动物氧化应激研究进展

动物氧化应激研究进展
动物氧化应激研究进展
随着我国畜牧业特别是现代养殖业集约化程度的提高以及人们对动物福利意识的增强，动物应激医学已成为动物医学的重要组成部分。

在动物应激医学研究中，动物氧化应激又逐渐成为国内外学者的热点研究课题。

1 氧化应激概念与起因
1.1 氧化应激概念
动物在正常生理代谢过程中，会产生许多自由基，这些自由基通常不会导致组织细胞的损伤，机体依靠自身体内的抗氧化防御体系，主要包括抗氧化酶类（包括超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px、谷胱甘肽硫转酶GST等）以及非酶类的抗氧化剂（包括维生素C、维生素E、谷胱甘肽、褪黑素、a-硫辛酸、类胡萝卜素、微量元素铜、锌、硒等），可以保护机体组织和细胞防止自由基的损伤。

当动物机体细胞内产生的自由基的水平高于细胞的抗氧化防御能力时，氧化还原状态失衡，过量的自由基存在于组织或细胞内，即诱发氧化应激，并导致氧化损伤。

因此，氧化应激(Oxidative Stress)是机体应答内外环境，通过氧化还原反应对机体进行多层次应激性调节和信号转导，同时造成氧化损伤的重要生命过程。

器官和组织对氧化应激的易感性依赖于它的抗氧化系统的状态和氧化剂与抗氧化之间的动态平衡。

氧化应激可导致细胞膜磷脂过氧化、蛋白质过氧化(受体和酶)以及DNA的氧化损伤。

脂质、蛋白质和DNA的氧化会对机体造成不同程度的危害，从而影响机体的生长、发育、衰老等过程。

急性和慢性的应激都能通过产生自由基诱导胃肠道、免疫系统等多方面的氧化应激。

1.2 氧化应激的起因
1.2.1 自由基的产生
细胞在正常新陈代谢和先天免疫反应过程中，都会产生活性氧代谢物(ROM)——自由基。

首先，肠上皮细胞的主动新陈代谢本身就是ROM的来源，其生成与电子传递链的活性有关。

所产生的活性物质包括超氧化物阴离子(O2-)、过氧化氢(H2O2)和羟基自由基(·OH)，它们都是线粒体中氧化磷酸化不可避免的产物。

其次，另一个内源性氧化应激源自于肠道先天及获得性免疫系统在与许多共生物和病原微生物反应过程中产生的一氧化氮(NO)，其在食物和水的吸收过程中不可避免的会产生。

当动物遭受应激刺激或患病时，机体代谢出现异常而骤然产生大量自由基，过量的自由基数量将超过抗氧化体系的还原能力，使机体处于氧化应激状态，结果会导致机体损伤。

目前研究表明主要有四种致细胞损伤机制：
1)对脂类和细胞膜的破坏，从而导致细胞死亡。

2)对蛋白质、酶的损伤，从而导致蛋白质变性，功能丧失和酶失活。

3)对核酸和染色体的破坏，从而导致DNA链的断裂，染色体的畸变和断裂。

4)对细胞外基质的破坏，从而使细胞外基质变得疏松，弹性降低。

1.2.2 氧化应激的起因
1.2.2.1 外源性因素
1.2.2.1.1 日粮营养因素
营养缺乏或不良可能使体内自由基增加，而且还影响抗氧化酶生物合成及内源性抗氧
因氧气、光照、湿度、温度、铜、铁、霉菌等因素的作用，会形成大量脂质过氧化产物。

这些产物不但会影响饲料脂质利用效率，还会给畜禽造成氧化应激。

因此，若能成功构建食源性的可复制的氧化应激动物模型将具有非常重要的价值。

以富含PUFA的玉米油和鱼油为对象，分别向其中加入外源性的促氧化剂（Fe2+ Cu2+、H2O2和O2)，并以过氧化物价（POV）、酸价（AV）、皂化价（SV）、硫代巴比妥酸反应物（TBARS）和碘价（IV）为指标评判脂质的过氧化程度，经比较分析发现鱼油的过氧化速率远远快于玉米油(玉米油过氧化时长与POV的动态方程为：YPOV=0.0005X2+0.1434X+4.9404，R2=0.9924，X：单位为“天”，Y：单位为“meqO2/kg”；鱼油过氧化时长与POV的动态方程为：YPOV =-0.692X2+73.605X-329.88，R2=0.79，X：单位为“小时”，Y：单位为“meqO2/kg”)。

