脂肪酶(LPS)活性试剂盒使用说明

脂肪酶(LPS)活性试剂盒使用说明
脂肪酶(LPS)活性试剂盒使用说明

脂肪酶(LPS)活性试剂盒使用说明

微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC2345

规格:100/96S

产品内容:

试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,室温保存。

试剂三:液体×1瓶,4℃保存。

标准品:液体×1瓶,10μmol/mL的标准溶液,室温保存。临用前加入 3.168mL甲苯,充分溶解。

产品说明:

LPS又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。LPS 广泛的存在于各种生物中。血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。

LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。

自备仪器和用品:

研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、粗酶液提取:

1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g

组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。16000rpm,4℃离心40min,取上清置冰上待测。

2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后16000rpm,4℃离心40min,取上清置冰上待测。

3.血清等液体:直接检测。

二、LPS测定操作:

1.分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到710nm,蒸馏水调零。

2.试剂一和试剂二置于37℃水浴预热30min以上。

3.空白管:取1.5mL离心管,依次加入130μL试剂一50μL试剂二和20μL蒸馏水,置于37℃震荡反应10min;加入300μL甲苯,反复震荡混匀10min,25℃,4000rpm离心10min;小心吸取上层溶液200μL,加入 1.5mL离心管中,再加50μL试剂三,反复震荡5min;25℃,4000rpm离心10min,小心吸取上层溶液150μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于710nm处测定吸光值。记为A空白管。

4.测定管:取1.5mL离心管,依次加入130μL试剂一50μL试剂二和20μL上清液,置于37℃震荡反应10min;加入300μL甲苯,反复震荡混匀10min,25℃,4000rpm离心10min;小心吸取上层溶液200μL,加入 1.5mL离心管中,再加50μL试剂三,反复震荡5min;25℃,4000rpm离心10min,小心吸取上层溶液200μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于710nm处测定吸光值。记为A测定管。

5.标准管:取标准品200μL,加入1.5mL离心管中,再加50μL试剂三,反复

震荡5min;25℃,4000rpm离心10min,小心吸取上层溶液150μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于710nm处测定吸光值。记为A标准管。

三、LPS活性计算公式:

A.使用微量比色皿测定:

1.组织LPS活性

(1)按照蛋白浓度计算

活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。LPS(μmol/min/mg prot)=[C标准品×(A测定管-A空白管)÷A标准管]×V反总÷(Cpr ×V样)÷T

=10×[(A测定管-A空白管)÷A标准管]÷Cpr

(2)按照样本质量计算

活性单位定义:37℃中每克组织每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。LPS(μmol/min/g)=[C标准品×(A测定管-A空白管)÷A标准管]×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T

=10×[(A测定管-A空白管)÷A标准管]÷W

2.细胞LPS活性

活性单位定义:37℃中每104个细胞每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。

LPS(μmol/min/104cell)=[C标准品×(A测定管-A空白管)÷A标准管]×V反总÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T=10×[(A测定管-A空白管)÷A标准管]÷细胞数量

3.血清等液体LPS活性

活性单位定义:37℃中每毫升血清每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。

LPS(μmol/min/mL)=[C标准品×(A测定管-A空白管)÷A标准管]×V反总÷V样÷T

=10×[(A测定管-A空白管)÷A标准管]

C标准品:10μmol/mL;V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中加入样本体积,0.02mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL,需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒;W:样本质量,g;T:催化反应时间,10min。

B.使用96孔板测定

1.组织LPS活性

(1)按照蛋白浓度计算

活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。LPS(μmol/min/mg prot)=[C标准品×(A测定管-A空白管)÷A标准管]×V反总÷(Cpr ×V样)÷T

=10×[(A测定管-A空白管)÷A标准管]÷Cpr

(2)按照样本质量计算

活性单位定义:37℃中每克组织每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。LPS(μmol/min/g)=[C标准品×(A测定管-A空白管)÷A标准管]×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T

=10×[(A测定管-A空白管)÷A标准管]÷W

2.细胞LPS活性

活性单位定义:37℃中每104个细胞每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。LPS(μmol/min/104cell)=[C标准品×(A测定管-A空白管)÷A标准管]×V反总÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T=10×[(A测定管-A空白管)÷A标准管]÷细胞数量

3.血清等液体LPS活性

活性单位定义:37℃中每毫升血清每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。LPS(μmol/min/mL)=[C标准品×(A测定管-A空白管)÷A标准管]×V反总÷V样÷T

=10×[(A测定管-A空白管)÷A标准管]

C标准品:10μmol/mL;V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中加入样本体积,0.02mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL,需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒;W:样本质量,g;T:催化反应时间,10min。

注意事项:

