RNA提取实验操作步骤、注意事项及问题指南讲解学习
RNA提取详细步骤及注意事项
2、主要提取流程 3、详细步骤 4、注意事项
1、试剂介绍
本实验室提取RNA常用的抽提剂是全式金Trizol。Trizol是一
种新型总RNA抽提试剂，可以直接从细胞或组织中提取总 RNA。
其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞并抑制细胞释 放出的核酸酶。Trizol在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性，
使两相混匀。 5、在提取核酸时，如样品浓度低，则应增加有机溶剂沉淀时间，
－80℃下>30min或－20℃过夜将有助于增加核酸的沉淀量。
6、切勿让RNA过分干燥，否则将难溶解。
谢谢老师的评阅！
因此对纯化RNA及标准化RNA的生产十分有用。
2、主要提取流程
磨 样
加 Trizol
去杂质
加氯仿
室温晾干
加乙醇
胶状物
转移水相
溶解RNA
测浓度
保 存
3、详细步骤
1、剪取新鲜幼嫩叶片，置于液氮中慢慢反复研磨，直至其成为合格粉 末为止。
2、加入1ml Trizol，晃动3-5下，再用枪吹打2-3下，确保全部裂解。
3、室温放置5分钟，使样品充分裂解。 12,000g、 4℃离心10分钟。 4、每毫升 Trizol加入0.2ml氯仿，猛烈晃动15秒，室温放置2-3分钟。
5、12,000g 4℃离心15分钟，然后吸取上层无色水相至一新的离心管
中。
6、按1ml最初的Trizol加入0.5ml异丙醇，颠倒数次混匀，室温沉淀10分
钟。 7、12,000g、 4℃离心10分钟，弃上清，在管底可见RNA沉淀（透明胶 状）。 8、每毫升最初的Trizol加入1ml 75%乙醇（DEPC水配制），剧烈震荡。
RNA提取的操作步骤、注意事项和常见问题分析
RNA提取的操作步骤、注意事项和常见问题分析RNA的提取准备试剂：氯仿，异丙醇，75�G乙醇，无RNase的水或0.5�GSDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制)操作步骤:1. 匀浆处理:a.组织将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。
样品体积不应超过TRIzol体积10�G。
b.单层培养细胞直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。
TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。
TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。
加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。
一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。
离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。
处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。
取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。
样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。
RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol 试剂的60�G。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。
用异丙醇沉淀水相中的RNA。
每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。
RNA提取准备工作及注意事项
RNA提取准备工作及注意事项RNA提取是分子生物学实验中常用的操作步骤之一，它是从细胞或组织中提取RNA分子的过程。
在进行RNA提取前，需要进行一系列的准备工作以及注意事项，以确保提取出的RNA质量好、纯度高。
下面是RNA提取的准备工作及注意事项的详细介绍。
一、实验前准备1.实验器材准备：常用的器材有离心管、离心机、恒温水浴器、pH计、显微镜等，根据实验的需要选择相应的器材，并确保所有器材都经过充分的洗涤和消毒。
2.试剂准备：RNA提取试剂盒通常包括缓冲液、酚-氯仿、异丙醇等，根据试剂盒的说明书准备相应的试剂溶液，并保证试剂的纯度和保存状态。
3.工作区准备：RNA提取实验应在清洁、干净的台面上进行。
实验室湿度应保持在50-60%之间，温度保持在20-25°C之间，以防止RNA降解和污染。
二、实验注意事项1. 避免污染：RNA易受到RNase的污染，因此，实验操作时应避免污染源。
严格控制实验室环境的清洁程度，使用无RNase酶的试剂和离心管，避免直接接触RNase。
2. 快速操作：RNA易被RNase降解，因此在提取过程中应尽量减少操作时间。
在每一个步骤中，应迅速进行，尽量避免长时间的搅拌和振荡。
4.酚-氯仿提取法：酚-氯仿法是一种经典的RNA提取方法，但需要注意的是，该方法中酚对人体有毒，因此在操作时应注意避免接触皮肤和吸入。
5.商业试剂的选择：市场上有许多RNA提取试剂盒可供选择，根据实验需求和预算，选择可靠的商业试剂。
确保试剂的批次一致，并严格按照说明书操作。
6.RNA样品的保存：提取得到的RNA样本应立即保存在低温条件下，如-80°C冰箱中，以避免RNA的降解和污染。
7.评估RNA质量：提取得到的RNA样品可以通过吸光光度计检测A260/A280比值来评估其纯度。
通常来说，纯度好的RNA样品A260/A280比值应在1.8-2.0之间。