试验制作了不同POV值的氧化鱼油，按照3％的比例加入到饲料中，拟构建食源性的氧化应激模型。

结果发现，不同POV值的氧化鱼油可提高仔猪的腹泻指数，降低生产性能和养分利用率。

其中，以POV值约为l000 meqO2／kg的氧化鱼油作用效果最明显。

2.2 Diquat诱导氧化应激仔猪模型
Diquat又叫敌快死，是双吡啶除草剂，它和百草枯(Paraquat)一样可以利用分子氧产生O2-和H2O2，诱导动物产生氧化应激。

Diquat的主要靶器官是肝脏，而主要的物质代谢都集中于肝脏。

因此，以Diquat作为氧化应激源构建动物的氧化应激模型，有助于研究动物氧化效应及可能机理。

Diquat对大鼠的半数致死剂量(LD50)为120mg／kg。

有研究发现，以LD50的十分之一作为腹腔注射剂量可诱导野生型大鼠的氧化应激并不会引起动物死亡。

采用12mg／kg体重的腹腔注射剂量诱导断奶仔猪氧化应激，并将应激效应与饲喂含5％氧化鱼油饲料(在混入饲料前油脂POV值为786.50meqO2/kg，混入饲料后抽提油脂POV值为122.63 meqO2/kg)的仔猪的应激效应进行比较。

结果发现，在注射Diquat 后，所有的试验猪在30分钟内都出现呕吐、厌食等症状，但在3天后都基本恢复采食，在试验期(26天)结束后，未见猪只死亡，但是大多数试猪在试验后期出现增重下降、厌食、精神萎靡不振的现象。

上述研究结果表明，使用的Diquat腹腔注射可成功构建氧化应激模型，但采用12mg ／kg的注射剂量可能不太适合构建长期氧化应激状态动物模型。

随后，进一步的研究表明，通过腹腔注射10mg／kg Diquat可有效诱导仔猪氧化应激，建立稳定可靠的氧化应激模型。

2.3 地塞米松（DEX）诱导氧化应激肉仔鸡模型
王成等（2008）采用地塞米松(DEX)处理肉仔鸡胸肌卫星细胞(SCs)，筛选DEX的最佳作用时间和浓度，以优化肉仔鸡卫星细胞（SCs）的氧化应激模型。

试验将体外培养的肉仔鸡胸肌SCs按DEX处理浓度(0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48和0.96 mg/ml)分为7组，分别测定培养不同时间点(6 h、12 h、24 h和48 h)SCs的存活率(MTT法)，细胞及培养液丙二醛(MDA)、氧自由基(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转酶(GST)含量或活性。

研究结果显示，随DEX浓度升高，SCs中MDA和ROS含量极显著升高、SOD和GST活性极显著降低；随着DEX处理时间的延长，SCs存活率及SOD和GST活性均有所下降、MDA和ROS产生量上升；用0.12 mg/ml的DEX处理SCs 24 h后，SCs
存活率显著降低。

