实验动物微生物学分类及控制
实验动物学-微生物控制、营养控制
第三节 实验动物饲料的质量控制
畜牧在饲料学分类上的所谓8大类饲料，即青绿饲料、 粗饲料、青贮饲料、能量饲料、蛋白质饲料、矿物质饲料、 维生素饲料和添加剂8大类，这种分类方法对于实验动物 饲料分类没有意义。
全价配合饲料是指通过配合形成的全面满足饲喂动物的营养 需要，直接用于饲喂动物，而不必另外添加任何营养性饲用 物质。实验动物必需使用全价配合饲料。
4.狗 狗是肉食动物，犬必须供给足够的脂肪和
蛋白质，饲料中动物性蛋白应占全部蛋白质 食物的1/3。犬能耐受高脂肪日粮，要求日粮 含有一定量的不饱和脂肪酸。维生素A的需要 量较大。
5.猴
猴日粮能量的50%以上来自 糖代谢。体内不能合成维生 素C，必须由日粮提供，同 时要注意日粮的适口性。除 主食外，每天应供给一定量 的新鲜水果和蔬菜。
实验小鼠微生物和寄生虫质量检测标准（1983）
不同级别的小鼠应排除的微生物及寄生虫种类
SPF
清洁级
普通级
23种
19种
4种
SPF动物和清洁级动物的饲养管理要点是
☆饲养在屏障系统中 ☆饮水、饲料、垫料、空气都要除菌后才可以使用。 ☆工作人员要严格按照规范操作 ☆定期对动物和环境检测
无菌动物 （germ free animals ，GF ）
一、实验动物的营养需要 是指动物群体每天对碳水化合物、蛋白质、脂肪、水
分、矿物质和维生素等各种营养物质的平均需要量。
二、实验动物营养需要的指标 以动物血液生化、免疫等指标作为衡量指征。
三、实验动物营养需要的种类
※生长需要：能够满足动物生长与同化过程中所需要的各 种营养物质。
※繁殖需要：能够满足动物母子自身营养需要与胎儿生长 发育与哺乳提供各种营养物质。
实验动物学 第三章
四、 无菌动物 （Germ free animals, GF）
无菌动物是指体内、外无任何可检测出的活 的微生物和寄生虫的动物。来源于无菌手术剖腹 取胎，饲养在无菌隔离器内，人工哺乳或保姆代 养培育而成。 悉生动物（Gnotobiotes animals, GA）体内 携带有已知微生物的动物。这种动物来源于无菌 动物，人为的投给已知的单菌、双菌、三菌或多 菌。这些均为已知菌，与无菌动物一样，饲养在 隔离器中。
第三章 实验动物 微生物学质量控制
实验动物微生物学质量控制是实验动物 标准化的主要内容之一。 实验动物按微生物学质量控制标准或微 生物净化程度，目前我国将实验动物分 为普通级动物(CV)、清洁级动物(CL)、 无特定病原体动物(SPF)、无菌动物(GF), 其中包括悉生动物(GA)。
一、 普通动物 （Conventional animals,CV）
普通级实验动物（一级实验动物）是在微 生物学控制上，要求最低的动物，它要求不携 带人畜共患病和动物烈性传染病的病原。普通 级实验动物（主要指大、小鼠）对实验结果反 应性较差，因而国际上普遍认为仅可作生物医 学示教之用，或作某些科学研究为探索方法而 从事的予试验之用，不可供科研、生产和检定 之用。
饲养管理要求：
清洁级实验动物（二级实验动物）除普通级动物应 排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究 干扰大的病原。 清洁级实验动物是根据我国国情而 设定的等级动物。目前在我国已成为适用于科研的 标准的实验动物，其种群来源于SPF动物或剖腹产 动物。 清洁级动物比普通级动物要求排除的微生物和 寄生虫多，但比SPF动物少。清洁级动物除肉眼观 察无病外，尸体解剖时主要脏器、组织无论是眼观 还是病理组织切片均没有病变。
