高纯度质粒小提中量试剂盒操作方法及步骤说明书
高纯度质粒小提中量试剂盒
目录号：PL1801
适用范围：
适用于5-15ml 中等规模质粒制备（mind preparations） 试剂盒组成、储存、稳定性：
试剂盒组成保存50次
平衡液室温5ml
RNase A（10mg/ml）－20℃250μl
溶液P1 4℃25 ml
溶液P2 室温25 ml
溶液P3 室温35 ml
去蛋白液PE 室温16ml
第一次使用前按说明加指定量乙醇
漂洗液WB 室温15 ml
第一次使用前按说明加指定量乙醇
洗脱缓冲液EB 室温10ml
吸附柱AC 室温50个
收集管（2ml）室温50个
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:
1.第一次使用时，将试剂盒所带的全部RNase A加入溶液P1后（终浓度100ug/ml）
置于2-8℃保存。如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有微量RNA
残留，在溶液P1中补加RNase A即可。
2.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分
钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时
盖紧盖子。
产品介绍：
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附
量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.独有的去蛋白液配方，可以高效去除残留的核酸酶，即使是核酸酶含量丰富的菌
株如JM系列、HB101也可以轻松去除。有效防止了质粒被核酸酶降解。
3.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的
质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，
如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.溶液P3和去蛋白液PE中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、
眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3.提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒，建议
取5-15 ml 过夜培养14-16个小时的菌液，可提取出多达50μg-60μg的纯净质粒。
如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应适当加大菌体使用量，使用10-20 ml过夜培养物，同时按比例增加P1、P2、P3的用量，其它步骤相同。
4.得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260
值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5.质粒DNA确切分子大小，必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知
道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道其确切大小。
6.洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗
脱，但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
关于平衡液的使用
1.介绍：核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会同空气中的电荷/尘埃发生反应而影
响其核酸的结合能力。硅胶柱经平衡液预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团，提高核酸的结合能力。从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。平衡液是强碱性溶液，若不小心碰到，请用大量自来水清洗。用完后需盖紧瓶盖，以免接触空气。室温保存。在保存过程中可能有沉淀生成，请加热至37℃使沉淀完全消失。
2.使用方法：取一个新的硅胶膜吸附柱子装在收集管中，吸取100μl的平衡液至柱
子中。13000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中废液，将吸附柱子重新放回收集管。
此时平衡液预处理柱子完毕。接后续的操作步骤。
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
提示：
?第一次使用前请先在漂洗液WB和去蛋白液PE瓶中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
?将RNase A全部加入溶液P1中，混匀，每次使用后置于2-8℃保存。
?将溶液P3放在冰上预冷。
1.取5-15 ml过夜培养的菌液，9,000rpm离心1-2分钟，尽可能的倒干上清，收集
菌体。
2.用500μl溶液P1重悬菌体沉淀，涡旋振荡至彻底悬浮，全部转入一个2ml离心管。
如果有未彻底混匀的菌块，会影响裂解，导致提取量和纯度偏低。
3.加500μl的溶液P2，温和地上下翻转4 -7次使菌体充分裂解，室温放置4分钟。
温和地混合，不要剧烈震荡，以免基因组DNA剪切断裂！所用时间不应超过5分钟！以免质粒受到破坏。此时菌液应变得清亮粘稠，如果菌体少，很快清亮粘稠后就可以做下一步，不是一定要准确的5分钟。
4.加700μl溶液P3，立即温和地上下翻转4 -7次，充分混匀时会出现白色絮状沉淀。
冰上静置3-5分钟，13,000rpm离心10分钟，小心取上清。
加入溶液P3后应该立即混匀，以免产生SDS的局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀，可再次离心后取上清。
平衡液预处理吸附柱：
使用平衡液预处理硅胶膜吸附柱为必做步骤，具体方法参见前文“关于平衡液的使用”
5.将上一步所得上清分次加入吸附柱AC中（吸附柱放入收集管中），13,000rpm离
心30-60秒，倒掉收集管中的废液。
6.可选步骤:加入500μl去蛋白液PE，13,000rpm 离心30-60秒，弃废液。
