;张维;陈玉梅5.Ⅰ型糖尿病血清α-醋酸萘酯酶同工酶出现变异谱带的初步分析 [J], 万晓龙;刘昌元;王敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)

酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE 法)简介：酯酶主要分为非特异性酯酶(non-specific esterase)、酯酶(lipase)、胆碱酯酶(choli-esterase)。

每一种酯酶常能水解许多不同的底物，多种不同的酯酶又能水解相同的底物，因此这一系列酯酶被称为非特异性酯酶。

Leagene 酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE 法)又称非特异性酯酶染色液，其原理是酸性条件下细胞中的酸性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚，α-萘酚再与六偶氮副品红偶联，生成不溶性红色沉淀，定位于细胞质。

本染色液对酯酶染色无特异性，故又称作非特异性酯酶染色液，可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色，亦可作氟化钠抑制试验。

该染色液仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切入ANAE 固定液固定。

2、水洗5min 。

3、入配制好的ANAE 孵育液，放入湿盒中，室温(15～25℃)避光孵育，水洗。

4、入甲基绿染色液复染，水洗，镜检。

染色结果：编号名称DE0040 3×10ml DE0040 3×20ml Storage 试剂(A): ANAE 固定液10ml20ml RT 避光试剂(B): ANAE 孵育液B1: Pararosaniline solution 0.05ml 0.1ml 4℃ 避光 B2: Nitrite solution 0.05ml 0.1ml 4℃ 避光 B3: α-NAE solution 0.5ml 1ml 4℃ 避光 B4: ANAE buffer9.5ml19mlRT试剂(C): 甲基绿染色液 10ml 20ml RT 避光试剂(D): NaF solution 0.2ml 0.4ml RT 避光使用说明书1份细胞质暗红色/棕色细胞核绿色氟化钠抑制实验：按NaF solution：ANAE孵育液=1：25的比例，在ANAE孵育液中加入NaF solution，其余按上述染色法进行。

医学检验·检查项目：醋酸AS-茶酚酯酶染色_课件模板

细胞白血病(活性可被氟化钠抑制)。
医学检验·各论：醋酸AS-茶酚酯酶染色 >>>
正常值：阳性：粒细胞系统(或弱阳性)、单核
细胞系统(或强阳性)。
医学检验·各论：醋酸AS-茶酚酯酶染色 >>>
相关检查：铁染色、phi(φ)小体染色、胶体铁染色、苏丹黑B染色、特异性脂酶染色、阿利新蓝染色。
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相关症状：粒细胞减少、粒细胞缺乏、中性粒细胞增高。
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相关疾病：慢性粒细胞性白血病。
谢谢！
医学检验·各论醋酸AS-茶酚酯酶染
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医学检验·各论：醋酸AS-茶酚酯酶染色 >>>
简介：
酯酶染色的方法较多，常根据其作用液的PH和底物的不同将常用的酯酶染色分为二类：特异性酯酶染色法和非特异性酯酶染色法。
医学检验·各论：醋酸Aຫໍສະໝຸດ -茶酚酯酶染色 >>>
临床意义：阳性：急性粒细胞白血病、急性单核