T9-紫外可见分光光度计应用案例--普析

紫外可见分光光度计应用案例

案例1.肉制品中亚硝酸盐的测定

前处理方法：

称取5g(精确至0.01g)制成匀浆的试样，置于50mL烧杯中，加12.5mL饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约300mL将试样洗入500mL容量瓶中，于沸水浴中加热15min取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。在振荡上述提取液时加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度，摇匀，放置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用。

检测仪器：

T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）

仪器条件（见表1）：

表1 测量参数

检测界面（见图1）：

图1 肉制品中亚硝酸盐的检测界面

上图标准曲线中，亚硝酸钠标准系列的质量依次为：0.0μg、2.0μg、4.0μg、6.0μg、8.0μg、10.0μg、15.0μg、20.0μg、25.0μg（100mL容量瓶中）。

方法检出限：

该方法检出限为1mg/kg，能够满足《GB 5009.33-2010食品安全国家标准食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定第二法分光光度法》的检测要求。

参考标准：

《GB 5009.33-2010食品安全国家标准食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定第二法分光光度法》

案例2.啤酒中甲醛的测定

前处理方法：

吸取已除去二氧化碳的样品25.00mL移入500mL蒸馏瓶中，加200g/L磷酸溶液20.00mL于蒸馏瓶，接水蒸气蒸馏装置中蒸馏，收集馏出液于100mL容量瓶中（约100mL），冷却后加水稀释至刻度。

检测仪器：

T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）

仪器条件（见表2）：

表2 测量参数

检测界面（见图2）：

图2 啤酒中甲醛的检测界面

上图标准曲线中，甲醛标准系列的质量依次为：0.0μg、0.5μg、1.0μg、2.0μg、3.0μg、4.0μg、8.0μg（25mL比色管中）。

方法检出限：

该方法检出限为0.8μg，能够满足《GB/T 5009.49-2008 发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方法（4.4甲醛）》的检测要求。

参考标准：

案例3.食用植物油中过氧化值的测定

前处理方法：

精密称取约0.01g~1.0g试样（准确至刻度0.0001g）于10mL容量瓶内，加三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶剂溶解并稀释至刻度，混匀。

检测仪器：

T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）

仪器条件（见表3）：

表3 测量参数

检测界面（见图3）：

图3 食用植物油中过氧化值的检测界面

上图标准曲线中，铁标准系列的质量依次为：0.0μg、2.0μg、5.0μg、10.0μg、20.0μg、30.0μg、40.0μg（10mL比色管中）。

方法检出限：

该方法检出限为0.4μg，能够满足《GB/T 5009.37-2003食用植物油卫生标准的分析方法（4.2过氧化值第二法比色法）》的检测要求。

参考标准：

《GB/T 5009.37-2003食用植物油卫生标准的分析方法（4.2过氧化值第二

案例4.棉籽油中游离棉酚的测定

前处理方法：

称取1.000g（精确至0.001g）精制棉油，置于100mL具塞锥形瓶中，加入20.0mL丙酮（70%），并加入玻璃珠3粒~5粒，在电动振荡器上振荡30min，然后在冰箱中冷藏，放置过夜。取此提取液之上清液过滤，滤液供测定用。

检测仪器：

T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）

仪器条件（见表4）：

表4 测量参数

检测界面（见图4）：

图4 棉籽油中游离棉酚的检测界面

上图标准曲线中，棉酚标准系列的质量依次为：0.0μg、5.0μg、10.0μg、20.0μg、40.0μg、80.0μg、120.0μg（10mL具塞比色管中）。

方法检出限：

该方法检出限为0.3μg（当测定试样1.000g时，最低检出浓度为0.06mg/100g），能够满足《GB/T 5009.37-2003 （4.4.1紫外分光光度法）》的检测要求。

案例5. 油脂中没食子酸丙酯的测定

前处理方法：

称取10.00g（精确至0.001g）试样，用100mL石油醚溶解，移入250mL分液漏斗中，加入20mL乙酸铵溶液（16.7g/L），振摇2min，静置分层，将水层放入125mL分液漏斗中（如乳化，连同乳化层一起放下），石油醚层再用20mL乙酸铵溶液重复提取两次，合并水层。石油醚层再用水振摇洗涤两次，每次15mL，合并水层，振摇，静置。将水层通过干燥滤纸滤入100mL容量瓶中，用少量水洗涤滤纸，加入2.5mL乙酸铵溶液（100g/L），加水至刻度，摇匀。将此溶液用滤纸过滤，弃去20mL初滤液，收集滤液供测定。