目前国际上对SPF动物的要求不同，质量标 准也不一样。部分学者认为某种实验动物没有某 种病原体，不影响其实验要求就可称为SPF动物， 另有学者认为必须将常见的病原体全部排除才算 是真正的SPF动物。前者要求太低，后者要求太 高。结合我国的实际情况以既排除对动物群有危 害的病原体，又排除对动物实验有干扰的微生物 和寄生虫为原则。由此可见，我国的SPF动物微 生物学质量控制标准高于国外的控制标准。 国际上公认SPF动物适用于所有科研实验， 是目前国际标准级别的实验动物，各种疫苗生产 所采用的应为SPF动物。
实验动物分类 微生物学控制方法分类 遗传学为基础分类
实验动物分类微生物学控制方法分类遗传学为基础分类实验动物分类：实验动物是科研实验室中常用的生物模型，用于研究人类疾病、药物研发、基础生物学等领域。
根据动物的生物学特征和实验需求，实验动物可以分为多个类别。
1.哺乳动物：哺乳动物是最常见的实验动物类别。
它们具有和人类相似的生理结构和基因组，因此被广泛应用于研究药物毒性、疾病模型等领域。
常用的哺乳动物实验动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔子等。
-小鼠：小鼠是最常用的实验动物之一，因其繁殖快、基因易于操控等特点而受到广泛关注。
小鼠模型可以用于研究人类疾病、肿瘤、神经退行性疾病等。
-大鼠：大鼠和小鼠类似，但体型较大，适用于更复杂的实验操作，如外科手术等。
-豚鼠：豚鼠也是常用的实验动物之一，体积适中，适合进行一些生物学、生理学和行为学方面的研究。
-兔子：兔子常用于心血管病理、免疫学等领域的实验研究。
2.猪类：猪因其体型较大、解剖结构生理功能与人类相似等特点，被用作模拟人类器官、学习病毒感染机制等研究领域。
猪常用于研究心脑血管疾病、药物毒性测试等。
3.非人灵长类动物：非人灵长类动物包括猿类和猴类。
由于其智力和行为特征与人类相似度较高，因此在神经科学、行为学、神经退行性疾病等领域常被用于研究。
4.鸟类：鸟类是另一类常用的实验动物。
鸟类有较大的生物多样性，在研究发育生物学、行为学、遗传学等方面具有独特的优势。
5.其他动物：此外，还有很多其他种类的动物可作为实验模型，如鱼类、蛙类、昆虫等。
这些动物常被用于研究生物学、发育学、遗传学等方面的基础研究。
微生物学控制方法分类：微生物学具有重要的应用价值，在农业、食品加工、环境保护等方面有广泛的应用。
下面是微生物学控制方法的分类：1.生物防治：生物防治是通过应用特定的微生物，来控制病害虫和病原体的方法。
常用的生物防治微生物包括杀虫菌、拮抗菌等。
例如，使用芽孢杆菌来控制害虫的生长繁殖，使用拮抗菌来抑制病原菌的生长等。
2.生物肥料：微生物也可用于制备有机肥料，用于提供植物所需的养分。
请叙述实验动物遗传学和微生物学的分类
请叙述实验动物遗传学和微生物学的分类
实验动物遗传学分类：近交系动物、杂交群动物及远交系动物。
实验动物遗传学质量控制意义：实验动物在繁衍及成长过程中，遗传基因易受到漂变、污染及突变等影响，因而，有必要对动物遗传质量进行检定和判断，以保证其质量和使用的可靠性。
实验动物微生物学分类：普通级动物（CV）、清洁级动物（CL）、无特定病原体级动物（SPF）、无菌动物（GF）、悉生动物（GN）。
实验动物微生物学质量控制意义：由于实验动物采取群体饲养，频繁与外环境和人员接触，易被各种病原体感染，造成疾病爆发、流行和隐性感染，因而对实验研究产生严重干扰，造成人力物力和时间的极大浪费。
有的病原体宿主广泛，属人兽共患病原，可引起人和动物的疾病，更具有危险性。
因此，开展实验动物微生物监控工作，减少或阻止微生物的影响，对保证实验动物质量及等级标准化，以及动物实验结果的可靠性，具有十分重要的意义。
实验动物的微生物学和寄生虫学控制
参考文献2
