动物源性医疗器械产品注册申报资料相关技术要求

病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE

病毒灭活工艺有效性验证
指示病毒 ≥106/mL 指示病毒 ≥106/mL
病毒灭活 工艺
指示 病毒
动物源材料
动物源材料
动物源材料
Log（初始病毒数量）
—
Log（灭活后病毒数量）
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE

指示病毒的选择
◦ 需要选择与生产过程中采用的原材料可能含有病毒种类的 相关病毒，不能用相关病毒的，要选择与其理化性质尽可 能相似的指示病毒；
动物源性医疗器械产品
SFDA· CMDE

动物：任何脊椎或无脊椎动物[包括两栖动物、节肢动物
（如甲壳纲动物）、鸟、珊瑚、鱼、爬行动物、软体动物 和哺乳动物]，不包括人（智人）。

衍生物：通过制造工艺从动物材料中获得的物质。
术语
SFDA· CMDE

病毒感染风险
◦ 动物源材料的来源控制 ◦ 病毒灭活工艺及有效性验证 ◦ 终产品的残留病毒标准及检测（未强制）
产品技术报告 产品风险分析报告 产品标准 说明书 其它需要注意的问题
动物源性医疗器械申报资料附加要求
SFDA· CMDE


（一）产品技术报告
在产品技术报告中至少需增加以下内容： 1、动物的种类、地理来源、年龄、取材部位及取材部
位的组织性质的具体描述；
2、对于常规定点饲养的动物种类，提供与动物定点饲 养单位签订的长期供货协议及饲养单位的资质证明；如 果涉及中间商，应提供所有中间商的有关供货协议及资 质证明；
小鼠
RNA
有
80-110
球形
低
辛德比斯病毒
外衣
阿尔发病毒
人
RNA
有
60－70
球形
低
牛滤过性腹泻病毒（ BVDV）
黄热
疫瘟病毒
牛
RNA
有
50－70
多面体/球形
低
SFDA· CMDE
伪狂犬病毒
疱疹病毒
水痘病毒
猪
DNA
有
120-200
球形
中
脊髓Hale Waihona Puke Baidu质炎萨宾1型病毒
微小RNA病毒
肠道病毒
人
RNA
无
25-30

DNA 无包膜
同时满足：

大小： 直径 20~200nm 至少有一种对所用的病毒灭活工艺有明显抗性的病毒
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE

表1列举了已用于病毒清除研究的病毒。这些病毒根据 生产工艺研究情况，对物理化学处理具有不同的耐受性 。病毒的耐受性与特定的处理方式有关，只有在了解病 毒生物特性和生产工艺特定情况下才能使用这些病毒， 而且实际结果会随着处理情况的变化而变化。
病毒
生产工艺B
病毒
动物源材料
动物源材料
来源控制
病毒灭活?
终产品检测
病毒感染风险
SFDA· CMDE

对于感染病毒和传染性病原体的风险控制需至少从 源头控制和病毒灭活两方面着手，仅依靠源头控制 或仅依靠病毒灭活都无法确保风险降至最低。
病毒感染风险
SFDA· CMDE

病毒感染风险涉及的方面
病毒
感 染
◦ 每一步骤处理后的滴度及衰减系数
V1 T1 R log 10 V2 T2
例：
Log（初始数量） BDV PPV ORF REO 6.58 7.23 7.09 6.89 1.26 3.20 1.86 2.21
T1 处理前滴度 V1 处理前体积 T2 处理后滴度 V2 处理后体积
衰减系数 5.32 4.03 5.23 4.68
注：疫区的范围以质检总局网站为准
牛、羊源性材料的源头控制
SFDA· CMDE

为确保风险的可控性，企业需建立起一套追溯体系， 以便在发现不良事件时能够及时查出原因并采取措施 以防止类似不良事件的发生。 定点饲养、定点采购、定点屠杀，以及根据国家相关 规定进行动物防疫、检疫，都是降低病毒和传染性病 原体传播风险的必要手段。
点滴定或其他方法。这些方法应该有适宜的灵敏度和可重复性，每
一个取样点应取双份样品并设有对照以保证结果的准确性。
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE
一份典型的验证报告主要包括： ◦ 所依据和符合的标准/法规/指导性文件
ISO 22442 EN 12442 《动物源性医疗器械产品注册申报资料指导原则》 国药监注[2002]160号《血液制品去除／灭活病毒技术方 法及验证指导原则》 GLP
◦ 所选择的病毒理化性质需有代表性（病毒大小、核酸类型
以及有无包膜），其中至少需包括一种对物理和/或化学处 理有明显抗性的病毒； ◦ 指示病毒滴度需要尽可能高（病毒滴度一般需≥106/mL） 。
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE
至少四种：

