生化分析常见交叉污染探讨与对策分解
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1. 样本针携带污染： 目前大多数全自动生化分析仪采用循环冲洗 式样本针吸取样本，当样本针在清洗不完全，或黏附力增加时，样本 残留可能会对下一相邻样本的检测结果造成影响。
原因：样品针尖弯曲，特富龙涂层剥落，针堵塞，冲洗水冲洗不充分
携带污染率主要是体现样品之间的污染程度
样本针携带污染率试验（一）
同一检测项目浓度相差较大的a标本（高浓度），b标本（低浓度）。 检测顺序：a 1 , a 2 , b 1 ,b 2 , b3 计算： 评价： 以q小于10%为判断标准。局限性：结果与选择的标本浓度有关系 例1：选择高浓度的ALT样本浓度值为2020 U/L，低浓度ALT 样本第一次检测 结果40 U/L，第三次检测结果20 U/L。 通过计算携带污染率q = （40 – 20）/ 2000 * 100% = 1%。 例2：选择高浓度的Cl 样本浓度值为140 mmol/L，低浓度Cl 样本第一次检测 结果为86 mmol/L，第三次检测结果为80 mmol/L。 通过计算携带污染率q = （86 – 80）/ 60 * 100% = 10%。 上例中，例1的携带污染率尽管只有 1%，由于结果正好在医学决定水平附近 因此对临床判断有较大影响。例2的携带污 染率尽管达到了10%，但是对于临 床判断不会产生大的影响。因此，使用该方法评价样本针携带污染需考虑样 本的实际浓度。
样本针携带污染率试验（二）
Hale Waihona Puke Baidu
测试顺序：3L 2H 1L 2H 4L 2H 1L 2H 1L 2H 1L （注上述顺序前的数字代表测试数 量，如 3L 代表连续测试 3 个低值样 本） 定义：L – L 值为紧跟在低值标本 后低值标本的结果。 H – L 值为紧跟在高值标本后低值 样本的结果 携带污染指标= H – L结果的平均值 – L – L结果的平均值 判断标准： 当携带污染指标小于 3SD SD是 ( L – L ) 结果的SD值。
生化分析常见交叉污染探讨与对策
徐国超
一
如何理解交叉污染
测试项目A
在 A 项目测定中所使用的试 剂、样本、反应产物、清洗
试剂、样本等残留
剂等对 B 项目的测定产生了 不良影响的现象。
测试项目B
A 项目与 B 项目不一定是相
邻项目。
引发交叉污染的原因
生化仪的发展变化
生化仪状态不良,使用不当
①多项目,多样本处理 ②处理能力的提高(高速化)
试剂针携带污染
全自动生化分析仪一般采用双试剂针，即所有项目的一 试剂都共用试剂针 R1 ，所有项目的二试剂都共用试剂 针R2。试剂针R1或R2在每吸取一次试剂后都会进行一 次清洗，之后会 立即吸取下一个项目的试剂。 当自身清洗能力下降，试剂针在吸取试剂时会将部分残 留的前项目试剂成分带入到后项 目反应杯中，对后项 目的检测结果造成影响。 从各个项目设置的参数可知，试剂体积量远大于样本体 积量。因此试剂针携带污染影响程度会高于样本针携带 污染。
试剂针携带污染确认实验
由携带污染初实验筛选出怀疑有污染的项目组合， 假设 (A→B) 同(D→E) 即A项目对B项目（A项目做好后紧接着做B项目），D项目对E项目（D项目做好后紧接着做 E项目）怀疑有污染。 由于初实验的项目交叉结果只是一次测试的结果， 可能有偶然因素，还必须进行确认实验。 以(A→B)为例，(D→E)的情况相同
表3中显示了试剂之间携带污染初实验 后的结果: a 将表格内测试顺序号代表的位置处输 入该项目对应的测试结果， b 对每个测试顺序号下面对应的测试结 果和该项目单独5次重复结果的均值相 比 比值以百分比形式表示，通过考察百 分比的大小来初步判断携带污染的可 能性。 目前的判断标准以正负百分之五作为 判断标准，超过范围时怀疑有携带污 染。
携带污染实验方案