实验动物的微生物学和寄生虫学控制 涉及到多个方面，包括实验动物的微 生物和寄生虫监测、实验动物饲养环 境的卫生和消毒、实验动物饲料和水 源的管理等。这些措施可以有效降低 实验动物感染微生物和寄生虫的风险 ，从而提高实验结果的准确性和可靠 性。
参考文献3
实验动物的微生物学和寄生虫学控制 需要遵循一系列的规范和标准，如实 验动物微生物学和寄生虫学的监测标 准、实验动物饲养环境的卫生标准等 。这些规范和标准可以有效保障实验 动物的健康和福利，同时也可以确保 实验结果的准确性和可靠性。
期驱虫。
吸虫
吸虫主要通过水源传播，控制方法包 括提供清洁水源、加强水质监测和驱 虫。
原虫
原虫种类繁多，控制方法因种类而异， 常见的控制措施包括改善环境卫生和 加强生物安全管理。
寄生虫学控制技术的发展趋势
新型药物研发
随着科学技术的发展，新型抗寄生虫 药物的研发和应用成为趋势，以提高 防治效果和降低药物残留。
生物防治技术
利用天敌、微生物等生物资源进行寄 生虫防治，具有环保、安全和可持续 的优点。
智能化监控系统
利用物联网、传感器等技术，实现对 实验动物和环境的实时监控和预警， 提高防控效率。
疫苗研制
疫苗是预防寄生虫感染的重要手段， 未来将加大力度研制高效、安全的新 型疫苗。
04 实验动物微生物学和寄生 虫学控制的实践应用
面临的挑战
病原体的多样性
实验动物可能携带多种病原体，包括细菌、 病毒、真菌和寄生虫等，这些病原体可能 对动物和人类健康构成威胁。
免疫抑制
某些实验动物可能存在免疫抑制现象，导 致对病原体的抵抗力下降，容易感染疾病。
病原体的传播
实验动物在饲养、运输和使用过程中，病 原体可能会传播给其他动物或人员，造成 交叉感染。
实验动物微生物学分类
实验动物微生物学分类
1.普通级动物（CV，Conventional Animal）：
不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。
2.清洁动物（CL，Clean Animal）：
除普通级动物应排除的病原体外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体。
饲养在屏障系统中。
空气要经过滤净化，饲养室要保持正压，进入室内的—切物品要经过消毒灭菌，工作人员进入要洗澡和穿灭菌工作服，动物饮水要经灭菌。
3.无特定病原体动物（SPF，Specific Pathogenfree Animal）：
除清洁动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病菌和对科研干扰大的病原。
饲育在屏障系统中，是通过无菌动物、悉生动物、SPF动物而获得的。
笼具、饲料饮水都要经过特殊处理，并有严格的检疫、消毒、隔离制度。
科研实验主要使用 SPF 动物。
4.无菌动物（GF，Germfree Animal）
无可检出的一切生命体。
此种动物自然界中并不存在，它是经人工剖腹产净化培育出来的。
在隔离器中剖腹产取出其仔体，用无菌母鼠代乳或人工哺乳。
5.悉生动物(GnorobioticAnimal)
动物体内所携带生命体(病毒、细菌、真菌、原虫和寄生虫)是已知的，也叫已知菌动物。
实验动物的微生物学及寄生虫学控制
第四节 清洁动物（Clean animal，简称CL动物）
定义：除普通动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和 对科学研究干扰大的病原。
饲养条件：屏障系统大规模生产 来源：SPF动物扩群 应用：各种科研、教学用大小鼠
清洁级动物特点：
1、微生物特点 清洁级动物比普通级动物要求排除的微生
物和寄生虫多，但比SPF动物少。清洁级动 物除肉眼观察无病外，尸体解剖时，主要 脏器、组织无论是肉眼观看还是病理组织 切片均应无病变。