上述研究表明，以0.12 mg/ml DEX处理SCs 24 h能使肉仔鸡骨骼肌SCs产生适度的氧化应激，可以作为肉仔鸡胸肌卫星细胞的氧化应激模型。

3 氧化应激对动物的危害
3.1 氧化应激对动物消化道结构和功能的影响
氧化应激是人类和动物范围极广的综合病症的主要原因之一。

这些综合病症包括所有炎症，如肠炎、肠蠕动紊乱、各种急性炎症诸如创伤愈合过程中出现的炎症、心血管疾病、神经紊乱及一些与代谢有关的疾病等。

其中对消化道的氧化损伤在动物生产中发生率极高，由于慢性应激状态下，表征不易察觉，危害性极大。

消化道是动物体内营养素的消化、吸收和代谢的主要器官，因此，过量的自由基极易诱发胃肠疾病及消化道功能紊乱，给畜牧业的发展造成巨大损失。

研究氧化应激对消化道结构与功能的影响成为当今的一项热门研究课题。

3.1.1 氧化应激对动物消化道粘膜结构形态的损伤
消化道是消化和吸收营养物质的功能器官，它还具有免疫、内分泌、粘膜屏障等作用。

其中肠粘膜屏障功能具有阻止肠腔内有害物质如致病微生物、抗原和促炎因子进入血液循环的作用，从而维护动物体健康。

胃肠道的结构、整体性、氧化还原状态、微生物菌群和酶系的平衡状态是保证其正常生理功能的重要因素。

消化道器官与粘膜极易遭受氧化应激损伤，使旁细胞结合复合体受损，增加上皮通透性。

更为重要的是肠粘膜含有高浓度的非蛋白质巯基，氧自由基作用于巯基使蛋白质变性、酶失活，氧自由基与膜内多不饱和脂肪酸结合造成脂质过氧化损害，损伤肠粘膜组织，肠粘膜层变薄、绒毛变短、绒毛表面积减少、隐窝变浅。

在粘膜屏障受损情况下，肠粘膜通透性增高，肠道细菌移位引起促炎因子大量释放，从而诱发多种消化道疾病或加重原发疾病的过程与氧自由基的产生有密切的关系。

直接的症状是肠道的蠕动、粘膜的渗透性、电解质的分泌、粘液的释放、肠上皮形态及细胞的结构和周转异常，防御系统的改变将提高肠源性感染的发生率。

3.1.2 氧化应激对动物消化道屏障和吸收功能的影响
氧化应激不仅引发粘膜细胞损伤，可继而导致消化道分泌功能下降，导致消化吸收、转运和同化代谢功能降低，降低饲料利用率。

肠道粘膜组织的损伤，促使病原微生物可乘虚而人。

当肠道内氧自由基增加时，会使肠道中耐受能力较弱的乳酸菌数量减少，而大肠杆菌的数量上升。

病原菌侵入的增加，使得巨噬细胞在吞噬过程中释放活性氧数量增加，生成的O2-可使酶类及非酶类的物质还原并可产生反应性更高的活性氧。

Wargle（1996）研究表明在多种动物中，消化道粘膜的炎症和多种影响肠道粘膜功能的可溶性调节物的释放有关系。

Pscheidl等（2000）报道酸中毒可促进脂质过氧化及氧化剂介导的细胞损伤，反应性氧代谢产物能引起ATP耗竭，ATP耗竭是引起肠上皮屏障功能不全的一个重要因素。

Ilaria等（2002）报道，内脏氧化还原状态的改变是肠道蠕动异常或内脏敏感度提高的病理学早期因素。

黎君友等证实营养素的吸收依赖于肠吸收细胞膜完整性，肠粘膜损伤，致使大量吸收细胞受到破坏，严重影响小肠吸收功能。

大多数营养物质吸收是耗能过程，需要消耗ATP，而肠缺血能严重干扰小肠细胞的能量代谢，显著降低小肠粘膜的ATP含量，从而加重了肠粘膜的代谢应激，造成小肠吸收功能障碍。

3.1.3 氧化应激对动物消化道基因表达的影响
氧自由基(ROS)可通过细胞信号传导途径影响细胞的分裂、分化、凋亡等过程，许多细胞信号的传导通路对氧化应激都很敏感，ROS可能是诸多信号传导通路的共同环节。

ROS可能通过影响粘膜细胞的基因表达，调节肠道的功能。

3.2 氧化应激对动物免疫系统的影响
机体免疫机能和自由基关系非常密切。

免疫细胞在应答外来物、霉菌、真菌、细菌、病毒时，可能通过多种机制表达其防御反应，比较明确的机制有以下三种：1)通过NADP 氧化酶系统诱导的免疫细胞呼吸爆发所产生的活性氧包括氧负离子及其所产生的自由基，是机体产生自由基和活性氧的重要来源；2)通过髓过氧化物酶(Myeloperoxidase MPO)系统产生活性氧和次卤化物，以抵御外来物的侵入和袭击，但当其反应过度时，也可以造成氧化损伤；3)通过诱导型一氧化氮合酶(Inducible Nitric Oxide Synthase，iNOS)系统产生一氧化氮及其与氧反应所造成的过氧亚硝酸盐，通过其强氧化作用杀伤外来微生物及其自身的变异细胞，同时也是造成组织损伤的的因素之一。