此步骤为了去除痕量核酸酶等杂质，如所用菌株为JM系列、HB101等endA菌株或野生型菌株，核酸酶含量丰富，应加此步骤；如所用菌株为XL-1 Blue和DH5α等缺陷型菌株，核酸酶含量低，则可略过此步骤。
7.加入600μl漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心30秒，
弃掉废液。
8.加入600μl漂洗液WB，12,000rpm 离心30秒，弃掉废液。
9.将吸附柱AC放回空收集管中，13,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免
漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10.取出吸附柱AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加100μl-250洗
脱缓冲液EB（洗脱缓冲液事先在65-70℃水浴中加热效果更好），室温放置2-5分钟，12,000rpm 离心1分钟。如果需要较多量质粒，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，离心1分钟。
洗脱体积越大，洗脱效率越高。如果需要质粒浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是最小体积不应少于80μl，体积过小降低质粒洗脱效率，减少质粒产量。
问题与解决方法
问题评论与建议
质粒DNA 产量低*忘加抗生素，非质粒转化细胞过度生长-建议：确保固体、液体培养基中都加入了适当的抗生素。
*细菌培养时间太长，老化细菌开始裂解-建议：接种过夜培养的新鲜单菌落于加了合适抗生素的培养基中，培养12-16个小时。
*使用了低拷贝数质粒-建议：使用高拷贝数质粒，低拷贝数质粒应该适当加大处理体积。
*细菌培养时间过短，细菌浓度过低-建议：细菌培养到[A600]吸光值为2-4时，收集菌体。
*细菌细胞裂解不完全-建议：使用建议的菌体处理量，不要过量；涡旋或者吹打，确保菌体充分重悬于溶液P1中，不应该见到未散开的细菌团块；加入裂解液P2后，应该是粘稠和透明的。
*质粒DNA产量使用分光光度计定量不准确-建议：分光光度计定量常常偏高，使用琼脂糖电泳/EB染色定量。
*洗脱效率不高-建议：请阅读操作步骤9和注意事项6。
未提取到质粒DNA *漂洗液WB中忘加无水乙醇-建议：第一次实验时，在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇
*质粒洗脱液含有较多乙醇，琼脂糖电泳/EB染色定量时质粒DNA漂出上样孔-建议：确保已经做了步骤9，将离心吸附柱的残留乙醇去除；或者适当提高上样缓冲液浓度。。
问题评论与建议
质粒DNA
下游酶切不能
切开或者酶切不完全*忘记做步骤9，乙醇抑制了酶切反应-建议：做步骤9，然后空气中晾几分钟，让残留乙醇挥发。
*一些硅基质膜成分一起洗脱下来，抑制了酶切反应-建议：将洗脱的回收DNA溶液13,000rpm再离心1分钟，小心取上清使用。
质粒DNA降解或者无质粒DNA *核酸酶活性太高-建议：确保已经做了步骤6，使用去蛋白液PE 去除核酸酶。
基因组DNA污染*裂解时基因组DNA被剪切打断了-建议：做步骤3时，轻柔颠
倒混匀，不要涡旋或者剧烈震荡。
质粒DNA缺口或
者电泳时超螺旋带
前出现变性质粒带
*步骤3裂解时间过长-建议：裂解时间不要超过5分钟。
产物中含有RNA污染*第一次做实验时，忘记将RNase A 加入P1溶液，RNase A失活或者起始处理量过量-建议：第一次实验前确保将RNase A加入了溶液P1；P1溶液超过3个月的，可加入一些新RNase A；处理量不要过量；菌体重悬于P1溶液后可放置几分钟让RNase A充分作用后再进行下一步。
自己翻译的罗氏tunel检测细胞凋亡试剂盒说明书
罗氏tunel检测细胞凋亡试剂盒说明书 注意：Label溶液含有甲次砷酸盐和二氯化钴，严禁吸入和食入。 反应悬浮物收集于密闭、不易碎、有明确标识的容器中，按有毒废物处理。 需要自己配置的其他物品： 除上表所列试剂外，还需准备以下溶液。下表列出每步所需物品概览：
产品概述： 特异性：TUNEL 反应优先标记凋亡产生的DNA 链断裂，从而辨别凋亡与坏死、以及由抑 制细胞生长的药物或放射线产生的primary DNA 链断裂 实验干扰：假阴性：在某些型式的凋亡细胞中DNA 链断裂可能缺失或不完全。空间位阻， 如细胞外元件可能阻止TdT 到达DNA 断裂处。两种情况均能产生假阴性。 假阳性：在坏死晚期，可能产生大量的DNA 片段 DNA 链断裂也可能在具有高增殖和代谢活动的细胞中出现。两种情况均能产生 假阳性。为确认细胞死亡的凋亡型式，应认真进行每种细胞的形态学检查 凋亡过程中产生的形态学改变尤其特征形式，因此，对于可以结果进行解释时， 细胞形态评估是一项重要的参数 样本：细胞离心涂片和细胞涂片 在chamber slides 上培养的黏附细胞 冰冻或福尔马林固定、石蜡包埋样本 分析时间：2-3小时，除外培养、固定和渗透 检测次数：一个试剂盒50T
步骤和所需材料： 1 流程图： 2 样品准备 黏附细胞、细胞涂片和细胞离心涂片 需准备的其他试剂：Washing buffer：磷酸盐缓冲液（PBS） Blocking buffer封闭溶液：甲醇稀释的3% H2O2 Fixation solution固定溶液：PBS配制的4%多聚甲醛，ph ，新鲜配制 Permeabilisation solution 渗透液：%Triton1）X-100溶于%柠檬酸钠溶液 中，新鲜配制 步骤：下表描述了细胞固定、内源性过氧化物酶封闭和细胞渗透过程。 组织部分 福尔马林-包埋组织 福尔马林包埋组织的预处理：可按4种不同的方式预处理。如用蛋白酶K，不含核酸酶，浓 度、孵育时间和温度应按组织类型优化 注意：只用罗氏应用科学的蛋白酶K，因其经检测不含核酸酶， 核酸酶可导致假阳性。 另外3中替代方法在下表中描述（step 2） 需准备的其他试剂：二甲苯和乙醇（浓度：95%，90%，80%，70%，溶于双蒸水中）
普通道闸说明书.doc1
请您在使用产品前仔细阅读本手册
尊敬的用户： 首先感谢您选择了由本公司为您精心制造的道闸!能为您提供服务深感荣幸！ 为确保本产品的安全使用，充分发挥本产品的优良性能，提高产品的使用寿命，请通读本手册，了解相关的产品信息。 通过阅读本手册，你能更详细的了解到本产品的性能特点及相关技术参数，并通过相关示意图明确产品结构。本手册讲述了安装过程中可能遇到的问题，并作了相关分析，提供了相应的解决方案，方便用户对产品安装调试及进行保养维护。 本资料中部分图片是示意图，仅供参考，若图片与实物不符，请以以实物为准。 本公司全权负责该资料的修订及解释，并保留更改产品及技术参数不另行通知的权利，敬请谅解。