1、甲苯有一定毒性,实验过程中需佩戴手套和口罩。

2、实验过程中须远离火源。

过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒说明书 微量法

过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒说明书微量法 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号:BC0205规格:100T/96S 产品内容: 提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体125μL×1瓶,4℃保存。产品说明: CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的H 2O 2清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。 H 2O 2在240nm 下有特征吸收峰,CAT 能够分解H 2O 2,使反应溶液240nm 下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出CAT 活性。需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔(UV 板)、研钵、冰和蒸馏水操作步骤:一、粗酶液提取: 1、细菌、细胞或组织样品的制备 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。2、血清(浆)样品:直接检测。二、测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热30min 以上,调节波长至240nm,蒸馏水调零。 2、CAT 检测工作液的配制:用时在试剂二中加入25mL 试剂一,充分混匀,作为工作液。 3、测定前将CAT 检测工作液在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min 以上。 4、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL 样本和190μL 工作液,立即混匀并计时,记录240nm 下初始吸光值A1和1min 后的吸光值A2。计算ΔA=A1-A2。三、CAT 活性计算: a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下1、血清(浆)CAT 活力的计算: 单位的定义:每毫升血清(浆)每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。CAT(U/mL)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109 ]÷V 样÷T=459×ΔA 2、组织、细菌或细胞中CAT 活力计算:(1)按样本蛋白浓度计算: 单位的定义:每mg 组织蛋白每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。CAT(U/mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 样)÷T=459×ΔA÷Cpr (2)按样本鲜重计算: 单位的定义:每g 组织每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。 CAT(U/g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样÷V 样总×W)÷T=459×ΔA÷W (3)按细菌或细胞数量计算: 单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。CAT(U/104cell)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样÷V 样总×500)÷T =0.917×ΔA V 反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:H 2O 2摩尔消光系数,4.36×104 L/mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V 样:加入样本体积,0.01mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,1min;W:样本鲜重,g;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;500:细胞或细菌总数,500万;109:单位换算系数,1mol=109nmol。b.用96孔板测定的计算公式如下1、血清(浆)CAT 活力的计算:

土壤漆酶活性检测试剂盒说明书 微量法

土壤漆酶活性检测试剂盒说明书微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC1965 规格:100T/48S 产品内容: 试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存。 试剂二:粉剂×2瓶,4℃避光保存,临用前每瓶加7.5mL试剂一溶解。 试剂三:液体3mL×1瓶,常温保存。若有白色物质析出,放于37℃中溶解即可。 产品说明: 土壤漆酶(SL)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,广泛分布于真菌和高等植物中,具有较强的氧化还原能力,在纸浆生物漂白,环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。 漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基,在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS,测定ABTS自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。 自备实验用品及仪器: 天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、震荡仪、30目筛(或更小)。操作步骤: 一、样本处理 新鲜土样风干,过30目筛。 二、测定操作 1.分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到420nm,蒸馏水调零。 2.加样表: 试剂名称测定管对照管 土样(g)0.030.03

试剂一(μL)135135 试剂二(μL)150- 37℃水浴反应10min。 试剂三(μL)1515 试剂二(μL)-150 4℃12000g离心15min,取200μL上清于420nm测定其吸光值,分别记为A测定管、A对照管,计算ΔA=A测定管-A对照管。 三、土壤漆酶(SL)活性计算公式 (1)按微量比色皿计算: 酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol ABTS自由基所需的酶量为一个酶活力单位(U)。 SL活性(U/g)=ΔA÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T=0.833×△A÷W。 ε:ABTS自由基摩尔消光系数:36000L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,3×10-4L;W,样本质量,g;T:反应时间,10min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。 (2)按96孔板计算: 酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol ABTS自由基所需的酶量为一个酶活力单位(U)。 SL活性(U/g)=ΔA÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T= 1.39×△A÷W。 ε:ABTS自由基摩尔消光系数:36000L/mol/cm;d:比色皿光径,0.6cm;V反总:反应总体积,3 ×10-4L;W,样本质量,g;T:反应时间,10min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。 注意事项: 1.试剂一需临用前配制,并且尽快使用,4℃保存一周,若变色则不能使用。 2.测定之前进行预实验,若吸光值较高(A>1.5),请减少土样质量再进行测定。若数值偏小可以延长反 应时间或增加土样质量进行测定。 3.离心后若上清仍然浑浊,可再次离心去除。

游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD法)产品技术要求haifeng

游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD法) 适用范围:本产品适用于体外定量测定人血清中游离脂肪酸(NEFA)含量。 1.1 产品规格 1.2主要组成成分

注:校准品、质控品具有批间、赋值特异性,具体值详见靶值单。 2.1外观 2.1.1试剂盒标签标识清晰,外包装完整无破损; 2.1.2 试剂1:无色或淡黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;2.1.3 试剂2:无色或淡黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;2.1.4 校准品:无色或浅黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;2.1.5 质控品:无色或浅黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。2.2 净含量 净含量不低于标示值。 2.3 空白吸光度 在主波长546nm、副波长700nm、37℃条件下,试剂空白吸光度A≤0.2。 2.4 线性范围 (0.05,3.00)mmol/L范围内,相关系数r≥0.990;

(0.05,1.00]mmol/L范围内,绝对偏差不超过±0.10mmol/L; (1.00,3.00)mmol/L范围内,相对偏差不超过±10.0%。 2.5分析灵敏度 在产品说明书规定参数设定条件下,测定浓度1.0mmol/L的样本,吸光度变化△A≥0.05。 2.6 精密度 2.6.1批内重复性 CV≤10.0%。 2.6.2 批间差 相对极差R≤10.0%。 2.7 准确度 与已上市产品比对:(0.05,3.00)mmol/L范围内,相关系数r≥0.990;(0.05,1.00]mmol/L范围内,绝对偏差不超过±0.10mmol/L; (1.00,3.00)mmol/L范围内,相对偏差不超过±10.0%。 2.8 校准品 2.8.1 均一性CV≤5.0% 2.8.2 开瓶稳定性:开瓶后3天,相对偏差不超过±10.0%。 2.9 质控品 2.9.1赋值有效性:测定值在质控靶值范围内。 2.9.2 均一性:CV≤5.0%。 2.9.3 开瓶稳定性:开瓶后3天,测定值在质控靶值范围内。 2.10 稳定性