(1)盲肠肥大，比普通动物要大5-6倍。 (2)肠道肌层薄，肠绒毛变细变短。 (3)肝脏重量下降。
无菌动物特点
• 循环系统
(1)心脏变小 (2)白细胞数变少，且数量波动范围小
• 免疫系统 免疫机能基本处于原始状态。
(1)胸腺，淋巴组织，网状内皮系统发育不良
(2)脾脏小，无二级滤泡，网状内皮细胞功能下降
• 3、免疫学研究中的应用
无菌动物体内既无抗原也无特异性抗体，处于 一种“原始状态”，很适合用于各种免疫功能 的研究。 如，无菌动物暴露于微生物，先产生α球蛋白，
再产生β球蛋白，最后产生γ球蛋白。
常用无菌动物进行免疫抑制剂试验研究。
4、肿瘤学研究 （1）制备人体肿瘤模型需要免疫抑制
动物，而普通动物给予免疫抑制剂后常 继发感染死亡，所以可以应用无菌动物。
SPF动物 屏障系统 确知不带有的微生物
清洁动物 屏障系统 确知不带有的微生物
普通动物 开放系统 微生物情况不明确
二、对科染病 无
无
无 未知
寄生虫 无
无
无 未知
试验结果 明确 明确 明确 有疑问
用动物数 少 少
较少 多或大量
统计价值 很好 可能好 较好 不准确
实验动物的微生物学、寄生虫学的检验检疫
实验动物的微生物学、寄生虫学的检验检疫一、实验动物的微生物学、寄生虫学质量控制分类根据国家标准GB14922.1和GB14922.2，我国实验动物按微生物和寄生虫学控制分类，分为四个等级，即：①普通级动物（Conventional Animal, CV）；②清洁级动物（Clean Animal, CL）；③无特定病原体级动物（Specific Pathogen Free Animal, SPF）；④无菌级动物（Germ Free Animal, GF）。
现行标准中，大小鼠无普通级，犬、猴无清洁级及无菌级。
二、实验动物的微生物学、寄生虫学质量监测如何控制微生物和寄生虫，是实验动物标准化的主要内容之一。
一般而言，实验动物中，其微生物学和寄生虫学的控制等级越高、不确定因素和干扰因素越少，其实验结果就越准确、越可靠。
（一）监测意义1. 保证实验研究的顺利进行和工作人员的身体健康在人工饲养环境中实验动物被集中饲养，由于活动空间相对狭小，动物繁殖快、数量多、互相影响大，当受到外界或动物间各种病原体感染时，极易导致传染病的发生与流行。
实验动物疾病的发生与流行，除造成动物死亡外，还会干扰实验的顺利进行，引起生物制品的污染，对人类健康产生危害。
2. 确保实验数据的准确性和可重复性定期对实验动物和动物实验的环境设施、饲料、垫料和饮水等的监测，为确保实验动物符合控制等级要求提供了基础；对各级实验动物群进行微生物学、寄生虫学监测，可以确定各级实验动物是否符合原定级别，有利于排除不确定因素，保证实验动物和动物实验的质量可控，从而确保实验数据的准确性和可重复性。
也可以对实验动物不应有的病原体的入侵，及早采取措施，以免疫情扩大，导致动物的死亡，实验的终止而造成更大的损失，（二）监测方法实验动物的微生物、寄生虫检测具体操作方法详见《国家标准实验动物微生物学和寄生虫学的检测方法>>(GB/T 14926.1-14926.64；GB/T 18448.1～18448.10 ),检测方法归纳起来有病原学检测和血清学检测。
实验动物的分类和质量控制
1、dw（dwarf，侏儒）：隐性突变，缺乏生长激素和 甲状腺激素，纯合子dw/dw。
2、hr（hairles，无毛）：生后14天脱毛（几乎裸体） ，多用于皮肤放射效应。
3、dy（dystrophia musculairs，肌失养症）：纯合子 dy/dy，生后2-3周后肢瘫痪。
常见的远交（封闭）群动物
2. 大鼠
Wistar大鼠，SD大鼠。
3. 兔
新西兰兔、青紫蓝兔、日本大耳白 兔等。
命名
