桦褐孔菌中羊毛脂烷型三萜系列化合物的探讨_麦勤勤

ＡＶＡＮＣＥ ４００Ｍ 型 核 磁 共 振 仪 （１Ｈ－ＮＭＲ： ｓ）为 ２６－ＣＨ３和 ２７－ＣＨ３ 两 个 烯 丙 位 的 甲 基 峰。 另
３００ ＭＨｚ，１３Ｃ－ＮＭＲ：７５ ＭＨｚ，德 国 Ｂｒｕｋｅｒ公 司）； 外 可见３．２６（１Ｈ，ｄｄ ，Ｊ ＝４．８，１１．６ Ｈｚ，Ｈ－３），５．１１
了其色谱行为、理化 性 质、波 谱 数 据 等 诸 方 面 的 一 些 （３Ｈ，ｓ），０．８９（３Ｈ，ｓ），０．９９（３Ｈ，ｓ），１．０１（３Ｈ，ｓ）
规律。
５个角甲基的尖峰，这是四环三萜类化 合 物 的 典 型 特
１ 仪器与试剂
征；０．９３（３Ｈ，ｄ ，Ｊ ＝６．４Ｈｚ）为２１－ＣＨ３峰，被２０－ 位 质子偶合而裂分 为 双 峰，１．６２（３Ｈ，ｓ）和 １．７０（３Ｈ，
５ 个 角 甲 基 的 尖 峰；０．９１（３Ｈ，ｄ ，Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ）为
２ 提取及分离
２１－ＣＨ３ 峰，１．６２（３Ｈ，ｂｒｓ ）和 １．７１（３Ｈ，ｂｒｓ ）为 ２６－ ＣＨ３ 和２７－ＣＨ３ 两个烯丙位的甲基峰，因 发 生 烯 丙 偶
取桦褐孔菌干燥 子 实 体 粉 末 １ ０００ｇ，用 体 积 分 合而使 峰 展 宽。 另 外 可 见 ３．１９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ ＝４．６，
中 图 分 类 号 ：Ｑ９３６ 文 献 标 识 码 ：Ａ
文 章 编 号 ：１６７２－７６０６（２０１３）０２－０１１２－０５
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ ｌａｎｏｓｔａｎｅ ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍＩｎｏｎｏｔｕｓ ｏｂｌｉｑｕｕｓ
ＭＡＩ Ｑｉｎｑｉｎ，ＣＨＥＮ Ｙｉｎｓｈｅｎｇ，ＣＨＥＮＧ Ｌｉｈｏｎｇ，ＳＨＡＯ Ｌｉｌｉ， ＷＵ Ｈｕａｆｅｎ，ＳＵＮ Ｍｉｎｇｌｉ， ＷＵ Ｘｉａｏｈｏｎｇ
８．７ｇ。取乙酸乙酯萃取物１０ｇ，进行硅胶柱层析，用 ３．３ 化合物３
石 油 醚 － 乙 酸 乙 酯 （１００∶０→０∶１００）梯 度 洗 脱 ，得 到
白色 针 晶 （ＭｅＯＨ），熔 点 １４５～１４６ ℃。１ Ｈ－ＮＭＲ
化合物１（３７ｍｇ）和７个馏分 Ｆｒ．１～Ｆｒ．７。 将其中 （ＣＤＣｌ３）：在高场区可见δ０．６９（３Ｈ，ｓ），０．８１（３Ｈ，ｓ），
广泛生物活性。药效物质基础研究 发 ［５］ 现，其主 要 有 效成分为四环三萜类化合物，并有报道 对 ［６］ 其中 三 萜 进行生物转化的研究。
桦褐孔菌中羊毛脂烷型三萜类化合物大多数具 有同一结构的母核，即 羊 毛 甾 母 核，相 同 的 母 核 决 定 了 它 们 具 有 许 多 的 相 同 之 处 ，而 不 同 的 取 代 基 又 使 它 们呈现出不同的性质。我们的实验对桦褐孔菌中的
数为９５％乙醇回 流 提 取 ３ 次，每 次 １ｈ，合 并 ３ 次 提 ６．８ Ｈｚ，Ｈ－３），３．６３（１Ｈ，ｍ ，Ｈ－２１），５．１６（１Ｈ，ｔ，
取液，减压回收溶剂后得乙醇提取物５６ｇ。用水将乙 Ｊ ＝６．８，７．０ Ｈｚ，Ｈ－２４）。１３Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７８．
醇提取物均匀分散 后，依 次 用 石 油 醚、乙 酸 乙 酯 和 正 ８３为 Ｃ－３ 信 号，７３．４４ 为 侧 链 上 与 －ＯＨ相 连 的 Ｃ－２１
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Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ （Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ） Ｍａｙ ２０１３ Ｖｏｌ．３２ Ｎｏ．２