抗坏血酸过氧化物酶(ascorbateperoxidase ,APX)活性测定试剂盒 使用说明

抗坏血酸过氧化物酶(ascorbateperoxidase ,APX)活性测定试剂盒使用说明 微量法100T/96S 产品简介: APX 是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一,也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。APX 具有多种同功酶,分别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体,以及过氧化体和类囊体膜上。APX 催化H 2O 2氧化AsA,是植物AsA 的主要消耗者。APX 的活性直接影响到AsA 的含量,在胁迫和解胁迫条件下,APX 与AsA 具有一定的负相关性。 APX 催化H 2O 2氧化AsA,通过测定AsA 的氧化速率,可计算得APX 活性。 试验中所需的仪器和试剂: 低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、移液枪、研钵、冰和蒸馏水。 产品内容: 试剂一:液体×2瓶,4℃保存。 试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加3mL 蒸馏水充分溶解。 试剂三:液体×1支,4℃保存。 操作步骤: 一、粗酶液提取: 称取约0.1g 样品,加1mL 试剂一,冰上充分研磨,13000g 4℃离心20min,取上清液。 二、测定操作表: 1.分光光度计预热30min 以上,调节波长到265nm,用蒸馏水调零。 2.试剂一在25℃中预热30min 以上。 3.空白管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL 蒸馏水、140μL 预热的试

剂一、20μL试剂二和20μL试剂三,迅速混匀后在265nm测定10s和130s光吸收。 4.测定管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL上清液、140μL预热的试剂 一、20μL试剂二和20μL试剂三,迅速混匀后在265nm测定10s和130s光吸收。 APX活力计算: a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下 (1)按蛋白浓度计算 活性单位定义:每毫克蛋白每分钟氧化1μmol AsA为1U。 APX(U/mg prot)=(△A测定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反总×106÷(Cpr×V样)÷T=0.0924×(△A测定管-△A空白管)÷Cpr (2)按样本鲜重计算 活性单位定义:每克样品每分钟氧化1μmol AsA为1U。 APX(U/g鲜重)=(△A测定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反总×106÷(V样÷V样总×W)÷T=0.0924×(△A测定管-△A空白管)÷Wε:AsA在265nm处摩尔吸光系数为5.42×104L/mol/cm;d:比色皿光径(cm),1cm;V反总:反应体系总体积(L),200μL=2×10-4L;106:1mol=1×106μmol;Cpr:上清液蛋白质浓度(mg/mL),需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒;W:样品质量;V样:加入反应体系中上清液体积(mL),20μL=0.02mL;V样总:提取液体积,1mL;T:催化反应时间(min),2min。 b.使用96孔板测定的计算公式如下 (1)按蛋白浓度计算 活性单位定义:每毫克蛋白每分钟氧化1μmol AsA为1U。 APX(U/mg prot)=(△A测定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反总×106÷(Cpr×V样)÷T=0.1848×(△A测定管-△A空白管)÷Cpr (2)按样本鲜重计算 活性单位定义:每克样品每分钟氧化1μmol AsA为1U。

胰蛋白酶活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法

胰蛋白酶活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定 货号:BC2310 规格:50T/48S 产品内容: 提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:粉剂×1支,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水充分溶解。 试剂二:液体50mL×1瓶,4℃保存。 产品说明: 胰蛋白酶选择性水解变性蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链,是一种重要的消化酶。此外,胰蛋白酶还广泛应用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等的辅助治疗。 胰蛋白酶催化水解BAEE的酯键,生成BA,BA在253nm处有吸收峰,通过测定253nm吸光度增加速率,即可计算出胰蛋白酶的活性。 自备仪器和用品: 紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 操作步骤: 一、粗酶液提取: 称取约0.1g样品,加入1mL提取液进行冰浴匀浆,10000rpm4℃离心10min,取上清液,即粗酶液,置冰上待测。或者直接称取1mg酶粉,加1mL提取液,充分混匀后置冰上待测(为保证实验的准确性建议梯度稀释)。 二、测定: 1.分光光度计预热30min以上,调节波长到253nm,蒸馏水调零。 第1页共2页

2.工作液的配制:将试剂一与试剂二按2:97配置工作液,按需配制,并置于37℃水浴预热30min以上。 3.空白管:取1mL石英比色皿,加入990μL工作液,再加入10μL蒸馏水,混匀,迅速于253nm测定0s 和60s的吸光度,分别记为A1、A2,△A空白=A2-A1。 4.测定管:取1mL石英比色皿,加入990μL工作液,再加入10μL粗酶液,混匀,迅速于253nm测定0s 和60s的吸光度,分别记为A3、A4,△A测定=A4-A3。 三、胰蛋白酶活性计算: 1.按蛋白浓度计算: 活性单位(U)定义:在1mL体系下,37℃每毫克蛋白质每分钟催化253nm处吸光值增加0.001为一个单位。胰蛋白酶(U/mg prot)=(△A测定-△A空白)÷0.001÷(Cpr×V1)÷T =100000×(△A测定-△A空白)÷Cpr 2.按样本鲜重计算: 活性单位(U)定义:在1mL体系下,37℃每克组织每分钟催化253nm处吸光值增加0.001为一个单位。 胰蛋白酶(U/g鲜重)=(△A测定-△A空白)÷0.001÷(W×V1÷V2)÷T =100000×(△A测定-△A空白)÷W Cpr:粗酶液蛋白质浓度(需要另外测定),mg/mL;W:样本鲜重,g; V1:加入反应体系中粗酶液体积,10μL=0.01mL;V2:粗酶液总体积,1mL; T:反应时间,1min。 注意事项: 实验前用1~2个样做预实验,保证吸光值变化在0.01~0.15之间。 第2页共2页