产品性能特点 我公司精心设计并制作的一款新型道闸，使用方便，安全可靠，简洁大方、美观亮丽。广泛用于机关单位、小区、停车场、厂区大门等出入通道口。 一.机芯特性 ●采用最稳定的非等速运行机构，使闸杆慢起动、快运行，慢停止，排除闸杆在运行开、关中带来的抖动。延长产品使用寿命。 ●道闸左右可换向，根据现场需要可随意更换闸杆的起落方向，适用范围更加广泛。 ●采用高负苛承重带座轴承，使机芯部分更加稳固。 ●机械限位可调，使安装调试更加方便快捷。 ●采用高灵敏限位开关，瞬间控制起杆、落杆到位准确。 ●一体化涡轮蜗杆传动减速异步电机，传动平稳，噪音低，结构紧凑，能实现自锁。 ●电机设智能过热保护系统，在频繁的使用下，控制了电机的温升，使电机不易烧坏。 ●手动开闸机构，停电时可通过电机手轮自动起落闸杆，不受限制。 二.控制系统 ●采用数字芯片技术，防砸、地感、IC接口集为一体，稳定性好，误动概率为零，特别设有延时保护功能，具有双重控制功效。 ●采用升降超时与电机过热保护，防止闸机非正常损坏。 ●采用原装进口的大功率继电器，确保道闸可靠运行。 ●采用原装进口的光电隔离保护电路，确保信号完整和抗强干扰。 ●集成高性能百万组学习码的无线遥控接收模块，确保操作的稳定性。 ●采用独有的灭弧处理电路，确保控制板的使用寿命。 ●采用原装进口磁芯的变压器，在户外潮杂环境下的稳定工作。 三.安全特性 ●遇阻反弹（压力电波防砸）：闸杆在下落过程中，若遇到外力阻挡后，便会自动起杆，减免因失误带来的损伤。 ●地感防砸：闸杆在下落过程中，如接收到地感信号后，便会自动起杆，触发期间不落杆，待地感信号恢复后，闸 杆自动下落，确保安全； ●开优先防砸：闸杆在下落过程中，若遇紧急情况，无论运行何种状态，只要接收到开闸信号，闸杆便会执行开闸 动作； ●防砸胶条防砸：闸杆上配带有橡胶胶条，可以减轻因为意外而造成的损失。
Annexin V-FITC PI细胞凋亡检测试剂盒
Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit 一、试剂盒说明 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS ）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS ）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca 2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素FITC 标记，以标记了的Annexin V 作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶（Propidium Iodide, PI ）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V 与PI 匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测（不推荐用于检测组织样本）。 二、试剂盒组份 组份 (20 assays) (50 assays) (100 assays) 储存条件 AnnexinV-FITC 100 μL 250μL 500 μL Propidium Iodide 100 μL 250μL 500 μL Binding Buffer 10.0 mL 25 mL 50 mL 注：1、Annexin V-FITC 组份建议按需分装小份冻存于-20 ℃，避免反复冻融； 2、Propidium Iodide 和Binding Buffer 组份不用时可放置于4℃保存，Propidium Iodide 需要避光。 3、Store at -20℃ for 12 months 三、试剂盒以外自备仪器和试剂 流式细胞仪或荧光显微镜、低速离心机、微量移液器 1.5m L Microtube 、载玻片、盖玻片（荧光显微镜观察需用）、PBS 、不含EDTA 的胰酶消化液 四、使用注意事项 1. 微量试剂取用前请离心集液。 2. Annexin V-FITC ，Propidium Iodide （PI ）避光保存及使用。对于Annexin V-FITC 这个组份，建议您在收到产品之后，分装为小份避光保存于-20℃，即用即取。 3. Propidium Iodide （PI ）有毒，操作时要戴手套。 4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，不推荐用于检测组织样本。 5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而 用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。 6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。 7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每 次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。 五、 操作方法 1. 悬浮细胞离心（2000rpm 离心5min ）收集；贴壁细胞用不含EDTA 的胰酶消化收集（注：胰酶消化时间不 易过长，否则容易引起假阳性）； -20℃避光 4℃避光 4℃
道闸说明书
道闸说明书 目录 产品性能特点 (2) 安全注意事项 (2) 道闸机芯（左右更换） (3) 主要功能及调试法 (5) 主机箱安装 (6) 挡杆安装 (7) 限位调节及停电应急 (7) 常见事故及处理 (8) 道闸装箱清单 (10) 道闸说明书………………………………………………11…
一．产品概述 我司专业生产一体化智能道闸，采用国际领先技术设计制造，实现了道闸运行的自动化、智能化，使用安全、方便、快捷。 二．产品性能特点 1.特殊转动结构，无齿轮、无皮带转动，无需保养，使用稳定，寿命更长久。 2.特殊设计的平衡结构，使闸杆慢起动，快运行，慢停止。 3.排除了闸杆运行带来的抖动。 4.闸杆永久90度运行，排除故障而带来360度运转的意外发生。 5．特殊设计低速铝外壳电机，波箱连体设计，低噪音，散热快。 6.驱动机构设计智能过热保护系统，在频繁使用下，控制马达的温升，使马达不易烧坏。 7.主机采用进口机械限位开关、磁敏限位开关双重保护，避免那些传统的光电开关容易受外界环境的干扰而产生故障，使电机堵死，不工作等。 三．技术参数 1.工作电压：AC220V±10％50HZ/60HZ AC110V±10％50HZ/60HZ 2.工作环境温度：-40℃~85℃ 3.定额公率：150W 4.相对温度：≥90％ 四．安全注意事项 1.道闸在工作时，严禁打开箱盖和箱门以免发生人身意外事故。 2．道闸在出厂前已将箱内布好线，一般情况下用户不得更改，只需要接入220V电源即可工作。 3.提供本机的电源必须加装≥15A漏电断电器。 4.落杆时禁止摆放物品或有人站立、行走。 5.停电时，应先光闭电源后用手把手动摇摆旋至闸杆在垂直位置。 6.产品出厂时，已将挡杆长度与平衡弹簧调到最佳状态，不得随意增加或减少挡杆的长度与重量，以免失去平衡发生危险。如需要更改必须请专业人员操作。 7.机械开关限位和磁敏开关限位在出厂前已调到最佳状态，不得随意调动。