桦褐孔菌中羊毛脂烷型三萜系列化合物的探讨
麦勤勤，陈寅生，程丽红，邵丽丽，吴花粉，孙明丽，武小红
（河南大学 药学院，河南 开封 ４７５００４）
摘 要：目的 研究桦褐孔菌中羊毛脂烷型三萜类化学成分。方法 采用体积分数 为 ９５％ 乙 醇 回 流 提 取，并 依 次 用石油醚、乙 酸 乙 酯、正 丁 醇 萃 取；将 乙 酸 乙 酯 萃 取 物 分 别 采 用 硅 胶 柱 色 谱、ＯＤＳ 开 放 柱 色 谱、Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ－２０ 柱 色谱、半制备 ＨＰＬＣ 进 行 化 学 成 分 的 分 离，并 根 据 理 化 性 质 及１ Ｈ－ＮＭＲ、１３ Ｃ－ＮＭＲ、ＤＥＰＴ、ＨＳＱＣ、ＨＭＢＣ、ＨＨＣＯ－ ＳＹ、ＮＯＥＳＹ 等波谱数据鉴定化合物结构。结果 从 桦 褐 孔 菌 乙 酸 乙 酯 萃 取 物 中 分 离 得 到 了 ６ 个 化 合 物，它 们 的 结构分别鉴 定 为 羊 毛 甾 醇 （１）、ｉｎｏｔｏｄｉｏｌ（２）、３β－ｈｙｄｒｏｘｙ－ｌａｎｏｓｔａ－８，２４－ｄｉｅｎｅ－２１－ａｌ（３）、ｉｎｏｎｏｔｓｕｏｘｉｄｅ Ａ（４）、ｉｎｏｎｏｔ－ ｓｕｏｘｉｄｅ Ｂ（５）和ｔｒａｍｅｔｅｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ（６）。 结 论 分 析 总 结 了 ６ 个 羊 毛 脂 烷 型 三 萜 类 同 系 物 的 色 谱 行 为 、理 化 性 质 和 波 谱数据等方面的规律，并首次报道化合物ｉｎｏｎｏｔｓｕｏｘｉｄｅ Ａ 和ｉｎｏｎｏｔｓｕｏｘｉｄｅ Ｂ 的 ＤＥＰＴ 和 ＨＳＱＣ 谱。 关 键 词 ：桦 褐 孔 菌 ；三 萜 ；化 学 成 分
桦褐孔 菌 （Ｉｎｏｎｏｔｕｓ ｏｂｌｉｑｕｕｓ ）为 多 孔 菌 科 的 药 用真菌，分布 于 北 半 球 ４５°～５０° 的 地 区。 在 我 国 的 黑龙江、吉林两省资 源 较 为 丰 富，民 间 用 于 治 疗 一 些 恶性 肿 瘤 。 ［１］ 药 理 实 验［２－４］表 明，桦 褐 孔 菌 能 抑 制 ＨＴＣ 和 ＺＨＣ 肝 癌 细 胞、瓦 克 癌 肉 瘤 Ｗ２５６ 细 胞、人 ＭＣＦ－７乳腺癌细胞、白血病 Ｐ３８８细胞等多种癌细胞 的生长，同时桦褐孔 菌 还 具 有 抗 病 毒、抗 炎 及 保 肝 等
收 稿 日 期 ：２０１３－０３－０５ 作 者 简 介 ：麦 勤 勤 （１９８９－ ），女 ，河 南 洛 阳 人 ，硕 士 研 究 生 ，从 事 天 然 产 物 药 效 物 质 基 础 的 研 究 工 作 。
河南大学学报 （医学Biblioteka ） ２０１３年５月 第３２卷 第２期
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羊毛脂烷型三萜系列化合物进行了分离制备，并总结 ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：在 高 场 区 可 见 δ０．７０（３Ｈ，ｓ），０．８２
Ｅｓｑｕｉｒｅ ＬＣ 质谱仪（德国 Ｂｒｕｋｅｒ公 司）；ＸＴ６ 显 微 熔 （１Ｈ，ｔ，Ｊ ＝１．２，６．４ Ｈｚ）则 是 ２４ 位 双 键 上 的 质 子
点测定仪（北京市科技 电 光 仪 器 厂）；Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ 型 信 号。１３Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７９．００７ 为 Ｃ－３ 信 号，
层预制板（Ｍｅｒｃｋ公司）；柱色谱用硅胶３００～４００ 目、 ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：在 高 场 区 可 见 δ０．６９（３Ｈ，ｓ），０．７１