氧化应激可导致人和动物机体的细胞免疫抑制，不仅影响淋巴细胞的增殖、分化与成熟，还影响自然杀伤(NK)细胞和杀伤(K)细胞的杀伤能力，使机体抗感染能力下降。

有研究指出，氧化应激可直接引起小鼠胸腺和脾脏萎缩，影响脾脏T淋巴细胞的增殖反映；也可引起仔猪脾脏严重充血、出血，淋巴细胞减少，脾脏和胸腺萎缩。

与采食正常日粮的小鼠相比，采食高脂日粮的C57BL/6小鼠受硫酸葡聚糖钠（DSS）应激时，结肠上皮非CD1d限制型自然杀伤细胞显著增多，高脂日粮也刺激这种细胞产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-g(IFN-g)增多。

同时调节型T细胞显著减少，小鼠对DSS 诱导结肠炎的易感性增强。

小鼠摄食高脂和高糖饲料可引起脂肪肝，肝脏免疫功能紊乱，主要表现为自然杀伤细胞（NKT）数量减少和已经可引起NKT死亡的IL-12产量增多，同时其他炎性细胞因子产量增多，肝脏炎性损伤易感性增强。

长期摄入高脂饲料，造成氧化应激削弱小鼠细胞特异性免疫反应，降低机体抵抗感染的能力。

3.3 氧化应激对动物胴体品质的影响
近十年来，随着人们对畜产品品质意识的提高，国内外学者对氧化应激与畜产品品质之间的相互关系的研究也逐渐走向深入。

宋伟等（2004）研究了温热环境对生长猪过氧化反应及肉品质的影响。

研究发现：1）机体过氧化反应对热处理较为敏感,其相关指标（血浆丙二醛MDA、超氧化物歧化酶SOD 以及总抗氧化能力T-AOCD）绝对值的变化及其之间关系的变化能够在一定程度上反映出热处理的时间效应；2）高温应激明显改变肉质的适口性和营养性，显著降低肌肉肉色、系水力和剪切力，增加肌肉乳酸、磷、胆固醇含量，降低肉质肌内脂肪和游离脂肪酸含量；高温应激也改变了肌纤维细胞能量代谢过程，肌浆中磷、乳酸的水平显著升高，而肉样中乳酸脱氢酶(LDH)、肌糖原(MC)水平的活性降低。

在应激对过氧化效应上，宰前应激明显造成肌肉组织细胞损伤。

柏华等（2007）研究了慢性氧化应激对肉仔鸡肉品质及消化代谢的影响，结果表明，通过饮水添加10～30㎎/L的可的松引发肉仔鸡慢性氧化应激，继而影响肌肉组织的发育，显著降低肌肉的营养成分，即增加了胸肌、腿肌滴水损失和胸肌pH值, 降低了胸肌、腿肌蛋白和脂肪含量。

王成等（2008）对氧化应激影响肉仔鸡肉品质的主要MAPK信号转导通路进行了研
究。

研究发现：1）体外采用0.12 mg/ml 地塞米松（DEX）处理胸肌卫星细胞（SCs）24 h能使肉仔鸡骨骼肌SCs产生适度的氧化应激，可以作为肉仔鸡胸肌卫星细胞的氧化应激模型；2）在DEX诱导肉仔鸡胸肌SCs产生氧化应激过程中，p38MAPK和JNK通路起着关键作用；3）抗氧化物质（维生素C、维生素E、茶多酚TP、大豆黄酮DZ）能通过调控p38MAPK和JNK信号通路缓解氧化应激对肌肉SCs所产生的氧化损伤，显著降低SCs 中丙二醛（MDA）与ROS的产量，下调了MEK3和MEK4基因的表达量、上调了SOD 和GST基因的表达量；4）日粮中添加茶多酚（TP）与维生素C对肉仔鸡生产性能无明显影响，但能通过调控JNK和p38信号通路缓解DEX饮水诱导的氧化应激对肉仔鸡造成的氧化损伤。

4 氧化应激的预防或干预措施
当动物遭受氧化应激刺激时，体内的抗氧化体系将会产生应答以淬灭自由基，而过度氧化应激则严重影响着动物的健康和生产性能，同时改变了应激动物对一些具有抗氧化作用养分的适宜需要量，因在动物的饲料中其必需养分除了能满足基本的营养需要外，还要求能维持营养物质及其代谢与自由基稳衡性动态的关系，故合理的营养供给能显著降低应激带来的危害。