• 1、用2-4个大写字母表示。 • 2、保持者与品系名称之间用冒号隔开。 • 如：N：NIH-nu/nu
封闭群的特点及应用
1、遗传组成具有很高的杂合性。
1 由于杂合性，导致个体间的反应具有差异，因 此，个体间的重复性各一致性差，一般作为遗 传实验的基础群体。
原因：1、有害隐性基因的暴露。 2、多基因平衡的破坏。
常见的近交系动物
1.近交系小鼠 1) C57BL/6J:第一个基因组测序工程的动物
，常作为遗传工程的研究。 2) BALB/c：主要作为单抗的研制。 3) DBA：第一个近交品系小鼠。 4) 129/sv：作为基因敲除的ES来源。 5) FVB：雄性原核大，作为显微注射的首选
杂交群的特点及应用
1、遗传和表型上的一致性
就某些生物学特征而言，杂种一代比近交系 动物具有更高的一致性，不容易受环境因素变化的 影响，可广泛地适用于营养、药物、病原和激素的 生物评估。
2、杂交优势 克服了近交衰退现象。
杂交群的特点及应用
3、同基因型
具有杂合的遗传组成，同时又能接受两个亲本 品系的细胞、组织、器官和肿瘤的移植，适用于 免疫学和发育生物学等研究领域。
03第三章实验动物的微生物学分类
豚鼠的脾脏病变
小鼠肝脏病变
2. 细菌性疾病
2. 细菌性肺炎 • 病原学：肺炎双球菌 、克雷伯肺炎杆菌、鼠丹
毒杆菌等 • 流行病学：
传染源：患病和隐性感染动物 传播途径：呼吸道 易感动物：所有实验动物 • 临床症状：呼吸困难 • 诊断：分离培养，血清学检查 • 预防和控制： 加强管理，保持室温，防止昼夜温差过大。
1. 病毒性疾病
3. 流行性出血热病毒感染（Epidemic hemorrhagic fever virus infection）
• 病原学：流行性出血热病毒（Bunyaviridae, Hantavirus) • 流行病学：
传染源：带毒野鼠和实验大鼠 传播途径：咬伤接触传播，气溶胶吸入 易感动物：大鼠 • 临床症状：无症状，人感染后得流行性出血热 • 诊断：血清学检查，病毒分离 • 预防和控制： 预防：饲养区内外捕杀野鼠，不从无生产许可证单位购买动物。 控制：捕杀血清学检查阳性大鼠，消毒、隔离
2. 狂犬病（Rabies） • 病原学：狂犬病毒（Rhabodovirus） • 流行病学：
传染源：病犬、猫、猪等家畜，野生动物 传播途径：咬伤，少数接触传播 易感动物：犬科、猫科动物，人 • 临床症状：高度兴奋，攻击人兽，转而麻痹。 • 诊断：临床症状观察：10-14天后病犬死亡
病毒分离：脑组织和唾液腺 实验室检查：脑组织海马回和小脑有病毒包涵体（内基氏小体） • 预防和控制： 预防：不收购来源不清的野犬。人被咬伤后必须注射狂犬疫苗。 控制：捕杀病犬、野犬，焚烧或深埋。
3. 寄生虫病
弓形体病（Toxoplasma infection） • 病原学：弓形体 • 生活史：
有性繁殖：终末宿主猫 包囊内滋养体 裂殖体 配子体 配子 卵囊 成熟卵囊 无性繁殖：中间宿主、终末宿主 滋养体 滋养体
实验动物学第三章 实验动物的微生物和寄生虫学控制
四、无菌动物的生产与维持
（一）无菌动物的获得 1.预产期判断 2.剖宫产术 3.人工哺乳/奶妈代乳 （二）无菌动物质量检测 1.无菌隔离器内环境检测 2.无菌隔离器内动物检测
2018/4/5
ห้องสมุดไป่ตู้
21
第三节
实验动物的微生物学和寄 生虫学质量监测
一、进行微生物学监测的意义
所谓微生物监测是指用微生物学的方法对不同 等级的实验动物进行定期的抽样检查，以确认该 等级动物是否感染了某些病原体。因此，微生物 学监测是一个群体的、流行病学上的概念，它是 通过从一个群体中定期抽取少量样本进行检测， 从而判断整个群体中某一疾病流行情况的一种方 法。