NEFA游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD法)产品说明书

游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD 法)说明书 【产品名称】通用名称:游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD 法) 英文名称:Nonestesterified fatty acid Assay Kit (Enzymic Method)(NEFA ) 【包装规格】R1:2?60ml 、R2:2?20ml ;R1:2?45ml 、R2:2?15ml ;R1:1?45ml 、R2:1?15ml ; 校准品(选配):1?2ml (1个水平)。 【预期用途】用于体外定量测定人血清中游离脂肪酸的含量。 临床上主要用于高血脂症、冠心病和动脉粥样硬化的辅助诊断。 【检验原理】游离脂肪酸和辅酶A 在乙酰辅酶A 合成酶(ACS )的作用下反应生成乙酰辅酶A 。乙酰辅酶A 在乙酰辅酶A 氧化酶(ACOD )的作用下生成H 2O 2,随后通过Trinder ’s 底物在过氧化物酶(POD )的作用下生成有色物质。 【主要组成成分】由试剂R1、R2和校准品组成。试剂R1:乙酰辅酶A 合成酶(ACS )0.8KU/L 、MgCl 2(氯化镁)5mmol/L 、吐温-20 0.1%;试剂R2:乙酰辅酶A 氧化酶(ACOD)20KU/L 、过氧化物酶( POD )30KU/L 、吐温-20 0.1%;校准品:含十六(烷)酸水溶液。校准品可以溯源至北京华宇亿康校准品,注:校准品浓度见每批瓶标示。不同批号试剂盒中各组分不可以互换。 【储存条件及有效期】试剂和校准品在2℃~8℃避光条件下保存可以稳定365天。试剂和校准品开瓶后2℃~8℃可稳定15天。备注:生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。 【适用仪器】日立7180、奥林巴斯AU680、贝克曼LX-20/DXC800、迈瑞BS-380、朕江T900全自动生化分析仪。 【样本要求】 1、空腹静脉采血,样本为新鲜的血清样本。 2、样本采集后立即离心分离,并在当日检测,如当日不能检测,冷藏2℃~8℃下可稳定48h ;避免反复冻融。 【检验方法】 (1)双试剂无需配制,直接使用。 (2)试验条件:样本(S ):5 μl 试剂1(R1) :225 μl 试剂2(R2):75 μl 温度:37 ℃ 测定类型:终点法 主波长:546 nm 副波长:700 nm 反应方向:向上 方法:先将样本与R1混合,37 ℃5分钟后加入R2试剂,然后测定加入R2后5分钟的反 应吸光度。 测定空白吸光度(A 1) 测定反应吸光度(A 2) 0 5 10 (反应时间:10min ) 37℃ (3)校准程序:使用配套校准品进行校准,每次更换试剂批次时都应进行校准。校准后,各实验 室要用质控品验证。如果质控结果不在可接受范围值内,则需要进行重新校准。 (4)质量控制程序:选用Randox2、3(HN1530、HE1532)进行质量控制。各实验室建立各自的 质控频率和可接受范围值。当测定结果超出可接受范围时,有必要采取相应措施。 (5)结果的计算 (A 2 - A 1)样本 NEFA (mmol/L )= ———————— × 校准品浓度(mmol/L) (A 2 - A 1)校准品 【参考区间】(0.129~0.769) mmol/L (建议各实验室建立自己的参考区间)。依照《医学研

谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase, GR)活性测定试剂盒说明书

货号:QS1111 规格:50管/48样 谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase, GR)活性测定试剂盒说明书 紫外分光光度法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: GR是广泛存在于真核和原核生物中的一种黄素蛋白氧化还原酶,是谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶之一(通常昆虫中GR被TrxR取代)。GR催化NADPH还原GSSG生成GSH,有助于维持体内GSH/GSSG比值。GR在氧化胁迫反应中对活性氧清除起关键作用,此外GR还参与抗坏血酸-谷胱甘肽循环途径。 测定原理: GR能催化NADPH还原GSSG再生GSH,同时NADPH脱氢生成NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,相反NADP+在该波长无吸收峰;通过测定340 nm吸光度下降速率来测定NADPH脱氢速率,从而计算GR活性。 自备实验用品及仪器: 紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水 试剂组成和配置: 试剂一:液体×1瓶,4℃保存。 试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入5.0 mL蒸馏水,混匀。 试剂三:液体×1支,4℃保存。 粗酶液提取: 1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加 入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。 2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500 万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心15min,取上清置于冰上待测。 3.血清等液体:直接测定。 操作步骤: 1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。 2. 试剂一置于25℃(普通物质)或者37℃(哺乳动物)中预热30min。 3. 空白管:取1mL石英比色皿,加入850μL试剂一,100μL试剂二,50μL试剂三,充分混匀,于340nm 处测定10 s和190 s吸光度,记为A空1和A空2,△A空白管= A空1﹣A空2。 4. 测定管:取1mL石英比色皿,加入750μL试剂一,100μL试剂二,100μL上清液,50μL 试剂三,充分混匀,于340nm测定10 s和190 s吸光度,记为A测1和A测2,△A测定管= A 测1﹣A测2。 注意:空白管只需要测定一次。 计算公式: 第1页,共2页

脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)产品技术要求lepu

脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中脂肪酶的活性。 1.1规格 试剂1:2×60mL,试剂2:1×60mL; 试剂1:2×60mL,试剂2:2×15mL; 试剂1:3×40mL,试剂2:1×30mL; 试剂1:2×60mL,试剂2:2×12mL; 试剂1:2×60mL,试剂2:2×20mL; 试剂1:1×45mL,试剂2:1×15mL; 试剂1:1×4L,试剂2:1×1L; 试剂1:2×4L,试剂2:1×2L。 1.2主要组成成分 试剂1主要组分: 试剂2主要组分:

2.1 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1:无色或淡黄色透明溶液;试剂2:无色或淡黄色透明溶液。外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 2.3.1 试剂空白吸光度 在570nm处测定试剂空白吸光度,应≤0.9; 2.3.2 试剂空白吸光度变化率 试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.5。 2.4 分析灵敏度 测试50U/L的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0025 。 2.5 准确度 在样品中加入一定体积的纯品,计算回收率,应介于90%-110%之间。 2.6 重复性 批内变异系数(CV)应不超过10%。 2.7 线性 2.7.1在[5,500]U/L区间内,线性相关系数r应不低于0.990; 2.7.2[5,60)U/L区间内绝对偏差不超过±7.2U/L;[60,500]U/L区间内相对偏差不超过±12%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定,相对极差不大于12%。

2.9 稳定性 取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测,应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。

快速诊断试剂盒化学反应原理

快速检测试剂盒化学反应原理 1.硫氰酸钠:白色斜方晶系结晶或粉末,易溶于水、乙醇、丙酮等溶剂,水溶液呈中性, 遇铁盐生成血红色的硫氰化铁,遇亚铁盐不反应,与硫酸生成黄色的硫酸氰钠,与钴盐作用生成深蓝色的硫氰化钴,与银盐或铜盐作用生成白色的硫氰化银或黑色的硫氰化铜沉淀,在空气中易潮解。 2.液体石蜡:即矿物油,珍珠大米的检测方法:取大米于样品杯中一半体积,加入70℃以 上的热水至样品杯近满处,用洁净牙签轻轻搅动30秒以上,静置片刻使溶液温度降低到50℃以下(固体石蜡的熔点为50~65℃),如果样品中掺有石蜡,液面上会出现细微的油珠,随着温度的降低和时间的延长液体石蜡的油珠会聚集加大,固体石蜡的油珠会结成白色片状物浮于液面上。 3.工业碱:一般指(碳酸钠)、工业烧碱(氢氧化钠)、工业重碱(碳酸氢钠)。碳酸钠也 被称为纯碱。碱性溶液遇到酚蓝试剂变成紫红色,碳酸钠与钙的可溶性盐生成沉淀,而氢氧化钠或者碳酸氢钠遇到钙的可溶性盐则不会发生沉淀。 4.甲醇:工业酒精,甲醇经氧化试剂氧化后形成甲醛,甲醛可与品红-亚硫酸作用生成蓝紫 色化合物。(氧化剂配制:高锰酸钾-磷酸溶液,混合后不容易保存,所以分开配制逐一添加。品红-亚硫酸溶液:混合后不易保存,同样是分开配制逐一添加。亚硫酸为亚硫酸钠与盐酸配制所得,可百度。) 5.甲醛:乙酰丙酮法原理是利用甲醛与乙酰丙酮及氨生成黄色化合物二乙酰基二氢卢剔啶 后,412nm下进行分光光度测定。此法最大的优点是操作简便,性能稳定,误差小,不受乙醛的干扰,有色溶液可稳定存在12hr;缺点是灵敏度较低,最低检出浓度为 0.25mg/L,仅适用于较高浓度甲醛的测定;方法缺点是反应较慢,需要约60min;SO2 对测定存在干扰(使用NaHSO3作为保护剂则可以消除)。变色酸法也称铬变酸法,甲醛在浓硫酸溶液中可与变色酸(1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸)作用形成紫色化合物。该法的优点是操作简便、快速灵敏;缺点是在浓硫酸介质中进行,不易控制,且醛类、烯类化合物及NO2等对测定有干扰。酚试剂法原理是甲醛与酚试剂反应生成嗪,嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物,颜色深浅与甲醛含量成。正比副品红法原理是在甲醛存在下,亚硫酸根离子与副品红生成紫色络合物,其最大吸收峰在570nm处,检测限为50μg/L。本法的优点是简便灵敏,其它醛和酚不干扰测定;缺点是褪色快,灵敏度不高,易受温度影响,使用了有毒的汞试剂。AHMT法原理是甲醛与4-氨基-3-联氨-5-巯基-1,2,3-三氮杂茂(AHMT)在碱性条件下缩合,然后经高碘酸钾氧化成6- 基-5-三氮杂茂[4,3-b]-S-四氮杂苯紫红色化合物,比色定量。该方法优点是抗干扰能力强,对乙酰丙酮法、MBTH法及副品红法干扰严重的六胺对此测定方法无干扰,因此,该法是测定树脂交联过程释放甲醛的有效方法;灵敏度较高,最低检出限为0.01mg/m3,较适宜与一般情况下室内空气的检测;缺点是颜色随时间逐渐加深,要求标准溶液的显色反应和样品溶液的显色反应时间必须严格统一,在显色体系最大吸收波长550nm测定,Co2+、Cu2+干扰测定。溴酸钾-次甲基蓝法原理是在酸性介质中,甲醛可促进溴酸钾氧化次甲基蓝反应,降低体系吸光度的特点来快速测定甲醛含量。次甲基蓝在665nm处有最大吸收峰,在H2SO4介质中加入KBrO3能使其吸收峰微降,而再加入甲醛后,其吸光度会显著下降,△A降低与甲醛浓度成正比。银-Ferrozine法原理为水合氧化银能氧化甲醛并被还原为Ag,产生的Ag与Fe3+定量反应生成Fe2+,Fe2+与菲洛嗪(Ferrozine)形成有色配合物 6.溴酸钾:见附页。 7.硫酸镁:络合滴定法取供试品适量,加水溶解,以铬黑T为指示剂,用乙二胺四醋酸钠 滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液自紫红色转变为纯蓝色。每1mL乙二胺四醋酸钠滴定液

