组织胚胎学第一章绪论

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免疫组织化学
荧光素标记显示皮肤医学毛课件细血管内皮细胞
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核酸分子杂交技术
• 是用标记的RNA或DNA探针检测RNA或 DNA片段的一种重要方法。用核酸杂交技 术检测细胞内某一基因在染色体上的定位， 称染色体原位杂交。用核酸杂交技术检测 某一基因的转录物mRNA的细胞定位和转 录状况，称细胞原位杂交。
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PAS染色示肝糖元
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PAS染色
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免疫组织化学和免疫细胞化学技术
• 是应用免疫学原理，通过抗原与抗体的特 异性结合，显示组织内和细胞内的抗体或 抗原成份。这种检测技术的特异性强、灵 敏度高、应用广泛，是生物学和医学领域 中的重要研究手段。通常需对已知抗原或 抗体进行标记，用相应的显色和观察方法 检测目的抗体或抗原。常用的标记物有荧 光素、铁蛋白、辣根过氧化物酶等。
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子宫内膜上皮细胞
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流式细胞术
• 应用流式细胞仪对单个细胞进行生物化学和生物物 理特性的快速定量测定，可进行细胞周期各时相细 胞的比例和细胞内DNA、RNA、蛋白质的含量分 析，淋巴细胞亚群的分离和定量，血细胞增殖情况 的分析，杂交细胞等的分选等。
• 其工作原理是分离被检细胞，制成悬液，并进行荧 光染色或标记，然后使单细胞液流快速通过该仪器 的激光照射分析区，被检细胞产生不同的荧光信号 并转变为电脉冲，分别输入计算机内贮存，同时显 示于示波器屏幕上，即可获得该细胞群体中不同类 型细胞的有关数据。
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普通光学显微镜术
• 应用普通光镜观察组织切片是组织学研究 的主要技术。
• 光镜的分辨率是指在光镜下所能分辨的两 点间的最短距离，约为0.2 µm。分辨率决 定图像的清晰度和细微度 。
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特殊光学显微镜
• 荧光显微镜 用于观察组织、细胞中有自 发荧光、诱发荧光或经荧光染料染色或标 记的结构。
助色团的染料。
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染色
• 嗜碱性：易被碱性染料着色 • 嗜酸性：易被酸性染料着色 • 中 性：与两种染料的亲和力都不强
• 特殊染色
银染 甲苯胺蓝 甲苯胺蓝
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普通HE染色照片
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大家好
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组织学与胚胎学
( histology and embryology )
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第一章：组织学绪论
内容提要
• 组织学的定义和研究 内容
• 石蜡切片、HE染色
• 组织化学和免疫组织 化学
• 细胞培养与组织工程
• 组织和器官 • 光学显微镜术和电子显
微镜术 • 原位杂交 • 组织学的学习方法
• 器官：由四大基本组织按着一定的规律组成的、 具有一定形态结构和生理功能的结构，称为器官。 人体内有若干器官，如胃、心、肺、肾、肝、脾 等。
• 系统：结构和功能相关的一些器官，相互协同、 相互制约，共同完成某一方面的系列功能，称为 系统。
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组织学的研究方法和技术
• 普通光镜组织标本的制备方法 • 光学显微镜术 • 电子显微镜术 • 组织化学技术 • 组织培养术与组织工程 • 组织和细胞的定量术
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透射电镜术
Transmission electron microscopy，TEM
• 是用电子束穿透标本，经过电磁场的会聚、 放大后，在荧光屏上显像，或将影像投射 到照相底片。
• 由于电子束穿透力弱，故经过固定的电镜 标本需制成超薄切片（50～80 nm） ，并 用重金属盐如柠檬酸铅和醋酸铀等染色。
• 相差显微镜 主要用于观察体外培养中活 细胞的形态结构。
• 激光共聚焦扫描显微镜 可对细胞内部非 侵入式光学断层扫描成像，可进行一系列 亚细胞水平的结构和功能研究 。
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激光共聚焦扫描显微镜
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激光共聚焦扫描显微镜图像
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CLSM显示上皮细胞
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电子显微镜
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原位杂交示脐静脉内皮细胞呈心房钠尿肽阳性
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细胞培养技术
• 是将离体细胞或组织放置在适当的环境条 件下进行培养的一种技术方法，可用以检 测各种理化因子、细胞因子等对细胞增殖、 分化、代谢、运动、吞噬、分泌等生命活 动和细胞行为的影响，还可用细胞培养技 术研究细胞癌变、逆转的机制。
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电镜扫描图
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电镜图（冷冻蚀刻）
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组织化学和细胞化学技术
• 是应用化学反应及物理反应原理，检测组 织和细胞内某种化学成份并进行定位定量 和细胞功能分析的一种实验技术，如用过 碘酸——Schiff反应检测多糖，用脂溶性染 料显示脂类，用酶化学染色显示某种酶， 用孚尔根反应显示DNA。
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组织学的定义和研究内容
• 是研究人体的微细结构及其相关功能的 一门科学，内容主要包括细胞、基本组 织和器官组织。组织学又称显微镜解剖 学或微细解剖学。
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组织、器官和系统
• 组织 ：形态结构和生理功能相同或相似的细胞和 细胞间质构成的具有一定形态结构和一定生理功 能的细胞群体，称为组织。构成人体的基本组织 有4种，称四大基本组织，即上皮组织、结缔组织、 肌肉组织和神经组织。
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普通光镜组织标本的制备方法
• 制备能使光线透过的组织切片是组织学研 究的基本方法，主要包括固定、包埋和切 片、染色等步骤。
• 组织学中最常用的染色方法是苏木精和伊 红染色法，简称HE染色法。
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染色
• 目的：使组织切片着色,便于观察。 • 碱性染料：含氨基、二甲氨基等碱性助色
团的染料。 • 酸性染料：含有羧基、羟基、磺基等酸性
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组织学的学习方法
• 建立立体与动态的概念 • 注意结构与功能的联系 • 重视理论与实践的结合 • 勤奋加技巧，学习效果好
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扫描电镜术
Scanning electron microscopy，SEM
• 用于观察细胞、组织和器官表面的立体细 微结构。
• 需将小块组织经固定、脱水、干燥后，在 其表面喷镀薄层碳膜和金属膜。
• 图像清晰，富有立体感 。
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电镜扫描图
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肺巨噬细胞吞噬大肠杆菌
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