总结：RNA提取是一项关键的实验步骤，准备工作和注意事项的严格执行对RNA提取的结果和后续实验的顺利进行非常重要。
rna提取试剂盒的提取流程及注意事项
rna提取试剂盒的提取流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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rna提取的关键操作及注意事项
rna提取的关键操作及注意事项RNA提取是生物学研究和临床诊断中必不可少的操作之一，它能够从细胞、组织中提取RNA分子，并进行分析和检测。
RNA提取的关键
操作和注意事项如下：
1. 样本的选择和采集：生物样品是RNA提取的基础，样品的选择
和采集直接影响到提取效率和RNA的质量。
应选择新鲜的细胞和组织，采集后应立即转移到冰上并迅速进行下一步操作。
2. 细胞和组织的破碎：RNA是由核酸和蛋白质组成的，因此需要
将样品进行破碎，以释放RNA。
常用的破碎方法包括机械破碎和化学破碎。
机械破碎主要通过磨砂器、超声波等物理方法进行，而化学破碎
主要通过酚-氯仿法或三氯乙酸进行。
3. RNA的纯化：纯化是RNA提取过程中最重要的一步，目的是去
除杂质和提高RNA的纯度。
它常采用硅胶柱层析法、钠酸盐沉淀法等。
在纯化过程中需要注意避免RNA降解，因此要严格控制时间、温度和
pH值等因素。
4. RNA的定量和质量分析：为了确保RNA的质量和纯度，需要对
提取出来的RNA进行定量和质量分析。
定量可以使用紫外分光光度计，质量可以通过琼脂糖凝胶电泳、比色法和荧光标记等进行分析。
总之，在RNA提取过程中，样品选择和采集、细胞和组织的破碎、RNA的纯化以及RNA的定量和质量分析是关键步骤。
在实际操作中，还
应注意严格控制时间、温度、pH值等因素，避免RNA的降解和污染。
同时，在选择RNA提取方法时，也应根据需要选择合适的方法。
这些注意事项都能够提高RNA提取的效率和RNA的质量，有助于后续的研究和诊断。
RNA提取详细步骤及注意事项
RNA的提取准备试剂：Trizol，氯仿，异丙醇，75℅乙醇（4℃预冷），无RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制)操作步骤:1. 匀浆处理a.组织将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。
样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm 直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。
TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。
TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。
加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。
一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。
离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。
处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。
取澄清的匀浆液进行下一步操作。
4. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
5. 2-8℃10000×g离心15分钟。
样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。
RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
6. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。
用异丙醇沉淀水相中的RNA。
每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。
7. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。
rna提取过程中的关键步骤及注意事项
一、概述RNA提取是生物学研究中的重要步骤，它涉及到从细胞或组织中提取出RNA分子，为后续的分子生物学实验和分析提供基础数据。
在RNA提取过程中，有许多关键步骤和注意事项需要注意，才能确保提取到高质量的RNA样品。
本文将重点介绍RNA提取过程中的关键步骤及注意事项。
二、样品采集和保存1. 样品的采集要尽量避免受到外界环境的污染，采集器具要事先经过严格的消毒处理。
2. 采集后的样品应立即冷藏或置于液氮中保存，避免RNA降解。
三、细胞破碎1. 细胞破碎是RNA提取的第一步，直接影响到RNA的得率和质量。
常用的方法包括酚-氯仿法、超声波法和离心破碎法等。
2. 选择合适的细胞破碎方法，要充分破碎细胞膜，释放出RNA分子，同时避免RNA的降解。
四、蛋白质沉淀1. 蛋白质沉淀的目的是去除DNA和蛋白质，以纯化RNA。
常用的方法包括酚-氯仿法和硅胶柱法。
2. 在进行蛋白质沉淀时，要注意去除酚相和混合相中的DNA和蛋白质，以免对RNA纯化产生影响。
五、RNA沉淀和洗涤1. RNA沉淀的方法有乙醇沉淀法和硅胶柱法等，选择合适的方法要根据样品的特点和后续实验的需要进行。
2. 在RNA洗涤的过程中，要充分去除盐和其他杂质，以保证提取到干净的RNA样品。
六、RNA溶解和质量检测1. RNA溶解的过程要充分溶解RNA，并保证溶解液的质量纯净。
2. 对提取得到的RNA样品进行浓度和完整性的检测，以确保RNA的质量达标。