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第二节
无菌级动物和悉生动物
一、无菌级动物和悉生动物的由来和发展 悉生动物：广义的悉生动物包括无菌动物和已知菌动物。 • 最初是研究微生物和动物（人）之间的依存关系而建立发 展起来的。 发展史： 1. 1895年-1910年：解决了动物可在无菌状态下生存的问题。 2. 1910年-1940年：因技术问题没有解决，悉生生物研究进 展缓慢。 3. 1940年- ：技术问题解决，悉生动物研究进展迅速。
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不同微生物级别动物用于实验的比较
项目 传染病 寄生虫 实验结果 应用动物数 GF/GN动物 无 无 准确 少 SPF动物 无 无 准确 少 CV动物 有或可能有 有或可能有 有疑问 多
统计学价值
长期实验 实验中死亡率
好
可能好 很低
可能好
可能好 低
不准确
困难 高
长期实验存活率
实验的正确设计 实验结果的统计价值
不同级别的动物必须饲养在相应的设施环境中，并有相应的饲养管理操作规程， 需要定期监测，保证其携带的微生物和寄生虫符合其等级标准。
实验动物学微生物学控制分类
教学ppt
16
不同等级动物在生命科学各学 科的应用
教学ppt
17
小鼠、大鼠病毒检测项目（2001）
小鼠和大鼠病原菌检测项目
小鼠和大鼠寄生虫检测指标
豚鼠、兔、地鼠病毒检测项目
豚鼠、地鼠、兔病原菌检测指标
豚鼠、地鼠、兔寄生虫检测指标
犬、猴病原菌检测项目
犬、猴寄生虫检测指标
犬、猴病毒检测项目
教学ppt
26
动物体外寄生虫
教学ppt
27
实验动物常见的球虫
教学ppt
28
引起小鼠疾病的主要病原体
教学ppt
29
引起大鼠疾病的主要病原体
教学ppt
30
引起地鼠疾病的主要病原体
教学ppt
31
引起豚鼠疾病的主要病原体
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引起兔疾病的主要病原体
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33
实验动物监测取样数量的确定
鼠肝炎2
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5
除一级动物应排除的病 原体外，不携带对动物危害 大和对科学研究干扰大的病 原体。
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6
无特定病原体
（Specific Pathogen-free Animal,SPF）
不携带特定病原体的动物
无菌动物
(Germfree Animal,GF) 体内外无任何可检出的生命体
教学ppt
教学ppt
9
VAF (virus antibodies free)概念
教学ppt
10
无菌动物的生物学特征
教学ppt
11
无菌大鼠的心血管功能
教学ppt
12
无菌动物的血液生化特征
教学ppt
实验动物微生物质量控制(共49张PPT)
Lyphocytic choriomenin gitis
virus
狂犬病 (Rabies)
Rhabdo virus
小鼠、仓鼠
类 似 流 行 性 感 冒 的 症 状 ，接 触 感 染 ( 接 触 小 鼠 头痛、肌痛、发热、恶 粪便和尿液)；吸入； 心 、 呕 吐 、 喉 痛 、 畏 光 。咬伤，或由节肢动物
如蚊子、蟑螂传播
所有哺乳类
头痛、肌痛、发热、恐 咬伤、皮肤伤口或黏
水、狂妄、抽搐、昏厥、 膜感染含狂犬病毒的
死亡
唾液
细菌性疾病
疾病
病原
媒介动物
人类临床症状