一体机道闸说明书
智能道闸（一体机） 说明书
智能道闸 现代企业管理部门为树立良好的企业形象，对所辖区域进行规范的现代化管理，已广泛地采用电动道闸取代落后的手动道闸，对出入的车辆进行高效管理。在珠江三角洲甚为流行。 本公司集多年专业从事研制停车场、路桥IC卡收费系统的经验及吸收国外同类产品之优点，采用先进的单片计算机控制，从高标准、高可靠、高安全的角度出发，研制出新一代智能化电动道闸。具有手控、遥控、防砸车、车过自动落闸、停电自动解锁、可挂接各类电脑收费系统等功能，适合于花园别墅小区、企事业单位车辆进出管理及车场路桥收费系统等领域使用。 产品介绍 主要功能： 1·手动按钮可作‘升’、‘降’及‘停’操作 2·无线遥控可作‘升’、‘降’、‘停’及对手动按钮的‘加锁’‘解锁’操作 3·停电自动解锁，停电后可手动抬杆 4·具有便于维护与调试的‘自检模式’ 5·可选配车辆传感器，使具有‘车过自动落闸’‘防砸车’或‘冲闸自动抬杆’功能 6·可选配专为道路收费而增设的顶蓬及通道两对红绿灯 7·可选配光隔离长线驱动器，挂接到电脑RS232-C串行通讯接口。具备丰富的底层控制及状态返回指令，使收费系统微机可对道闸作最完全的控制。 8·可根据客户需要增加其它特殊功能 电气特性： 1·采用具备软件陷井与硬件看门狗的单片机控制，永不死机 2·采用磁感应霍尔器件进行行程控制，非接触工作，永不磨损偏移 3·采用光电耦合、无触点、过零导通技术，主控板无火花无干扰高可靠工作 4·采用升降超时与电机过热保护，防止道闸非正常损坏 5·宽范围的单相电源输入（160V-260V）适于恶劣的野外道路收费环境 6·光隔离串行通讯接口，隔离电压大于1500V，确保上位微机安全，实现抗汽车电火花等强电磁干扰的高可靠通讯 机械特性：
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明书
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明书 货号：T2190 规格：20次 保存：-20oC保存，荧光标记液需避光保存。 产品简介： 细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。 一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。 TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。产品内容： 1.TdT酶100μl 2.荧光标记液900μl 3.TdT酶稀释液(选用)500μl
道闸使用说明手册
精心整理 尊敬的用户： 您好! 非常感谢您选择了我公司为您精心制造的道闸,使我们有机会为你提供服务。为充分发挥本产品的优良性能，请您在使用之前详细阅读本手册。 本手册的主要内容，包括该产品的主要性能优势，产品规格及其结构参数，控制部分的接口说明，现场安装调试说明，以及产品的配件清单等，通阅读本手册，可让您更加清楚的了解本产品的构造特点，使用要求及其注意事项，以确保道闸的安全使用，延长使用寿命。同时，本手册还特别的详细的介绍了，产品在安装使用过程中可能出现的问题，详细分析了出现问题的原因，并提供了相应的解决方案，解除您在使用本产品的过程中一些困扰。除此之外，我们还在手册中为您详细介 是 一. 减轻电 ●70W 二.. ●采用原装进口的光电隔离保护电路，确保信号完整和抗强干扰。 ●集成高性能百万组学习码的无线遥控接收模块，确保操作的稳定性。 ●采用独有的灭弧处理电路，确保控制板的使用寿命。 ●采用原装进口磁芯的变压器，在户外潮杂环境下的稳定工作。 ●提供额外12V/100mA电源，便于连接不同型号的限位检测装置。 三.安全特性 ●遇阻反弹（压力电波防砸）：闸杆在下落过程中，若遇到外力阻挡后，便会自动起杆，减免因失误带来的损伤； ●地感防砸：闸杆在下落过程中，如接收到地感信号后，便会自动起杆，触发期间不落杆，待地感信号恢复后，闸杆自动下落，确保安全； ●开优先防砸：闸杆在下落过程中，若遇紧急情况，无论是在开闸或关闸运行状态，只要接收到开
闸信号，闸杆便会执行开闸动作； ●防砸胶条防砸：闸杆上配带有橡胶胶条，可以减轻因为意外而造成的损失。 产品规格及其结构参数 一.规格参数
凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒
凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(通用)（BIOTIN标记POD法,适用于细胞、组织样本） 使用说明书 一、TUNEL制品说明 凯基TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA 的断裂情况，其原理是生物素（biotin）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂的DNA的3‘－OH末端，并可与连接了的辣根过氧化酶的链霉亲和素（Streptavidin-HRP）特异结合，在辣根过氧化酶底物二氨基联苯胺（DAB）的存在下，产生很强的颜色反应（呈深棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在普通显微镜下即可观察和计数凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH 形成，很少能够被染色。 本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）的凋亡原位检测。 本试剂盒特点 ●操作简便：使用Ready-to-Use型试剂，并配有Proteinase K 和DAB。 ●高灵敏度：可以单一检出初期的凋亡细胞。 ●高特异性：能特异性染色凋亡细胞。 ●快速操作：整体操作约需3小时。 ●用途广泛：可应用于组织切片、细胞样本等。 ●方便观察：使用光学显微镜观察实验结果。 ●高正确性：有阳性对照片的制备方法，可以确认试剂盒的有效性