目前大部分实验室开展的生化检测项目至少都有 20项以上，评价全项 目之间的携带污染会非常耗时，试剂成本消耗量大。且不同仪器的动 作原理不完全相同，设计一个较为简单，合理的实验方法是需要重点 考虑的 内容。 试剂针携带污染实验方案原理：通过设置特定的标本检测顺序，每个 样本只做一个项目的检测，可以控制不同项目的先后吸取顺序，实现 任何一个 项目都能与其他项目相遇。为了有效评价项目之间携带污染 影响程度，污染实验所用病人样本的混合血清应尽量包含医学决定水 平浓度
①清洗力的低下(日常维护 欠缺,仪器老化)
②生化仪内污垢的积聚 ③测试顺序安排不当 ④常规清洗不能有效消除 污染
设计共用机械部分
①样本针,试剂针 ②比色杯 ③搅拌棒
二
交叉污染的分类
样本针携带污染
试剂针携带污染 搅拌棒携带污染 清洗系统携带污染 比色杯污染
试剂交叉污染
三 不同类型交叉污染的鉴别 方法及原因
确认实验步骤（表4） A B1 B2 B3 D E1 E2 E3
搅拌棒携带污染
搅拌棒污染：试剂与样本、第一试剂与第二试剂的混 匀需要搅拌棒，而搅拌棒如果清洗不完全，或黏附力增 加时，残留试剂可能会对下一检测结果造成影响。 鉴别 对同一份血清标本重复测定 GGT 或 ALT 或 AST20次以上，结果重复性较差且有走高趋势。 原因 搅拌棒特富龙涂层剥落，搅拌棒表面有顽固性 污渍，冲洗水冲洗不充分,
试剂针携带污染实验方法
携带污染初实验
假设本次实验以A, B, C, D, E五个项目来考察各个项目之间的试剂针携 带污染,
先在生化仪中输入样本测试号码和选择项目，每个样本号码只选择一 个项目，目的是使试剂针吸取项目的顺序 完全按照样本测试号码的先 后顺序进行，五个项目的测试 顺序见表1。测试完成后，将数据输入到 处理表格2和表格3中，按照一定的判断标准，寻找可能存在的污染项 目组合。
先单独做A项目，紧接着连续测试3次B项目，第一个B项目的结果受A项目影响最大，第三 个B项目的结果因为有2次自身冲洗，结果应比较准确。比较第一个B项目检测结果同第三个 B项目检测结果，如果影响百分比同初试结果影响趋势和程度相近，可以判断 A项目对B项 目有携带污染。 确认实验检测顺序以(A→B ）, (D→E)为例
原因：样品针尖弯曲，特富龙涂层剥落，针堵塞，冲洗水冲洗不充分
携带污染率主要是体现样品之间的污染程度
样本针携带污染率试验（一）
同一检测项目浓度相差较大的a标本（高浓度），b标本（低浓度）。 检测顺序：a 1 , a 2 , b 1 ,b 2 , b3 计算： 评价： 以q小于10%为判断标准。局限性：结果与选择的标本浓度有关系 例1：选择高浓度的ALT样本浓度值为2020 U/L，低浓度ALT 样本第一次检测 结果40 U/L，第三次检测结果20 U/L。 通过计算携带污染率q = （40 – 20）/ 2000 * 100% = 1%。 例2：选择高浓度的Cl 样本浓度值为140 mmol/L，低浓度Cl 样本第一次检测 结果为86 mmol/L，第三次检测结果为80 mmol/L。 通过计算携带污染率q = （86 – 80）/ 60 * 100% = 10%。 上例中，例1的携带污染率尽管只有 1%，由于结果正好在医学决定水平附近 因此对临床判断有较大影响。例2的携带污 染率尽管达到了10%，但是对于临 床判断不会产生大的影响。因此，使用该方法评价样本针携带污染需考虑样 本的实际浓度。
样本针携带污染率试验（二）
Hale Waihona Puke Baidu
测试顺序：3L 2H 1L 2H 4L 2H 1L 2H 1L 2H 1L （注上述顺序前的数字代表测试数 量，如 3L 代表连续测试 3 个低值样 本） 定义：L – L 值为紧跟在低值标本 后低值标本的结果。 H – L 值为紧跟在高值标本后低值 样本的结果 携带污染指标= H – L结果的平均值 – L – L结果的平均值 判断标准： 当携带污染指标小于 3SD SD是 ( L – L ) 结果的SD值。
生化分析常见交叉污染探讨与对策
