小鼠提取脂肪组织老方法

参考Deslex 的方法[ ，略有改动。取普通食物喂养4 周雄性W istar大鼠，颈椎脱臼处死，无菌情况下取出附睾川隔脂肪垫，成l 1~／11／1×1 1~／11／1×1 lilm 大小碎块后在1L 胶原酶溶液中消化90 ra in ，离心后去除上层漂浮的成熟脂肪细胞，加入DM EM 培养液制成前脂肪细胞悬液，通过250 目尼龙筛网过滤后接种，在5％co2、37 oC 用含10％小牛盯fL清的DM EM 培养基培养3 d 后，换川含胰岛素5 m g／L 、二碘甲腺原氨酸13 200 pm ol／L 的无血清DM EM／F 一12 培养4 d ，前脂肪细胞约有90％左存分化成为成熟脂肪细胞。