嵌合抗原受体修饰T细胞(CAR-T细胞)制剂制备质量管理规范(征求意见稿)

嵌合抗原受体修饰T细胞（CAR-T细胞）制剂制备质量管理规范（征求意见稿）

中国医药生物技术协会发布

目次

前言II

引言III

1 范围1

2 术语和定义1

3 基本要求2

3.1 基本原则2

3.2 人员的要求2

3.3 场所和设施2

3.4 物料2

4 载体制备3

4.1 质粒制备3

4.2 非病毒载体制备的基本要求3

4.3 病毒载体制备的基本要求3

5 细胞制备过程中的要求3

5.1 样本的要求3

5.2T细胞的采集和分离4

5.3 操作的要求4

5.4 细胞转导及扩增的要求4

5.5 安全性及有效性检测5

5.6CAR-T细胞制剂的质量要求5

5.7CAR-T细胞冻存、运输与复苏的要求5

6CAR-T制剂的质量控制与放行5

7 追溯5

8 保密原则6

9 附则6

参考文献7

前言

本标准按照GB/T 1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中国医药生物技术协会制定，由中国医药生物技术协会实施。

本标准起草单位：中国医药生物技术协会医药生物技术临床应用专业委员会。

本标准主要起草人：。

本标准为首次发布。

引言

近年来，免疫治疗经历了一系列突飞猛进的发展，以特异性过继免疫细胞疗法及免疫检查点抗体疗法为代表的新型免疫治疗技术因其在临床研究中取得的显著疗效而成为学术界和产业界共同关注的焦点。其中，嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，CAR-T疗法）因其在白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤的治疗中展现出显著的治疗效果而成为国内外研究的热点。随着我国对CAR-T技术的研究不断深入，国内企业的积极布局和产业链的延伸，我国的CAR-T细胞治疗技术也在紧随国际趋势的发展。然而，目前国内关于CAR-T细胞的制备和质量控制缺乏统一的标准和管理规范，各制备机构或应用机构之间无法进行正常的评估和交流，一定程度上不利于细胞治疗产业的专业化发展。只有确立了安全、规范、稳定、可追溯的行业规范，才能从源头保证整个CAR-T细胞治疗产业的规范性和安全性。

为了适应我国CAR-T细胞治疗产业的需要，加强CAR-T细胞治疗的管理，规范细胞制备过程，保证CAR-T细胞制品在临床应用的安全性，促进国际间同行的交流，有必要制定中国医药生物技术行业的CAR-T细胞制剂制备质量管理规范。

嵌合抗原受体修饰T细胞（CAR-T细胞）制剂制备质量管理规范

1 范围

1.1 为协助CAR-T细胞制剂制备机构（以下简称机构）在制备过程中避免污染、交叉污染、混淆及差错，且保证CAR-T细胞制剂的安全性、生物学效应，参照《免疫细胞制剂制备质量管理自律规范》等相关规定和指导原则，制定本规范。

1.2 本规范所称的CAR-T指用于治疗的、经体外基因导入后表达嵌合型抗原受体的人源T 细胞，T细胞来源于患者自体或异体外周血淋巴细胞。

1.3 本规范适用于CAR-T细胞制剂制备的所有阶段。

2 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）Chimeric Antigen Receptor T Cell，CAR-T cell

经过基因工程修饰的，可表达被导入的含有抗原识别片段、T细胞受体活化分子、共刺激信号等信号分子的CAR基因的T细胞。

2.2

外周血单个核细胞Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC

血液中具有单个核的细胞，主要包括淋巴细胞，单核细胞，巨噬细胞，树突状细胞和少量其他细胞类型。

2.3

质粒Plasmid

是一类存在于细菌和真菌细胞中独立于染色体DNA而自主复制的共价、闭合、环状DNA分子，是基因工程最常见的运载体。

2.4

目的基因Target Gene

人工构建的具有明确功能的基因或基因片段。

2.5

载体Vector

在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞中进行复制和表达

的工具。常用的载体包括质粒、慢病毒、逆转录病毒等。

2.6

转导Transduction

借助病毒等方法将外源性遗传物质（DNA或RNA）导入细胞进行稳定表达的过程。

2.7

冻存液Cryoprotectant

当与活细胞相结合时，能保护细胞在冷冻和复苏过程不受损害的溶液或试剂。

2.8

标识Label

粘贴或附着在对象上的用于区分不同对象的标记、注释或条码。

2.9

细胞批次Cell Batch

指取自个体的一次采集的细胞，经生产全过程制成的终末细胞培养物或收获物。

3 基本要求

3.1 基本原则

CAR-T细胞制剂的制备包括质粒的制备、病毒的制备、样本的接收和处理、细胞刺激、转导、扩增、收获、质量检测以及冻存、运输等全过程。对各个操作环节以及环境和人员等都有严格的要求以确保最终产品符合标准。

3.2 人员的要求

3.2.1 机构应配备与其规模相适应的专门的CAR-T细胞制剂制备人员和质量检测人员，操作人员应具备基本的专业知识，并接受特定的专业技术培训后方可上岗。病毒构建和细胞制备技术人员身体健康无传染性疾病，能熟练掌握无菌操作技能，并具备GMP级病毒构建或人T细胞培养经验。

3.2.2 建立人员卫生操作规程和自我防护规程，最大限度地降低人员对细胞制备造成污染以及操作人员自我感染的风险。操作规程应当包括与健康、卫生习惯及人员着装相关的内容，以及操作过程中避免交叉感染和污物正确处理方法等内容。参观人员和未经培训的人员不得进入制备区和质控区。

3.3 场所和设施

3.3.1 CAR-T细胞制剂制备场所分为洁净区及非洁净区。洁净区各功能区包括细胞制备区、细胞储存区、病毒制备区、病毒储存区、中控区、部分质控区（无菌检测室、微生物限度室、阳性对照室、细胞操作室等）等，各个区域相互独立，病毒制备区、病毒储存区、阳性对照室应具有独立的空调系统。非洁净区包括部分质控区（革兰氏染色、内毒素测定、流式细胞仪检测等）、留样室、办公室、资料档案室、物料储存室、气体储存室等，不应与洁净区交叉过往。机构可根据实际情况合理分配各区。

3.3.2 洁净区应当根据制备流程及相应的洁净度级别要求合理设计、布局和使用。洁净区应以温湿度、微粒、微生物、压差为主要控制参数。

3.4 物料

3.4.1 CAR-T细胞制剂制备所用的物料是指制备中所使用的试剂耗材、生物活性分子以及与细胞制剂直接接触的包装材料及外包装材料等。

3.4.2 CAR-T细胞制剂制备所用的样本及物料应当符合相应的质量标准。进口物料应当符合国家相关的进口管理规定。细胞制剂制备中使用的物料管理应参照《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则》。

4 载体制备

4.1 质粒制备