使用注意事项 1．使用前请认真阅读本说明书，提前准备好相关试剂。 2．因本试剂盒中组分均为微量，使用前请离心集液。 3．为避免试验误差、降低试剂的损耗，建议使用精密度高的进口微量移液枪及枪头。 4． TdT 酶反应液最好在使用前根椐样本数量集中配制，再分别滴加于各样本片上，避免每个样本单独配制而产生的试剂损耗。 5. 为防止样本脱落，请使用硅烷（Silane）处理的载玻片或采用多聚赖氨酸铺片。 6. 固定好的样本可以在-20℃的70%乙醇中放置30分钟或至过夜，以改善细胞的渗透性。 7. 使用PBS清洗细胞样本时，不要直接加在细胞样本上，以防止细胞样本的脱落。 8. 进行PBS清洗时，以5分钟清洗3次为标准。 9. DAB为固体粉末，使用前加入PBS配制成20×DAB（10 mg/ml）后，按说明书显色使用。 二、TUNEL试剂盒组分 试剂盒以外自备仪器和试剂
道闸使用说明书
尊敬的用户： 您好! 非常感谢您选择了我公司为您精心制造的道闸,使我们有机会为你提供服务。为充分发挥本产品的优良性能，请您在使用之前详细阅读本手册。 本手册的主要内容，包括该产品的主要性能优势，产品规格及其结构参数，控制部分的接口说明，现场安装调试说明，以及产品的配件清单等，通阅读本手册，可让您更加清楚的了解本产品的构造特点，使用要求及其注意事项，以确保道闸的安全使用，延长使用寿命。同时，本手册还特别的详细的介绍了，产品在安装使用过程中可能出现的问题，详细分析了出现问题的原因，并提供了相应的解决方案，解除您在使用本产品的过程中一些困扰。除此之外，我们还在手册中为您详细介绍了我公司其他系列产品的规格和结构参数，为您的使用提供一个更加方便的参考选择机会。 与此同时，我们也希望您在使用我们产品的过程中，能够为我们提出更好的建议，我们 将会为您提供专业化、全方位的服务。 最后，再次感谢您使用本公司为您精心制造的产品，并希望我们能有更多的机会为您提供服务！ 产品性能优势 道闸是我公司经过精心设计并制作的一款能够适应现代“安全、快捷、高效、高质”管理的新一代的数字道闸；其高标准、高质量、高集成化的特性，时尚潮流的外观形象，及其独特地颜色视觉魅力，给人一种尊贵高雅、爽心悦目的感觉，使得与其搭配起来更加具有相得益彰的效果，是停车场，酒店，学校，花园别墅小区，企事业单位等场合的配套首选。 一.机械特性 ●采用一体化机芯，全模具量化生产制作，大大提高产品稳定性，确保道闸的运行精度； ●采用无固定方向设计，使得机芯可左右调转，不分左右向，根据需要可随意更换闸杆的 起落方向，适用范围更加广泛； ●采用精密的四连杆机构，使闸杆做缓起渐停无冲击的快速平稳动作，有效减轻闸杆抖动， 减轻电机负荷，延长道闸的使用寿命； ●70W一体化涡轮蜗杆传动减速异步电机，传动平稳，噪音低，结构紧凑，能实现自锁， 堵转时无冲击，保护控制器，延长控制器使用寿命； ●手动锁闸机构，停电时可通过电机手轮自动起落闸杆，不受限制； 二..电气特性 ●系统集成度高，功能强大； ●采用升降超时与电机过热保护，防止闸机非正常损坏； ●采用霍尔感应装置进行限位感应控制，非接触工作，永不磨损偏移； ●采用原装进口的大功率继电器，确保道闸可靠运行。 ●采用原装进口的光电隔离保护电路，确保信号完整和抗强干扰。 ●集成高性能百万组学习码的无线遥控接收模块，确保操作的稳定性。 ●采用独有的灭弧处理电路，确保控制板的使用寿命。 ●采用原装进口磁芯的变压器，在户外潮杂环境下的稳定工作。 ●提供额外12V/100mA电源，便于连接不同型号的限位检测装置。 三.安全特性 ●遇阻反弹（压力电波防砸）：闸杆在下落过程中，若遇到外力阻挡后，便会自动起杆， 减免因失误带来的损伤；
invitrogen AnnexinV PI双染试剂盒说明书中文
流式细胞仪 1，使用特定的方法诱导细胞凋亡，设置一个没有处理的control组 2，在一定孵育期后收获细胞，用冰冷的PBS清洗 3，准备1X的annexin结合液，例如，对于10个实验来说，加1ml 5X annexin 结合液（组分C）到4ml 去离子水中 4，准备一个100ug/ml的PI工作液，例如，通过稀释5ul 1mg/ml的PI储存液（组分B）到45ul 1X annexin 结合液中。没有使用的这部分工作液用于以后的实验。 5，再次离心2步骤中洗过的细胞，弃上清用1X annexin 结合液重悬。调整细胞密度，用1X的annexin 结合液稀释到大约1x106/ml，为每个实验准备100ul 足够的体积。 6，加5ul Alexa Fluor 488 annexin V(组分A)和1ul 100ug/ml PI工作液（4步骤中准备的）到每100ul的细胞悬液中。 7，室温孵育细胞15min. 显微镜观察 1，使用特定的方法诱导细胞凋亡，设置一个没有处理的control组 2，在一定孵育期后收获细胞，用冰冷的PBS清洗 3，准备1X的annexin结合液，例如，配置1ml，加200ul 5X annexin 结合液（组分C）到800ul去离子水中 4，准备一个100ug/ml的PI工作液，例如，通过稀释5ul 1mg/ml的PI储存液（组分B）到45ul 1X annexin 结合液中。没有使用的这部分工作液用于以后的实验。 5，再次离心2步骤中洗过的细胞，弃上清用1X annexin 结合液重悬。调整细胞密度，用1X的annexin 结合液稀释到大约1x106/ml，为每个实验准备足够的体积。 6，加5-25ul的annexin V缀合物（组分A）和1-2ul(100ug/ml)PI工作液到100ul 的细胞悬液中。高浓度的annexinV缀合物会产生较好的结果；最佳染色浓度需要凭借经验 7，室温孵育细胞15min 8，1X annexin 结合液清洗细胞 9，用一个合适方法使细胞固定在载玻片上，用一个适当的滤镜观察荧光效果。 细胞应该被分成3组：活细胞，凋亡细胞和死细胞。活细胞在细胞膜上有微弱的annexin V染色，而凋亡细胞在膜上有一个显著亮度，死亡细胞在膜上有annexin染色和核上的PI染色。
碧云天 细胞凋亡-一步法TUNEL检测试剂盒