传染途径
全身性感染 (Systemic infections)
布氏杆菌病 (Brucellosis)
犬 Brucdla Canis 、 猪 Brucella suis
正常菌群
a. 正常菌群受内外环境变化发生菌群失调，将产生数量和位置的改变， 由非致病菌变为致病菌。
3. 真菌感染对动物和实验的干扰
病原真菌大多为人兽共患病原，病原性弱，为慢性过程，以慢性增生性炎
症为主。
真菌孢子飞扬，污染环境，威胁动物和实验、饲养人员。
4. 寄生虫感染对动物和实验的干扰
掠夺宿主的营养
(Rabies) 酶联免疫吸附试验（ELISA）。
Germfree animal GF
三、微生物、寄生虫潜在感染对实验研究的干扰
1. 实验动物病毒对动物和实验的干扰
鼠痘病毒
a. 实验性结核、X射线、化学毒素、组织移植、肿瘤、运输可使隐性感染病毒激
活。
b. 大量内毒素或切除脾脏可改变吞噬细胞功能，而增加小鼠对病毒的易 感性。
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随着现代科学的发展和西方动物保护主 义运动的影响，实验动物科学已从过去注 重于动物的饲养管理和实验操作，愈来愈 集中于动物的福利和实验结果的质量。实 验动物使用总量下降，高质量实验动物使 用量增加。
早在七十年代，发达国家的实验动物在使用量 上已经趋于平衡。但是，高质量实验动物的使用数 量呈上升趋势，普通级、清洁级动物逐渐被SPF级 取代。目前发达国家使用的大、小鼠等小型实验动 物大多为SPF级.
利用SPF鸡生产疫苗、抗体：麻疹流行性腮腺 炎二联活疫苗、抗轮状病毒卵黄免疫球蛋白、 抗大肠杆菌O157∶H7鸡卵黄抗体等。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
药物安全评价：实验能否持续取决于污染的可能性 老年病学研究：SPF动物的寿命普遍超过普通动物 免疫学研究： 免疫缺陷动物只有SPF级或以上级别
动物才能保种、繁殖.
四、无菌动物
实验动物微生物学分类及控
2.干扰实验结果 实验动物的微生物和寄生虫感 染可不同程度干扰实验结果，从而影响研究工作 的准确性和可靠性，甚至得出错误的结论。隐性 感染常导致动物生理生化指标的改变，使实验得 不到应有的结果。或因实验处置，动物抵抗力下
降，使隐性感染显性化，导致疾病的发生。
实验动物感染寄生虫后，不仅虫体对机体造成一定的损 害，动物机体也对虫产生反应，使动物机体的生理、生 化及免疫学指标发生改变，从而影响实验结果。
4．影响生物制品的质量 使用在人身上的血清、 疫苗和别的生物制品必须是安全的、无污染的。 如病原微生物污染了细胞培养物、肿瘤移植物或 以动物组织和细胞为生产原料的生物制品，不仅 干扰实验，而且还可将病原扩散，以至危害人类 的健康。如果实验动物是用于生产生物制品的目 的，其来源必须摆脱大量的能引发人类潜在人兽 共患病的、带有特别病原体的动物群体。
掠夺宿主的营养; 体外寄生虫对动物的骚扰; 对宿主机体产生机械性损伤; 对宿主产生毒性作用; 对宿主生理、生化和免疫系统的影响。
3.人兽共患病 许多实验动物传染病为人兽共 患性疾病，这些传染病可在人与动物之间传播 流行，因而也对饲养和研究人员的健康构成威 胁。特别是那些在动物呈隐性感染、而对人类 呈致死性感染的病原微生物（如流行性出血热 病毒），应引起我们高度重视。
三、无特定病原体动物
定义
无 特 定 病 原 体 动 物 （ Specific Pathogen free,SPF ）是指除清洁级动物应排除的病原外， 不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干 扰大的病原的动物，又称SPF动物。饲养于屏障 环境。
