阿莫西林微生物限度检查步骤

阿莫西林微生物限度检查步骤

东南科仪

东南科仪工程师问您分享：

阿莫西林为抗细菌口服抗生素制剂，应检查霉菌每1g中不得超过100个，因其对铜绿假单胞菌无效，还应检查铜绿假单胞菌

一、使用设备：日本ALP CL-32L高压灭菌器（东南科仪提供），德国binder KBF恒温恒湿箱（东南科仪提供），离心机（kokusan提供），意大利VELP 均质器（东南科仪提供）

二、霉菌的检查

配制供试液:称取供试液10g。置0.9%无菌氯化钠溶液100ml中，用意大利VELP 均质器或其它方法进行混匀，作为供试液。

三、培养基使用前处理

采用日本ALP CL-32L高压灭菌器直接对琼脂培养基，使用器皿的高压灭菌。

四、预处理:可采用以下方法

1.稀释法:将供试液注入较大的培养集中，使该供试液稀释至不具抑菌作用的浓度。

2.离心沉淀集菌法：将规定量的供试液，离心（3000r/min）30min，留底部集菌液约2ml,再稀释成原规定量的的供试液，如有不溶性药渣，可离心（500r/min）5min,取全部上层液，再集菌处理。

3.薄膜过滤法：取定量供试液至稀释剂100mI中，摇匀，以无菌操作加入装有直径约50mm，孔径不大于0.15um±0.02um微孔滤膜的过滤器内，减压抽干后，用稀释剂冲洗滤膜3次，每次50-100ml，取出滤膜备捡。

4.利用平皿菌落计数法，将供试液涂布在玫瑰红钠培养基上，在适宜的温度下进行培养，观察肉眼可见的霉菌菌落数。

五、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）的检查

检验程序：铜绿假单胞菌、分离、纯培养革兰氏染色镜检，及生化试验等步骤进行检查。

检查方祛:取胆盐乳糖培养基3份，每份100ml，两份分别加入规定量的供试液，其中一份入对照菌液作为阳性对照，第3份加入与供试液等量的稀释液作为阴性对照。培养18-24h阴性对照应无菌生长，其余2份培养液划线接种于溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上培养18-24h, ;当阳性对照的平扳呈阳性菌落时，供试品的平板无菌落或无疑似菌落的生长，可判未检出铜绿假单胞菌。

铜绿假单胞菌典型菌落呈扁平，无定形，周边扩散，表而湿润，灰白色，周围时有蓝绿色扩散。如生长菌落具有上述特征或疑似者，应挑选2-3个菌落，分别接种于营养琼脂养斜面上，培养18-24小时。取培养物做革兰染色，并作氧化酶试验。

如革兰阴性杆菌、氧气酶试验阳性，及绿脓菌素试验阳性，可判检出铜绿假单胞菌。绿脓菌素阴性的培养物，应继续做硝酸盐还原产气实验、42℃生长实验、明胶液化实验均为阳性时，应判检出铜绿假单胞菌。

附：日本ALP CL-32L高压灭菌器特点

1、CL-32L 高压灭菌器的显示屏、键盘及压力表在同一个斜面上，令操作和读数都同样方便。键盘功能指

示明确，并可保留预设模式，一键start即可自动完成高压灭菌器的全部工作

2、快速锁盖杆可轻松地锁紧高压灭菌器的灭菌舱盖，自动铰链使拾起各放下舱盖都毫不费力。

3、双内锁装置确保高压灭菌器操作过程中舱盖的锁紧，并使温度保持安全范围内。

4、高压灭菌器的状态图像显示，可清晰显示当前的工作状态。

5、定时空气排出，确保高压灭菌器内纯蒸汽的灭菌环境。

6、可调自动蒸气排出，使高压灭菌器灭菌完后蒸汽慢慢地自动排出。

7、ALP生产的高压灭菌器专为处理培养基设计的保温及融化功能。

8、定时启动功能，可使高压灭菌器的灭菌工作按所需日期时间启动，使您随时可以开始工作。

9、记忆功能，高压灭菌器的使用工作程序即使在断电后也不丢失，重新接上电源，程序即可恢复。

10、多选功能，ALP CL-32L高压灭菌器满足各种工作需要：①热空气或真空干燥②样品温度探头使灭菌更为可靠③自动给水④预热功能可缩短升温时间，⑤冷却风机，缩短冷却时间⑥打印机⑦记录仪11、三种标准工作模式， CL-32L高压灭菌器组合加热、灭菌、排气、保温、融合等各步骤，适应液体、固体、废料、培养基等不同样品的处理需求。增配干燥设置，即可提供带干燥的操作模式