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒 产品简介： 碧云天生产的一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。 细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(T dT-mediated d U TP N ick-E nd L abeling)法检测细胞凋亡的原理。 注：FITC是fluorescein isothiocyanate的缩写，实际上大多数情况下所谓的FITC即为fluorescein。 本试剂盒有如下优点。(1) 高灵敏度：可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。(2) 特异性：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。(3) 快速：仅需约1-2个小时即可完成。(4) 方便：只需一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。(5) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。 TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。 极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。 本试剂盒足够检测20个样品。 保存条件： -20℃保存，荧光标记液需避光保存。 注意事项： 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS，用于封片的抗荧光淬灭封片液(P0126)，用于固定的4%多聚甲醛或向碧云天订购免疫染色固定液(P0098)，同时需自备含0.1％ Triton X-100的PBS或向碧云天订购免疫染色洗涤液(P0106)。 如果用于石蜡切片的检测，需自备蛋白酶K，二甲苯。蛋白酶K(ST533)可以向碧云天订购。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1.对于贴壁细胞或细胞涂片： a.PBS或HBSS洗涤一次。 b.如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。 c.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。 d.用PBS或HBSS洗涤一次。 e.加入含0.1％ Triton X-100的PBS或碧云天生产的免疫染色洗涤液(P0106)，冰浴孵育2分钟。 f.转步骤5。 2.对于悬浮细胞或细胞悬液： a.收集细胞(不超过200万细胞)，PBS或HBSS洗涤一次。 b.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。为防止细胞聚集成团，宜在侧摆摇床或 水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。 c.用PBS或HBSS洗涤一次。
智能道闸方案说明书
WQ智能路闸 说明书 深圳安厦科技有限公司
智能路闸 现代企业管理部门为树立良好的企业形象，对所辖小区进行规范的现代化管理，已广泛地采用电动路闸取代落后的手动路闸，对出入车辆的进行高效管制。在珠江三角洲甚为流行。 本公司集多年专业从事研制车场路桥IC卡收费系统的经验及国外同类产品之优点，采用先进的单片计算机控制，从高标准、高可靠、高安全的角度出发，研制出新一代智能化电动路闸。具有手控、遥控、防砸车自动落闸、停电自动解锁、可挂接各类电脑收费系统等功能，适合于花园别墅小区、企事业单位车辆进出管理及车场路桥收费系统等领域使用。 产品介绍 主要功能： 1·手动按钮可作‘升’、‘降’及‘停’操作 2·无线遥控可作‘升’、‘降’、‘停’及对手动按钮的‘加锁’‘解锁’操作 3·停电自动解锁，停电后可手动抬杆 4·具有便于维护与调试的‘自检模式’ 5·可选配车辆传感器，使具有‘车过自动落闸’‘防砸车’或‘冲闸自动抬杆’功能6·可选配专为道路收费而增设的顶蓬及通道两对红绿灯 7·可选配光隔离长线驱动器，挂接到电脑RS232-C串行通讯接口。具备丰富的底层控制及状态返回指令，使收费系统微机可对电闸作最完全的控制。 8·可根据客户需要增加其它特殊功能 电气特性： 1·采用具备软件陷井与硬件看门狗的单片机控制，永不死机 2·采用磁感应霍尔器件进行行程控制，非接触工作，永不磨损偏移 3·采用光电耦合、无触点、过零导通技术，主控板无火花无干扰高可靠工作 4·采用升降超时与电机过热保护，防止电闸非正常损坏 5·宽范围的单相电源输入（160V-260V）适于恶劣的野外道路收费环境 6·光隔离串行通讯接口，隔离电压大于1500V，确保上位微机安全，实现抗汽车电火花等强电磁干扰的高可靠通讯 机械特性： 1·采用精密的四连杆机构使闸杆作缓启渐停无冲击的的快速平稳动作，并使闸杆只能在限定的九十度范围内运行，不出意外。 2·采用精确的全自动跟踪平衡机构使任意位置静态力矩为零，从而最大限度地减小驱动功率和延长机体寿命 3·箱体采用先进的防水结构及抗老化的室外型喷塑处理，坚固耐用，永不褪色。
细胞凋亡试剂盒(FITC)
凯基Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒 （Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit） Cat number：KGA For Research Use Only Store at4℃for one year Expire date： 一、试剂盒说明 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素（EGFP、FITC）标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测（不推荐用于检测组织样本）。 二、试剂盒组份 组份Cat: KGA105 (10 assays) Cat: KGA106 (20 assays) Cat: KGA107 (50 assays) Cat: KGA108 (100 assays) 储存条件 AnnexinV-FITC 50μL 100μL 250μL 500μL 4℃避光 Propidium Iodide 50μL 100μL 250μL 500μL 4℃避光 Binding Buffer 5 mL 10.0 mL 25 mL 50 mL 4℃ 三、试剂盒以外自备仪器和试剂 流式细胞仪或荧光显微镜、低速离心机、微量移液器 1.5m L Microtube、载玻片、盖玻片（荧光显微镜观察需用）、PBS、不含EDTA的胰酶消化液 四、使用注意事项 1．微量试剂取用前请离心集液。 2．Annexin V-FITC，Propidium Iodide （PI）避光保存及使用。 3．Propidium Iodide （PI）有毒，操作时要戴手套。 4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。 5．推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS中，防止进一步的损伤。 6．细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。 7．因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。 五、操作方法 1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用不含EDTA的胰酶消化收集（注：胰酶消化时间不易过长，否则容易引起假阳性）； 2．用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(PI法)