应用：举例说明
应用
选择SPF动物，避免了病原体的隐性感染或潜伏 感染及某些条件性致病菌对实验结果的影响，因 此国际上公认SPF动物适用于所有科研试验，是目 前国际标准级别的实验动物，疫苗生产必须应用 SPF动物。
四、实验动物的微生物和寄生虫控制国家标准
不同等级啮齿类、兔、犬和猴等实验动物要求 排除的细菌、病毒、寄生虫应根据国家技术监督 检验检疫总局发布的有关实验动物微生物学等级 及 监 测 标 准 (GB14922.2—2019 、 GB14922.1—2019)。
第二节 实验动物的微生物等级
GB 14922-1994《实验动物 微生物学和寄生 虫学监测等级（啮齿类和兔类）》
2019年在全国基本普及使用清洁级实验大鼠、 小鼠。某些重点科研项目用实验动物，达到SPF级 水平。
二、实验动物微生物和寄生虫感染的基本要素
1.感染源 (1)内源性 (2)外源性 2.传播途径: 实验动物;生物材料;工作人
员;材料和设备 3.易感动物
三、实验动物常见感染性疾病
重要的人兽共患病 主要的烈性传染病 常见的微生物和寄生虫感染
一、普通级动物
定义 普通级动物（Conventional Animal CV）是在微
生 物学控制上要求最低的动物，它要求不携带人兽共 患病和动物烈性传染病的病原。如鼠痘病毒、流行 性出血热病毒、弓形体等，饲养于普通环境中。 应用：举例说明
应用
用于医学生物学中的教学示范 和科学实验的预实验。
二、清洁级动物
1.重要的人兽共患病
流行性出血热 弓形虫病 淋巴细胞脉络从脑膜炎 沙门菌病 狂犬病 猴B病毒感染 猴结核病
2.主要的烈性传染病 鼠痘 兔出血症（兔瘟）
3.常见的微生物和寄生虫感染
鼠肝炎病毒感染 仙台病毒感染 鼠肺支原体病 嗜肺巴斯德杆菌病 小鼠呼肠孤3型病毒感染 球虫病 犬细小病毒感染 犬瘟热
将我国实验动物分为四级，即一级动物（普通级）、 二级动物（清洁动物）、三级动物（无特殊病原体 动物）和四级动物（无菌动物）。
GB 14922.2-2019《实验动物 微生物学等级 及监测》(2019年5月1日开始实施)
新标准对实验动物等级进行了重新设定，将实验小 鼠和大鼠的微生物学等级分为清洁级、无特定病原 体级（SPF）和无菌级，取消了普通级。豚鼠、地 鼠和兔仍保留四级。犬和猴分为普通级和SPF级。
定义 清洁级动物（ Clean animal ， CL ）是指除普通动 物应排除的病原体外，不携带对动物健康危害大和对 科学研究干扰较大的病原的动物，如鼠肝炎病毒、仙 台病毒、体外寄生虫等，饲养于半屏障环境。
应用：举例说明
应用
国际上普遍认为CL动物仅适合于短期或部分科研试 验。根据国外实验动物工作发展及国内的具体条件，CL 动物近年来在我国得到了广泛的应用。它较普通动物健 康，又较SPF易达到质量标准，在动物实验研究中可免 受动物疾病的干扰，其敏感性及重复性亦较好。因此， 我国针对自己的实际情况认为这类动物目前可适用于大 多数科研实验，应是国内科研工作主要要求的标准级别 的动物，可应用于生物医学研究的各个领域。
定义 无菌动物（ Germ-Free Animal,GF） 是指无可检出的一切生命体的动物。饲 养于隔离环境。
应用：举例说明
无菌动物的发展过程
1895—1910年 解决了无菌生命能否生存的问题。 Pasteur认为动物没有肠道菌参与不能生存。生物学 家NenK提出了相反的看法，由此开展了一场学术 上的争论。十年后，1895年Nuttall 和Thierfelder经 剖腹产，用牛奶饲喂获得了无菌豚鼠，第八天后处 死，肠道内未检出细菌。1898年Scottellies获得了无 菌鸡，无菌环境中养活了17天，至此建立了无菌生 命可以存活的论点。