检测仪器：

T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）

仪器条件（见表5）：

表5 测量参数

检测界面（见图5）：

图5 油脂中没食子酸丙酯的检测界面

200μg、300μg、400μg、500μg（25mL具塞比色管中）。

方法检出限：

该方法检出限为18.1μgPG。（测定试样相当于2g时，最低检出浓度为9.1mg/kg。），能够满足《GB/T 5009.32-2003油脂中没食子酸丙酯（PG）的测定》的检测要求。

参考标准：

《GB/T 5009.32-2003油脂中没食子酸丙酯（PG）的测定》

案例6. 果汁饮料中总磷的测定

前处理方法：

称取一定量经混合均匀的果汁样品5.00 g～10. 00 g于500 mL凯氏烧瓶中，加入2粒～3粒玻璃珠、10 mL～15 mL硝酸（分析纯）、5 mL硫酸（分析纯），浸泡约2h。先用微火加热，待剧烈反应停止后，加大火力。溶液开始变为棕色时，立即滴加硝酸（分析纯），直至溶液透明，颜色不再变深为止。继续加热数分钟至浓白烟逸出，冷却，小心加入20 mL水，再加热至白烟逸出，冷却至室温。将溶液转移到50 mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，备用。

检测仪器：

T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）

仪器条件（见表6）：

表6 测量参数

检测界面（见图6）：

图6 果汁饮料中总磷的检测界面

上图标准曲线中，磷标准系列的质量依次为：0.0mg/L、2.0 mg/L、4.0 mg/L、6.0 mg/L、8.0 mg/L、10.0 mg/L（50mL容量瓶中）。

方法检出限：

（9.5.3总磷）》的检测要求。

参考标准：

《GB/T 12143-2008饮料通用分析方法（9.5.3总磷）》

案例7. 茶饮料中茶多酚的测定

前处理方法：

称取均匀透明的样液1g~5g （精确至0.001g ）于25mL 容量瓶中，加水4mL 、酒石酸亚铁溶液5mL ，充分摇匀，用pH7.5磷酸缓冲溶液定容至刻度。 检测仪器：

T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司） 仪器条件（见表7）：

表7 测量参数

检测界面（见图7）：

图7 茶饮料中茶多酚的检测界面

上图中，A 1=0.9598，A 2=0.0092。 结果计算：

X =

10002957.1)(21????-m

K

A A

式中：X ——样品中茶多酚的含量（mg/kg ）；A 1——试液显色后的吸光度；A 2——试液底色的吸光度；1.957——用10mm 比色皿，当吸光度=0.50时，1mL 茶汤中茶多酚的含量相当于1.957mg ；K ——稀释倍数；m ——测定时称取试液的质量（g ）。

参考标准：

《GB/T 21733-2008茶饮料 （6.2.1 茶多酚）》

案例8. 白砂糖色值的测定

前处理方法：

称取样品100.0g 于200mL 烧杯中，加入pH7.00的三乙醇胺-盐酸缓冲溶液135mL ，搅拌至完全溶解。倒入已预先铺好0.45μm 孔径微孔膜的过滤器中，在真空下抽滤，弃去最初50mL 左右的滤液，收集滤液应不少于50mL 。 检测仪器：

T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司） 仪器条件（见表8）：

表8 测量参数

检测界面（见图8）：

图8 白砂糖色值的检测界面

上图中，A=0.1755。 结果计算：

C =

1000??c

b A

式中：C ——色值，单位为国际糖色值单位（IU ）；A ——在420nm 波长测得样液的吸光度；b ——比色皿光程，单位为厘米（cm ）；c ——样液浓度[由20℃的折光锤度乘上一系数（白砂糖0.9862，绵白糖0.9854），然后查表求得]，单位为克每毫升（g/mL ）。