七、总结RNA提取是分子生物学研究中的重要步骤，本文介绍了RNA提取过程中的关键步骤和注意事项。
通过严格控制每个步骤，可以保证提取到高质量的RNA样品，为后续的实验和分析提供可靠数据。
希望本文能够帮助读者更好地理解RNA提取过程，并在实验操作中取得更好的效果。
八、RNA存储和稳定性1. 存储RNA样品时，应尽量避免反复冻融，因为这样容易导致RNA 降解。
合适的储存温度通常为-80摄氏度。
2. 另外，干燥的RNA样品更容易保存，因此可以考虑使用适当的稳定剂，如DEPC水或RNAlater等，来保护RNA在样品采集至提取过程中的稳定性。
提取植物组织RNA的准备工作和操作规范
提取RNA前的准备工作1、提取RNA操作全程及配制RNA提取试剂必须穿实验服，戴口罩和一次性手套，触摸皮肤（例如面部）、门把手及实验室其他未处理过RNase的普通物体表面后立即更换手套。
2、器具干烤：需要干烤的器具包括金属和玻璃制品，如研钵、钥匙、镊子、剪刀、试剂瓶（200mL、500mL、1L）、量筒（50mL、100mL）、烧杯，即所有在配制RNA提取试剂过程中需要用到的玻璃器皿均需要干烤处理。
所有干烤的器具均用锡箔纸包住，如研钵、钥匙、镊子、剪刀和匀浆器，容器用锡箔纸封口，如试剂瓶、量筒和烧杯。
180℃干烤6h后放入RNA专用柜中备用。
3、DEPC水的处理：用于处理枪头、试剂瓶盖和离心管等塑料制品的0.1%的DEPC水可以在烧杯中配制，磁力搅拌器上搅拌过夜，搅拌过程中用锡箔纸封口。
用于配制RNA提取试剂的DEPC水需要在干烤过的试剂瓶中配制，盖上瓶盖搅拌过夜后121℃灭菌20min。
4、枪头、离心管和试剂瓶盖用0.1%DEPC水过夜处理后用报纸包好高温灭菌，移液器必须是专用的，用之前用DEPC处理的水配制的75%酒精擦拭整个移液器，特别是枪杆。
超净台的处理：用DEPC处理的水配制的75%酒精擦拭干净后，用氯仿快速擦拭，再用75%酒精擦拭，将提取所需的物品放入超净台，并用75%酒精擦拭，另放置一个废物缸，表面喷酒精，上述完成后，超净工作台紫外灯照射15-20min。
试剂配制过程中所用的枪头也必须是DEPC水处理过并高温灭菌的。
5、提取过程中用新开封的氯仿和异丙醇，用DEPC水处理过的15mL离心管分装，每管分装10mL并于4℃保存，最后溶解RNA沉淀的DEPC处理过的水用处理过的1.5mL离心管分装并于-20℃保存。
6、用专用的电泳槽电泳RNA，用DEPC处理的水配制50×TAE缓冲液，每次电泳前用DEPC处理的水配制1×TAE缓冲液进行电泳，电泳前用去污剂将电泳槽、制胶板和梳子清洗干净，DEPC水配制的75%乙醇擦拭，最后用DEPC处理的水冲洗干净。
RNA采集流程及注意事项
RNA采集流程及注意事项1. 引言RNA采集是生物学研究中常用的实验步骤，主要用于获取细胞内的RNA分子，以进一步研究基因表达的特点和规律。
本文档将介绍RNA采集的基本流程，并提供一些注意事项，以确保实验的准确性和可靠性。
2. RNA采集流程以下是一般的RNA采集流程，供参考：2.1 样本准备收集适当的样本并储存于合适的中，确保样本的新鲜度和纯度。
2.2 细胞破碎使用合适的方法（如超声波破碎或细胞裂解液）将细胞破碎，释放RNA分子到溶液中。
2.3 RNA提取使用RNA提取试剂盒等适当的试剂和方法提取RNA分子。
注意遵循厂家提供的操作步骤和注意事项。
2.4 RNA质量评估使用比色计或专业的RNA质量评估仪器，如比色法或琼脂糖凝胶电泳，评估提取到的RNA的纯度和浓度。
2.5 RNA保存将提取到的RNA样品储存于适当的条件下，如低温冰箱或液氮罩存储，以保持其稳定性和完整性。
注意避免RNA的降解和污染。
3. 注意事项在进行RNA采集实验时，还需要注意以下事项：3.1 样品处理尽量避免样品与外界环境的污染，使用无菌的器具和试剂操作，并在样品处理过程中尽量减少RNA降解的可能性。
3.2 RNA稳定性RNA易受到外界环境的影响，对温度和pH敏感。
在实验过程中，需严格控制样品的温度和pH值，避免RNA的降解和失活。
3.3 实验平台选择合适的实验平台和试剂，确保其适用于所需的RNA采集目的和样本类型。
3.4 操作规范按照实验操作规范进行RNA采集实验，遵循操作步骤和注意事项，以减少误差和提高实验结果的可靠性。
3.5 数据分析针对RNA采集实验的结果，进行适当的数据分析和统计处理，以更好地了解RNA分子的特性和功能。
4. 结论RNA采集是基因表达研究的重要步骤，通过合理的流程和注意事项的遵守，可以确保RNA的稳定性和纯度，为后续的实验和分析提供可靠的基础。
以上是RNA采集流程及注意事项的简要介绍，希望对您的实验工作有所帮助。
rna提取方法
rna提取方法RNA提取方法。
RNA提取是分子生物学研究中的重要步骤，其质量和纯度直接影响后续实验结果的准确性和可靠性。
在进行RNA提取时，我们需要选择合适的提取方法，并严格按照操作规程进行操作，以确保提取到高质量的RNA样品。
本文将介绍常用的RNA提取方法及其操作步骤，希望能对您的实验工作有所帮助。
1. 常用的RNA提取方法。
（1）酚/氯仿法，这是最常用的RNA提取方法之一，通过酚和氯仿的相分离，将RNA从细胞裂解液中提取出来。
该方法操作简单，适用于大多数样品类型，但需要注意的是酚/氯仿对操作者和环境有一定的危害性，需要在安全通风下进行操作。
（2）硅基柱法，该方法利用硅基柱上的硅胶膜吸附RNA，通过洗脱的方式提取RNA。
该方法操作简便，提取效率高，且对DNA和蛋白质有较好的去除效果，适用于高质量RNA的提取。
（3）磁珠法，磁珠法利用磁珠载体对RNA进行特异性结合，通过磁场的作用实现RNA的分离和提取。
该方法操作简单，易于自动化，且对样品量要求较低，适用于高通量样品的提取。
2. RNA提取操作步骤。
（1）样品裂解，将待提取RNA的样品进行裂解，一般使用细胞裂解液或组织裂解液进行细胞破碎，释放RNA。