徐国超
一
如何理解交叉污染
测试项目A
在 A 项目测定中所使用的试 剂、样本、反应产物、清洗
试剂、样本等残留
剂等对 B 项目的测定产生了 不良影响的现象。
测试项目B
A 项目与 B 项目不一定是相
邻项目。
引发交叉污染的原因
生化仪的发展变化
生化仪状态不良,使用不当
①多项目,多样本处理 ②处理能力的提高(高速化)
试剂针携带污染
全自动生化分析仪一般采用双试剂针，即所有项目的一 试剂都共用试剂针 R1 ，所有项目的二试剂都共用试剂 针R2。试剂针R1或R2在每吸取一次试剂后都会进行一 次清洗，之后会 立即吸取下一个项目的试剂。 当自身清洗能力下降，试剂针在吸取试剂时会将部分残 留的前项目试剂成分带入到后项 目反应杯中，对后项 目的检测结果造成影响。 从各个项目设置的参数可知，试剂体积量远大于样本体 积量。因此试剂针携带污染影响程度会高于样本针携带 污染。
试剂针携带污染确认实验
由携带污染初实验筛选出怀疑有污染的项目组合， 假设 (A→B) 同(D→E) 即A项目对B项目（A项目做好后紧接着做B项目），D项目对E项目（D项目做好后紧接着做 E项目）怀疑有污染。 由于初实验的项目交叉结果只是一次测试的结果， 可能有偶然因素，还必须进行确认实验。 以(A→B)为例，(D→E)的情况相同
表3中显示了试剂之间携带污染初实验 后的结果: a 将表格内测试顺序号代表的位置处输 入该项目对应的测试结果， b 对每个测试顺序号下面对应的测试结 果和该项目单独5次重复结果的均值相 比 比值以百分比形式表示，通过考察百 分比的大小来初步判断携带污染的可 能性。 目前的判断标准以正负百分之五作为 判断标准，超过范围时怀疑有携带污 染。
携带污染实验方案
目前大部分实验室开展的生化检测项目至少都有 20项以上，评价全项 目之间的携带污染会非常耗时，试剂成本消耗量大。且不同仪器的动 作原理不完全相同，设计一个较为简单，合理的实验方法是需要重点 考虑的 内容。 试剂针携带污染实验方案原理：通过设置特定的标本检测顺序，每个 样本只做一个项目的检测，可以控制不同项目的先后吸取顺序，实现 任何一个 项目都能与其他项目相遇。为了有效评价项目之间携带污染 影响程度，污染实验所用病人样本的混合血清应尽量包含医学决定水 平浓度
①清洗力的低下(日常维护 欠缺,仪器老化)
②生化仪内污垢的积聚 ③测试顺序安排不当 ④常规清洗不能有效消除 污染
设计共用机械部分
①样本针,试剂针 ②比色杯 ③搅拌棒
二
交叉污染的分类
样本针携带污染
试剂针携带污染 搅拌棒携带污染 清洗系统携带污染 比色杯污染
试剂交叉污染
三 不同类型交叉污染的鉴别 方法及原因
确认实验步骤（表4） A B1 B2 B3 D E1 E2 E3
搅拌棒携带污染
搅拌棒污染：试剂与样本、第一试剂与第二试剂的混 匀需要搅拌棒，而搅拌棒如果清洗不完全，或黏附力增 加时，残留试剂可能会对下一检测结果造成影响。 鉴别 对同一份血清标本重复测定 GGT 或 ALT 或 AST20次以上，结果重复性较差且有走高趋势。 原因 搅拌棒特富龙涂层剥落，搅拌棒表面有顽固性 污渍，冲洗水冲洗不充分,
试剂针携带污染实验方法
携带污染初实验
假设本次实验以A, B, C, D, E五个项目来考察各个项目之间的试剂针携 带污染,
先在生化仪中输入样本测试号码和选择项目，每个样本号码只选择一 个项目，目的是使试剂针吸取项目的顺序 完全按照样本测试号码的先 后顺序进行，五个项目的测试 顺序见表1。测试完成后，将数据输入到 处理表格2和表格3中，按照一定的判断标准，寻找可能存在的污染项 目组合。
先单独做A项目，紧接着连续测试3次B项目，第一个B项目的结果受A项目影响最大，第三 个B项目的结果因为有2次自身冲洗，结果应比较准确。比较第一个B项目检测结果同第三个 B项目检测结果，如果影响百分比同初试结果影响趋势和程度相近，可以判断 A项目对B项 目有携带污染。 确认实验检测顺序以(A→B ）, (D→E)为例