Na+K+- ATP酶活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法

Na+K+-ATP酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定 货号:BC0060 规格:50T/24S 产品内容: 试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存。 试剂二:液体4mL×1瓶,4℃保存。 试剂三:粉剂×2支,-20℃保存。用时每支加1mL蒸馏水,现用现配。用不完的试剂-20℃可保存一周。 试剂四:液体2mL×1瓶,4℃保存。 试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存。用时加入3mL双蒸水,4℃保存。 试剂六:粉剂×1瓶,4℃保存。用时加入15mL双蒸水,溶解后4℃保存一周。 试剂七:粉剂×1瓶,4℃保存。用时加入15mL双蒸水,溶解后4℃保存一周。 试剂八:液体15mL×1瓶,室温保存。 标准品:10μmol/mL标准磷贮备液1mL×1支,4℃保存。 0.5μmol/mL标准磷应用液配制:将标准品20倍稀释,即取0.1mL标准品加1.9mL蒸馏水充分混匀。 O:试剂六:试剂七:试剂八=2:1:1:1的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。 定磷剂的配制:按H 2 若变色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。 注意:配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。 产品说明: Na+K+-ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。 Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤: 一、样品酶液的制备: 1、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL 试剂一,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 组织:称取约0.1g组织,加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 二、测定步骤 1、分光光度计预热30min以上,调节波长至660nm,蒸馏水调零。 2、酶促反应(在EP管中加入下列试剂) 对照管测定管试剂一(μL)13090 试剂二(μL)8080 试剂三(μL)4040 试剂四(μL)40 样品(μL)200 混匀,37℃(哺乳动物)或25℃(其他物种)准确水浴10min 试剂五(μL)5050 样品(μL)200 混匀,4000g,常温离心10min,取上清液 3定磷(在1.5mLEP管中依次加入下列试剂) 空白管标准管对照管测定管 0.5μmol/ml标准磷应用液(μL)100 上清液(μL)100100 蒸馏水(μL)100 定磷试剂(μL)1000100010001000混匀,40℃水浴10min,冷却至室温,在660nm处比色。 三、计算

游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒(ACS-ACOD酶法)产品技术要求百奥泰康

游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒(ACS-ACOD酶法)适用范围:该产品用于体外定量测定人血清中游离脂肪酸的浓度。 1.1产品规格 1.2 组成成分 1.2.1 试剂组成 试剂1:磷酸盐缓冲液(pH=7.0) 50mmol/L;

辅酶A 0.5mmol/L; ATP 3 mmol/L; 乙酰辅酶A合成酶(ACS ) 0.4KU/L; )2mmol/L; 氯化镁(MgCl 2 偶联终点比色法结合成份(Trinder结合成份)0.5g/L; 表面活性剂和稳定 剂<1%; 试剂2:磷酸盐缓冲液(pH=7.0) 50mmol/L; 乙酰辅酶 A 氧化酶(ACOD )30KU/L; 过氧化物酶(POD ) 45KU/L; 4-氨基安替比林(4AAP) 1.5g/L; 表面活性剂和稳定剂<1% 1.2.2 校准品的组成 单水平的液体校准品,在50mM pH7.0的磷酸盐缓冲液中添加十六烷酸纯品,稳定剂<0.5%;定值范围:0.8-1.2mmol/L。 1.2.3质控品的组成 两个水平的液体质控品,在牛血清(20g/L)中加入十六烷酸纯品,添加的牛血清的比例为5%-10%,稳定剂<0.5%;目标浓度范围:低水平(0.30-0.60)mmol/L,高水平(0.80-1.20)mmol/L。 2.1 外观 液体双试剂:试剂1:无色或淡黄色澄清液体;试剂2:黄色澄清液体。

校准品:无色或淡黄色澄清液体。 质控品:无色或淡黄色澄清液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 空白吸光度 试剂空白吸光度应≤0.3。 2.4 分析灵敏度 浓度为0.5mmol/L时,吸光度差值的绝对值在0.01-0.2范围内。 2.5 线性 在(0,3.0]mmol/L线性范围内,线性相关系数r 应≥0.995;在(0,1.2] mol/L 时绝对偏差不超过0.18mmol/L;在(1.2,3.0]mmol/L范围内的相对偏差不超过±15%。 2.6 精密度 变异系数CV应≤6% 2.7 批间差 不同批号之间测定结果的相对极差应≤10%。 2.8 准确度 回收实验:回收率在90%-110%。 2.9 质控品赋值有效性 测定值在质控靶值范围内。 2.10校准品溯源性要求