（2）酚/氯仿提取，将裂解液与酚/氯仿按比例混合，离心分离出上清液中的RNA。
（3）酒精沉淀，向上清液中加入等体积的异丙醇或乙醇，使RNA沉淀出来，再经过洗涤和干燥步骤得到RNA沉淀物。
（4）溶解RNA，用无DEPC的水或TE缓冲液溶解RNA沉淀物，得到可用于后续实验的RNA样品。
3. 注意事项。
（1）操作环境，在进行RNA提取时，需要在RNase-free的环境下进行操作，避免RNA受到RNase的污染。
（2）样品保存，裂解后的样品需要在-80℃的环境下保存，以避免RNA的降解。
（3）避免污染，在操作过程中需要避免外源RNA的污染，使用RNase-free的试剂和耗材，并注意操作规范。
（4）质量检测，提取得到的RNA样品需要进行质量检测，包括浓度、纯度和完整性的检测，以确保提取到高质量的RNA。
提rna步骤
提rna步骤RNA是一种重要的生物分子，它在细胞内起着传递遗传信息、调节基因表达等重要作用。
为了研究RNA的功能和机制，科学家们需要对RNA进行提取和纯化。
本文将介绍RNA提取的步骤和注意事项。
一、材料准备1.细胞样本：可以是组织、细胞培养物等。
2.离心管：用于分离样本中的细胞。
3.离心机：用于离心细胞。
4.细胞裂解液：可以是Trizol、RNAiso等商用试剂，也可以是自制的裂解液。
5.异丙醇：用于沉淀RNA。
6.洗涤液：可以是75%的乙醇、70%的乙醇等。
7.去离子水：用于稀释试剂和溶解RNA。
8.琼脂糖凝胶：用于纯化RNA。
二、提取步骤1.制备样品将细胞样本收集到离心管中，离心机离心10分钟，将上清液倒掉，留下细胞沉淀。
2.细胞裂解加入适量的细胞裂解液，使细胞完全裂解，释放RNA。
3.分离RNA加入等体积的异丙醇，混匀，离心10分钟，收集上清液，其中含有RNA。
4.沉淀RNA将上清液加入等体积的异丙醇，混匀，离心10分钟，收集沉淀，其中富含RNA。
5.洗涤RNA用75%的乙醇洗涤RNA沉淀，去除杂质。
6.溶解RNA用去离子水溶解RNA沉淀，制备1mg/ml的RNA溶液。
7.纯化RNA将RNA溶液加入琼脂糖凝胶管中，离心10分钟，收集上清液，其中含有纯化的RNA。
三、注意事项1.样品的处理要快速，避免RNA被降解。
2.细胞裂解液的选择要根据实验需要进行优化。
3.异丙醇的体积要与上清液相等，否则RNA沉淀不完全。
4.洗涤RNA时要用足够的乙醇，否则杂质无法完全去除。
5.制备RNA溶液时要使用去离子水，避免RNA被污染。
6.琼脂糖凝胶的选择要根据RNA大小和纯度要求进行优化。
7.操作过程中要注意无菌操作，避免RNA被污染。
总之，RNA提取是RNA研究的基础工作，正确的提取步骤和注意事项能够保证RNA的纯度和完整性，为后续实验提供可靠的基础。
RNA提取实验操作步骤、注意事项及问题指南
RNA提取实验操作步骤、注意事项及问题指南RNA提取是一项重要的实验技术，也是分子生物学和基因表达研究的前提之一。
RNA提取的操作步骤、注意事项和可能出现的问题是影响实验结果的关键因素。
本文将介绍RNA提取实验的操作步骤、注意事项和问题指南，以便帮助读者更好地完成RNA提取实验。
RNA提取实验操作步骤1. 样本的准备在实验开始前，需要准备好样本。
样本可以是组织、细胞、菌落等，在RNA提取中通常使用 TRIzol 或 RNeasy 等试剂进行样品裂解和提取。
样本的数量和来源需要根据实验的需要来决定。
2. 细胞裂解样品准备好之后，需要进行细胞裂解，使细胞内部的 RNA 释放出来。
裂解的方法可以是机械裂解、化学裂解或声波裂解等。
3. RNA 的提取和纯化经过细胞裂解后，需要使用 RNA 提取试剂对 RNA 进行提取和纯化。
经过提取和纯化后，可以通过检测 A260/A280 值的比例来确定 RNA 的纯度和浓度。
4. 聚合酶链式反应（PCR）检测经过 RNA 的提取和纯化之后，需要进行 PCR 检测，确定 RNA 是否已经被成功提取和纯化。
PCR 检测需要使用适当的引物和探针，并遵守相应的反应条件和分析方法。
RNA提取实验注意事项1. 样品选择选择合适的样品，保证样品的活性和稳定性。
不同类型的样品需要使用不同的RNA 提取试剂，因此需要选择适当的试剂和方法。
2. 操作规范在 RNA 提取过程中，需要保持操作规范，如穿戴实验手套和实验衣服等，避免 RNA 受到污染。
在实验过程中要注意操作细节，如注射器和离心管应保证干净和无漏，对样品的取用和储存要进行标记和记录。
3. RNA 的质量控制在 RNA 提取的过程中，需要进行质量控制，如测定 RNA 的纯度和浓度等。
在进行下一步操作之前，必须检查 RNA 的质量和质量指标，如 A260/A280 值的比例要在 1.8 ~ 2.0 之间， RNA 的完整性要保证。
RNA抽提详细步骤[修改版]
![RNA抽提详细步骤[修改版]](https://img.taocdn.com/s3/m/4245a51df8c75fbfc67db248.png)
第一篇：RNA抽提详细步骤RNA抽提指南(TRIZOL法) RNA抽提指南(TRIZOL法) 注意事项：* 全程佩戴一次性手套。
皮肤经常带有细菌和霉菌，可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。
培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。
* 使用灭菌的，一次性的塑料器皿和自动吸管抽提RNA，避免使用公共仪器所导致的RNA酶交叉污染。
例如，使用RNA探针的实验室可能用RNA酶A 或T1来降低滤纸上的背景，因而某些非一次性的物品（如自动吸管）可能富含RNA酶。
* 在TRIZOL 中，RNA 是隔离在RNA 酶污染之外的。
而对样品的后续操作会要求用无RNA 酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。