因此，深入探讨氧化应激的危害效应和机制，从营养调控角度寻求缓减应激危害的措施，将有助于加快实现畜禽的抗病饲养。

4.1 机体自身调节
正常情况下，在一定范围内，动物体对氧化还原状态具有较强的自身调节能力，活性氧代谢物（ROM）通过内源抗氧化防御系统保护细胞免受损伤。

这种防御系统由三类抗氧化剂组成(Miller等，1993)：第一组为酶类抗氧化剂，包括线粒体Mn依赖性超氧化物歧化酶(SOD)、Cu-Zn依赖性SOD及Se依赖性谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等（Aw等，1999)。

酶类抗氧化剂是主要的内源抗氧化防御系统和抵抗ROM(如H2O2和·OH)的第一道防线。

第二组为细胞内液的蛋白质抗氧化剂，例如带有巯基基团的清蛋白、半胱氨酸和同型半胱氨酸。

第三组为低分子量的短链抗氧化剂，如水溶性维生素C、谷胱甘肽、脂溶性维生素E和维生素A。

如果氧化应激超过了动物的抗氧化能力，将会进一步扩大组织损伤(Weiss，1989)。

4.2 添加外源性抗氧化剂
4.2.1 对营养性氧化应激的抑制作用
在高能、蛋白日粮中补充各种外源抗氧化物质、重建机体组织细胞内氧化/抗氧化的平衡，将有助于消化道营养性氧化应激的预防。

抗氧化剂与其他营养素一样，存在适宜营养需要，高能状态下需要增加。

适量的抗氧化剂，可使GSH-Px、SOD、CAT的活性提高，但过量同样增加氧自由基释放，破坏生长抑素分泌系统，使抗氧化酶活性急剧下降。

例如对于日粮脂肪引起的氧化应激，日粮中的抗氧化剂可通过与自由基反应，能够减少过氧化物载体，使其转化成无毒性的代谢物。

抗氧化剂能够与易于氧化的脂肪酸结合，从而稳定分子结构，抑制脂类氧化的加剧以及过氧化物的进一步形成。

日粮中抗氧化剂含氢的活性集团如乙氧基喹啉、叔丁基对苯二酚(TBHQ)、二丁基羟基甲苯(BHT)或丁基羟基茴香醚(BHA)，能够与脂肪酸或媒介中的不对称电子自由基相结合，从而阻止其被氧化。

添加抗氧化剂（AOX）能够稳定饲料原料（如湿酒糟粕）中的脂肪，阻止不饱和脂肪酸C18：2和C18：3的进一步氧化和损失。

同时，AOX能够有效抑制脂肪因氧化过程所导致的能量损失。

通过原子测热法所测定的能量值表明，与新鲜脂肪相比，氧化脂肪的能量
降低了35％。

然而，在有效的AOX存在情况下，能量值得到维持。

脂肪的氧化不仅降低了其能量和生物价值，而且还会把氧化反应扩大到其他脂类成分中，如维生素和日粮色素。

此外，目前使用的抗氧化剂主要还包括铁、硒、锌、镁、维生素C、维生素E、烟酸、丹酚酸、番茄红素、硫辛酸、二氢吡啶、半胱胺、茶多酚等。

铁、硒、锌等作为抗氧化酶系的组成影响抗氧化状态，如动物锌缺乏时，脂肪氧化增加，可诱发机体产生氧化损伤，补加锌则能使损伤得以恢复（Yoursef, 2002），锌可有效地降低NO水平，减少对机体的氧化损伤作用（Wapnir,2000）。

镁能够减少氧自由基的泄露。

丹酚酸、番茄红素、硫辛酸、二氢吡啶、半胱胺等外源抗氧化剂能够清除自由基，维持正常的氧化还原状态，改善消化道功能。

4.2.2 对其它氧化应激的抑制作用
饲料中外源性添加抗氧化剂（AOXs）可缓解胃肠道的一些氧化应激，以及节约在氧化应激情况下内源性A0Xs的供应。

即可以保护肠腔内的AOXs，合成AOXs可以减少内源性AOXs如谷胱甘肽、维生素A、维生素E被肠道细胞的吸收。

Knight等（2007）研究表明，新鲜脂肪或氧化脂日粮中添加乙氧基喹啉能够显著增加肝脏中的维生素A含量，此结果进一步支持了合成AOXs能够节约内源AOXs消耗的假设。

