血涂片评价和分类计数的质量控制流程

血涂片评价和分类计数的质

量控制流程

-标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII

血涂片评价和分类计数的质量控制流程

血涂片评价

血涂片的显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，制备薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。

一、血涂片制作

取末梢血1滴，置载玻片一端，取另一边缘光滑的推片，放在血滴前面慢慢后移，接触血滴后稍停。血液即沿推片散开，将推片与载片保持30 ～45°角，向前平稳均匀推动推片，载片上便留下一层薄血膜。血涂片制成后，立即在空气中挥动，使其迅速干燥，以免血细胞变形。血膜干燥后，用铅笔在血膜的一侧写上病人姓名或编号。一张良好的血片，厚薄要适宜，头体尾要明显，细胞分布要均匀，膜

的边缘要整齐，并留有一定的空隙。涂片时血滴愈大，角度愈大，推片速度愈快则血膜愈厚，反之血膜愈薄。太薄的血膜片50%的白细胞集中于边缘或尾部，

血涂片过厚，细胞重叠缩小均不利于白细胞分类计数。如果血膜分布不匀，主要是推片不整齐，用力不均匀，载片不清洁所致。

二、血涂片的质量控制

1、血膜片的质量要求是厚薄均匀适度，低倍镜下观察全片，细胞不重叠，头尾及两侧有一定的空隙，血膜头部有明确的病人标志。

2、一些体积较大的特殊细胞常在血膜的尾部出现，因此蜡笔划线时应注意保存血膜尾部细胞，血膜必须充分干燥，否则在染色过程中容易脱落。

3、配制染料须用优质甲醇，稀释染液用缓冲液，因为缓冲液的pH 对细胞染色的影响很重要。在偏酸性环境中正电荷增多，在偏碱性环境中负电荷增多，又因为细胞着色对氢离子浓度十分敏感。如果染色偏碱，原是紫红色的中性颗粒则染成深蓝色，造成识别困难。冲洗须用中性水，虽亦可用自来水（但不能保持稳定）。

4、对所用染液应进行预染试验，新配制的染液放置一段时间后其中的美蓝逐渐氧化成天青B ，天青B 对细胞核的着色效果比美蓝好，因此，瑞氏染液放置时间越长染色效果越好，临床上称之为成熟。判断染液成熟程度的简易方法是用正常优质血片做预染试验，先用低倍镜观察载有染液的血片，认为着色满意后，再按照染色后冲洗顺序最后用油镜镜检，这样不仅可了解染液的成熟程度，而且还可以选择合适的染色时间，供临床标本染色时参考。

5、染液与缓冲液的比例要适当，以1∶2为宜。一般说来缓冲液稀释度愈大，染色时间愈长，细胞着色愈匀称、鲜艳。缓冲液和染液量要充足，否则染液很快蒸发，染料沉淀于细胞上，使细胞深染而无法检查。细胞较多较厚的涂片（如红细胞增多症）染液应多些。细胞较少的涂片染液应少些。

6、染色时间与染液浓度、室温高低、细胞多少有关，染液愈淡，室温越低，细胞愈多，所需时间越长，应适当增加染液浓度，因此必须根据情况灵活掌

握。

7、染色良好的血膜片，外观呈浅红色，红细胞呈粉红色，白细胞核呈暗紫红色，

染色质结构能辨，粒细胞的颗粒呈固有种特异颜色。

四、注意：在日常工作中遇到特殊标本，在制片时就要特殊对待。如：贫血病人、WBC特高疑为白血病人、腹水或胸水。个人：由检验师（士）完成涂片、染色、计数、分类。两差比较：由主管技师计数、分类。

双份技术标准差评价法：由检验师（士）及副主管技师计数、分类后

比较。

质评：A级（优）：90~100分。

B级（良）：80~89分。

C级（中）：70~79分。

D级（及格）：60~69分。

E级（不及格）: <60分。

检验士→主管技师→副主任技师

质控目的：1避免或消除技术误差。2缩小固有误差。

质控评价：1常规考核标准。2变异百分数评价。3经验控制。

分类计数的质量控制流程

制定血细胞分析仪血涂片复检的标准并加以评价，建立适合我院的分类计数的标准。

方法：通过对200份临床标本血涂片进行显微镜检查，评价仪器提示结果与手工分类计数的一致性和标准执行的可行性。复检标准的标本均需要严格按照操作规程进行显微镜镜检，以免造成漏诊、误诊现象，提高血液学分析质量。

白细胞分类计数

一、低倍镜观察：选择细胞分布均匀、染色好的部位，转油镜下计数100—200个细胞，求出各种白细胞所占百分比。包括：中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸细胞、嗜碱细胞。

二、细胞分布：头体部以淋巴细胞较多，尾部和两侧以中性粒、单核细胞较多，片尾部异常大的细胞较多。一般选择体尾交界处，细胞分布均匀的地方按一定方式，有规律的移动视野。

三、发现幼稚或异常白细胞，应分类报告，包括在分类百分率中。如遇到不能确认的细胞，应另列入分类不明一项，如实报告，并保留血片。如发现有核红细胞，应报告分类100个白细胞所见有核红细胞数。检验人员必须能对所有常见白细胞进行分类，并了解大多数白细胞的形态异常，包括先天性和获得性。参与细胞形态学检查的检验人员必须进行专业培训，并具备实际工作经验。检验人员的工作态度、动机和专心程度是关键因素。因为白细胞分类计数是一项主观性很强

的工作，影响分类计数的因素很多，有检验人员的态度、实验室环境条件和工作量等。

四、血涂片考核

考核样本选择10份样本。样本必须包含7种类型白细胞（中性分叶核粒细胞、性杆状核粒细胞、淋巴细胞、异型淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞）。按照要求，每份样本制备5张血涂片，按照第节所述方法染色，统一标签，但检验人员不知道样本来源。玻片分成5套，每套包含10份样本的玻片各1张。

五、检验人员考核分发给参加检验的人员一套考核血涂片，要求每张血涂片做200个白细胞的分类计数，并根据血涂片编号，报告结果。计算每份样本每种细胞的均值，进行结果解释，制作每种类型细胞分布图。