玻璃器皿可以在150°C 的烘箱中烘烤4 小时。
塑料器皿可以在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，用水彻底漂洗干净后高压灭菌备用。
抽提步骤：1．匀浆化作用通过离心来沉淀细胞后，弃上清，用移液管加TRIZOL试剂反复吹打来裂解细胞至均一通亮的液态后，将匀浆样品在15—30°C 条件下孵育5 分钟以使核蛋白体完全分解。
（每5—10×106的动物细胞，植物或酵母菌细胞或每1×107 细菌加1ml的TRIZOL。
在加入TRIZOL前应避免洗涤细胞因为那样会增加mRNA降解的可能性。
）2．分离阶段每1 mlTRIZOL 加0.2 ml 氯仿。
盖紧样品管盖，用手用力摇晃试管15 秒并将其在30°C 下孵育2—3 分钟。
在2—8°C 下以不超过12,000×g 的离心力高速冷冻离心15 分钟。
离心后混合物分成三层：下层红色的苯酚-氯仿层，中间层，上层无色的水样层。
RNA 无一例外地存在于水样层当中。
水样层的容量大约为所加TRIZOL 容量的60% 3．RNA的沉淀将水样层转移到一干净的试管中，通过将水样层和异丙醇混合来沉淀RNA。
最初均化时的每1 mlTRIZOL 对应0.5 ml 异丙醇。
提取植物rna的步骤及原理
提取植物rna的步骤及原理答案：一、实验目的通过本实验学习从植物组织中提取RNA的方法二、实验原理RNA是一类极易降解的分子，要得到完整的RNA，必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。
高浓度强变性剂异硫氰酸胍，可溶解蛋白质，破坏细胞结构，使核蛋白与核酸分离，失活RNA酶，所以RNA从细胞中释放出来时不被降解。
细胞裂解后，除了RNA，还有DNA、蛋白质和细胞碎片，通过酚、氯仿等有机溶剂处理得到纯化、均一的总RNA。
三、仪器、药品与试剂配方(一) 仪器1．低温离心机2．分光光度计3．琼脂糖胶电泳系统，用前先用1% Na OH溶液浸泡过夜，之后再用DEPC水浸泡冲洗。
4．高压灭菌锅5．研钵、剪刀、一次性手套等(二) 药品1.焦碳酸二乙酯(DEPC)2.吗啉代丙烷磺酸(MOPS)3.异硫氰酸胍4.醋酸钠(NaAc)5.氯仿6.苯酚7.甲醛8.乙醇9.乙二胺四乙酸(EDTA)10.琼脂糖11.异丙醇(三) 试剂配方1．0.1% DEPC水0.1 ml DEPC 加入100 ml三蒸水中，振摇过夜，再湿热灭菌。
2.2 mol/L NaAc、0.5 mol/L EDTA、4 mol/L异硫氰酸胍、4 mol/L LiCl等均用DEPC 水配制。
3.5ΧMOPS 电泳缓冲液(pH 7.0)MOPS 0.1 mol/LNaAc 40 mmol/LEDTA 5 mmol/L四、实验步骤（一）总RNA的提取（方案一）1.实验前10天左右播种水稻种子，在3-4叶期，剪取1.2 g幼叶。
放入研钵，在液氮中研磨成粉末状，移入10 mL离心管。
加入4 mol/L异硫氰酸胍4 mL苯酚3 mL2 mol/L NaAc (pH 4.8) 0.3 mL氯仿0.6 mL混匀，冰浴放置30 min。
2.4℃，8000 r/min，离心13 min。
3.弃沉淀，取上清至另一干净无菌离心管中。
4.加入2倍体积无水乙醇，-70℃，0.5 h。
全血提取rna步骤及注意事项
全血提取rna步骤及注意事项全血提取RNA步骤及注意事项引言：RNA是一种重要的生物大分子，它在细胞内参与了许多关键的生物过程。
全血提取RNA是一种常用的实验方法，用于获取全血样本中的RNA，并进一步应用于分子生物学研究。
本文将介绍全血提取RNA的步骤及注意事项。
一、全血提取RNA的步骤：1. 样本采集：a. 使用无菌技术，采集全血样本，并将其转移到无菌离心管中；b. 保持样本无菌，避免污染。
2. 血浆分离：a. 将全血样本离心，将血浆和混浊的细胞沉淀分离开；b. 小心地将血浆转移到新的离心管中。
3. 细胞沉淀处理：a. 将细胞沉淀洗涤，去除血浆中的残留细胞；b. 加入适量的PBS缓冲液，轻轻混合，离心沉淀；c. 去除上清液，获得纯净的细胞沉淀。
4. 细胞破碎：a. 加入适量的细胞破碎缓冲液，使细胞完全破碎释放RNA；b. 使用离心机离心，去除细胞碎片。
5. RNA纯化：a. 加入适量的RNA纯化试剂，使RNA与其他杂质分离；b. 使用离心机离心，将RNA沉淀下来；c. 去除上清液，使用酒精洗涤RNA沉淀；d. 最后用RNase-free水溶解RNA沉淀。
6. RNA质量检测：a. 使用比色计或生物分析仪检测RNA的浓度和纯度；b. 确保RNA质量良好，无降解和污染。
二、全血提取RNA的注意事项：1. 样本处理：a. 采集全血样本时，注意样本的无菌和无污染；b. 在处理全血样本时，尽量避免样本的降解和污染。
2. 实验操作：a. 在操作过程中，使用无菌技术，保持实验环境的清洁；b. 使用RNase-free材料和试剂，避免RNA的降解；c. 注意各步骤的离心条件和时间，确保样本的分离和沉淀效果。
3. RNA质量检测：a. 使用合适的方法和仪器，准确测量RNA的浓度和纯度；b. 检测RNA的完整性，确保RNA未受到降解。
4. RNA保存：a. 在提取完RNA后，及时将其保存在-80℃的冰箱中，避免RNA的降解和损失；b. 使用RNase-free管和RNase-free手套进行保存。
RNA提取准备工作及注意事项
RNA提取准备工作及注意事项一、准备工作：1.设计实验方案：根据研究对象的不同，设计合适的实验方案，例如提取样品的数量、提取方法的选择等。
2.购买试剂和设备：准备好所需的试剂和设备，如RNA提取试剂盒、离心机、冷冻离心管等。
3.设置实验环境：确保提取RNA的工作环境干净、无菌，避免外部污染对实验结果的影响。
4.消毒操作台、仪器和试剂：使用漂白水或酒精将操作台、仪器和试剂进行消毒，以保证实验的无菌性。