薄层层析 用 硅 胶 ＧＦ２５４（青 岛 海 洋 化 工 厂 ）；实 验 所 （３Ｈ，ｓ），０．８４（３Ｈ，ｓ），０．９５（３Ｈ，ｓ），０．９６（３Ｈ，ｓ）
用其他化学试剂均为分析纯。
丁醇萃取，萃取用溶剂与水层体积比均 为 １∶１，各 萃 信号，１３４．８７、１３４．５１、１３４．１１、１２１．３６ 存 在 ４ 个 烯 碳
取４次，分别得到石油醚萃取物２．３ｇ、乙酸乙酯萃取 信号，其 １３Ｃ－ＮＭＲ 数据与文 献 报 ［８］ 道 的ｉｎｏｔｏｄｉｏｌ对
物 ２６．８ ｇ、正 丁 醇 萃 取 物 １７．０ ｇ 和 水 层 残 留 物 照一致。故鉴定化合物２为ｉｎｏｔｏｄｉｏｌ。
ＯＤＳ开放柱层析，用甲 醇 － 水（８５％ →１００％）梯 度 洗 是２４位双键上的质子信号，９．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ ＝５．７ Ｈｚ）
脱，得到化合 物 ３（５６ ｍｇ）。 将 Ｆｒ．３ 馏 分 进 行 硅 胶 则是２０位上的质子信号。１３Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７８．９６为
柱层析，用氯仿－丙酮（３０∶１→８∶１）梯度洗脱，得到 Ｃ－３信号，１３４．７２、１３３．９３、１３２．４６、１２３．５４ 存 在 ４ 个 烯
５个馏分Ｆｒ．３－１～Ｆｒ．３－５，继而将 Ｆｒ．３－４ 进 行 半 制 碳信号，２０６．２９为 与 Ｃ－２０ 相 连 的 －ＣＨＯ 上 的 碳 信 号，
Ｆｒ．１馏分 进 行 硅 胶 柱 层 析，用 石 油 醚 － 乙 酸 乙 酯 ０．９１（３Ｈ，ｓ），０．９７（３Ｈ，ｓ），１．００（３Ｈ，ｓ）５ 个 角 甲 基
（１０∶１→３∶１）梯度洗脱，得到化合物２（１３４ｍｇ）和５ 的尖峰；１．５７（３Ｈ，ｓ）和１．６８（３Ｈ，ｓ）为２６－ＣＨ３ 和２７－
个馏分 Ｆｒ．１－１～Ｆｒ．１－５。将其 中 Ｆｒ．１－２ 馏 分 进 行 ＣＨ３ 两个烯丙位的甲基峰。５．０６（１Ｈ，ｔ，Ｊ ＝７．１ Ｈｚ）
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｈｅｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋａｉｆｅｎｇ，Ｈｅｎａｎ ４７５００４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｌａｎｏｓｔａｎｅ ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｃ ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｉｎｏｎｏｔｕｓ ｏｂｌｉｑｕｕｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｐｏｗｅｒｅｄ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ９５％ ＥｔＯＨ ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｗａｓ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｂｙ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ，ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ ａｎｄ ｎ－ ｂｕｔａｎｏｌ ｓｕｃｃｅｓｓｉｖｅｌｙ ｔｏ ４ｐａｒｔｓ．