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(PI法) 产品简介： Leagene细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色(PI staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种可以嵌合到双链DNA和RNA的碱基对中与直接和的荧光染料，无碱基特异性。碘化丙啶与双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被Propidium Iodide染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。 碘化丙啶染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片断在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。 细胞凋亡时，流式细胞检测可呈现亚二倍体核型的特征，根据光散射的特点，PI染色可以区分细胞凋亡和细胞坏死的细胞峰型。细胞凋亡时，出现凋亡细胞皱缩、染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的前向光散射低于正常。在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期，前向和侧向光散射的信号均降低。细胞坏死时细胞多表现为细胞肿胀，因此前向光散射高于正常，对侧向光散射高于正常。 Leagene Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit经常用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测，亦可用于区分细胞凋亡和细胞坏死。该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1～1×106之间。 主要成分：
细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒
细胞凋亡-Hoechst 染色试剂盒 简介： 细胞凋亡-Hoechst 染色试剂盒(Hoechst Staining Kit)是一种采用经典的Hoechst33258进行细胞凋亡检测的快速简便的试剂盒。当细胞发生凋亡时，染色质会固缩，Hoechst33258染色后在荧光显微镜下观察，正常细胞的细胞核呈正常的蓝色，而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染，颜色有些发白。Hoechst Staining Kit 经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1～1×106之间。 组成： 操作步骤(仅供参考)： (一)贴壁细胞 1、取洁净盖玻片在70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用无菌的PBS 或生理盐水洗涤3次，再用细胞培养液洗涤1次。 2、加入干预条件使细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入Hoechst 固定液0.5ml 。 3、去除固定液，用PBS 或生理盐水洗，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 4、加入Hoechst 33258染色液0.5ml 孵育。也宜用摇床，或手动晃动数次。 5、弃染色液，用PBS 或生理盐水洗，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 6、滴一滴抗荧封片剂于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片剂，尽量避免气泡。 7、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长350nm 左右，发射波长460nm 左右。 (二)悬浮细胞 1、离心收集细胞样品于1.5ml 离心管内并弃液，加入Hoechst 固定液0.5ml ，缓缓悬起细胞固定。 2、低速离心去除固定液，用PBS 或生理盐水洗。洗涤时手动晃动数次。 3、低速离心离心后吸去大部分液体保留约50μl 液体，再缓缓悬起细胞，滴加至载玻片上， 编号 名称 DA0032 100T Storage 试剂(A): Hoechst 固定液 50ml RT 试剂(B): Hoechst 染色液 50ml -20℃ 避光 试剂(C): 荧光封片剂 5ml 4℃ 避光 使用说明书 1份
Annexin V凋亡试剂盒操作步骤
请在使用前仔细阅读说明书 Annexin V,FITC 凋亡检测试剂盒(100次) 产品名称货号规格储存条件运输条件 Annexin V,FITC结合物AD01-10 100次×1 0-5℃，避光(切勿冻存) 室温 PI Solution AD02-05 50次×2 0-5℃，避光(切勿冻存) 室温 10×Annexin V Binding Buffer AD03-05 50次×2 0-5℃，避光(切勿冻存) 室温 *注：规格中的每“次”是以细胞浓度1×106 cells/ml计算 产品描述 细胞凋亡是指为维持有机体内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。正常情况下任何细胞在形成过程中发生的异常都会通过凋亡消除。例如体内的癌细胞增长为肿瘤的过程会受细胞凋亡的引导而被抑制。然而在抑癌基因p53出现问题时，凋亡就不会诱导发生，从而导致癌细胞的不断增长。细胞凋亡可以通过细胞形态的变化或生物化学的变化来检测。