RNA 有包膜 DNA 有包膜 RNA 无包膜 （也可以用不同的灭活方法分别 灭活不同类型的病毒）
◦ 去除/灭活病毒验证研究应符合GLP的要求。 ◦ 应研究影响去除/灭活病毒效果的参数（包括机械参数和理化参数 ）允许变化的幅度。 ◦ 应研究病毒灭活动力学，包括病毒灭活速率和灭活曲线。 ◦ 加入的病毒与待验证样品体积比不能高于1∶9。
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE

在验证过程中需要遵守的其它原则

免疫原性风险
◦ 免疫原性降低工艺 ◦ 终产品的免疫原性相关指标控制标准及检测
动物源性医疗器械的主要风险控制措施
SFDA· CMDE

病毒感染风险涉及的方面
病毒
感 染
病毒
病毒
生产工艺A
病毒
动物源材料
动物源材料
动物源材料
来源控制
病毒灭活
终产品检测
病毒感染风险
SFDA· CMDE

病毒感染风险涉及的方面
Log（灭活后数量）
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE
一份典型的验证报告主要包括（续）：
◦ 总的衰减系数
Rn=R1+R2+…… ≥4
例：
BVD NaOH 1N 60min 无水乙醇 10h 新洁尔灭 0.5% 30min 总衰减系数（Logs） 5.32 2.32 3.21 10.85 PPV 4.03 1.03 2.63 7.69 ORF 5.23 2.63 4.23 12.09 REO 4.68 1.65 3.32 9.65

动物源材料的来源控制
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病毒灭活方法（举例）
◦ 钴60辐照法
◦ 干热法 ◦ 巴氏消毒法 ◦ 有机溶剂/去污剂（S/D）处理法 ◦ 酸处理、碱处理 ◦ 强氧化剂、强还原剂处理 注意：生产企业需充分评 估其对产品的不利影响， 以保证产品最终能够安全 有效地使用。
◦ 高温闪灭，等
注意：以上方法均需验证试验或提供相关研究资料。
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE

效果的判定
◦ 原则上病毒降低量（log10）≥4 logs表示该工艺去除/灭活病毒 有效。 ◦ 如因检测方法造成病毒降低量＜4 logs时，需盲传三代，如无病 毒检出,才可认定是有效的灭活病毒工艺。
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE

在验证过程中需要遵守的其它原则
病毒感染风险
SFDA· CMDE

种群来源控制方面
◦ 动物种类 ◦ 动物的地理来源
◦ 动物年龄
◦ 取材部位 ◦ 取材部位的组织性质
病毒感染风险
SFDA· CMDE

所用牛、羊源性材料应符合国食药监械[2006]407号《关于含有牛、羊
源性材料医疗器械注册有关事宜的公告》
发生下列情况之一的不予受理： 1. 牛/羊来自疫区 2. 牛/羊来自非疫区，但医疗器械的实际生产场所为疫区 1）牛/羊与疫区牛/羊一起圈养 2）牛/羊喂养动物蛋白质饲料
病毒
病毒
生产工艺A
病毒
动物源材料
动物源材料
动物源材料
来源控制
病毒灭活
终产品检测
病毒感染风险
SFDA· CMDE

病毒感染风险涉及的方面
病毒
感 染
病毒
病毒
生产工艺A 动物源材料
病毒
动物源材料
动物源材料
来源控制？
病毒灭活
终产品检测
病毒感染风险
SFDA· CMDE

动物源材料的来源控制
◦ 种群来源 ◦ 饲养（场地、饲料、免疫、防疫） ◦ 屠宰 ◦ 取材（部位、组织性质、取材方式） ◦ 处理 ◦ 储存运输 ◦ 可追溯性
◦ 如可能，验证过程中每步取出的样品应尽快直接进行病毒滴定，不 做进一步处理（如超离心、透析或保存、除去抑制剂或毒性物质等 ）。如果样品必须做进一步处理，或不同时间取出的样品要在同一 时间进行测定，应考虑这些处理方法对病毒检测结果的影响。 ◦ 检测方法可包括蚀斑形成、细胞病变（如合胞体或病灶形成）、终
无
25-30
二十面体
高
细小病毒(犬、猪)
细小
细小病毒
犬猪
DNA
无
18-24
二十面体
很高
SFDA· CMDE

效果的判定
◦ 验证的目的是为了确定生产工艺去除/灭活病毒的能力，获得生 产全过程中估计去除/灭活病毒的总量。 ◦ 如果制品的生产工艺中包含了两步或两步以上病毒去除/灭活步 骤，需要分别进行病毒灭活效果验证。一般降低的总量是各步降 低病毒量的总和。 ◦ 但是由于病毒验证的局限性，如分步骤中病毒降低量≤1 log则 不需将其计算在总量中。
可以与蛋白质结合的小分子物质（半抗原），等
免疫原性风险
SFDA· CMDE