5. 准备辅助试剂：根据实验方案的需要，准备好辅助试剂，如裂解缓冲液、RNase抑制剂、维生素C等。
二、注意事项：1. 避免RNA的降解：RNA容易受到核酸酶的降解，因此在处理样品时需注意使用RNase抑制剂，并避免RNA接触空气、水等容易污染的环境。
2.样品的采集和储存：样品的采集和储存条件对RNA的质量有很大影响，应注意快速采集样品并冷冻保存，避免样品的长时间存放和频繁冻融。
3. 避免污染：在整个提取过程中，应注意避免污染，使用专门的无菌、无DNase的耗材，并严格遵守实验室操作规范。
4.快速操作：RNA提取过程中，所有步骤都要迅速进行，尽量减少RNA长时间暴露在空气中，避免RNA的降解和污染。
5.质控检测：在提取过程中，可通过紫外吸收检测RNA的浓度和完整性，也可用琼脂糖凝胶电泳检测RNA的降解情况。
三、RNA提取的流程：1.样品裂解：将样品经过细胞裂解液处理，使DNA和RNA被释放出来。
2.分离RNA：经过离心将细胞碎片、核糖体、DNA等物质和RNA分离开来。
3.去除DNA：通过DNA酶的作用将DNA分解掉，使提取的物质中只含有RNA。
4. RNA稳定化：加入RNase抑制剂，防止RNA被降解。
5.沉淀RNA：将RNA进行萃取，并用酒精沉淀将RNA从提取溶液中分离出来。
6. 清洗和溶解：通过洗涤剂和酒精去除杂质，并用RNase-free水将RNA溶解。
7.浓缩RNA：将溶解的RNA进行浓缩，以便后续实验使用。
RNA提取步骤及注意事项
RNA分离纯化的原理、提取步骤及注意事项一、分离纯化的基本原理研究基因的表达和调控时，常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA。
RNA质量的高低常常影响cDNA库，RT-PCR和Northern Blot等分子生物学的成败。
Trizol是一种新型总RNA提取试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。
二、需自备的试剂和材料无水乙醇、氯仿、1.5mlEP管（无RNase）、枪头（无RNase）、异丙醇、水（DEPC处理）低温离心机三、提取步骤1、从组织中提取总RNA①液氮研磨。
组织块直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次，按50-100mg组织/mlTrizol加入Trizol，转入离心管进行第二步操作。
②匀浆。
组织样品按50-100mg组织/mlTrizol加入Trizol，另外，组织体积不能超过Trizol体积的10%，否则匀浆效果会不好，用电动匀浆器充分匀浆约需1-2分钟。
2、从细胞中提取总RNA①培养贴壁细胞：不需消化，可直接用Trizol进行消化、裂解，操作步骤：吸尽培养液，用PBS洗涤细胞2-3次，按10cm2/mlTrizol比例加入Trizol，吹打，使细胞充分裂解。
②对于悬浮细胞，可直接收集、裂解，每mlTrizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞，或107细菌细胞。
操作步骤：收集细胞，600g离心5min，弃上清，PBS洗涤细胞2-3次。
③细胞或组织加入Trizol后，室温放置5min，使其充分裂解。
（此时可放入-70℃长期保存。
④12000rpm离心5min，弃沉淀，上清吸入到另一个RNase-free的EP管中，按200μL氯仿/mlTrizol加入氯仿，振荡混匀后室温放置15min。
（禁用涡旋振荡器，以免基因组DNA断裂）。
⑤4℃，12000rpm离心15min，吸取上层水相，至另一个离心管中（RNase-free）（千万不要吸取中间界面；若同时提取DNA和蛋白质，则保留下层酚相保存于4℃冰箱，如只提取RNA，则弃下层酚相。
提取rna的注意事项
提取rna的注意事项
提取RNA的注意事项
RNA提取是分子生物学研究中的重要步骤之一，其成功与否直接影响后续实验结果。
在进行RNA提取时，需要注意以下事项：
一、样品处理
1. 样品应该尽量新鲜，避免长时间保存或冷冻，以免RNA降解。
2. 样品收集前应该仔细消毒，并严格按照操作规程进行处理。
3. 不同样品类型（如组织、细胞、血液等）的处理方法不同，需要根据具体情况进行选择。
二、试剂准备
1. 所有试剂都应该严格按照说明书中的要求进行配制和保存。
2. 使用前应该检查试剂是否过期或出现异常情况。
三、操作步骤
1. RNA提取步骤中需要注意无菌操作，避免污染。
2. 操作过程中需要避免机械振动和温度变化对RNA产生影响。
3. RNA纯化过程中需要使用RNase-free试剂和器材，以避免RNase 污染对RNA降解的影响。
4. RNA纯化过程中需要保持低温环境，以避免RNA降解。
四、常见问题及解决方法
1. RNA提取过程中出现DNA污染。
此时可以使用DNase I酶进行去除。
2. RNA提取过程中出现RNase污染。
此时可以使用RNase A酶进行去除，并在后续操作中严格避免RNase污染。
3. RNA提取后纯化效果不佳。
此时可以重新进行RNA提取，或者对纯化步骤进行优化。
综上所述，RNA提取是一项重要的实验步骤，需要在样品处理、试剂
准备、操作步骤等方面严格注意，以保证RNA的质量和纯度。
同时，需要针对常见问题及时采取相应措施解决。
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RNA提取实验操作步骤、注意事项及问题指南准备试剂：氯仿，异丙醇，75℅乙醇，无RNase的水或0.5℅SDS（溶液均需用DEPC处理过的水配制）。