关于抗氧化剂添加的剂量、抗氧化剂的协同作用以及氧化应激与DNA损伤关系等，都还有待进一步研究。

4.2.3 谷氨酰胺对氧化应激的抑制作用
谷氨酰胺（Gln）供给对粘膜上皮结构的完整性起着十分重要的作用，严重应激状态下，肠粘膜上皮细胞内Gln很快耗竭。

Gln供给在促进肠细胞能量代谢同时，增强谷胱甘肽（GSH）合成，进一步减少氧自由基危害。

王军军等（2007）研究报道，过氧化氢处理可降低了细胞增殖相关蛋白Medthionyl Aminopeptidase2、Transgelin-2、RAD23；压力反应蛋白HSP70、GRP78；钙离子信号传导相关的蛋白Calreticulin precursor、Calmodulin等的表达量，而提高了细胞骨架蛋白Lamin A、Vimentin、热休克蛋白90（HSP90）、Ribonuclease Inhibitor (RI)等蛋白的表达。

这些蛋白的表达变化反映了细胞的生长受限、胞膜氧化损伤以及核相关的氧化抵抗。

谷氨酰胺（Gln）的添加增加了对蛋白合成和胞内钙调节具有重要意义的钙网蛋白和转录因子BTF3的表达，降低了谷氨酰胺合成酶的表达以及可能引发免疫应激的MHC class Ⅱ的表达。

此研究结果对进一步认识体外和体内谷氨酰胺改善肠道氧化应激的效果及其机制提供了一定的理论基础。

可见，Gln在调节细胞内氧化还原状态、氧化应激、细胞增殖与凋亡等方面具有重要的意义。

4.2.4 硒对氧化应激的抑制作用
硒是动物必需微量元素之一，Burk和Hill(1995)预言哺乳动物体内有超过100种的硒蛋白。

硒的生物学功能是多方面的，而最主要的是其抗氧化功能。

机体硒水平的高低，直接影响机体的抗氧化性以及对疾病的抵抗力。

4.2.4.1 硒可缓解由氧化应激引起的生产性能和养分表观消化率的降低。

4.2.4.2 硒可提高机体抗氧化酶的活力，维持机体氧化还原稳衡状态。

余冰等（2007）研究发现，随着饲粮硒添加水平的增加，有提高氧化应激仔猪血清GSH、GSH-Px、SOD和CAT等抗氧化酶活力的趋势。

4.2.4.3 硒可降低脂质过氧化的发生，保护细胞结构与功能的完整性。

在许多对ROS敏感的物质中，多不饱和脂肪酸（PUFA）的敏感性高于其它物质，通常认为脂质过氧化是细胞过氧化损伤的主要标识。

脂质过氧化最普遍的检测指标是丙二醛（MDA）的含量，因MDA是由ROS攻击生物膜中多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用而形成的脂质过氧化物，因而MDA水平高低可反映机体细胞受自由基攻击的严重程度，也可代表组织细胞内的ROS水平。

余冰等（2007）研究发现，添加硒后可以显著或极显著降低血清MDA含量，且在氧化应激状况下，随着硒添加水平的增加，MDA含量呈逐渐下降的趋势。

4.2.4.4 硒可减少DNA的氧化损伤，降低细胞凋亡的发生。

细胞凋亡的突出特征是由于内源性核酸内切酶的激活而导致细胞核DNA断裂成大量200bp及其倍数大小的核苷酸片断，凝胶电泳表现为典型的DNA ladder。

氧化应激导致仔猪肝脏和脾脏细胞DNA断裂，在凝胶电泳图谱上表现出明显的DNA条带。

氧化应激仔猪肝脏和脾脏都出现超微结构的变化，表现肝细胞核膜严重扩张、内陷或溶解，核皱缩、染色质聚集，线粒体肿胀、破裂、嵴紊乱，见中性白细胞和糖原异常聚集。

脾脏出现不同程度的浆细胞、网状细胞和淋巴细胞的病变，线粒体肿胀，内质网微扩和细胞器坏死，且见大量白细胞和红细胞。

而与Se(0.2)／Diquat(+)组肝细胞核膜严重扩张、内陷或溶解相比，Se(0.4)／Diquat(+)组肝脏见肝细胞核膜微扩，内质网和线粒体扩张。

可见，添加硒可以降低细胞凋亡的发生。