浅谈全自动生化分析仪试剂交叉污染
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3.搅拌棒携带污染,对同一份血清标本重复 测定GGT或ALT或AST 20次以上,结果重复 性较差且有走高趋势。
4.清洗系统携带污染:①在样本测定过程中, 加做室内质控,部分项目测定异常或者失 控,②在样本测定过程中以蒸馏水为样本, 多次测定LDH、P、Mg、TBA,结果重复性 不好。
5.比色杯污染:在每日早晨刚开机时对所有 项目做试剂空白测定,试剂空白吸光度或 者试剂空白吸光度变化率结果变高,TBA (循环酶速率法)经常出现负值,蛋白项 目、血脂项目结果偏高,胆红素(钡酸盐法) 易出现异常值。
解决办法
①定期进行仪器的维护保养。 ②按要求及时更换零部件。 ③定期对仪器进行校准。
④全自动生化分析标本和试剂用量少,残存 少量即会影响测试结果,每天应用无水 乙醇擦洗并定期更换干燥棒,保证比色 杯清冼后不留残液,避免比色杯的交叉 污染。
⑤可使用生化分析仪的试剂针、比色杯清 洗程序,对试剂针、比色杯进行2次或多
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2.合理安排检测项目的顺序,在有交叉污 染的检测项目间插入一个以上的非污染 项目,最好的方法是将被干扰项目放置 在干扰项目之前,以消除干扰的发生。
3.每个项目检测所需的样本量和试剂量不 要随意同比例降低,以保证反应液有较 大的缓冲能力。
4.做好仪器日常的维护保养,合理设计仪 器清洗次数,密切观察仪器运行情况, 遇见异常情况要及时处理,以保证检验 结果的可靠性。
(3)以甘油作为酶保护剂的试剂,会对TG的 测定带来干扰(4)钙(MTB法)试剂对K+有 负干扰;5)CHOL试剂中含有胆固醇酯酶, 可水解胆固醇酯形成游离胆固醇,而引起 对游离胆固醇测定的干抗。
3.反应进程相同:上一个试剂所引导的反应对 下一个项目的反应进程带来间接的干扰,下一 项目所测定的是前后两个项目反应的综合作 用结果。如:(1)当上一反应产物为H202时,则 对以Trinder反应产生颜色的测定结果引起干 扰。如UA对CHOL结果的影响;CHOL对肌酐 (CREA)(酶法)测定结果的影响;GLU(氧 化酶法)对CREA(酶法)测定结果的影响
胆碱酯酶(ChE)、总胆固醇(CHOL)、GLU(GOD 法),尿酸(UA)(尿酸酶法)、乳酸脱氢酶 (LD)(IFCC法)、羟丁酸脱氢(HBDH)(DGKC法)等 试剂中可能含有磷酸缓冲液;CHOL、TG试剂及 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂中可能含 有胆酸钠;丙氨酸氨基转移酶(ALT)(IFCC
次清冼。用碱性清洗液或酸性清洗液冲 洗试剂针可以有效地避免携带污染。
⑥合理设置实验项目的排列顺序,避免试 剂交叉污染。ALT、AST、TBIL、 DBIL,TBA、ALP、GGT、CHE、TP、A1b、 Urea、UA,Cr、CK、cK-MB、HBDH、LD、 TG 、TC、HDL-C、LDL-C、 APOAI、APOB、 Amy、CO2、G1u、P、Fe、Ca、Mg。(仅供 参考)
⑦每个实验项目所需的样本量、试剂量不 要随意同比例降低,以保证反应液保持较 大的缓冲能力。
从试剂角度分析交叉污染的原因主要
以下几种:
1.试剂成分的直接污染:上一个测定试剂中 含有下一个测试所要测定的物质,直接干 扰下一测试的测定结果。如:淀粉酶(AMY) 试剂中含有较高浓度的钙(Ca2+);碱性磷酸 酶(ALP)(IFCC法)、肌酸激酶(CK)(NAC法)、 肌酸激酶同工酶(CKMB)(NAC法)、二氧化 碳(CO2)(PEPC法)、AMY(EPS法)、三酰甘 油(TG)等试剂中含有镁(Mg2+);葡萄糖 (GLU)(氧化酶法)、总蛋白(TP)与酸性磷 酸酶(ACP)试剂中含有较高浓度的钾(K+),
浅谈全自动生化分析仪检测时 常见交叉污染及解决办法
主讲:朱正宝
在生化试剂的应用过程中我们往往会
碰到交叉污染的问题,从而导致结果的 偏离,影响临床结果的报告和临床病情 的诊断。所以正确认识交叉污染问题及 有效排除显得尤为重要。
交叉污染简单分析是生化仪使用过程中永 恒的话题:
从仪器角度分析交叉污染的来源主要 包括已下几方面
(2)CK(NAC法),CK+MB(NAC法)试剂中含 有GLU成分,其分析方法的原理中包 含GLU的己糖激酶(HK)反应过程,因 此可能对GLU的测定带来干扰,尤其 对GLU的己糖激酶法测定可能带来严 重干扰。
4.影响反应条件:影响下一个项目的反应条 件如PH等,从而改变反应速率,如 (1)DBiL(钒酸盐氧化法)试剂中含有表面 活性剂的酒石酸盐缓冲液会影响ALT活 性,对测定结果有负干扰。
法)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)(IFCC法)试
剂中含有高活性的LD;以上试剂的交叉污染就 分别会对Ca2+、Mg2+、K+(紫外酶法)、磷(P)、 总胆汁酸(TBA)及LD的测定结果造成干扰。
2.试剂成分参与反应:上一个试剂中含有的 某种试剂成分与下一反应所要测定的底物 有作用,因而干扰下一反应的测定结果。 如:(1)Mg2+测定试剂的络合剂亦能与铁(Fe) 结合,影响铁与铁络合剂的结合;(2)直接 胆红素(DBiL)(重氮法)试剂含有EDTA,Mg2+ 试剂中含有EGTA.均能与Ca2+结合,从而影 响Ca2+的测定
1.样本针携带污染。 2.试剂针携带污染。 3.揽拌棒携带污染。 4.清洗系统携带污染。 5.比色杯污染。
主要原因:
1.样品针,试剂针弯曲,特富龙涂层剥落, 针堵塞,冲洗水冲洗不充分。
2.搅拌棒特富龙涂层剥落,搅拌棒表面有 顽固性污渍,冲洗水冲洗不完全。
3.比色杯划痕较多,冲洗水冲洗不完全。 4.干燥棒携带污染。
(2)CREA(苦味酸速率法)反应条件为碱性, 果糖胺(动力学法)反应冬件为酸性,受到
到污染后反应速率会减慢。 (3)CREA(酶法)试剂中含有抗坏血酸氧
化酶,影响了氧化还原反应的进程,会 对TBA(酶循环法)测定结果有影响。
解决方案
1.要求检验人员对仪器工作流程,试剂组 成、测定原理要求一个准确的了解,以 便对试剂交叉污染的各种可能性加以考 虑,合理设计程序、更换试剂时,应仔 细研究说明书,发现和避免可能存在的 试剂交叉污染。
那如何鉴别交叉污染的类型从而及时 排除?
1.样品针携带污染:同一血清分为五份,分 别测定蛋白项目,重复性差。
2.试剂针携带污染:①部分试剂极易变质, 可通过肉眼观察发现 ,②以蒸馏水为样本, 重复测定以下项目组合10次以 上,AST,ALT(前)+LDH(后),TCHO(前)+TBA( 后),后者测定结果偏高但重复性较好。