操作步骤：1. 匀浆处理a. 植物组织:以叶片RNA提取为例.取新鲜叶片在液氮中充分研磨或将叶片剪碎后直接在Trizol中研磨,研磨要迅速,最好不要超过1min.，大约100mg 叶片使用1 ml Trizol.b. 动物组织:以鼠肝脏RNA提取为例.取新鲜或-70℃冻存组织,每50-100mg组织加1ml Trizol,用匀浆仪进行匀浆处理.样品体积一般不要超过Trizol体积的10%.c. 单层培养细胞.直接在培养板中加入Trizol裂解细胞,每10cm2面积加1ml Trizol.用取样器吹打几次.注意:Trizol加量根据培养板面积决定,不是由细胞数决定.如果Trizol加量不足,可能导致提取的RNA中有DNA污染.d.细胞悬液:离心取细胞，每5-10×106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml Trizol。
加Trizol 前不要洗涤细胞，以免降解mRNA。
一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪处理。
e.血液处理:直接取新鲜的血液,加入3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10min，10 000rpm 离心1min。
弃上清，收集白细胞沉淀。
每1ml血液收集的白细胞沉淀中加入1ml Trizol。
2. 将匀浆样品在15-30℃放置5mim，使得核酸蛋白复合物完全分离。
3. 可选步骤:4 ℃10 000rpm离心10min，取上清。
如果样品中含有较多蛋白、脂肪、多糖或肌肉、植物结节部分等，可离心去除。
离心得到的沉淀中包括细胞外膜、多糖、高分子量DNA，上清中含有RNA。
处理脂肪组织样品时，上层是大量油脂，应除去。
取澄清的匀浆溶液进行下一步操作。
4. 每使用1ml Trizol加0.2ml氯仿，盖好管盖，剧烈震荡15s，室温放置3min。
如不能涡旋混匀，可手动颠倒混匀2min代替。
5. 4 ℃10 000rpm离心10-15min，样品会分成三层：红色的有机相，中间层和上层无色的水相，RNA主要在水相中，把水相（约600ul，约为所用Trizol试剂的60%）转移到新管中。
（如要分离蛋白质和DNA，可保留黄色的有机相）6. 在得到的水相溶液中加入等体积的异丙醇，混匀，-20℃放置20-30min。
植物或动物组织RNA提取中，容易沉淀出大量的蛋白等污染物，导致电泳检测时看不到RNA。
可以按以下步骤操作减轻污染：在上清中加入1/2体积的异丙醇，1/2体积的RNA助沉剂，然后进行以下操作。
7. 4 ℃10 000rpm离心10min，去上清。
离心前RNA沉淀经常是看不见的，离心后在管侧和管底形成胶状沉淀。
8. 加入1ml 75%乙醇（DEPC水处理过的水配制）洗涤沉淀。
每使用1ml Trizol至少加1ml 乙醇。
9. 4 ℃10 000rpm离心2min，弃上清；短暂快速离心，用移液器小心吸弃上清，注意不要吸弃沉淀。
10. 室温放置晾干（不要晾得过干，RNA完全干燥后会很难溶解，大约晾干2-3min左右即可）。
加入适量DEPC水（根据实验需要，可加30-100ul水）或0.5%SDS，用枪头吸打几次，充分溶解RNA。
如RNA用于酶切反应，勿使用SDS溶液。
RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解，-70℃保存。
注意事项：1. 从少量样品中提取RNA(1-10mg组织或102-104细胞) ：加800ul Trizol，样品裂解后加氯仿，分层，沉淀RNA前，加5-10ug RNase-free糖原，糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml时不会影响反转录cDNA第一链的合成，也不影响PCR反应。
2. 匀浆后，加氯仿前，样品可在-70 ℃放置一个月以上：RNA沉淀可以保存在75%酒精中，2-8 ℃一个星期或-20 ℃一年以上。
如果要长期保存，RNA可以溶解于100%去离子甲酰胺中，-70 ℃长期保存。
预防RNase污染，应注意以下几个方面：1. 经常更换新手套。
因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase污染。
2. 使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
3. RNA在Trizol试剂中不会被RNase降解。
但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。
玻璃器皿可在150 ℃烘烤4h，塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10min，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4. 配制溶液应使用无RNase的水（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至中浓度0.1%(v/v)，放置过夜，高压灭菌。
注：DEPC有致癌之嫌，需小心操作）。
不同组织或细胞RNA提取预期得率植物叶片100-200ug/g叶片动物组织200-400ug/g肝脏组织动植物培养细胞5-10ug/106细胞大肠杆菌2-10ug/mlDH5α过夜菌血液3-5ug/ml人全血问题指南：低得率A. 样品裂解或匀浆处理不彻底B. 最后得到的RNA沉淀未完全溶解A260/A280<1.65A. 检测吸光度时，RNA样品不是溶于TE，而是溶于水。
低离子浓度和低pH条件下A280会较高。
B. 样品匀浆时加的试剂量太少。
C. 匀浆后样品未在室温放置5min。
D. 水相中混有有机相。
E. 最后得到的RNA沉淀未完全溶解。
RNA降解A. 组织取出后没有马上处理或冷冻。
B. 样品或提取的RNA沉淀保存于-5~-20℃，未在-60~-70℃保存。
C. 细胞在胰蛋白酶处理时被破坏。
D. 溶液或离心管未经RNase去除处理。
E. 电泳时使用的甲酰胺pH低于3.5。