Ｔｈｅ ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｗａｓ ｆｕｔｈｅｒ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｂｙ ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ，ＯＤＳ，ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ－２０ ａｎｄ ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．Ｔｈｅｉｒ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ａｎｄ ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ（１Ｈ－ＮＭＲ，１３Ｃ－ＮＭＲ，ＤＥＰＴ，ＨＳＱＣ，ＨＭＢＣ，ＨＨＣＯＳＹ ａｎｄ ＮＯＥＳＹ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ ６ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ Ｉ．ｏｂｌｉｑｕｕｓ．Ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｓ ｌａｎｏｓｔｅｒｏｌ（１），ｉｎｏｔｏｄｉｏｌ（２），３β－ ｈｙｄｒｏｘｙ－ｌａｎｏｓｔａ－８，２４－ｄｉｅｎｅ－２１－ａｌ（３），ｉｎｏｎｏｔｓｕｏｘｉｄｅ Ａ （４ ），ｉｎｏｎｏｔｓｕｏｘｉｄｅ Ｂ （５ ）ａｎｄ ｔｒａｍｅｔｅｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ （６） ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃａｌ ｔｒａｉｔ，ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ａｎｄ ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃａｌ ｐａｔｔｅｒｎ ｏｆ ｔｈｅ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｓｉｓｅｄ．ＤＥＰＴ ａｎｄ ＨＳＱＣ ｏｆ ｉｎｏｎｏｔｓｕｏｘｉｄｅ Ａ（４）ａｎｄ ｉｎｏｎｏｔｓｕｏｘｉｄｅ Ｂ（５）ｗｅｒｅ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｔｉｍｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｉｎｏｎｏｔｕｓ ｏｂｌｉｑｕｕｓ ；ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ；ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ
１０μｍ），（大连 依 利 特 分 析 仪 器 厂）；色 谱 甲 醇 （天 津 致。故鉴定化合物１为羊毛甾醇。 市四 友 精 细 化 学 品 有 限 公 司 ）；Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ－２０ ３．２ 化合物２
（Ｐｈａｒｍａｃｉａ 公司）；Ｒｐ－１８柱层析材料、Ｒｐ－１８高效薄
白色 针 晶 （ＭｅＯＨ），熔 点 １８２．１～１８２．９ ℃。１ Ｈ－
ＨＰＬＣ 仪（美国 Ａｇｉｌｅｎｔ 公 司 ）；半 制 备 ＨＰＬＣ 色 谱 １３４．３８、１３４．３８、１３０．９７、１２５．２５ 存 在 ４ 个 烯 碳 信 号，
柱 为 Ｓｉｎｏｃｈｒｏｍ ＯＤＳ－ＢＰ （１０ ｍｍ × ２５０ ｍｍ， 其 １３Ｃ－ＮＭＲ数 据 与 文 献 报 ［７］ 道 的 羊 毛 甾 醇 对 照 一