目前常用的指标有caspase活性变化、DNA碎片、磷脂酰丝氨酸的外翻等。 Annexin V染色的细胞可以用于检测细胞凋亡早期的细胞膜变化。在细胞凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜特异性结合，因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。用绿色荧光FITC标记的Annexin V 通过流式细胞仪或荧光显微镜可以检测到细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料，PI只能透过凋亡晚期和死细胞的细胞膜，因此Annexin V和PI结合使用，可以区分凋亡早晚期的细胞及死细胞。 所需的设备和材料 -合适量程的移液枪-样品和诱导剂 -细胞培养用6，12，24，96孔板-PBS、去离子水 -流式细胞仪或荧光显微镜。*最大激发/发射波长Annexin V,FITC:494 nm/518 nm; PI:535 nm/617 nm 溶液制备 1×Annexin V Binding solution -将10×Annexin V Binding Buffer用蒸馏水稀释10倍。 稳定性 试剂盒在0-5°下可以保存6个月，请避光保存Annexin V,FITC结合物。 操作流程 Ⅰ.悬浮细胞的操作流程 （Ⅰ）诱导凋亡的操作步骤 1.制备细胞（Jurkat cell）悬液（1×106 cells/ml） 2.加入终浓度为1 μg/ml的凋亡诱导剂（Staurosuporine） 3.在37℃下培养3.5 h。* Staurosuporine用于诱导Jurkat cell凋亡。最佳诱导条件请根据实验的细胞类型与诱导剂调整。（Ⅱ）Annexin V染色操作步骤 1.将细胞悬液转移到离心管中，1,000 rpm离心3 min，取出上清液。 2.加入PBS，1,000 rpm离心3 min，去除上清液。再重复本步操作一次。 3.用之前准备好的1×Annexin V Binding Solution制备细胞终浓度为1×106 cells/ml的细胞悬液。* 细胞悬液体积根据实验目的自行调整，一般推荐不少于500 μl细胞悬液。 4.取100 μl步骤3中制备的细胞悬液，加入到一个新的tube中。 5.向细胞悬液中加入5 μl Annexin V,FITC结合物，再加入5 μl PI Solution。 6.室温下避光培养15 min。 7.加入400 μl 1×Annexin V Binding Solution，请在在1小时内检测。 Ⅱ. 贴壁细胞的操作流程 （Ⅰ）诱导凋亡的操作步骤 1.制备细胞（Caco-2）悬液（1×106 cells/ml） 将细胞悬液接种到培养皿或者培养板中。 2.在5% CO2培养箱中37℃预培养。 3.加入终浓度为25 μmol/ml的凋亡诱导剂（Cisplatin） 4.37℃培养4 days。*Cisplatin用于诱导Caco-2 cell凋亡。最佳的诱导条件请根据实验的细胞类型与诱导剂调整。 （Ⅱ）Annexin V染色操作步骤 1.弃去培养皿或培养板中的上清液。 2.用PBS洗细胞2次。 3.用胰蛋白酶消化细胞。 4.用适量的培养基或PBS将细胞悬液转移至离心管中。 5.1,000 rpm离心3 min，弃上清。 6.加入PBS后1,000 rpm离心3 min，弃上清。重复本步操作一遍。 7.加入预先配好的1×Annexin V Binding Solution，制成终浓度为1×106 cells/ml的细胞悬液。* 细胞悬液体积根据实验目的自行调整，一般推荐不少于500 μl细胞悬液。 8.取100 μl步骤7中的细胞悬液，加入到新的tube中。 9.向细胞悬液中加入5 μl Annexin V,FITC结合物，再加入5 μl的PI Solution。 10.室温下避光培养15 min。 11.加入400 μl 1×Annexin V Binding Solution，请在1小时内检测。 Ⅲ. 设定的对照 1.未染色细胞。 2. Annexin V-FITC染色细胞（没有PI）。 3.PI染色细胞（没有Annexin V-FITC）。
捷顺道闸使用说明书
捷顺道 捷顺道闸使用说明书闸 使用说明书 深圳市捷顺科技实业股份有限公司SHENZHEN JIESHUN SCIENCE AND TECHNOLOGY INDUSTRY CO.,LTD.
尊敬的用户： 非常感谢您选购深圳市捷顺科技实业股份有限公司的捷威道闸，该道闸采用先进的直流伺服技术和全电路无触点控制技术，使整机运行更加平稳、可靠。而且采用了数字化电路自学习检测功能，有 效地杜绝砸车现象，使系统运行更安全可靠。并配备了标准的外接电气接口，可配置车辆检测器以及 上位机，实现系统的自动控制。可广泛适用于道路管理、道路收费及停车场管理等系统中。 您所购买的捷威道闸，是按照ISO9001：2000 质量管理体系的要求研制、生产的，是经严格、认真检验合格的产品。 本系列产品是技术性较强之设备，为了保证其安全、可靠的运行，以及确保使用安全，在本手册中，对在系统运行过程中，应注意的事项进行了特别的注明，请您在使用本设备之前，首先仔细阅读本说明书，以免由于操作不当而损害您的权益。
版权声明： 捷顺和是深圳市捷顺科技实业股份有限公司的注册商标。 本手册版权归深圳市捷顺科技实业股份有限公司所有，未经书面许可，任何单位和个人不得复制、传播其中的内容，违者要对造成的损失承担责任。 本公司保留对该软件进行升级、完善的权利，所以我们不能保证本手册与您所购买的软件完全一致，但我们会定期对本手册进行审查并修订。本手册如有任何修订，恕不另行通知。 客户服务和技术支持承诺 用户自购买产品之日起，由深圳捷顺科技实业股份有限公司提供一年的免费保修和免费技术支持，并实行终身维护，超过免费保修期只收维护成本费。但当用户对本系列产品有下列行为时，本承诺将自动终止。 (1)用户自行改装、拆卸以及其他不能保证本产品软硬件完整性的操作时。 (2)用户未按照本说明书的内容进行正确的使用而导致产品全部或部分损坏的。 安全警告 (1)本系列产品是技术性较强之设备，使用时系统若发生故障，应及时通知我公司售后服务部门或授权服务机构进行处理，切不可随意拆卸，以免损坏内部结构或操作不当而损害您的权益。 (2)本系列产品在使用时带有危险电压，应定期检查系统保护地接线，以免造成不必要的人身伤害。 (3)本系列产品在运行时，开关闸速度较快，在闸机进行开、关操作的过程中，严禁行人及车辆通过闸杆的下面，以防造成不必要的人身伤害。 (4)请参照说明正确使用设备的接口电特性，以免损坏设备和用户的设备。 (5)设备无防爆设计，请勿使用设备于含有易燃易爆环境。如需要请选购本公司其它型号的产品。