Ca++ Mg++- ATP酶活性检测试剂盒说明书 微量法

Ca++Mg++-ATP酶活性检测试剂盒说明书微量法 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。 货号:BC0965 规格:100T/48S 产品内容: 试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存。 试剂二:液体4mL×1瓶,4℃保存。 试剂三:粉剂×2支,-20℃保存;临用前加入1mL蒸馏水充分混匀待用;现用现配。用不完的试剂-20℃可保存一周。 试剂四:液体2mL×1瓶,4℃保存。 试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存。用时加入3mL双蒸水,4℃保存。 试剂六:粉剂×1瓶,4℃保存。用时加入5mL双蒸水,溶解后4℃保存一周。 试剂七:粉剂×1瓶,4℃保存。用时加入5mL双蒸水,溶解后4℃保存一周。 试剂八:液体5mL×1瓶,室温保存。 标准品:10mmol/L标准磷贮备液1mL×1支,4℃保存。 0.5μmol/mL标准磷应用液配制:将标准品20倍稀释,即取0.1mL标准品加1.9mL蒸馏水充分混匀。 定磷剂的配制:按H O:试剂六:试剂七:试剂八=2:1:1:1的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。若无色 2 则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。 注意:配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。 产品说明: Ca++Mg++-ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。 根据Ca++Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性高低。 需自备的仪器及用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰

谷胱甘肽过氧化物酶活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px/GPX)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。货号:BC1190规格:50T/24S 产品简介: 谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px/GPX)是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。GPX 能够催化还原型谷胱甘肽(GSH)生成氧化型谷胱甘肽(GSSG),使有毒的过氧化氢还原成无毒的羟基化合物。 GPX 催化H 2O 2氧化GSH,产生GSSG,GSH 能与DTNB 生成在412nm 处有特征吸收峰的化合物,412nm 下吸光度的下降即可反应GPX 的活性。试验中所需的仪器和试剂: 可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP 管。产品内容: 提取液:液体40mL×1瓶,4℃保存; 试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入5.5mL 蒸馏水溶解;试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入6.6mL 蒸馏水溶解备用; 试剂三:液体20μL×1支,临用前按1μL 试剂三:499μL 蒸馏水的比例稀释试剂三,4℃保存。现用现配; 试剂四:液体60mL×1瓶,4℃保存;瓶底若有结晶可50℃水浴溶解,此溶液为饱和溶液,若底部最终还有结晶,吸取上清使用即可; 试剂五:液体15mL×1瓶,4℃保存; 试剂六:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入15mL 蒸馏水溶解备用; 标准品:粉剂×1支,10mg 还原型谷胱甘肽,4℃保存。临用前加入1.62mL 蒸馏水溶解为20μmol/mL 的标准溶液备用。操作步骤:

一、粗酶液的提取: 1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取0.05g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆。10000rpm,4℃离心10min,取上清置冰上待测(如上清不清澈,再离心3min)。 2、细菌、真菌:按照细胞数量104个:提取液体积(mL)500~1000:1的比例,建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(率300w,超声3s,间隔7s,总时间3min)然后10000rpm,4℃,离心10min,取上清置冰上待测(如上清不清澈,再离心3min)。 3、血清(浆)等液体:直接测定。 二、测定步骤: 1、分光光度计预热30min以上,调节波长至412nm,蒸馏水调零。 2、将20μmol/mL标准液用提取液稀释为0.25μmol/mL的标准溶液。再吸取100μL标准溶液与400μL试 剂四混匀待用,此标准液混合物的浓度为0.05μmol/mL。标准液混合物现用现配。 3、将150μL样本与150μL试剂一混合后室温放置5min。 4、操作表:(在1.5mL离心管中依次加入下列试剂) 测定管对照管样品混合物(μL)100- 试剂二(μL)100100 37℃下预热5min 试剂三(μL)100100 37℃下反应5min 试剂四(mL)11 样品混合物(μL)-100 4000rpm常温离心5min,取上清。 试剂名称(μL)测定管对照管标准管空白管上清液500500--标准液混合物--500-试剂四---500 试剂五200200200200 试剂六200200200200 蒸馏水100100100100

脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)产品技术要求jiuqiang

脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法) 适用范围:用于体外定量测定人血清或血浆中脂肪酶的含量。 1.1 包装规格 包装规格见表1。 表1 包装规格

1.2 试剂成分 试剂成分见表2。 表2 试剂成分

注:不同批号的校准品、质控品赋值有差异。 2.1 外观 试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物; 试剂2为橘黄色到橘红色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物; 校准品为黄色粉末状物质,复溶后为淡黄色或黄色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物; 质控品微黄色粉末状物质,复溶后为淡黄色或黄色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。 试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。 2.2 净含量 试剂的净含量应不少于标称量。 2.3 试剂空白吸光度 A570nm下测定空白吸光度应≤ 0.8000。