免疫原性降低工艺
◦ 固定 ◦ 脱细胞
注：生产企业需充分评估 其对产品的不利影响，以 保证产品最终能够安全有 效地使用。
◦ 去蛋白
◦ 胶原蛋白提纯 ◦ 使蛋白质变性，等
免疫原性风险
SFDA· CMDE

病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE
表1 已用于病毒清除研究的病毒举例
病毒
科
属
天然 宿主
基因 组
囊 膜
大小 (nm）
形状
耐受 性
小囊状口腔炎病毒
弹状病毒
水泡性病毒
马牛
RNA
有
70×175
子弹状
低
副流感病毒
副粘属
副粘液病毒
多种
RNA
有
100-200
多面体/球形
低
鼠白血病病毒（MulV）
逆转录
C型肿瘤病毒
SFDA· CMDE
3、对于常规定点屠宰的动物种类，提供生产者与屠宰 单位签订的合同及屠宰单位的资格证明； 4、对所执行的检疫标准的描述，以及所取材动物的检 疫/防疫证明性资料,一般包括动物检疫合格证、动物防疫 合格证、对动物进行防疫接种的兽医卫生合格证等；
SFDA· CMDE
5、生产者对保存每一批动物可追溯性文件（该文件中 至少需包括：该产品所用动物的地理来源、取材部位、动 物的可追溯性标识、动物饲养、检疫、屠宰及加工方面的 情况）的承诺；（注：这里提到的批是指在同一环境中饲 养、检疫、屠宰或加工的一组动物。） 6、对生产过程中灭活和去除病毒和／或传染性病原体 工艺过程的描述及有效性验证数据或相关资料； 7、对清除（或降低）动物源性材料免疫原性工艺过程 的描述、质量控制指标与验证性实验数据或相关资料。
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE
一份典型的验证报告主要包括（续）： ◦ 企业提供的灭活工艺的描述
◦ 指示病毒的具体信息和选取理由 ◦ 原始样品的制备、初始病毒滴度 ◦ 试验所用的灭活工艺描述 （包括规模缩小的有效性）
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE
一份典型的验证报告主要包括（续）：
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE

关于朊蛋白
由于目前尚没有朊蛋白（如疯牛病因子）的指示病毒/因子， 而且对去除朊蛋白的工艺还很难验证，因此对牛、羊源性材料制品 的安全性还主要是对源头进行控制。基于目前对朊蛋白灭活工艺验 证的认知程度，对于符合407号公告受理条件的牛、羊源性医疗器 械，可以接受按照《动物源性医疗器械产品注册申报资料指导原则 》所进行的病毒灭活有效性验证资料。随着对朊蛋白研究水平的不 断提高，相关的要求也将随时调整。
病毒灭活工艺有效性验证
SFDA· CMDE

免疫原性风险涉及的方面
◦ 免疫反应（免疫应答）类型
刺激 急性炎症
慢性炎症
免疫抑制 免疫刺激 超敏反应 自主免疫，等
免疫原性风险
SFDA· CMDE

免疫原性风险涉及的方面
◦ 动物源产品中的免疫原（抗原）类型
蛋白质 多糖 核酸 脂类
二十面体
中
脑心肌炎病毒（EMC）
微小RNA病毒
心病毒
小鼠
RNA
无
25-30
二十面体
中
呼肠病毒3
呼肠
正呼肠病毒
各种
RNA
无
60-80
球形
中
SV40
乳多孔
多瘤病毒
猴
DNA
无
40-50
二十面体
很高
人类免疫缺陷病毒
逆转录
Lentivirus
人
RNA
有
80-100
球形
低
甲型肝炎病毒
Picorna
肝病毒
人
RNA

来源于非脊椎动物：
壳聚糖（虾、蟹等）、骨蜡（蜜蜂）、蚕丝
动物源性医疗器械产品举例
SFDA· CMDE

《动物源性医疗器械产品注册申报资料指导原则》

范围
◦ 全部或部分采用无生命动物组织制成的或取材于动物组 织的医疗器械产品（体外诊断用医疗器械除外）。 ◦ 采用动物组织衍生物或由动物体自然获取物质（例如： 牛奶、羊毛等）制成的医疗器械产品。 ◦ 生产过程中使用或接触了动物源性材料的医疗器械。
动物源性医疗器械产品注册申 报资料相关技术要求
国家食品药品监督管理局医疗器械技术审评中心
审评二处
赵鹏
SFDA· CMDE

来源于脊椎动物：
胶原止血/填充材料、生物敷料、羊肠缝线、生物瓣膜 、生物补片、骨填充材料、硫酸软骨素、透明质酸钠、含 羊毛脂的医疗器械、带肝素涂层的医疗器械等 本身不属于器械但与动物源有关的：酶、抗体、培养 基等