DNA污染A. 样品匀浆时加的试剂体积太少。
B. 样品中含有组织溶剂（如乙醇，DMSO等），强缓冲液或碱性溶液。
蛋白和多糖污染A. 样品中蛋白、多糖含量高。
B. 样品量太大。
C. 水相中混有有机相。
D. 第6步中加入RNA助沉剂可以帮助去除这些污染。
RNA提取一般步骤总结RNA提取原理：通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA，再经过沉淀，洗涤，晾干，最后溶解。
但是由于RNA酶无处不在，随时可能将RNA降解，所以实验中有很多地方需要注意，稍有疏忽就会前功尽弃。
RNA提取的一般步骤所有RNA的提取过程中都有五个关键点，即：样品细胞或组织的有效破碎；有效地使核蛋白复合体变性；对内源RNA酶的有效抑制；有效地将RNA从DNA 和蛋白混合物中分离；对于多糖含量高的样品还牵涉到多糖杂质的有效除去。
但其中最关键的是抑制ＲＮＡ酶活性。
RNA的提取目前阶段主要可采用两种途径:提取总核酸，再用氯化锂将RNA沉淀出来；直接在酸性条件下抽提，酸性下DNA与蛋白质进入有机相而RNA留在水相。
第一种提取方法将导致小分子量RNA的丢失，目前该方法的使用频率已很低。
实验步骤：破碎组织→分离RNA→沉淀RNA→洗涤RNA→融解RNA→保存RNA。
1、破碎组织和灭活RNA酶可以同步进行，可以用盐酸胍、硫氰酸胍、NP-40、SDS、蛋白酶K等破碎组织，加入β-ME可以抑制RNA酶活性。
2、分离RNA一般用酚、氯仿等有机溶剂，加入少量异戊醇，经过此步，离心，RNA一般分布于上层，与蛋白层分开。
3、沉淀RNA一般用乙醇、3M NaAc（pH-5.2）或异丙醇。
4、洗涤RNA使用70％乙醇洗涤，有时，为避免RNA被洗掉，此步可以省掉，洗涤之后可以晾干或者烤干乙醇，但是不能过于干燥，否则不易溶解。
5、融解RNA一般使用TE。
6、保存RNA应该尽量低温。
为了防止痕量RNase的污染，从富含RNase的样品（如胰脏、肝脏）中分离到的RNA需要贮存在甲醛中以保存高质量的RNA，对于长期贮存更是如此。
从大鼠肝脏中提取的RNA，在水中贮存一个星期就基本降解了，而从大鼠脾脏中提取的RNA，在水中保存3年仍保持稳定。
另外，长度大于4kb的转录本对于痕量RNase的降解比小转录本更敏感。
为了增加贮存RNA样品的稳定性，可以将RNA溶解在去离子的甲酰胺中，存于- 70℃。
用于保存RNA的甲酰胺一定不能含有降解RNA的杂物。
来源于胰脏的RNA至少可以在甲酰胺中保存一年。
当准备使用RNA时，可以使用下列方法沉淀RNA：加入NaAc至0.3M，12,000×g离心5分钟。
氯化锂法提取总RNA：本方法用高浓度尿素变性蛋白并抑制RNA酶，用氯化锂选择沉淀RNA，其特别适合于从大量样品中提取少量组织RNA，具有快速简洁的长处，但也存在少量DNA的污染及RNA得率不高,小RNA丢失的缺陷。
试验试剂：1、氯化锂/尿素溶液【氯化锂126g(3M) 尿素、360g(6M) 加水至1L，过滤灭菌】2、悬浮液【10mM? Tris-HCL (pH7.6) ,1mM? EDTA (pH8,0) ,0.5%SDS】试验步骤：1、对于大量组织或细胞，则每克组织或细胞加入5－10ml氯化锂－尿素溶液，匀桨器高速匀桨2分钟；对于少量细胞（107个细胞/ml），则每克组织或细胞加入0.5ml氯化锂－尿素溶液手工匀桨，并转移至Eppendof管中。
2、匀桨液在0－4℃放置4小时后，12000g离心30分钟。
3、取沉淀，加入原匀桨液1/2体积的氯化锂－尿素溶液，重复步骤2。
4、沉淀用原匀桨液1/2体积的氯化锂－尿素溶液复溶后，加入等体积酚/氯仿/异戊醇在室温放置15－30分钟并不时摇动混匀，4000g离心5分钟。
5、取上层水相，加1/10倍体积的3M乙酸钠（pH5.2）及2倍体积的乙醇，－20℃放置1小时，5000g离心。
6、70％乙醇洗沉淀一次。
真空干燥。
7、RNA溶解液溶解沉淀，得RNA，分装，于－70℃保存。
蛋白酶－热酚法－本方法适合于病毒RNA的提取试验试剂：1、蛋白酶K（终浓度50ug/ml）2、2×缓冲液：1%SDS 20mMTris-HCL (pH 7.6)? 0.2MnaCL试验步骤：1、提纯病毒液中加入等体积缓冲液、蛋白酶K,37℃40-50分钟。
2、加入等体积65℃预热的酚溶液，轻徭,在65℃保温5分钟后再轻徭。
3、离心，取上清，氯仿抽提一次。
4、取上层水相，加1/10倍体积的3M乙酸钠（pH5.2）及2倍体积的乙醇，－20℃放置1小时，5000g离心(10000g,10min)。
5、70％乙醇洗沉淀一次。
真空干燥。
6、RNA溶解液溶解沉淀，得RNA，分装，于－70℃保存。
RNA提取实验经验心得总结一：实验的准备实验之前必须先准备好相关的试剂和实验用品．试剂：１.TRIZOL,一步法提取ＲＮＡ用的，最好是INVITROGENE的，１００ml850RMB,不过也有国产的，便宜些．这个试剂是非常关键的，也是不能省的，经常有很多朋友不想买这个，嫌贵，个人感觉是非买不可，不然用其他办法自己配的话也不便宜，而且配的过程中很毒．2.异丙醇，无水乙醇，三氯甲烷（氯仿），ＤＥＰＣ３.逆转录酶等．一般如果做的次数不是很多的话可以买试剂盒的，里面什么都有，ＰＲＯＭＥＧＡ的也不是很贵，记得是３０次的６００多．但是如果实验室做得比较多的话，还是自己分开买的比较好．Ｍ－ＭＬＶ逆转录酶个人觉得ＰＲＯＭＥＧＡ的最好，而且不贵，其他公司我用得也不多，反正一直用ＰＲＯＭＥＧＡ，还有ＤＮＴＰ，oligod(T)n,RNA酶抑制剂，除了逆转录酶买ＰＲＯＭＥＧＡ的，其他的几样我都是买的ＴＡＫＡＲＡ的，因为promega的其他几样都很贵，这样配起来用一点也不比原装的差．当然实验室比较富裕的也可以买好的，不过话说回来，咱们花的经费大多数还是民脂民膏，这些不太关键的地方省着点比较好（我是不是太罗嗦了！）４.用具．各种大小的枪头和ＥＰ管。