参考标准：

《GB 317-2006白砂糖（4.7色值的测定）》

案例9. 鸡精调味料中呈味核苷酸二钠的测定

前处理方法：

准确称取均匀的样品2g ~4g （精确至0.0001g ），用少量0.01mol/L 的盐酸溶液溶解并定容于100mL 容量瓶中，混匀。将此溶液用滤纸过滤，弃去初滤液20mL 。吸取滤液5.00mL 于100mL 容量瓶中，用0.01mol/L 的盐酸溶液定容，混匀，此溶液即为测试液。 检测仪器：

T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司） 仪器条件（见表9）：

表9 测量参数

检测界面（见图9）：

图9 鸡精调味料中呈味核苷酸二钠的检测界面

上图中，A=0.6021。 结果计算：

X =

100

1000

119502000

530?????m A 式中：X ——样品中呈味核苷酸二钠的含量（含7.25分子结晶水）（g/100g ）；A ——样

品在波长250nm 处的吸光度；m ——样品质量（g ）； 530——含7.25分子结晶水呈味核苷酸二钠的平均分子量；2000——样品的稀释倍数；11950——呈味核苷酸二钠的平均摩尔吸光系数。

参考标准：

前处理方法:

称取适量（5~10g）粉碎混匀后的样品，浸泡提取生成稳定络合物后过滤，取适量滤液与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫色络合物，使用T9通过与标准系列比较定量。

检测仪器：

北京普析通用仪器有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。

仪器条件:

具体参数见表1。

表1 仪器参数

检测谱图（见图1）:

图1 标准曲线谱图

上面谱图显示R=0.9999。

样品检出限：该方法检出限为0.001g/kg，能够满足GB 5009.34-2003的检测要求。

参考标准：GB 5009.34-2003

前处理方法:

迅速称取10g样品，加入乙酸锌溶液，酒石酸溶液进行水蒸气蒸馏，以氢氧化钠溶液作为吸收液。取适量蒸馏液遇酸产生氢氰酸，氢氰酸与苦味酸钠作用生成异氰紫酸钠，显红色，使用T9通过与标准系列比较定量。

检测仪器：

北京普析通用仪器有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。

仪器条件:

具体参数见表1。

检测谱图（见图1）:

图1 标准曲线谱图

上面谱图显示R=0.9994。

样品检出限：该方法满足GB 5009.48-2003的检测要求。

参考标准：GB 5009.48-2003，GB 5009.36-2003

前处理方法:

酒中杂醇油比较复杂，以异戊醇和异丁醇为代表，异戊醇和异丁醇在浓硫酸作用下脱水生成异戊烯和异丁烯，再与对二甲氨基苯甲醛作用显橙红色，与标准比较定量。

检测仪器：

北京普析通用仪器有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。

仪器条件:

具体参数见表1。

表1 仪器参数

检测谱图（见图1）:

上面普图显示R=0.9996，说明标曲线性良好，可以进一步进行定量测定。

样品检出限：该方法检出限为1mg/kg，能够满足GB/T 5009.48-2003的检测要求。

参考标准：GB/T 5009.48-2003

案例13.食品中的组胺的检测

前处理方法:

称取适量（5~10g）粉碎混匀后的样品，用三氯乙酸浸泡后正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙色，使用T9通过与标准系列比较定量。

检测仪器：

北京普析通用仪器有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。

仪器条件:

具体参数见表1。

表1 仪器参数

检测谱图（见图1）:

图1 标准曲线谱图

上面谱图显示R=0.9999。

样品检出限：该方法满足GB 5009.45-2003的检测要求。

参考标准：GB 5009.45-2003

案例14.食品中的铝含量的检测

前处理方法:

将样品粉碎后置于85℃烘箱中干燥4h，称取1g于100mL锥形瓶中，加硝酸-高氯酸混合液放置过夜再进行消解，至出现出现高氯酸烟雾时，再加入硫酸，待高氯酸烟除净后加水，加热至沸腾，冷却后形容至50mL，，取稀释样液1mL，加入缓冲溶液，抗坏血酸、溴化十六烷基三甲胺溶液、铬天青混合后显色，然后T9测其吸光度分析。

检测仪器：

北京普析通用仪器有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。

仪器条件:

具体参数见表1。

检测谱图（见图1）:

上面普图显示R=0.9992，说明标曲线性良好。

样品检出限：该方法检出限为0.5ug，能够满足GB/T 5009.182-2003的检测要求。

参考标准：GB/T 5009.182-2003