组织培养方案

“植物组织培养”项目竞赛方案

第一部分竞赛规程

一、竞赛项目名称

植物组织培养。

二、竞赛目的

随着植物组织培养技术迅速发展及应用范围不断扩大，花卉企业、果蔬生产基地、种苗公司等农业企业对组培技术人才的需求也不断提高。通过举办组培技能竞赛，顺应农业行业需求，为生产一线培养高素质技能型人才，也为高职农业领域的专家、教师共同探索植物组培教学改革、交流经验搭建平台。

三、竞赛方式与内容

（一）竞赛方式

比赛采取理论知识考试和操作技能考核相结合的方式，其中理论占30%、技能占70%。

（二）竞赛内容

以教育部颁布的职业学校相关专业教学指导方案和国家职业标准《花卉园艺师》（三级）中对《植物组织培养》规定的知识和技能要求为基础，结合技能型人才培养要求和农业生产岗位需要，适当增加新知识、新技术、新技能等相关内容。

1.理论知识考试

按国家职业标准《花卉园艺师》（三级）中对《植物组织培养》规定的应知要求和高职高专《植物组织培养》课程相关的基础知识，采取闭卷方式进行。每名选手须参加理论考试，考试时间为60分钟。

2.操作技能竞赛内容

（1）竞赛内容

在规定时间内完成规定的MS母液配制、MS固体培养基的配制、一

般外植体的消毒和接种及香蕉或金线莲组培苗继代无菌接种操作。

①MS母液配制

根据表1配方进行计算（扩大倍数和母液体积按照大赛要求填写），将结果填入表中，并配制相应溶液。

表1 母液配制配方

②MS培养基的配制

根据表2进行计算，并将结果填入表中。请利用提供的母液和材料，以MS+ 0.01 mg/LNAA+ 3%蔗糖+ 0.7%琼脂，pH为5.8，配制培养基500ml，并均匀分装到12个培养瓶，最后由承办方统一灭菌。（表2中浓度由参赛选手按照大赛提供的母液标签填写）

表2 MS培养基配制

③外植体消毒和接种

在20min内，要求参赛小组熟练掌握一般外植体处理、体表灭菌和接种技术，包括材料整理、冲洗，灭菌剂选择，消毒时间、顺序，如何接种等。其中材料在无菌室外的处理由承办方统一操作，20min只计算无菌室内的操作时间。

④香蕉或金线莲组培苗继代培养的无菌操作

在30min内，按无菌操作规范要求完成继代瓶苗的转瓶操作，每人接种16瓶培养基，每瓶转接苗的株数香蕉为6-8苗，金线莲为8苗，茎段长短视材料而定，把材料转接到培养基中，均匀分布，无交叉污染等动作。

（2）竞赛时间

理论考试（统一安排）时间：60分钟；

技能竞赛时间：125分钟，建议安排如下：

①培养基母液配制（45分钟）；

②MS固体培养基配制（30分钟）；

③外植体消毒和接种（20分钟）；

④继代培养无菌操作（30分钟）。

（三）竞赛成果

1.配好的母液3瓶（根据提供的母液配制配方），贴上标签，写上参赛选手的参赛号数；

2.配好并装好瓶的培养基12瓶（每队），贴上标签，写上参赛选手的参赛号数；

3.外植体接种4瓶（每人），贴上标签，写上参赛选手的参赛号数；

4.继代无菌操作16瓶（每人），贴上标签，写上参赛选手的参赛号数。

四、竞赛规则

（一）比赛规则

1．参加理论考试与操作技能考试的参赛选手必须持本人身份证与参

赛证参加竞赛。

2.参赛选手出场顺序、位置、竞赛所用材料、工具由抽签决定，不得擅自变更、调整。

3.参赛选手提前15分钟检录进入赛场，并按照指定位号参加竞赛。迟到15分钟者，取消竞赛资格；竞赛开始15分钟后，选手方可离开赛场。

4.植物组织培养项目选手应在竞赛试卷或实物标签上填写竞赛号。试卷（或实物标签）上不得有任何暗示参赛选手身份的标记，否则取消成绩。

5.参赛选手在竞赛过程中不得擅自离开赛场，如有特殊情况，需经裁判同意。选手若需休息、饮水或去洗手间等，耗用时间计算在竞赛时间内。

6.竞赛在规定时间结束时，参赛选手应立即停止操作，不得以任何理由拖延竞赛时间。选手操作完成后，在《实际操作现场记录表》上签名确认，方可离开赛场。

（二）注意事项

1.参赛对象必须是高职高专在校生。

2.参赛选手须按规定的时间报到、比赛。

3.参赛选手不得穿有学校标识的服装。

4.比赛所用材料、仪器、工具均由承办院校提供。

5.遵守纪律，尊重评委，服从指挥。

五、竞赛场地与设备

（一）竞赛场地

竞赛场地开阔、平整，采光、照明和通风良好，为参赛各组提供竞赛相关仪器设备。

（二）竞赛设备

每2人为一单元，共用1套。

1.MS母液配制

大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素，电子分析天平（感量0.0001g）1台、电炉1只、电子天平（感量0.01g）1台、烧杯（200ml）3只、容量瓶（1000ml）1只、容量瓶（500ml）1只、容量瓶（250ml）1只、试剂瓶3只、玻璃棒3支、塑料滴管2支、洗瓶2只、蒸馏水5L、95%酒精1瓶、0.1mol/L HCl 1瓶、0.1mol/L NaOH 1瓶、抹布1块、称量纸2包、吸水纸1包、标签纸1张、草稿纸2张、水芯笔1支、计算器1个、白色实验工作服1件/人等。

2.MS培养基的配制

电磁炉1只、MS母液、琼脂条1袋、蔗糖1瓶、搪瓷杯（500ml）1只、培养瓶24只、烧杯（500ml）1只、烧杯（200ml）1只、蒸馏水2L、洗瓶1只、量筒（50ml）1只、移液管（10ml）3支、移液管（5ml）5支、0.1mol/L HCl 1瓶、0.1mol/L NaOH 1瓶、精密pH试纸（5.4－7.0）1包、抹布1块、称量纸1包、吸水纸1包、标签纸1张、草稿纸2张、水芯笔1支、计算器1个等。

3.香蕉或金线莲组培苗继代繁殖的无菌操作

瓶苗6瓶、培养基32瓶、单人单面工作台2台、剪刀4把、镊子4把、酒精灯2只、无菌滤纸2包、喷壶2个、酒精棉2瓶、一次性口罩3只、记号笔2支等。

六、评分办法与标准

（一）评分办法

理论知识考试和操作技能考核分别采用百分制计分，按理论知识占30%、操作技能占70%权重确定成绩。理论知识和操作技能由该项目裁判员统一评分，称量、定容、pH测定终止举手示意裁判确认，否则该项操作不计分。每位裁判对每小组评分，去掉一个最高分，去掉一个最低分，最后所得总分除以有效计分的裁判人数，就是该小组的操作技能分。