2.4 准确度 与已上市产品进行比对试验:在[5,300]U/L区间内,线性相关系数r≥0.975,在[5,50]U/L区间内测定的绝对偏差应不超过±7.5U/L,在(50,300]U/L 区间内测定的相对偏差应不超过±15%。 2.5 分析灵敏度 样本浓度为100 U/L时,其吸光度变化率在0.0150~0.0450之间。 2.6 线性区间 在[5,300]U/L区间内,线性相关系数r≥0.990,在[5,50]U/L区间内测定的绝对偏差应不超过±7.5U/L,在(50,300]U/L区间内测定的相对偏差应不超过±15%。 2.7 测量精密度 2.7.1重复性 对高、低浓度的血清样本或质控品重复测定10次,其测定值的变异系数(CV%)应不大于5%。 2.7.2批间差 随机抽取三批试剂盒的批间相对极差(R)应不大于10%。 2.8 瓶间差 校准品、质控品的瓶间差应≤10%。 2.9 稳定性 2.9.1 效期稳定性 试剂在2℃~25℃密封避光保存,校准品、质控品在2℃~8℃密封避光保存,有效期为12个月。在试剂盒有效期满后一个月以内,分别检测2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1项,结果应符合各项目的要求。 2.9.2 校准品复溶稳定性 复溶后校准品在2℃~8℃保存7天,取到效期后校准品与新鲜复溶的校准品同时测定,测试结果间的相对偏差应在±10%之内。 2.9.3质控品复溶稳定性 复溶后质控品在2℃~8℃保存7天,取到效期后质控品与新鲜复溶的质控品同时测定,测试结果间的相对偏差应在±10%之内。

干扰物试剂盒

商品号/79370 干扰物检查A PLUS Interference Check.A Plus 说明干扰物检查A PLUS试剂盒是用于检测胆红素(游离型、结合型)、溶血、乳糜等物质对检查结果影响程度的干扰物检查用的专用试剂盒。 制品成分 1、胆红素*F(游离型)--------------2mL*1 2、胆红素*F(空白)---------------2mL*1 3、胆红素*C(结合型)--------------2mL*1 4、胆红素*C(空白)---------------2mL*1 5、溶血血红蛋白----------------2mL*1 6、溶血血红蛋白(空白)------------2mL*1 7、乳糜--------------------2mL*1 8、乳糜(空白)----------------2mL*1 使用方法 各瓶用精制水2mL溶解,当天使用。(根据所需添加浓度不同,精制水量不同) 操作方法 1、溶解后的样本(干扰物质)1.0ml和事先准备好的混合血清9.0ml混合制成样本A 2、溶解后的样本(空白)1.0ml和事先准备好的混合血清9.1ml混合制成样本B 3、样本A和样本B按以下表格配制稀释系列 对照 1/10 2/10 3/10 4/10 5/10 6/10样本A----0.10.20.30.40.50.6 样本B 1.00.90.80.70.60.50.4 7/10 8/10 9/101 样本A0.70.80.9 1.0 样本B0.30.20.1---- 4、对以上稀释系列进行检测 组成 1、胆红素*F(游离型)T-BIL# 牛蛋白 3.2g/dL Tris.缓冲液 Ph8.5100mmol/L 2、胆红素*F(空白)牛蛋白 3.2g/dL Tris.缓冲液 Ph8.5100mmol/L 3、胆红素*C(结合型)T-BIL/D-BIL# 牛蛋白 4.0g/dL Tris.缓冲液 Ph8.020mmol/L 4、胆红素*C(空白)牛蛋白 4.0g/dL Tris.缓冲液 Ph8.020mmol/L 5、溶血血红蛋白溶血血红蛋白# 蔗糖10g/dL

羧酸酯酶(Carboxylesterase,CarE)活性测定试剂盒使用说明

羧酸酯酶(Carboxylesterase,CarE)活性测定试剂盒使用说明产品简介: 哺乳动物CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于丝氨酸水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关,有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。 CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固蓝显色;通过测定450nm光吸收增加速率,计算出CarE的活性。 试验中所需的仪器和试剂: 可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水和无水乙醇。 产品内容: 试剂一:液体×1瓶,4℃保存; 试剂二:液体×1瓶(棕色),4℃避光保存(收货后一周内完成测定)。 操作步骤: 一、粗酶液提取: 称取约0.1g样品,加1.0mL试剂一,冰上充分研磨,15000rpm4℃离心30min,取上清液待测。 二、测定操作表: 1,分光光度计预热30min以上,调节波长到450nm,蒸馏水调零。 2,试剂二置于37℃水浴中预热30min以上。

3,空白管:在1mL玻璃比色皿中依次加入5μL蒸馏水和1000μL试剂二,迅速混匀后于450nm处测定3min内的吸光值变化,第10s吸光值记为A1,第190s 的吸光值记为A2。注意:空白管只需做1-2次。△A空白管=A2-A1。 4,测定管:在1mL玻璃比色皿中依次加入5μL上清液和1000μL试剂二,迅速混匀后于450nm处测定3min内的吸光值变化,第10s吸光值记为A3,第190s 的吸光值记为A4。△A测定管=A4-A3。 CarE活力计算: CarE活力单位定义:37℃中每分钟催化吸光值增加1,定义为一个CarE活力单位(U)。 1,按照蛋白浓度计算: CarE酶活(U/mg prot)=(△A测定管–△A空白管)÷(Cpr×V样)÷T =66.7×(△A测定管–△A空白管)÷Cpr Cpr:蛋白浓度,mg/ml;V样:加入上清液体积,0.005mL;T:反应时间,3min。蛋白浓度需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白含量测定试剂盒。 2,用样品质量计算: CarE酶活(U/mg Fresh Weight)=(△A测定管–△A空白管)×(V样总÷V样)÷W ÷T =66.7×(△A测定管–△A空白管)÷W W:样品质量,g;V样总:上清液总体积,1mL;V样:加入上清液体积,0.005mL;T:反应时间,3min。

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