小鼠尾静脉注射心得.doc
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小鼠尾静脉注射心得
对血管的选择
1.小鼠尾部有三条静脉,左右两边各一条而且比较浅,容易穿刺;中间一条较深不容易找到,建议尽量不要选择。另外穿刺选择尾部中下1/3-1/2处比较好,因为此处皮肤较薄,可以用75%的酒精反复擦拭穿刺部位血管,使其充盈,并使皮肤的角质层软化,便于穿刺。或者在注射之前,小鼠尾巴用温水泡大约2min,(水温大约50℃),这样才能使血管充分舒张。注射前用干棉球擦干,从下往上扎。这样的好处是万一一次扎不进,还可以继续使用此血管。
2.针的选择:书上说使用的是1ml的注射器,有人在实验中用的是头皮针,后接1ml注射器,因为头皮针针头更小,对血管的损伤更小,适合连续多次给药,其次使用头皮针穿刺后,我们可以通过回血来判断穿刺是否成功。(4号半1ml 注射器已经足够且容易进针。
3.注射手法:左手食指和中指上下夹住你所选择血管的靠近身体的一边,无名指和小指垫起一块纱布或者纸巾(建立一个穿刺的平面的作用),拇指压住所选血管的尾尖端,上下夹住血管的距离应以不影响右手持针上下移动为宜。(否则容易人为建立穿刺的角度,而使右手持穿刺针穿刺过深,导致穿刺失败。)右手持穿刺针,针斜面向上,针与皮肤稍成一角度(10℃左右),进针后要将针头稍向上挑,然后将针向里送一点。如果在血管里,则无阻力,并且能看见针。若针看得很清晰,则扎到了皮下,若针看不清,则针扎深了。看到回血表明成功,还可以回抽,见到回血后表明穿刺已进入血管,可以给药。
4.穿刺结束后,用纱布压住穿刺部位反折尾部进行止血。良好并彻底的止血对于血管可以起到很好的保护作用,这对于需要天天穿刺给药是非常有用的。(一般小鼠需要按压时间很长,否则易引起出血。)
5.用细针头皮下进针(我用的是4号)从远端打起,后面的皮薄一点,较容易打成功(个人看法),打成功时进针会很顺畅,注药没有阻力,一般不会自己回血,若不成功再往近端打,但一般一条血管打过三次还不成功的话最好先暂停,因为刺激后血管会收缩,很难打,歇一会儿换另一边打。还有一点,信心很重要!!有了信心才能找到感觉。
1. 将小鼠固定好,将尾巴拉直,绷紧,这是成功的第一步。
小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。
或者用这个方法:1 小鼠要固定好,自制一个笼子,前面通气,中间最好有一个挡板,让小鼠不能后退,筒子后面开一个口,尾巴从这里出来,这样固定牢靠;2、注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟,有利于注射;3、先远后尽,不要一开始就从尾根部,那样失败了不好办;
4、进血管后注意保持稳定,针尖很容易刺穿血管的。至于能否穿进,个人手感如何,全靠自己啦。多练习,一定很快掌握的,不难,绝对不难!我练习10余只小鼠就比较熟练了
2. 用酒精棉球擦拭尾巴,使血管扩张;或者用热水或者热毛巾焐热,使静脉扩张;选用适当的针头,越细越好;在尾部较靠近上段的地方注射,这里血管比较大。用酒精或热水擦拭,擦拭的时候,可把尾巴用力扯在桌面上。注射状态为尾巴发白,紧靠白色的尾骨两侧清晰可见两根红色静脉。
3.用左手的食指,中指,无名指及大拇指将小鼠尾巴固定,; 手法:握住1ml注射器前面0.1ml 处。右手小指搭在拽着鼠尾的左手拇指处按此手形进针;看针尖前面那个斜面有3/4(关键),如果血管充盈则进1/2,进入,停,上挑针头,进针;左右轻摆动,如可动,可注射。原则是:把你第一次打进的手形,完全固定下来,每次都重复。
4.注射:注射时左手扯尾,使尾巴紧贴桌面,尾巴与桌边紧贴转弯处为进针部位,一般选择距尾尖1/4或1/3处进针,此处皮肤较薄,血管清晰,进针容易。进针时针头与桌面平行,针尖稍稍朝下,从中指及无名指与拇指接触处稍上方进针,一旦进入,须将针头稍稍上挑进入,针头沿血管进入,肉眼可关察到针头前进。如果针头在血管中前进,可明显地感觉到针行通畅,毫无阻力。若针头不在血管中,手感针行有阻力,有一种堵的感觉。进针时不要太深,针头入皮肤后马上把针头略往上,平行进针,针扎入时有落空感,推液时无阻力则说明成功了!如针头处出现皮丘则说明在皮下,推出重来。进针处最好在尾巴的1/3-1/2处,甚至可以更下一点。这样一次失败了还可以往上再来,不要马上在最高处打,因为你们要打这么多天。要为以后作准备。用热水、酒精、红外都可以扩张血管。可以视情况而用。总而言之,最重要的是“熟能生巧”。你最好先练习一下或请高手相助。不然到了最后几天,真的很难打的。
2。注射:针进入后,切记手不可发抖,因为血管壁非常薄,容易扎穿。推药时,要缓推。若进针成功,推药顺畅,无阻力;若推药时感觉有阻力,说明针头不在血管中,须及时拔出,重新进针。一般选用4号或4号半针头。最好用打疫苗的2毫升一次性注射器。尾静脉注射并不难,主要是一种感觉。若用上十只鼠练手,你必会找到感觉。心要静,手要稳,要有耐心。我研一的时候尾静脉注射让我头疼万分,越急越打不进去。后来静下心来,边注射边找感觉,很快就熟练了。
祝你找到感觉
5.通过看有无回血来测试针是否在静脉内;
6.注射.